專利名稱：治療癌癥的凍干蜀羊泉的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥品，特別涉及一種治療癌癥的凍干蜀羊泉，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蜀羊泉為爺科植物青杞(Solanum septemlobum Bunge)的干燥地上部分。別名有:羊泉，青杞，漆姑草，紅葵，野枸杞，野茄，小孩拳，紅耳墜等。夏末采割，除去雜質(zhì)，曬干。性苦、寒，歸肝，胃經(jīng)。具清熱解毒之功效。用于熱毒瘡腫，咽喉腫痛，皮膚癢疹?！侗静菥V目》中蜀羊泉項(xiàng)下恭曰:“此草俗名漆姑，葉以菊，花紫色，子類枸杞子，根如遠(yuǎn)志,無心有慘。”《中藥大辭典》中為白英(白毛藤)和千年不爛心?！蛾兾髦胁菟帯分姓f在陜北叫蜀羊泉，陜南叫白毛藤，其基原植物是白英。《中國高等植物圖鑒》中青杞項(xiàng)下別名有蜀羊泉?！吨兴幉暮喗椤分惺裱蛉獮榍喙瘛！度珖胁菟巺R編》下冊蜀羊泉項(xiàng)下別名有青把?！缎戮幹兴帉W(xué)》中蜀羊泉是青杞。本發(fā)明所述蜀羊泉為爺科植物青杞(Solanum septemlobumBunge) ο 白英(Solanum lyratum Thunb)和千年不爛心(Solnum dnlcamars L),非本發(fā)明所述的蜀羊泉。經(jīng)過試驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)，凍干蜀羊泉抗癌活性高于曬干的蜀羊泉。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是以蜀羊泉為原料制備高活性的治療腫瘤的藥物。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物。以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于以凍干蜀羊泉全草為原料制備治療腫瘤的藥物。本發(fā)明所述的以凍 干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，優(yōu)選以凍干蜀羊泉果為原料制備治療腫瘤的藥物。本發(fā)明所述的凍干，特征在于用以下工藝凍干:
鮮蜀羊泉全草，洗凈去雜，切成小段；裝盤，裝盤重量為5-8 kg/m%逐漸降溫至-20°C -60°C進(jìn)行預(yù)凍；升華干燥抽真空至系統(tǒng)絕對(duì)壓力為40 60Pa，開始加熱升溫至30°C 60°C，升華干燥15 24小時(shí)；解析干燥保持物料溫度在35°C 65°C，使含水量達(dá)到2 3%,得凍干蜀羊泉。本發(fā)明所述的凍干，特征在于用以下工藝凍干蜀羊泉果:取蜀羊泉果用水洗凈；裝盤，裝量為5-8Kg/ rtf左右；凍結(jié)溫度控制在-28 -32°C之間；達(dá)到控制溫度后，立即開啟真空泵抽真空至干燥室壓力40-50Pa，然后啟動(dòng)加熱開關(guān)，促進(jìn)升華；升華的溫度應(yīng)控制在40°C以下；解析階段的溫度應(yīng)控制在45°C以下，當(dāng)物料溫度與加熱溫度接近時(shí)干燥結(jié)束，得凍干蜀羊泉果。凍干蜀羊泉的目的是解決曬干有效成分損失較大，抗癌活性低等技術(shù)問題。在蜀羊泉收獲季節(jié)直接用鮮蜀羊泉制備本發(fā)明的藥物可以降低成本。據(jù)此，本發(fā)明所述的凍干蜀羊泉在蜀羊泉收獲季節(jié)本發(fā)明的凍干蜀羊泉可以替換為鮮蜀羊泉，或凍干蜀羊泉果可以替換為鮮蜀羊泉果，其用量按干品折算。本發(fā)明所述的以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，是在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，采用中藥制劑常規(guī)方法制備成任何可藥用的制劑。例如，將凍干蜀羊泉全草或凍干蜀羊泉果粉碎，制成散劑沖服；將凍干蜀羊泉全草或凍干蜀羊泉果通過進(jìn)一步提取，提取物加入輔料制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑，但這并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明所述的提取是低溫提?。挥盟?、乙醇、甲醇或它們的溶液回流提取、浸潰、滲漉。本發(fā)明所述的以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，是以凍干蜀羊泉為原料制備治療肺癌、膀胱癌、子宮頸癌、食道癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、乳癌等多種癌癥的藥物。下面通過試驗(yàn)例說明本發(fā)明的有益之處。—、曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉水溶性浸出物和生物堿含量比較
1、制備曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉
制備曬干蜀羊泉:取蜀羊泉除去雜質(zhì)，噴淋清水，少潤，切段，曬干。制備凍干蜀羊泉:
1)鮮蜀羊泉原料,去除雜質(zhì),切成2-5cm的小段；
2)將小段裝盤， 裝盤重量為3kg / m%逐漸降溫至-40°C進(jìn)行預(yù)凍，凍結(jié)速度約為
0.5-1.(TC /min。3)升華干燥抽真空至系統(tǒng)絕對(duì)壓力為50Pa，開始加熱升溫至50°C，升華干燥24小時(shí)；
4)解析干燥保持物料溫度在45°C，使含水量達(dá)到2 3%，得凍干蜀羊泉。2、曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉水溶性浸出物、生物堿含量測定
I)采用《中國藥典》2010年版一部，附錄XA方法進(jìn)行水溶性浸出物含量測定，結(jié)果:曬干蜀羊泉水浸出物含量為12.32%,凍干蜀羊泉水溶性浸出物含量為19.68%ο2)用以下方法測定曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉的生物堿含量。取龍葵曬干藥材和凍干龍葵藥材樣品細(xì)粉各約2.0g,精密稱定，分別加入無水乙醇50ml，浸泡過夜(12時(shí))，超聲提取40min，濾過，濾液置50°C恒溫水浴上蒸干，殘?jiān)?0mll0%醋酸溶液使溶解，用等體積石油醚多次萃取，至石油醚層無色，水層轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿中，用濃氨水調(diào)PH至9-10，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘?jiān)?0mllmol鹽酸乙醇溶液使溶解，回流水解Ih,取出，放冷，用濃氨水調(diào)PH至9-10，再用氯仿萃取3次(30ml, 20ml, 10ml),合并氯仿萃取液，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘?jiān)寐确罗D(zhuǎn)移至IOml容量瓶中，氯仿定容，取5ml轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加入7ml0.1%的溴甲酚綠乙醇溶液顯色，收集氯仿層，多次萃取至氯仿層無色，合并氯仿層，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘?jiān)勇确律倭慷啻稳芙獠⒍ㄈ葜?0ml，各在414nm處測吸光度值，計(jì)算蜀羊泉生物堿含量。結(jié)果:曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉的生物堿含量分別為1.11%和2.42%,凍干蜀羊泉生物堿含量明顯高于曬干蜀羊泉。水溶性浸出物常被作為評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的重要指標(biāo)。蜀羊泉中的生物堿是抗腫瘤的主要有效成分，其含量越高生物活性越高。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出凍干蜀羊泉水溶性浸出物含量明顯高于曬干蜀羊泉，凍干蜀羊泉生物堿含量明顯高于曬干蜀羊泉，進(jìn)而可知藥理活性高于曬干蜀羊泉。
二、曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉對(duì)人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721, HepG2和胃癌細(xì)胞株MGC-803增殖的抑制作用試驗(yàn)。1、制備曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉提取物分別取曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉粉碎，各加水煎煮兩次，第一次加水8倍量，煎煮2小時(shí)，第二次加水8倍量，煎煮I小時(shí)，合并藥液，藥液濾過，取濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.10 (60°C)時(shí)，加入乙醇使含醇量達(dá)到75%，沉淀，靜置36小時(shí)，吸取上清液，回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎；得曬干蜀羊泉和凍干蜀羊泉提取物。2、方法MTT法SMMC-7721、!fepG2和MGC-803三種細(xì)胞株用含有10%滅活新生小牛血清，100U/ml的青霉素和100 μ g/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基在37°C，5%C02條件下培養(yǎng)，取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。分別取濃度為2X 106/ml的SMMC-7721、HepG2和MGC-803細(xì)胞株90μ I于96孔板中培養(yǎng)，空白對(duì)照組加入10μ 1PBS，給藥組分別加入10 μ I不同劑量的受試藥液，藥物終濃度(按生藥計(jì)算)。設(shè)陰性對(duì)照組，陰性對(duì)照組是在不含細(xì)胞的培養(yǎng)液中加入不同劑量的藥液。設(shè)6個(gè)平行孔，細(xì)胞給藥后培養(yǎng)24h，每孔加入5.0 mg/mlMTT溶液20 μ 1，振蕩混勻后，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育4h，棄去各孔中的上清液，再加入100 μ 1DMS0中止反應(yīng)，振蕩混勻10 min，待其各孔中的紫色結(jié)晶完全溶解后，用酶標(biāo)儀在490nm處測定其吸光值(A490)。按下面公式計(jì)算細(xì)胞抑制率:
生長抑制率(%) = (N組OD均值-B組OD均值)一 (T組OD均值-TC組OD均值)/N組OD均值-B組OD均值X 100%。3、結(jié)果見表1、表2、表3。表I 對(duì)SMMC-7721的抑制率結(jié)果
權(quán)利要求
1.以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于以凍干蜀羊泉全草或凍干蜀羊泉果為原料制備治療腫瘤的藥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于用以下工藝凍干龍葵全草:鮮龍葵全草，洗凈去雜，切成小段；裝盤，裝盤重量為5-8 kg /m2，逐漸降溫至-20°C -60°C進(jìn)行預(yù)凍；升華干燥抽真空至系統(tǒng)絕對(duì)壓力為40 60Pa，開始加熱升溫至30°C 60°C，升華干燥15 24小時(shí)；解析干燥保持物料溫度在35°C 65°C，使含水量達(dá)到2 3%，得凍干蜀羊泉全草。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于用以下工藝凍干蜀羊泉果:取蜀羊泉果用水洗凈；裝盤，裝量為5-8Kg/nf左右；凍結(jié)溫度控制在-28 -32°C之間；達(dá)到控制溫度后，立即開啟真空泵抽真空至干燥室壓力40-50Pa，然后啟動(dòng)加熱開關(guān)，促進(jìn)升華；升華的溫度應(yīng)控制在40°C以下；解析階段的溫度應(yīng)控制在450C以下，當(dāng)物料溫度與加熱溫度接近時(shí)干燥結(jié)束，得凍干蜀羊泉果。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于凍干蜀羊泉替 換為鮮蜀羊泉全草或鮮蜀羊泉果，其用量按干品折算。
全文摘要
本發(fā)明涉及以凍干蜀羊泉為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于以凍干蜀羊泉全草或凍干蜀羊泉果為原料制備治療腫瘤的藥物，優(yōu)選以凍干蜀羊泉果為原料制備治療腫瘤的藥物。凍干蜀羊泉的療效好于曬干的蜀羊泉。
文檔編號(hào)A61P35/00GK103181978SQ20131006576
公開日2013年7月3日 申請(qǐng)日期2013年3月3日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月3日
發(fā)明者李詩標(biāo), 張為勝, 孫志芳, 牛鳳菊, 蘇靜 申請(qǐng)人:濟(jì)南康眾醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司