專利名稱：凍干龍葵果治療腫瘤的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥品，特別涉及凍干龍葵果治療腫瘤，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
龍葵Solanum nigrumL.系爺科(Solanaceace)爺屬一年生草本植物。別名野葡萄、老鴉眼睛草、苦菜、苦葵。龍葵全草入藥，味苦、性寒、微甘，有小毒，歸肺、胃、膀胱經(jīng)，有清熱解毒、活血散瘀、利水消腫、止咳祛痰的功效。用于瘡癰腫毒，跌打扭傷，慢性氣管炎，急性腎炎，皮膚濕疹，小便不利，老年性慢性氣管炎，白帶過多，前列腺炎，痢疾等疾病。龍葵及其復(fù)方制劑在臨床上被廣泛用于治療各類腫瘤，被中醫(yī)學(xué)列為十大抗腫瘤中草藥之一，其抗腫瘤作用引起了研究人員的重視，并成為了國內(nèi)外學(xué)者的研究熱點。經(jīng)過試驗我們發(fā)現(xiàn)，龍葵果抗癌活性高于龍葵全草，凍干龍葵果抗癌活性高于曬干的龍葵果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物。以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所述的藥物含有凍干龍葵
果O本發(fā)明所述的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所述的藥物是由單一味凍干龍葵果制備。本發(fā)明所述的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于凍干龍葵果直接服用。本發(fā)明所述的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于凍干龍葵果直接粉碎制成散劑服用。本發(fā)明所述的凍干龍葵果，特征在于用以下工藝凍干:取龍葵果用水洗凈；裝盤，裝量為5-8Kg/m2左右；凍結(jié)溫度控制在-28 -32°C之間；達到控制溫度后，立即開啟真空泵抽真空至干燥室壓力40-50Pa，然后啟動加熱開關(guān)，促進升華；升華的溫度應(yīng)控制在40°C以下；解析階段的溫度應(yīng)控制在45°C以下，當(dāng)物料溫度與加熱溫度接近時干燥結(jié)束，得凍干龍癸果。凍干龍葵果的目的是解決曬干有效成分損失較大，抗癌活性低等技術(shù)問題。在龍葵果收獲季節(jié)直接用鮮龍葵果制備本發(fā)明的藥物可以降低成本。據(jù)此，本發(fā)明所述的凍干龍葵果在龍葵果收獲季節(jié)凍干龍葵果可以替換為鮮龍葵果，其用量按干龍葵果折算。本發(fā)明所述的以凍干龍葵果為果原料制備治療腫瘤的藥物，是在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，采用中藥制劑常規(guī)方法制備成任何可藥用的制劑。例如，將凍干龍葵果粉碎，制成散劑沖服；將凍干龍葵果通過進一步提取，提取物加入輔料制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑，但這并不限制本發(fā)明的保護范圍。本發(fā)明所述的提取是低溫提?。挥盟?、乙醇、甲醇或它們的溶液回流提取、浸潰、滲漉。本發(fā)明所述的以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，是以凍干龍葵果為原料制備治療肺癌、膀胱癌、子宮頸癌、食道癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、乳癌等多種癌癥的藥物。下面通過試驗例說明本發(fā)明的有益之處。一、曬干龍葵果和凍干龍葵果水溶性浸出物和生物堿含量比較
1、曬干龍葵果和凍干龍葵果
制備曬干龍葵果:取龍葵果除去雜質(zhì)，曬干。制備凍干龍葵果:取龍葵果除去雜質(zhì)；裝盤，裝量為5_8Kg/ Hl2左右；凍結(jié)溫度控制在-28 -32°C之間；達到控制溫度后，立即開啟真空泵抽真空至干燥室壓力40-50Pa，然后啟動加熱開關(guān)，促進升華；升華的溫度應(yīng)控制在40°C以下；解析階段的溫度應(yīng)控制在45°C以下，當(dāng)物料溫度與加熱溫度接近時干燥結(jié)束，得凍干龍葵果。2、曬干龍葵果和凍干龍葵果水溶性浸出物、生物堿含量測定
I)采用《中國藥典》2010年版一部，附錄XA方法進行水溶性浸出物含量測定，結(jié)果:曬干龍葵果水浸出物含量為15.54%，凍干龍葵果水溶性浸出物含量為24.21%。2)用以下方法測定曬干龍葵果和凍干龍葵果的生物堿含量。取曬干龍葵果和凍干龍葵果各約2.0g,精密稱定，分別加入無水乙醇50ml，浸泡過夜(12時)，超聲提取40min，濾過，濾液置50°C恒溫水浴上蒸干，殘渣加20mll0%醋酸溶液使溶解，用等體積石油醚多次萃取，至石油醚層無色，水層轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿中，用濃氨水調(diào)PH至9-10，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘渣加20mllmol鹽酸乙醇溶液使溶解，回流水解lh，取出，放冷，用濃氨 水調(diào)PH至9-10，再用氯仿萃取3次(30ml，20ml, 10ml),合并氯仿萃取液，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘渣用氯仿轉(zhuǎn)移至IOml容量瓶中，氯仿定容，取5ml轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加入7ml0.1%的溴甲酚綠乙醇溶液顯色，收集氯仿層，多次萃取至氯仿層無色，合并氯仿層，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘渣加氯仿少量多次溶解并定容至10ml，各在414nm處測吸光度值，計算生物堿含量。結(jié)果:曬干龍葵果和凍干龍葵果的生物堿含量分別為2.65%和4.83%，凍干龍葵果生物堿含量是曬干龍葵果的1.8倍。龍葵中含有多種生物活性，水溶性浸出物具有抗腫瘤、增強機體的免疫作用，水溶性浸出物常被作為評價藥材質(zhì)量的重要指標(biāo)。龍葵中的生物堿是抗腫瘤的主要有效成分，其含量越高生物活性越高。以上實驗結(jié)果可以看出凍干龍葵果水溶性浸出物含量明顯高于曬干龍葵果，凍干龍葵果生物堿含量明顯高于曬干龍葵果，進而可知抗腫瘤的藥理活性高于曬干龍葵果，用于治療腫瘤等疾病療效好于曬干龍葵果。二、曬干龍葵果和凍干龍葵果對人肝癌細胞株SMMC-7721，！fepG2和胃癌細胞株MGC-803增殖的抑制作用試驗。1、制備曬干龍葵果和凍干龍葵果提取物分別取曬干龍葵和凍干龍葵粉碎，各加水煎煮兩次，第一次加水8倍量，煎煮2小時，第二次加水8倍量，煎煮I小時，合并藥液，藥液濾過，取濾液，濃縮至相對密度為1.10 (60°C)時，加入乙醇使含醇量達到75%，沉淀，靜置36小時，吸取上清液，回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎；得曬干龍葵果和凍干龍葵果提取物。2、方法MTT法SMMC-7721、H印G2和MGC-803三種細胞株用含有10%滅活新生小牛血清，100U/ml的青霉素和100 μ g/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基在37°C，5%C02條件下培養(yǎng)，取對數(shù)生長期細胞用于實驗。分別取濃度為2 X 106/ml的SMMC-7721、!fepG2和MGC-803細胞株90 μ I于96孔板中培養(yǎng)，空白對照組加入10 μ 1PBS，給藥組分別加入10 μ I不同劑量的受試藥液，藥物終濃度(按生藥計算)。設(shè)陰性對照組，陰性對照組是在不含細胞的培養(yǎng)液中加入不同劑量的藥液。設(shè)6個平行孔，細胞給藥后培養(yǎng)24h，每孔加入5.0 mg/mlMTT溶液20 μ 1，振蕩混勻后，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育4h，棄去各孔中的上清液，再加入100 μ IDMSO中止反應(yīng)，振湯混勾IOmin,待其各孔中的紫色結(jié)晶完全溶解后,用酶標(biāo)僅在490nm處測定其吸光值(A490)。按下面公式計算細胞抑制率:
生長抑制率(%) = (N組OD均值-B組OD均值)一 (T組OD均值-TC組OD均值)/N組OD均值-B組OD均值X 100%。3、結(jié)果見表1、表2、表3。表I 對SMMC-7721的抑制率結(jié)果__
權(quán)利要求
1.以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所制備的藥物含有凍干龍葵果。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所制備的藥物是由單一味龍葵果制備。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所制備的藥物是凍干龍葵果直接服用。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于凍干龍葵果直接粉碎制成散劑服用。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3或權(quán)利要求4或權(quán)利要求5的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于用以下工藝凍干龍葵果:取龍葵果用水洗凈；裝盤，裝量為5-8Kg/ rtf左右；凍結(jié)溫度控制在-28 -32°C之間；達到控制溫度后，立即開啟真空泵抽真空至干燥室壓力40-50Pa，然后啟動加熱開關(guān)，促進升華；升華的溫度應(yīng)控制在40°C以下；解析階段的溫度應(yīng)控制在45°C以下，當(dāng)物料溫度與加熱溫度接近時干燥結(jié)束，得凍干龍葵果。
7.根據(jù)權(quán)利 要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3或權(quán)利要求4或權(quán)利要求5的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于凍干龍葵果替換為鮮龍葵果，其用量按干龍葵果折算。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于采用中藥制劑常規(guī)方法制備成任何可藥用的制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于提取是低溫提??；用水、乙醇、甲醇或它們的溶液回流提取、浸潰、滲漉提取。
全文摘要
本發(fā)明涉及以凍干龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所述的藥物含有凍干龍葵果，其療效好于龍葵全草、曬干的龍葵果制備的藥物。
文檔編號A61K36/81GK103181979SQ20131006576
公開日2013年7月3日 申請日期2013年3月3日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月3日
發(fā)明者張為勝, 李詩標(biāo), 盧寧, 牛鳳菊, 蘇靜 申請人:濟南康眾醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司