專利名稱：一種可定位的骨灰盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
:本發(fā)明涉及一種小鼠毛囊干細(xì)胞向原始生殖細(xì)胞分化的技術(shù)方法，特別是涉及一種將小鼠毛囊干細(xì)胞采用體外培養(yǎng)方式，經(jīng)過形成擬胚體(EB)進(jìn)行誘導(dǎo)，然后以小鼠成纖維細(xì)胞為飼養(yǎng)層采用共培養(yǎng)方式誘導(dǎo)形成原始生殖細(xì)胞的方法。屬于生殖醫(yī)學(xué)的生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
:從2003年開始，多個(gè)實(shí)驗(yàn)組報(bào)導(dǎo)了他們將哺乳類干細(xì)胞，包括人類干細(xì)胞，誘導(dǎo)為各發(fā)育階段的生殖細(xì)胞。在以雄性配子為目標(biāo)的報(bào)導(dǎo)中，2003年Toyooka等首先以Vasa基因?yàn)镻GC報(bào)告系統(tǒng)(reporter system)及BMP4為誘導(dǎo)因子，將小鼠干細(xì)胞誘導(dǎo)為PGCs(原始生殖細(xì)胞primordial germ cells);并接著將分離出來的PGCs與睪丸細(xì)胞混合后移植到睪丸中產(chǎn)生精子。2004年，Geijsen等利用SSEAl為早期生殖細(xì)胞表面標(biāo)記，加上RA(retinoic acids)誘導(dǎo)小鼠干細(xì)胞,成功在體外獲得單倍體,並將其注射入小鼠卵子中，受精卵發(fā)育至囊胚期。德國研究小組Nayernia等同樣利用RA誘導(dǎo)小鼠干細(xì)胞，并以StraS及Prml為報(bào)告系統(tǒng)，獲得的類精細(xì)胞在注射入卵子后能獲得后代。此外，Nayernia等人也用小鼠骨髓干細(xì)胞在體外轉(zhuǎn)分化出了原始生殖細(xì)胞以及精原細(xì)胞樣的細(xì)胞。2009年，我國研究小組Yu等報(bào)導(dǎo)成功將小鼠干細(xì)胞誘導(dǎo)為精子。這項(xiàng)研究值得關(guān)注的是首次將高表達(dá)DAZL基因做為誘導(dǎo)配子的方案。2011年日本Hayashi等利用小鼠胚胎干細(xì)胞，加上BMP4等誘導(dǎo)因子，分離出PGCs。在移植到睪丸后，獲得成熟精子，并獲得下一代小鼠。綜合最近研究進(jìn)展，大都采用胚胎干細(xì)胞(ESC)作為原材料，但是ESC處在哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育的早期，而且取材困難，因此采用成體干細(xì)胞代替ESC向生殖細(xì)胞分化可以更好地解決問題。毛囊干細(xì)胞是一類具有自我更新能力及多向分化潛能的多能成體干細(xì)胞
發(fā)明內(nèi)容
:本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種小鼠毛囊干細(xì)胞體外向原始生殖細(xì)胞分化的技術(shù)方法。本發(fā)明方法分離出生后7天小鼠觸須部毛囊，體外培養(yǎng)毛囊干細(xì)胞，將傳代兩次的毛囊干細(xì)胞體外培養(yǎng)形成擬胚體(EB);然后以小鼠成纖維細(xì)胞(MEF)為飼養(yǎng)層，采用共培養(yǎng)的方式分化發(fā)育形成原始生殖細(xì)胞樣細(xì)胞，并具有與體內(nèi)正常發(fā)育的原始生殖細(xì)胞相類似的形態(tài)和特異基因表達(dá)特征。為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明方法按照如下步驟操作:第一步，利用機(jī)械法分離小鼠觸須部毛囊:用手術(shù)鑷子將出生后7天小鼠毛囊從觸須部皮膚上取下，轉(zhuǎn)移至磷酸鹽緩沖液(PBS，pH7.0) +10%胎牛血清(FCS)的操作液中，在操作液中清洗，并去除與毛囊連接在一起的皮脂腺、立毛肌、脂肪等雜質(zhì)，在新鮮DMEM/F-12 (細(xì)胞培養(yǎng)液Dulbecco’sModified Eagle Medium, F-12 Nutrient Mixture)中將毛囊清洗；第二步，體外培養(yǎng)毛囊干細(xì)胞:毛囊經(jīng)DMEM/F-12洗完后，置于0.25% Trypsin-0.04% EDTA, 37°C消化10分鐘，輕輕吹打混勻后加入10%血清終止消化， 于DMEM/F-12中清洗，過400目細(xì)胞篩后轉(zhuǎn)入毛囊
8無需采用特殊手段進(jìn)行養(yǎng)生，在干燥條件下自然養(yǎng)護(hù)即可；9制備工藝簡單。本材料的使用特點(diǎn)在于，其凝結(jié)時(shí)間的調(diào)節(jié)范圍在5 30min之間，凝結(jié)時(shí)間的調(diào)節(jié)方法，可以通過兩種方法實(shí)現(xiàn):第一種方法是將兩種磷酸鹽以不同的摩爾比參配；第二種方法是采用微波加熱設(shè)備，通過調(diào)節(jié)控制微波加熱設(shè)備來調(diào)節(jié)修補(bǔ)材料的溫度，溫度的高低直接導(dǎo)致修補(bǔ)材料水化速度即凝結(jié)速度。本材料對建筑石材進(jìn)行修補(bǔ)的優(yōu)勢在于:顏色可以任意調(diào)節(jié)以適應(yīng)大多數(shù)的石材；力學(xué)、物理性能可以根據(jù)具體的石材損壞形式進(jìn)行調(diào)節(jié)；更重要的一點(diǎn)在于本材料可以對任何位置的破損進(jìn)行水平或者豎向貼補(bǔ)，即時(shí)成型，不需要支護(hù)模板。
具體實(shí)施例方式為了使本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體圖示進(jìn)一步闡述本發(fā)明?！N基于建筑中破損石材的快速修補(bǔ)材料，包括一與水快速固化的膠凝混合物，膠凝混合物中含有磷酸鎂水泥、砂、硅溶膠，設(shè)膠凝混合物質(zhì)量為100份，則磷酸鎂水泥為40-55份，砂為40-50份，硅溶膠為10-15份。膠凝混合物與水能夠快速固化成型實(shí)現(xiàn)石材的修補(bǔ)。此外膠凝混合物固化前為膠狀，施工便捷；固化后，固化收縮率小且效果持久；固化成形后修補(bǔ)材料硬度大，耐水性好?！N基于建筑中破損石材的快速修補(bǔ)材料，還包括一水，水和膠凝混合物按照質(zhì)量比25:100 40:100拌合后使用。為改善材料的性能，膠凝混合物中還含有聚丙烯纖維、纖維素纖維，聚丙烯纖維為1-2份，纖維素纖維為1-3份。為了是膠凝混合物混合更為均勻，膠凝混合物中還含有分散 劑，分散劑為1-3份。

基于建筑中破損石材的快速修補(bǔ)材料是用于漢白玉修補(bǔ)的漢白玉修補(bǔ)材料，砂為漢白玉石砂。漢白玉修補(bǔ)材料的膠凝混合物中還可以含有白色云母片，白色云母片為0-10份。作為一種優(yōu)選方案，漢白玉修補(bǔ)材料的膠凝混合物含有磷酸鎂水泥40-50份、漢白玉石砂40-50份、白色云母片0-10份、聚丙烯纖維1-2份、纖維素纖維1-3份、硅溶膠10-15份、分散劑1-3份?；诮ㄖ衅茡p石材的快速修補(bǔ)材料是用于大理石修補(bǔ)的大理石修補(bǔ)材料，砂為大理石砂。大理石修補(bǔ)材料的膠凝混合物中還可以含有黑色云母片，黑色云母片為5-8份。大理石修補(bǔ)材料的膠凝混合物中還可以含有河砂，河砂為20-30份。大理石修補(bǔ)材料的膠凝混合物中還可以含有橡膠粉，橡膠粉為2-10份。作為一種優(yōu)選方案，大理石修補(bǔ)材料的膠凝混合物含有磷酸鎂水泥40-50份、橡膠粉2-10份、大理石砂20-30份、河砂20-30份、聚丙烯纖維1-2份、纖維素纖維1-3份、黑色云母片5-8份、硅溶膠10-15份、分散劑1_3份?；诮ㄖ衅茡p石材的快速修補(bǔ)材料是用于花崗巖修補(bǔ)的花崗巖修補(bǔ)材料，砂為花崗巖砂?；◢弾r修補(bǔ)材料的膠凝混合物中還可以含有粉煤灰，粉煤灰為3-10份?；◢弾r修補(bǔ)材料的膠凝混合物中還可以含有灰色云母片，灰色云母片為5-8份。花崗巖修補(bǔ)材料的膠凝混合物中還可以含有河砂，河砂為15-20份?；◢弾r修補(bǔ)材料的膠凝混合物中還可以含有橡膠粉，橡膠粉為1-5份。作為一種優(yōu)選方案，花崗巖修補(bǔ)材料的膠凝混合物含有磷酸鎂水泥50-55份、橡膠粉0-5份、花崗巖砂20-30份、河砂15-20份、粉煤灰3_10份、灰色
權(quán)利要求
1.一種可定位的骨灰盒，其特征在于:由骨灰盒盒體(I)和定位裝置(2)兩部分組成，其中定位裝置⑵由定位模塊(3)、無線通信模塊(4)、電源模塊(5)和防水保護(hù)殼(6)構(gòu)成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可定位骨灰盒，其特征在于:定位裝置(2)嵌入到骨灰盒盒體⑴中。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可定位骨灰盒，其特征在于:定位裝置(2)放置于骨灰盒盒體(I)的內(nèi)部或固定在骨灰盒盒體(I)的外壁上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可定位骨灰盒，其特征在于:定位裝置(2)向外界發(fā)送的信息內(nèi)容包含骨灰盒位置信息和骨灰盒所有者信息。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可定位骨灰盒，其特征在于:定位模塊(3)采用GPS衛(wèi)星定位系統(tǒng)、北斗導(dǎo)航定位系統(tǒng)、GLONASS定位導(dǎo)航系統(tǒng)、遵循IEEE802.11協(xié)議族的通信系統(tǒng)或移動(dòng)運(yùn)營商的基站定位功能對骨灰盒位置進(jìn)行定位。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可定位骨灰盒，其特征在于:無線通信模塊(4)采用4G-LTE、WCDMA, HSPA, CDMA2000EV-D 0、藍(lán)牙、紅外、CDPD、遵循 IEEE802.11 協(xié)議或 IEEE802.16 協(xié)議的無線通信技術(shù)與外界進(jìn)行通信。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可定位骨灰盒，其特征在于:電源模塊(5)采用蓄電池、干電池、太陽能電池、直流供電電源或交流供電電源。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可定位骨灰盒，其特征在于:防水保護(hù)殼(6)的材質(zhì)選自金屬及合金材料、石材、木材、塑料、橡膠或水晶。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種可定位的骨灰盒，使骨灰盒具有定位功能?？啥ㄎ还腔液杏晒腔液泻畜w1和定位裝置2兩部分組成，其中定位裝置2由定位模塊3、無線通信模塊4、電源模塊5和防水保護(hù)殼6構(gòu)成。定位裝置2可嵌入到骨灰盒盒體1中，也可放置于骨灰盒盒體1的內(nèi)部或固定在骨灰盒盒體1的外壁上，可向外界發(fā)送骨灰盒位置信息和骨灰盒所有者信息。本發(fā)明具有定位方式多樣、定位精度高、定位信息傳輸便捷、實(shí)時(shí)性高等優(yōu)點(diǎn)，便于人們快速定位骨灰盒的位置，可有效減少骨灰盒遺失盜竊現(xiàn)象的發(fā)生。
文檔編號(hào)A61G17/08GK103142379SQ20131006068
公開日2013年6月12日 申請日期2013年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月26日
發(fā)明者李英偉, 魏建福, 李林, 張濤, 王浩實(shí), 魏鑫 申請人:北京靈眾博通科技有限公司