皮膚疤痕治療用藥物組合物及利用其的皮膚疤痕治療方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含肉毒桿菌毒素與空氣的混合物的皮膚疤痕治療用藥物組合物。本發(fā)明的肉毒桿菌毒素與空氣的混合物在注入真皮時，真皮的彈性暫時消除，疤痕凹陷部位變得平坦，從而能夠精確地進行真皮內(nèi)切除，提高脈沖染料激光或點陣激光的治療效果，通過一次手術(shù)有效改善皮膚疤痕而對日常生活沒有不利影響。
【專利說明】皮膚疤痕治療用藥物組合物及利用其的皮膚疤痕治療方法
【技術(shù)領域】[0001]本發(fā)明涉及包含肉毒桿菌毒素與空氣的混合物的皮膚疤痕治療用藥物組合物以及利用其的皮膚疤痕治療方法。
【背景技術(shù)】
[0002]皮膚保護身體器官免受外部環(huán)境的威脅并起到維持體溫的自動溫度調(diào)節(jié)裝置的作用。皮膚由多個不同的層構(gòu)成，各層具有特定的功能。主要的層包括表皮、真皮和皮下組織。表皮是覆蓋由結(jié)締組織構(gòu)成的真皮的上皮細胞形成的層疊層。表皮和真皮均由作為脂肪組織的內(nèi)部層的皮下組織而進一步支撐。
[0003]作為皮膚的最上層的表皮的厚度只有0.1至1.5毫米(Inlander, Skin, NewYork, NY People’s Medical Society, 1_7( 1998))。表皮由角質(zhì)形成細胞構(gòu)成,根據(jù)它們的分化狀態(tài)分成多層。表皮可以進一步分成角質(zhì)層和由顆粒細胞、棘(melphigian)細胞和基底細胞構(gòu)成的活性表皮層(viable epidermis).角質(zhì)層吸收水分，為了維持其柔軟性和細膩性，需要10重量％以上的水分。吸濕性部分地來自角質(zhì)蛋白的鎖水能力。如果角質(zhì)層喪失其細膩性和柔軟性，則容易變粗糙并碎裂，從而導致干燥的皮膚。存在于表皮正下方的真皮的厚度為1.5至4毫米。真皮在皮膚的三個層中最厚。另外，真皮是包括汗腺和油線(通過被稱為粉刺或毛孔的皮膚的開口部而分泌物質(zhì))、毛根、神經(jīng)末端以及血管和淋巴管的皮膚的大部分結(jié)構(gòu)物存在的部分(Inlander, Skin, New York, NY:People's Medical Society, 1-7(1998))。但是真皮的主要成分是膠原蛋白和彈性蛋白。皮下組織是皮膚的最深部層。皮下組織起到維持體溫的絕緣層和用于保護器官的沖擊吸收層的作用(Inlander, Skin, NewYork, NY:People's Medical Society, 1-7 (1998))。另外，皮下組織為了儲備能量而儲藏脂肪。皮膚的PH在正常狀態(tài)下為5與6之間。皮膚的酸性是由于來自皮脂腺的分泌物兩性氨基酸、乳酸和脂肪酸的存在引起的。所謂“酸性外膜(mantle)”的用語是意味著存在于皮膚的大部分區(qū)域的水溶性物質(zhì)的存在。皮膚的緩沖能力部分地由皮膚的角質(zhì)層所儲藏的該分泌物而引起。
[0004]肉毒桿菌毒素(也成為肉桿菌毒素或肉毒桿菌神經(jīng)毒素)是由屬于革蘭氏陽性菌的肉毒梭狀芽孢桿菌(Clostridium botulinum)生成的神經(jīng)毒素。肉毒桿菌毒素阻礙通過神經(jīng)肌肉接頭(neuromuscular junction)的乙酰膽堿的突觸傳遞或釋放而起到肌肉麻痹的作用，另外，認為還以其他方式發(fā)揮作用。它們的作用從根本上切斷正常誘發(fā)肌肉痙攣或收縮的信號而導致麻痹。肉毒桿菌毒素與血清相關(serologically related),被分為不同的8種神經(jīng)毒素。其中，7種，即，肉毒桿菌神經(jīng)毒素血清型A、B、C、D、E、F和G能夠誘發(fā)麻痹。它們分別由利用血清型-特異性抗體的中和而區(qū)分。即便如此，這樣的7種活性肉毒桿菌毒素血清型的肉毒桿菌毒素蛋白質(zhì)的分子量均為約150kD。由細菌分泌的肉毒桿菌毒素是包含與150kD肉毒桿菌毒素蛋白質(zhì)分子相關的非-毒素蛋白質(zhì)的復合體。肉毒桿菌毒素A型復合體可以通過肉毒梭狀芽孢桿菌以900kD、500kD和300kD形態(tài)生成。肉毒桿菌毒素B型和C型從表面上看只生成700kD或500kD復合體。肉毒桿菌毒素D型生成300kD和500kD復合體。肉毒桿菌毒素E型和F型只生成約300kD復合體。復合體被認為(即，大于約150kD的分子量)包括非毒素的血凝素蛋白質(zhì)和非毒素且無毒性的不是血凝素的蛋白質(zhì)(non-toxin and nontoxic nonhematoglutinin)。這樣的2種非毒素蛋白質(zhì)在攝取毒素的情況下，能夠為了對肉毒桿菌毒素分子提供對變性的穩(wěn)定性和對消化性酸(digestiveacid)的保護而發(fā)揮作用。另外，更大(分子量大于約150kD)的肉毒桿菌毒素復合體能夠使肉毒桿菌毒素從肉毒桿菌毒素復合體的肌肉內(nèi)注射部位擴散的速度變得更慢。肉毒桿菌毒素的不同的血清型在它們造成影響的動物種類以及它們誘發(fā)的麻痹的嚴重程度和持續(xù)時間方面有不同。例如，肉毒桿菌毒素A型利用對鼠引起的麻痹率進行測定時比肉毒桿菌毒素B型強500倍。另外，確認了肉毒桿菌毒素B型在對于A型的靈長類的LD5tl的約12倍的480U/kg的給藥量下對靈長類無毒性。由于肉毒桿菌毒素的分子大小和分子結(jié)構(gòu)，肉毒桿菌毒素無法通過角質(zhì)層和下部皮膚架構(gòu)(underlying skin architecture)的多個層。
[0005]肉毒桿菌毒素A型被認為是人們已知的最致命的天然生物作用劑。C.肉毒桿菌的孢子在土壤中被發(fā)現(xiàn)，可以在滅菌不當而密封的食品容器中生長。該細菌的攝取能夠誘發(fā)可致命的肉毒桿菌中毒癥。
[0006]另一方面，疤痕是指損傷的皮膚治愈的痕跡，特別是凹陷疤痕是指表皮損傷后真皮的缺損或纖維化等皮膚的病理學反應。對其的治療方法有利用激光或各種化學物質(zhì)或磨皮機(dermabrator)剝皮至缺損部位的皮膚層的方法、或用真皮內(nèi)切除術(shù)(subcision:將真皮下部拆上來的方法)提高缺損的疤痕的高度的方法。但是，剝皮術(shù)的情況下，對日常生活有很多影響，使疤痕填滿的效果降低，真皮內(nèi)切除術(shù)由于疤痕邊界的粘連的纖維化而精確地對齊疤痕的高度的效果降低，因此手術(shù)后在美容方面難以令人滿意。
[0007]肉毒桿菌毒素具有肌肉麻痹效果，因此為了對包括面部痙攣、成人發(fā)病性攣縮斜頸、肛裂、眼臉痙攣、腦性麻痹、頸部肌緊張異常、偏頭痛、斜視、腭關節(jié)障礙、以及各種種類的肌肉痙攣和發(fā)作的各種疾病實現(xiàn)治療效果而利用。在近來，肉毒桿菌毒素的肌肉麻痹效果在皺紋、眉間紋以及其它面部肌肉的痙攣或收縮的治療等治療以及面部整形應用中活用。但是，幾乎沒有對于利用肉毒桿菌毒素治療疤痕的研究的報道，特別是對于將肉毒桿菌毒素制備成混合物的形態(tài)，并將其利用特異的方法注入皮膚，從而能夠有效改善皮膚疤痕疾病的方法沒有報道。
[0008]因此,如果能夠利用用于各種疾病治療的肉毒桿菌毒素來改善現(xiàn)有的癥痕治療方法的問題，則能夠有效地用于皮膚疤痕的治療，因此迫切需要對于利用肉毒桿菌毒素的新的疤痕治療用組合物及治療方法的研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]發(fā)明目的
[0010]本發(fā)明的發(fā)明人對利用肉毒桿菌毒素的皮膚疤痕治療方法進行了研究的過程中，確認了將肉毒桿菌毒素與空氣進行混合并注入真皮，則能夠消除真皮的彈性，使凹陷的疤痕部位變平，能夠非常有效地增加皮膚疤痕治療效果，從而完成了本發(fā)明。
[0011]本發(fā)明的目的是提供 包含肉毒桿菌毒素與空氣的混合物的皮膚疤痕治療用藥物組合物以及利用其的皮膚疤痕治療方法。
[0012]技術(shù)方案[0013]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供包含肉毒桿菌毒素與空氣的混合物的皮膚疤痕治療用藥物組合物。
[0014]另外，本發(fā)明提供將上述組合物注入真皮而實施的皮膚疤痕治療方法。
[0015]有益效果
[0016]根據(jù)本發(fā)明的肉毒桿菌毒素與空氣的混合物注入真皮時，使真皮的彈性暫時消除，疤痕凹陷部位變平，從而能夠精確地進行真皮內(nèi)切除，提高脈沖染料激光或點陣激光的治療效果，能夠?qū)θ粘Ｉ顩]有影響地僅通過一次的手術(shù)有效地改善疤痕。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0017]圖1是表示對手術(shù)前(A)和注入本發(fā)明的組合物后進行一次真皮內(nèi)切除術(shù)(B)后、經(jīng)過6個月后的疤痕的改善效果進行比較的示意圖。
[0018]圖2是表示對手術(shù)前(A)和注入本發(fā)明的組合物后進行3次真皮內(nèi)切除術(shù)(B)后的疤痕的改善效果進行比較的示意圖。
[0019]圖3是在I名患者的左側(cè)和右側(cè)面部選定5個部位的凹陷疤痕部位而表示的圖。
[0020]圖4是對根據(jù)肉毒桿菌毒素與空氣混合比(1:1、1:2、1:3的體積比)的皮膚疤痕的改善效果進行比較的示意圖。
【具體實施方式】
[0021]本發(fā)明提供，包含肉毒桿菌毒素與空氣的混合物的皮膚疤痕治療用藥物組合物。
[0022]上述肉毒桿菌毒素與空氣的混合物注入真皮時，使真皮的彈性暫時消除，疤痕凹陷部位變平，從而能夠精確地進行真皮內(nèi)切除，提高脈沖染料激光或點陣激光的治療效果，能夠?qū)θ粘Ｉ顩]有影響地僅通過一次的手術(shù)有效地改善疤痕。
[0023]在本發(fā)明中“肉毒桿菌毒素”是指具有肉毒桿菌毒素的生物學活性的分子，可以是蛋白質(zhì)、多肽、肽、融合蛋白質(zhì)、剪切的(truncated)蛋白質(zhì)、嵌合蛋白質(zhì)、突變蛋白質(zhì)或重組蛋白質(zhì)。
[0024]上述毒素的生物活性是指在本發(fā)明的主旨內(nèi)的肌肉麻痹或胞外分泌，特別是乙酰膽堿或其他神經(jīng)阻斷物質(zhì)的胞外分泌的抑制。
[0025]純的或?qū)嵸|(zhì)上純的肉毒桿菌神經(jīng)毒素，可以根據(jù)例如文獻[Corrent topics inMicrobiology and Immunology (1995), 195, p.151-154]中記載的方法由包含肉毒桿菌毒素的蛋白質(zhì)復合體獲得。純的或?qū)嵸|(zhì)上純的肉毒桿菌神經(jīng)毒素可以通過例如包含肉毒梭狀芽孢桿菌(Clostridium botulinum)菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基或培養(yǎng)肉湯(broth)的純化而獲得，例如可以利用肉或蛋白質(zhì)豐富的食品使其豐富。
[0026]上述肉毒桿菌毒素可以在根據(jù)血清型的血清型A、B、C、D、E、F和G中選擇I種以上，可以包括肉毒桿菌神經(jīng)毒素A型中市售的Dysport&或Botox?等，不受限制。也可以包括市售的肉毒桿菌毒素B型的Myobloc (口[0|2喜號)?。
[0027]上述肉毒桿菌毒素與空氣能夠以1:0.1至1:10的體積比混合而構(gòu)成皮膚疤痕治療用藥物組合物，優(yōu)選以1:2至1:4的體積比混合。
[0028]本發(fā)明的組合物能夠以用于疤痕治療的多種形態(tài)利用，能夠出于消除真皮的彈性并使疤痕凹陷部位變平的目的而用于真皮內(nèi)切除術(shù)預處理。[0029]本發(fā)明的組合物還可以包含在藥物組合物的制備中通常使用的適當?shù)妮d體、賦形劑和稀釋劑。
[0030]本發(fā)明的組合物能夠制成液劑、氣溶膠劑、滅菌注射溶液形態(tài)的劑型而使用，但最優(yōu)選將肉毒桿菌毒素與空氣的混合物制成氣溶膠形態(tài)的劑型而使用。將上述組合物制成制劑時，可以使用通常使用的填充劑、增量劑、粘結(jié)劑、濕潤劑、崩解劑、表面活性劑等稀釋劑或賦形劑。
[0031 ] 本發(fā)明的組合物可選地還可以包含分散劑。如本說明書中使用的那樣，分散劑是具有對肉毒桿菌毒素和本發(fā)明的載體不需要或不能抑制的凝集進行防止或最小化的特性的任意物質(zhì)或添加劑。例如，分散劑僅在由于容量限制而只能采用濃縮的肉毒桿菌毒素溶液的情況下有用。在這種情況下，分散劑使肉毒桿菌毒素以分散的狀態(tài)存在，從而防止如果沒有分散劑則會發(fā)生的毒素的凝集。一般來說，分散劑(I)無刺激性，(2)不破壞肉毒桿菌毒素，(3)不帶來透過性的增加，(4)具有可靠且穩(wěn)定的粒子大小，(5)不帶電荷，(6)不妨礙毒素和經(jīng)皮用載體的復合體。
[0032]本發(fā)明的注入意味著以任意的適當?shù)姆椒▽€體提供預定量的本發(fā)明的組合物。
[0033]本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選給藥量根據(jù)患者的疤痕狀態(tài)以及體重、疾病的程度、藥物形態(tài)、給藥途徑以及時間而不同，但本領域技術(shù)人員能夠適當選擇。為了優(yōu)選的效果，本發(fā)明的組合物在注入I次時，以肉毒桿菌毒素A型為基準，可以以0.1單位(unit)至3000單位的量進行給藥，優(yōu)選以I單位至10單位的量進行給藥。上述組合物的給藥可以一天給藥一次，也可以分數(shù)次給藥。
[0034]本發(fā)明的組合物可以為了皮膚疤痕的治療而單獨使用，或與手術(shù)、放射治療、激素治療、化學治療以及使用生物反應調(diào)節(jié)劑的方法并用，優(yōu)選對真皮并用脈沖染料激光(pulsed dye laser)或點陣激光、真皮內(nèi)切除術(shù)(subcision)。
[0035]另外，本發(fā)明提供氣溶膠噴射試劑盒，其中，包含將上述組合物制成氣溶膠形態(tài)的劑型的組合物。
[0036]本發(fā)明還包括如下的試劑盒，其中，包含用于向皮膚注入肉毒桿菌毒素的裝置和載體，還包含適合應用于受試者的皮膚或上皮的液體、凝膠、膏等。本發(fā)明的組合物進行給藥的試劑盒根據(jù)醫(yī)療專家的指導或者由患者或受試者，還可以包括適合其目的的配套涂敷器(custom applicator)。
[0037]另外，本發(fā)明提供皮膚疤痕治療方法，其中，包括:
[0038](I)將肉毒桿菌毒素與空氣的混合物通過28G至31G注射針注入真皮而消除傷痕部位真皮的彈性的步驟；以及
[0039](2)對上述(I)步驟的消除了彈性的真皮進行選自真皮內(nèi)切除術(shù)，脈沖染料激光或點陣激光中的I種以上的手術(shù)的步驟。
[0040]對本發(fā)明的方法，按步驟更詳細地進行說明。
[0041]上述(I)步驟涉及注入肉毒桿菌毒素與空氣的混合物而消除傷痕部位真皮的彈性的步驟，對受試者的皮膚疤痕凹陷部位注入將肉毒桿菌毒素與空氣以1:0.1至1:10的體積比，優(yōu)選地以1:2至1:4的體積比混合的混合物而構(gòu)成。
[0042]上述注入可以利用28G至31G注射針將上述混合物對真皮進行給藥而構(gòu)成，優(yōu)選通過31G的注射針噴射混合物，可以根據(jù)伯努利的流體力學法則以非常強的壓力對疤痕部位進行噴射而注入。另外，作為注射針，可以使用28G至31G的BD胰島素注射器。
[0043]上述噴射優(yōu)選以氣溶膠形態(tài)進行噴射。
[0044]上述(2)步驟是注入肉毒桿菌毒素與空氣的混合物后，進一步進行選自真皮內(nèi)切除術(shù)、脈沖染料激光或點陣激光中的I種以上的手術(shù)的步驟。
[0045]上述真皮內(nèi)切除術(shù)對通過(I)步驟的混合物的注入而暫時消除彈性的真皮進行，從而能夠更精確地對準疤痕的高度。
[0046]上述脈沖染料激光或點陣激光能夠與肉毒桿菌毒素與空氣混合物的治療效果一同對疤痕治療顯示出協(xié)同作用。
[0047]以下，通過制備例和實施例詳細說明本發(fā)明。但是，下述制備例和實施例僅作為例示本發(fā)明，本發(fā)明的內(nèi)容不被下述制備例和實施例所限定。
[0048]實施例1.混合了肉毒桿菌毒素與空氣的組合物的制備
[0049]在裝有肉毒桿菌毒素Al型的肉毒桿菌50U的瓶中注入生理鹽水IOCC而進行稀釋，制備0.5U/CC的肉毒桿菌毒素溶液。將制備的肉毒桿菌毒素溶液分別注入BDUltra-Fine? II Short Needle Insulin Syringe3/10cc31Gx8mm (5/16in)注射器，在該注射器中填充普通空氣來制備肉毒桿菌毒素與空氣的混合物。此時，將肉毒桿菌毒素與空氣的混合比分別以1:1、1:2、1:3、1:4的體積比進行區(qū)分而制備。
[0050]為了比較上述制備的組合物的疤痕改善效果，在以后的實施例中設定了不包含肉毒桿菌毒素的普通空氣注入組、不包括空氣的肉毒桿菌毒素注入組作為對照組。
[0051]實施例2.皮膚疤痕的改善確認
[0052]將上述實施例1中制備的組合物(將肉毒桿菌毒素0.03cc、空氣0.12cc混合而組成)對實際具有疤痕的5名患者的真皮進行給藥，進行真皮內(nèi)切除術(shù)，確認皮膚疤痕的改善效果。真皮內(nèi)切除術(shù)進行I次或3次，將手術(shù)后經(jīng)過6個月后的皮膚疤痕的樣子與手術(shù)前的皮膚疤痕進行比較。
[0053]將結(jié)果示于圖1和圖2。
[0054]如圖1和圖2所示，進行根據(jù)本發(fā)明的疤痕治療的結(jié)果，具有皮膚疤痕的所有患者均顯示顯著的疤痕改善效果，特別是僅通過I次手術(shù)也顯示出80%以上的治療滿意度，從而顯示出患者的滿意度非常大。
[0055]實施例3.根據(jù)肉毒桿菌毒素與空氣的混合比的皮膚疤痕的改善效果比較
[0056]為了將上述實施例2中用肉眼確認的皮膚疤痕的改善效果用數(shù)值進行確認，將不包含肉毒桿菌毒素的單純空氣、不包括空氣的肉毒桿菌毒素以及肉毒桿菌毒素與空氣分別以1:1、1:2和1:3的體積比混合的制劑注入患者的萎縮性疤痕，利用脈沖染料激光和點陣激光進行治療。更具體而言，為了消除根據(jù)個人的疤痕恢復能力差異的分析誤差，在I名患者的左側(cè)和右側(cè)面部選定5個凹陷疤痕部位(圖3)后，對相應部位分別注入上述混合制劑，將疤痕的改善效果數(shù)值化。為了將凹陷疤痕的改善程度數(shù)值化，利用將面部表面進行3維分析并以數(shù)值進行測量的 3D LifeViz II? (Quantificare, France)。
[0057]將結(jié)果示于圖4和表1。
[0058]【表1】
[0059]
【權(quán)利要求】
1.一種皮膚疤痕治療用藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物包含肉毒桿菌毒素與空氣的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚疤痕治療用藥物組合物，其中，所述肉毒桿菌毒素為選自肉毒桿菌毒素血清型A、B、C、D、E、F和G中的一種以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚疤痕治療用藥物組合物，其中，所述肉毒桿菌毒素與空氣以1:0.1至1:10的體積比進行混合。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚疤痕治療用藥物組合物，其中，所述組合物用于真皮內(nèi)切除術(shù)預處理。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的皮膚疤痕治療用藥物組合物，其中，所述組合物消除真皮的彈性。
6.根據(jù)權(quán)利要求1~5中任意一項所述的皮膚疤痕治療用藥物組合物，其中，所述組合物被制成氣溶膠形態(tài)的劑型。
7.一種氣溶膠噴射試劑盒，其特征在于，該試劑盒包含將權(quán)利要求1所述的組合物制成氣溶膠形態(tài)的劑型的組合物。
8.一種皮膚疤痕治療方法，其特征在于，該方法包括: (1)將肉毒桿菌毒素與空氣的混合物通過28G至31G注射針注入真皮而消除傷痕部位真皮的彈性的步驟；以及 (2)對所述(I)步驟的消除了彈性的真皮進行選自真皮內(nèi)切除術(shù)、脈沖染料激光或點陣激光中的I種以上的手術(shù)的步驟 。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的皮膚疤痕治療方法，其中，所述肉毒桿菌毒素與空氣以1:0.1至1:10的體積比進行混合。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的皮膚疤痕治療方法，其中，通過所述(I)步驟的注入而傷痕凹陷部位上升。
11.根據(jù)權(quán)利要求8~10中任意一項所述的皮膚疤痕治療方法，其中，所述(I)步驟的注入是以氣溶膠形態(tài)噴射而進行的。
【文檔編號】A61K38/48GK103501802SQ201280020601
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2012年6月26日 優(yōu)先權(quán)日:2011年6月27日
【發(fā)明者】金相德 申請人:金相德