專利名稱：一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法
一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑學(xué)領(lǐng)域，更具體地說，本發(fā)明涉及一種脂質(zhì)體及其制備方法。背景技術(shù)：
脂質(zhì)體(liposomes)是一種由排列有序的脂質(zhì)雙分子層組成的單層或多層微囊。脂質(zhì)體屬于膠體系統(tǒng)，具有類似細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，與細(xì)胞膜親和力強(qiáng)，可以增加被包封藥物透過細(xì)胞膜的能力。脂質(zhì)體生物相容性好，可實(shí)現(xiàn)藥物體內(nèi)靶向遞送，具有延長藥物作用時間、增加藥物的體內(nèi)外穩(wěn)定性、降低藥物毒性，增強(qiáng)藥理作用等諸多優(yōu)點(diǎn)。理想的脂質(zhì)體需要達(dá)到以下要求(1)脂質(zhì)體形態(tài)圓整且不聚集，可以通過制備方法有效控制粒徑范圍，實(shí)現(xiàn)藥物的緩控釋作用和靶向遞送的目的；(2)脂質(zhì)體穩(wěn)定性高，可以長期放置；(3)脂質(zhì)體具有較高的包封率和載藥量，尤其對于熱穩(wěn)定性差藥物或水溶性生物大分子藥物；(4)脂質(zhì)體容易實(shí)現(xiàn)滅菌或無菌操作。脂質(zhì)體的制備方法有多種，如機(jī)械分散法、薄膜分散法、逆相蒸發(fā)法、復(fù)乳法、熔融法、注入法、冷凍干燥法、表面活性劑處理法、鈣融合法、載體沉積法等。其中，逆相蒸發(fā)法、結(jié)合反復(fù)融凍法技術(shù)的冷凍干燥法是包載水溶性藥物的較好方法。但是，已有的包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法尚存在不足，例如逆相蒸發(fā)法需要長時間的熱處理過程，不適于熱穩(wěn)定性差的蛋白多肽類藥物，并且制備過程中有機(jī)溶劑容易殘留，潛在危害性大。結(jié)合反復(fù)融凍法技術(shù)冷凍干燥方法容易實(shí)現(xiàn)無菌化操作，得到的脂質(zhì)體凍干粉穩(wěn)定性好，但結(jié)合反復(fù)融凍法技術(shù)的冷凍干燥方法制備出來的脂質(zhì)體凍干粉遇水形成脂質(zhì)體溶液時，粒徑通常增大數(shù)倍，形態(tài)不圓整且容易聚集，無法有效控制粒徑范圍，存在安全性問題。發(fā)明專利“一種制備脂質(zhì)體的新方法”(申請?zhí)?3111470. 9)公開了一種制備脂質(zhì)體的新方法，其權(quán)利要求項(xiàng)I為“一種制備脂質(zhì)體的新方法，其特征在于a.制備一單相溶液，其溶質(zhì)為(I)用于形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)、待包封的物質(zhì)，或(2)用于形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)、待包封的物質(zhì)和水溶性載體，所述水溶性載體為蔗糖、乳糖或甘露醇；其溶劑由叔丁醇和水組成，叔丁醇和水的體積比大于1:3。b.冷凍單相溶液除去溶媒，得到凍干產(chǎn)物，將得到的凍干產(chǎn)物水化得到脂質(zhì)體”。發(fā)明專利“一種制備脂質(zhì)體的新方法”(申請?zhí)?3111470. 9)雖然利用了叔丁醇為溶液的冷凍干燥工藝，但明確強(qiáng)調(diào)(I)水溶性載體為蔗糖、乳糖或甘露醇；(2)冷凍干燥前必須得到單相溶液體系。該發(fā)明專利制備得到的脂質(zhì)體凍干粉溶解于水中形成的脂質(zhì)體粒徑雖然小，但結(jié)構(gòu)依然是傳統(tǒng)的單室脂質(zhì)體，因?yàn)檎崽恰⑷樘腔蚋事洞嫉刃》肿铀苄晕镔|(zhì)容易透過脂質(zhì)膜溶解到溶出介質(zhì)中。此外該發(fā)明制備的脂質(zhì)體由于內(nèi)部的小分子水溶性載體溶解后產(chǎn)生高滲透壓，因此存在水溶性藥物快速滲漏的問題，并且該發(fā)明藥物包封率較低(實(shí)施例5為21%，實(shí)施例6為40%)，無法滿足中國藥典2010版對于脂質(zhì)體包封率(大于85%)的要求。發(fā)明專利CN201210022488. 9公開一種膠核脂質(zhì)體凍干粉和制備方法，該脂質(zhì)體具有本發(fā)明類似的結(jié)構(gòu)，但是制備方法是將I份高分子親水膠體材料溶解在10-200份水中，加入O. 05-50份水溶性藥物，混勻形成水相；將O. 5-50份脂質(zhì)材料、2-100份乳化劑和10-1000份凍干支持劑溶解在50-4000份叔丁醇中，形成油相；將水相分散到油相中形成W/0型乳液，超聲、高速攪拌或高壓均質(zhì)處理形成W/0型微乳溶液，采用超低溫速凍工藝形成固體分散體，冷凍干燥除去叔丁醇，形成脂質(zhì)體凍干粉。發(fā)明專利CN201010131339. 7公開了一種包載藥物脂質(zhì)體的制備方法將水溶性藥物與兩親性高分子材料溶解于水相體系中，進(jìn)行第一次冷凍干燥處理，然后將包含水溶性藥物的凍干粉與脂質(zhì)體成膜材料均勻分散于有機(jī)相體系中，進(jìn)行第二次冷凍干燥方法，制成包載水溶性藥物的脂質(zhì)體。發(fā)明專利CN201010131244. 5公開了一種包載藥物脂質(zhì)體的制備方法將藥物分散于溶解或熔融狀態(tài)的兩親性高分子材料體系中，急速降溫處理得到藥物固體分散體，然后將藥物固體分散體與脂質(zhì)體成膜材料均勻分散于有機(jī)相體系中，按照脂質(zhì)體制備方法，制成包載藥物的脂質(zhì)體。以上三個發(fā)明專利，部分解決了脂質(zhì)體包載藥物的制備工藝中存在的穩(wěn)定性差或操作復(fù)雜等問題，但是操作時間控制要求較高、或需要加熱熔融處理等，增加了對大分子藥物的破壞，同時增加了批量制備的操作控制難度?？傊?，已有包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法大多采用乳劑體系或復(fù)乳劑體系，并需要經(jīng)過長時間的熱處理過程，由于大分子水溶性藥物耐熱性差、油水界面的易聚集等特點(diǎn)，應(yīng)用的這類方法制備的包載水溶性藥物的脂質(zhì)體不能保證藥物的活性，特別是大分子藥物的活性。此外，這類方法制備的包載水溶性藥物的脂質(zhì)體存在微粒易聚集、藥物載藥量低、包封率低，突釋效應(yīng)明顯等問題，采用主動載藥技術(shù)可以適度提高藥物的包封率，但是主動載藥技術(shù)需要透析除鹽等步驟，操作時間長且重現(xiàn)性差，也不適于水溶性藥物的脂質(zhì)體的大規(guī)模制備。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有的脂質(zhì)體制備方法的不足之處，提供一種適于包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備技術(shù)，將水溶性藥物溶于明膠、膠原或白蛋白等含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠體中，加入泊洛沙姆(Poloxamer )混勻后形成W/W型膠體溶液，冷凍干燥，形成的凍干粉轉(zhuǎn)入含有脂質(zhì)材料的叔丁醇溶液中，分散均勻后再次冷凍干燥，形成高包封率的包載水溶性藥物的脂質(zhì)體。該脂質(zhì)體制備方法利用二次凍干技術(shù)解決已有包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法對于水溶性藥物載藥量小、包封率低和穩(wěn)定性差的問題，制備得到的載藥脂質(zhì)體粒徑處于納米級、分散均勻、載藥量大、藥物包封率高、藥物釋放緩慢。該方法適用制備包載水溶性藥物的脂質(zhì)體，尤其適用于制備包載熱穩(wěn)定性差的藥物和蛋白、多肽、多糖等大分子藥物的脂質(zhì)體，達(dá)到緩控釋給藥或靶向遞送給藥的目的，也可以用于掩蓋苦味或臭味、與其他組分隔離、減少藥物刺激作用、液體藥物轉(zhuǎn)換為固體形式等制劑目的，可應(yīng)用于注射、口服、黏膜、皮膚、創(chuàng)面、腔道的局部或全身治療的多種劑型。發(fā)明人在長期試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)①明膠、膠原或白蛋白等含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠體溶液對于水溶性藥物具有較好的吸納能力，但很難長期保存，當(dāng)含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠體與泊洛沙姆(Poloxamer)混勻后可以形成W/W型膠體溶液，大分子藥物容易分散于含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠體溶液組成的內(nèi)水相；②利用冷凍干燥將W/W型膠體溶液制成的凍干粉有利于藥物的穩(wěn)定；③泊洛沙姆(Poloxamer)是很好的冷凍干燥支持劑，凍干工藝得到的脂質(zhì)體穩(wěn)定性高W/W型膠體溶液制成的凍干粉再次分散于磷脂溶液中形成的脂質(zhì)體粒徑小且穩(wěn)定性高。發(fā)明人經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)，創(chuàng)新性地將“W/W型膠體溶液技術(shù)”和“二次冷凍干燥工藝”有機(jī)融合成一體，集成了膠體的高載藥量、冷凍干燥工藝的高穩(wěn)定性等特點(diǎn)，探索出一種適于包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備技術(shù)，克服傳統(tǒng)脂質(zhì)體包載水溶性藥物存在的載藥量低、藥物包封率低、突釋效應(yīng)明顯等問題。本發(fā)明的脂質(zhì)體制備方法的關(guān)鍵技術(shù)組合為①制備含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠體與泊洛沙姆(Poloxamer)混勻后形成W/W型膠體溶液,大分子藥物容易分散于含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠體溶液的內(nèi)水相；②采用冷凍干燥工藝將內(nèi)相容納大分子藥物的W/W型高分子膠體溶液制成凍干粉，有利于保持藥物的高度分散狀態(tài)并維持穩(wěn)定性；③容納水溶性藥物的親水膠體凍干粉轉(zhuǎn)入含有脂質(zhì)材料的叔丁醇溶液中，利用超聲技術(shù)使磷脂材料充分包裹親水膠體為核心的微粒，形成混懸溶液體系，并通過調(diào)節(jié)超聲強(qiáng)度或叔丁醇用量控制粒子大??；⑤二次冷凍干燥，形成高包封率的包載水溶性藥物的脂質(zhì)體凍干粉，臨用前注入注射用溶媒，形成包載水溶性藥物的脂質(zhì)體溶液，解決大分子藥物穩(wěn)定性差的問題。以牛血清白蛋白為例，實(shí)驗(yàn)組按照質(zhì)量計(jì)算，將I份明膠溶解在1000份水中，加入5份牛血清白蛋白和100份Poloxamer 188,混勻形成親水膠體溶液I,冷凍干燥,形成凍干粉I。將5份氫化蛋黃磷脂、10份聚氧乙烯氫化蓖麻油溶解在200份叔丁醇中，形成叔丁醇溶液I。將凍干粉I加入到叔丁醇溶液I中，超聲(60KHz)處理lmin，分散均勻，液氮中凍結(jié)形成固體，冷凍干燥形成包載牛血清白蛋白的脂質(zhì)體凍干粉。發(fā)明人設(shè)置了對照試驗(yàn)進(jìn)行觀察，對照試驗(yàn)組如下對照試驗(yàn)組I (不加明膠)按照質(zhì)量計(jì)算，將5份牛血清白蛋白和200份Poloxamerl88溶解于1000份水,混勻，形成親水膠體溶液I，冷凍干燥，形成凍干粉I。將5份氫化蛋黃磷脂、10份聚氧乙烯氫化蓖麻油溶解在200份叔丁醇中，形成叔丁醇溶液I。將凍干粉I加入到叔丁醇溶液I中，超聲(60KHz)處理lmin，分散均勻，液氮中凍結(jié)形成固體，冷凍干燥形成包載牛血清白蛋白的脂質(zhì)體凍干粉。對照試驗(yàn)組2(親水膠體中不加泊洛沙姆):按照質(zhì)量計(jì)算，將I份明膠溶解在1000份水中，加入5份牛血清白蛋白，混勻形成親水膠體溶液I，冷凍干燥，形成凍干粉I。將5份氫化蛋黃磷脂、10份聚氧乙烯氫化蓖麻油溶解在200份叔丁醇中，形成叔丁醇溶液I。將凍干粉I加入到叔丁醇溶液I中，超聲(60KHz)處理lmin，分散均勻，液氮中凍結(jié)形成固體，冷凍干燥形成包載牛血清白蛋白的脂質(zhì)體凍干粉。對照試驗(yàn)組3 (僅一次冷凍干燥處理)按照質(zhì)量計(jì)算，將I份明膠溶解在1000份水中，加入5份牛血清白蛋白和200份Poloxamer 188，混勻形成親水膠體溶液I。將5份氫化蛋黃磷脂、10份聚氧乙烯氫化蓖麻油溶解在200份叔丁醇中，形成叔丁醇溶液I。將親水膠體溶液I加入到叔丁醇溶液I中，超聲(60KHz)處理lmin，分散均勻，液氮中凍結(jié)形成固體，冷凍干燥形成包載牛血清白蛋白的脂質(zhì)體凍干粉。對照試驗(yàn)組4，依據(jù)發(fā)明專利CN201210022488. 9方法制備脂質(zhì)體，具體方法按照質(zhì)量計(jì)算，將I份明膠溶解在1000份水中，加入5份牛血清白蛋白混勻形成水相；將5份氫化蛋黃磷脂、10份聚氧乙烯氫化蓖麻油和200份Poloxamer 188溶解在500份叔丁醇中，形成油相；將水相分散到油相中形成W/0型乳液，80KHz超聲處理2min形成W/0型微乳溶液，采用液氮速凍工藝形成固體分散體，冷凍干燥除去叔丁醇，形成脂質(zhì)體凍干粉。
對照試驗(yàn)組5，依據(jù)發(fā)明專利CN201010131339. 7方法制備脂質(zhì)體，具體方法按照質(zhì)量計(jì)算，200份聚維酮溶解于1000份水中，加入5份牛血清白蛋白溶解，-30°C冷凍5小時，冷凍干燥得到固態(tài)凍干品；將5份氫化蛋黃磷脂、2份膽固醇、O. 5份吐溫80溶解在5 O O份叔丁醇中，形成油相；將上述的固態(tài)凍干品分散到油相中，加入2 O O份甘露醇，超聲(SOKHz)處理2min使分散均勻，冷凍干燥得到脂質(zhì)體凍干粉。對照試驗(yàn)組6，依據(jù)發(fā)明專利CN201010131244. 5方法制備脂質(zhì)體，具體方法按照質(zhì)量計(jì)算，200份聚維酮在65°C水浴中熔融，加入5份牛血清白蛋白分散均勻，轉(zhuǎn)至0°C冰浴中驟冷處理，形成固體分散體；將5份氫化蛋黃磷脂、2份膽固醇、O. 5份吐溫80溶解在500份叔丁醇中，形成油相；將上述的固體分散體分散到油相中，加入200份甘露醇，超聲(SOKHz)處理2min使分散均勻，冷凍干燥得到脂質(zhì)體凍干粉。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組的牛血清白蛋白脂質(zhì)體凍干粉溶解于2000份注射用水中，脂質(zhì)體粒徑較小(平均粒徑=810nm)，微觀形態(tài)圓整，分散均勻，放置24小時沒有明顯變化(圖I)。采用葡聚糖凝膠分離法結(jié)合牛血清白蛋白特異性檢測試劑盒測定包封率，實(shí)驗(yàn)組的牛血清白蛋白脂質(zhì)體包封率達(dá)到95. 4%，并且放置30min后測定，牛血清白蛋白脂質(zhì)體沒有突釋效應(yīng)。對照試驗(yàn)組I (不加高分子親水膠體)的牛血清白蛋白脂質(zhì)體凍干粉溶解于2000份注射用水中，脂質(zhì)體初始粒徑較小，但聚集速度快，容易形成大粒子(>2 μ m)，初始包封率達(dá)到86. 2%，但藥物滲漏嚴(yán)重，存在明顯突釋效應(yīng)。對照試驗(yàn)組2 (親水膠體中不加泊洛沙姆)的牛血清白蛋白脂質(zhì)體凍干粉溶解于2000份注射用水中，粒徑較大(>2 μ m)，形狀不圓整，且分布不均勻，脂質(zhì)體包封率為89. 6%。對照試驗(yàn)組3 (僅一次冷凍干燥處理)的牛血清白蛋白脂質(zhì)體凍干粉溶解于2000份注射用水中,脂質(zhì)體粒徑大(>2 μ m)，形狀不圓整，脂質(zhì)體包封率為70. 2%。對照試驗(yàn)組4 (發(fā)明專利CN201210022488. 9方法)在將水相分散到油相中形成W/ο型乳液的制備操作中，必須采用較高功率的超聲處理才能形成W/0型微乳溶液。制備得到的牛血清白蛋白脂質(zhì)體凍干粉溶解于2000份注射用水中，脂質(zhì)體粒徑較大(平均粒徑=980nm)，微觀形狀不十分圓整，脂質(zhì)體包封率為88. 2%。對照試驗(yàn)組5 (發(fā)明專利CN201010131339. 7方法)在將固態(tài)凍干品分散到油相中的制備操作中，必須采用較高功率的超聲處理才能使溶液分散均勻。制備得到的牛血清白蛋白脂質(zhì)體凍干粉溶解于2000份注射用水中，脂質(zhì)體粒徑較大(平均粒徑=1. I μ m)，微觀形狀不十分圓整，脂質(zhì)體包封率為86. 1%。對照試驗(yàn)組6 (發(fā)明專利CN201010131244. 5方法)在將固體分散體分散到油相中的制備操作中，必須采用較高功率的超聲處理才能使溶液分散均勻，制備得到的牛血清白蛋白脂質(zhì)體凍干粉溶解于2000份注射用水中，脂質(zhì)體粒徑分布范圍較寬，平均粒徑較大(平均粒徑=1. 5 μ m)，微觀形狀呈不規(guī)則形狀，脂質(zhì)體包封率為85. 7%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的脂質(zhì)體制備方法的關(guān)鍵技術(shù)組合缺一不可。對比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明創(chuàng)新采用的“W/W型膠體溶液技術(shù)”和“二次冷凍干燥工藝”結(jié)合技術(shù)，更好地保證大分子蛋白類藥物的活性，提高了操作的可控性，降低了處理過程的難度，尤其降低了形成W/0型微乳溶液所需的機(jī)械處理強(qiáng)度(如超聲時間和功率)，也提高了載藥脂質(zhì)體圓整性和包封率。此外，發(fā)明人將實(shí)驗(yàn)組的親水膠體溶液I中的泊洛沙姆用量和水量、叔丁醇溶液I中的叔丁醇量都增加I倍，其余步驟不變，得到的包載牛血清白蛋白的脂質(zhì)體平均粒徑為550nm，表明通過制備過程中泊洛沙姆用量或溶液體積的調(diào)節(jié)，可以控制脂質(zhì)體的粒徑。此外，實(shí)驗(yàn)組的一些組分的不同型號或用量對實(shí)驗(yàn)結(jié)果不產(chǎn)生影響，例如磷脂材料采用氫化磷脂或合成磷脂，形成的載藥脂質(zhì)體的粒徑和包封率保持一致；泊洛沙姆原料采用Poloxamer 188或Poloxamer 407等不同型號,形成的載藥脂質(zhì)體的粒徑和包封率保持一致；實(shí)驗(yàn)組制備的牛血清白蛋白脂質(zhì)體凍干粉溶解于1000份-50000份注射用水中，形成的載藥脂質(zhì)體的粒徑和包封率保持一致。因此，可以根據(jù)臨床實(shí)際需要，選擇合適的磷脂材料、泊洛沙姆型號或注射用水量。實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)脂質(zhì)體需要大量磷脂材料才能包載一定的藥物，藥物磷脂的質(zhì)量比例最低不少于1:5，而本發(fā)明的藥物磷脂的質(zhì)量比例可以達(dá)到1:1甚至更低，節(jié)約了磷脂的用量，顯著提高脂質(zhì)體的載藥能力。此外，本發(fā)明制備工藝簡便，不需要采用PH梯度或硫酸銨梯度法即可制備高包封率載藥脂質(zhì)體，省去除鹽和高壓均質(zhì)等復(fù)雜的操作過程，容易實(shí)現(xiàn)無菌化操作。由此，一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其制備過程包含以下過程a.以質(zhì)量配比計(jì)算，將I份含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠材料加入500-5000份水形成溶液，加入O. 5-50份水溶性藥物和20-500份泊洛沙姆溶解，形成含有藥物的W/W型親水膠體溶液，冷凍干燥，形成凍干粉I ;b.以質(zhì)量配比計(jì)算，將1-50份脂質(zhì)材料，5-500份聚氧乙烯氫化蓖麻油，溶解在500-10000份叔丁醇中，采用超聲或水浴加熱的處理方法加速溶解，形成叔丁醇溶液I ;c.將凍干粉I加入到叔丁醇溶液I中，分散均勻，形成叔丁醇溶液II，液氮或冰箱中凍結(jié)形成固體，冷凍干燥形成包載水溶性藥物的脂質(zhì)體凍干粉II，灌裝于西林瓶中密封保存，臨用前注入1000-50000份藥學(xué)公知的注射用溶媒，形成包載水溶性藥物的脂質(zhì)體溶液。上述的含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠材料包括明膠、膠原和人血白蛋白。上述的水溶性藥物是指單獨(dú)應(yīng)用、配合增溶劑應(yīng)用或在特定pH值范圍內(nèi)藥物溶解度大于O. 01mg/ml的生物大分子藥物、化學(xué)藥物、中藥有效提取物、醫(yī)學(xué)或生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用的診斷試劑。上述的生物大分子藥物是指蛋白質(zhì)、多肽、多糖、酶、輔酶、核酸結(jié)構(gòu)的藥物及它們的生物降解或衍生產(chǎn)物，包括生長因子、激素、刺激因子、抗體、疫苗、干擾素、白介素、動植物來源的多糖。上述的水溶性藥物包括胰島素、水蛭素、血管內(nèi)皮生長抑制因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子、細(xì)胞生長因子、成骨生長因子、乳鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、干擾素、熒光蛋白、奧沙利鉬，卡鉬，奈達(dá)鉬、阿柔比星、多柔比星、表柔比星、米托蒽醌、博萊霉素、平陽霉素、絲裂霉素、厄洛替尼、吉非替尼、伊馬替尼、達(dá)沙替尼、阿立必利、阿扎司瓊、昂丹司瓊、氯磷酸、美司鈉、利妥昔單抗、替伊莫單抗、西妥昔單抗、貝伐單抗、阿那曲唑，氨魯米特，福美坦，依西美坦、替尼泊苷、依托泊苷，噴司他丁、伊立替康、白消安、氮芥、卡莫斯丁、羅莫司丁、高三尖杉酯堿、門冬酰胺酶、培門冬酶、阿糖胞苷、氟脲苷、吉西他濱、西地尼布、阿倫膦酸鈉、瑞舒伐他汀、抗凝血酶、卡莫氟、多西他賽、長春地辛、長春新堿、紫杉醇、索拉菲尼、地西他濱、丙卡巴肼、尼莫地平、硝苯地平、尼群地平、非洛地平、雙氯滅痛、萘普生、鹽酸曲馬多、嗎啡、硝酸甘油、可樂定、單硝酸異山梨醇酯、鹽酸噻氯匹啶、乙酰唑胺、對乙酰氨基酚、氨茶堿、阿米替林、氨芐西林、羥氨芐青霉素、阿司匹林、貝克拉胺、咖啡因、西咪替丁、苯巴比妥、樟腦、氯霉素、氯非那敏、鹽酸氯丙嗪、氯貝特、氯唑西林、磷酸可待因、地西泮、右美沙芬、布洛芬、鹽酸苯海拉明、鹽酸多西環(huán)素、依普拉酮、芬氟拉明、檸檬酸亞鐵、富馬酸亞鐵、硫酸亞鐵、東莨菪堿、偽麻黃堿、黃連素、吲哚美辛、左旋多巴、碳酸鋰、鹽酸甲氯芬酯、甲喹酮、甲基安非太明、乙酰螺旋霉素、呋喃妥因、去甲替林、那可丁、鹽酸帕努拉明、非那西丁、保泰松、鹽酸苯福明、鹽酸苯丙胺醇、潑尼松龍、普魯卡因胺、溴丙胺太林、鹽酸右丙氧芬、普萘洛爾、硫酸奎尼爾、硫利達(dá)嗪、葡萄糖酸鋅、磺胺托嘧啶、四環(huán)素、鏈霉素、慶大霉素、三氟美嗪、阿利馬嗪、維生素、核磁造影劑、同位素。上述的脂質(zhì)材料是指藥學(xué)公知的磷脂和類脂材料，包括天然卵磷脂、氫化磷脂、合成磷脂及其聚乙二醇修飾衍生物、飽和脂肪酸甘油酯、甾體。上述的制備過程a的含有藥物的親水膠體溶液中還可以加入O. 1-50份藥學(xué)公認(rèn)的水溶性抗氧劑、穩(wěn)定劑、pH調(diào)節(jié)劑，其中穩(wěn)定劑包括人血清白蛋白、酒石酸、琥珀酸、膽酸、脫氧膽酸、富馬酸、枸櫞酸、棕櫚酸、氨基酸。上述的制備過程b的叔丁醇溶液I中還可以加入O. 1-50份藥學(xué)公認(rèn)的油溶性抗氧劑、有機(jī)酸及其酯，其中有機(jī)酸包括甲酸、乙酸、酒石酸、棕櫚酸、硬脂酸、油酸。上述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于制備的載藥脂質(zhì)體凍干粉臨用前根據(jù)需要注入1000-50000份藥學(xué)公知的注射用溶媒，形成粒徑在IOOnm-IOOOnm范圍內(nèi)的載藥脂質(zhì)體。上述的脂質(zhì)體通過選用不同類型的磷脂或類脂材料組合，制成PEG修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體、PH敏感脂質(zhì)體、溫度敏感脂質(zhì)體、表面帶正電荷的脂質(zhì)體，更好地發(fā)揮胃腸道內(nèi)定位釋藥或體內(nèi)血循環(huán)靶向釋藥作用。上述的脂質(zhì)體是單獨(dú)使用或組合到制劑處方中應(yīng)用，通過注射、口服、黏膜、皮膚、創(chuàng)面、腔道途徑給藥，發(fā)揮治療、診斷、預(yù)防、免疫、清洗、消毒、美容、保健的應(yīng)用。本發(fā)明的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，具有下述優(yōu)點(diǎn)(1)該脂質(zhì)體制備工藝創(chuàng)新性地將“W/W膠體技術(shù)”和“二次冷凍干燥工藝”有機(jī)融合成一體，集成了膠體的高載藥量和高分散性、冷凍干燥工藝的高穩(wěn)定性等特點(diǎn)，避免藥物受熱，實(shí)現(xiàn)了包載藥物的脂質(zhì)體的高度分散和粒徑均勻性；(2)該脂質(zhì)體制備工藝有效提高了傳統(tǒng)脂質(zhì)體冷凍干燥制備工藝的效率，減少凍干操作復(fù)雜性。(3)本發(fā)明脂質(zhì)體的藥物磷脂的質(zhì)量比例可以達(dá)到1:1甚至更低，節(jié)約了磷脂的用量，顯著提高脂質(zhì)體的載藥能力；(4)本發(fā)明制備工藝簡便，不需要采用PH梯度或硫酸銨梯度法即可制備高包封率脂質(zhì)體，省去透析除鹽等復(fù)雜操作過程，容易實(shí)現(xiàn)無菌化操作；(5)可以通過調(diào)節(jié)親水膠體配比、叔丁醇用量等控制脂質(zhì)體粒徑；(6)本發(fā)明制備的脂質(zhì)體粒徑在納米范圍內(nèi)，并可以有效控制粒徑，有利于藥物穿透皮膚、黏膜或體內(nèi)生物膜屏障，適用范圍廣，可應(yīng)用于多種劑型，滿足注射、口服、黏膜、皮膚、創(chuàng)面、腔道的局部或全身治療的需要。(7)本發(fā)明的脂質(zhì)體可作為緩控釋給藥體系或靶向遞送給藥系統(tǒng)，也可以用于掩蓋苦味或臭味、與其他組分隔離、減少藥物刺激作用、液體藥物轉(zhuǎn)換為固體形式等制劑目的。
圖I :包載牛血清白蛋白脂質(zhì)體的微觀形態(tài)(平均粒徑=810nm)圖2 :包載水溶性藥物脂質(zhì)體制備流程示意圖
具體實(shí)施方式現(xiàn)結(jié)合下列實(shí)例來進(jìn)一步描述本發(fā)明。實(shí)施例I :胰島素脂質(zhì)體本實(shí)施例制備胰島素脂質(zhì)體，胰島素脂質(zhì)體組成如表I。表I胰島素脂質(zhì)體組分配比
權(quán)利要求
1.一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于其制備過程包含以下過程a.以質(zhì)量配比計(jì)算，將I份含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠材料加入500-5000份水形成溶液，加入O. 5-50份水溶性藥物和20-500份泊洛沙姆溶解，形成含有藥物的W/W型親水膠體溶液，冷凍干燥，形成凍干粉I ;b.以質(zhì)量配比計(jì)算，將1-50份脂質(zhì)材料，5-500份聚氧乙烯氫化蓖麻油，溶解在500-10000份叔丁醇中，采用超聲或水浴加熱的處理方法加速溶解，形成叔丁醇溶液I ;c.將凍干粉I加入到叔丁醇溶液I中，分散均勻，形成叔丁醇溶液II，液氮或冰箱中凍結(jié)形成固體，冷凍干燥形成包載水溶性藥物的脂質(zhì)體凍干粉II，灌裝于西林瓶中密封保存，臨用前注入1000-50000份藥學(xué)公知的注射用溶媒，形成包載水溶性藥物的脂質(zhì)體溶液。
2.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠材料包括明膠、膠原和人血白蛋白。
3.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的水溶性藥物是指單獨(dú)應(yīng)用、配合增溶劑應(yīng)用或在特定PH值范圍內(nèi)藥物溶解度大于O. Olmg/ml的生物大分子藥物、化學(xué)藥物、中藥有效提取物、醫(yī)學(xué)或生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用的診斷試劑。
4.如權(quán)利要求3所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的生物大分子藥物是指蛋白質(zhì)、多肽、多糖、酶、輔酶、核酸結(jié)構(gòu)的藥物及它們的生物降解或衍生產(chǎn)物，包括生長因子、激素、刺激因子、抗體、疫苗、干擾素、白介素、動植物來源的多糖。
5.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的水溶性藥物包括胰島素、水蛭素、血管內(nèi)皮生長抑制因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子、細(xì)胞生長因子、成骨生長因子、乳鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、干擾素、熒光蛋白、奧沙利鉬，卡鉬，奈達(dá)鉬、阿柔比星、多柔比星、表柔比星、米托蒽醌、博萊霉素、平陽霉素、絲裂霉素、厄洛替尼、吉非替尼、伊馬替尼、達(dá)沙替尼、阿立必利、阿扎司瓊、昂丹司瓊、氯磷酸、美司鈉、利妥昔單抗、替伊莫單抗、西妥昔單抗、貝伐單抗、阿那曲唑，氨魯米特，福美坦，依西美坦、替尼泊苷、依托泊苷，噴司他丁、伊立替康、白消安、氮芥、卡莫斯丁、羅莫司丁、高三尖杉酯堿、門冬酰胺酶、培門冬酶、阿糖胞苷、氟脲苷、吉西他濱、西地尼布、阿倫膦酸鈉、瑞舒伐他汀、抗凝血酶、卡莫氟、多西他賽、長春地辛、長春新堿、紫杉醇、索拉菲尼、地西他濱、丙卡巴肼、尼莫地平、硝苯地平、尼群地平、非洛地平、雙氯滅痛、萘普生、鹽酸曲馬多、嗎啡、硝酸甘油、可樂定、單硝酸異山梨醇酯、鹽酸噻氯匹啶、乙酰唑胺、對乙酰氨基酚、氨茶堿、阿米替林、氨芐西林、羥氨芐青霉素、阿司匹林、貝克拉胺、咖啡因、西咪替丁、苯巴比妥、樟腦、氯霉素、氯非那敏、鹽酸氯丙嗪、氯貝特、氯唑西林、磷酸可待因、地西泮、右美沙芬、布洛芬、鹽酸苯海拉明、鹽酸多西環(huán)素、依普拉酮、芬氟拉明、檸檬酸亞鐵、富馬酸亞鐵、硫酸亞鐵、東莨菪堿、偽麻黃堿、黃連素、吲哚美辛、左旋多巴、碳酸鋰、鹽酸甲氯芬酯、甲喹酮、甲基安非太明、乙酰螺旋霉素、呋喃妥因、去甲替林、那可丁、鹽酸帕努拉明、非那西丁、保泰松、鹽酸苯福明、鹽酸苯丙胺醇、潑尼松龍、普魯卡因胺、溴丙胺太林、鹽酸右丙氧芬、普萘洛爾、硫酸奎尼爾、硫利達(dá)嗪、葡萄糖酸鋅、磺胺托嘧啶、四環(huán)素、鏈霉素、慶大霉素、三氟美嗪、阿利馬嗪、維生素、核磁造影劑、同位素。
6.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的脂質(zhì)材料是指藥學(xué)公知的磷脂和類脂材料，包括天然卵磷脂、氫化磷脂、合成磷脂及其聚乙二醇修飾衍生物、飽和脂肪酸甘油酯、甾體。
7.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的制備過程a的含有藥物的親水膠體溶液中還可以加入O. 1-50份藥學(xué)公認(rèn)的水溶性抗氧劑、穩(wěn)定劑、PH調(diào)節(jié)劑，其中穩(wěn)定劑包括人血清白蛋白、酒石酸、琥珀酸、膽酸、脫氧膽酸、富馬酸、枸櫞酸、棕櫚酸、氨基酸。
8.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的制備過程b的叔丁醇溶液I中還可以加入O. 1-50份藥學(xué)公認(rèn)的油溶性抗氧劑、有機(jī)酸及其酯，其中有機(jī)酸包括甲酸、乙酸、酒石酸、棕櫚酸、硬脂酸、油酸。
9.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于制備的載藥脂質(zhì)體凍干粉臨用前根據(jù)需要注入1000-50000份藥學(xué)公知的注射用溶媒，形成粒徑在IOOnm-IOOOnm范圍內(nèi)的載藥脂質(zhì)體。
10.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的脂質(zhì)體通過選用不同類型的磷脂或類脂材料組合，制成PEG修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體、pH敏感脂質(zhì)體、溫度敏感脂質(zhì)體、表面帶正電荷的脂質(zhì)體，更好地發(fā)揮胃腸道內(nèi)定位釋藥或體內(nèi)血循環(huán)靶向釋藥作用。
11.如權(quán)利要求I所述的一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于所述的脂質(zhì)體是單獨(dú)使用或組合到制劑處方中應(yīng)用，通過注射、口服、黏膜、皮膚、創(chuàng)面、腔道途徑給藥，發(fā)揮治療、診斷、預(yù)防、免疫、清洗、消毒、美容、保健的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法，將水溶性藥物溶于明膠、膠原或白蛋白等含氨基酸結(jié)構(gòu)的高分子親水膠體中，加入泊洛沙姆混勻后，形成W/W型膠體溶液，冷凍干燥，形成的凍干粉轉(zhuǎn)入含有脂質(zhì)材料的叔丁醇溶液中，分散均勻后再次冷凍干燥，形成高包封率的包載水溶性藥物的脂質(zhì)體。該脂質(zhì)體制備方法利用W/W型膠體結(jié)合二次凍干的制劑技術(shù)解決已有包載水溶性藥物的脂質(zhì)體制備方法對于水溶性藥物載藥量小、包封率低和穩(wěn)定性差的問題。該方法適用制備包載水溶性藥物的脂質(zhì)體，尤其適用于制備包載熱穩(wěn)定性差或大分子藥物的脂質(zhì)體，也可以用于掩蓋藥物的苦味或臭味、與其他組分相隔離。
文檔編號A61K9/127GK102935068SQ20121040102
公開日2013年2月20日 申請日期2012年10月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月19日
發(fā)明者白驊, 魯翠濤, 曹金全, 蘇正興, 周志彩, 詹新安 申請人:浙江海正藥業(yè)股份有限公司