專利名稱：一種從桑葉中提取總黃酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種天然植物有效活性成分提取方法，具體涉及到一種從桑葉中提取總黃酮的方法。
背景技術(shù)：
桑葉又名“鐵扇子”，為桑屬alba Z )植物的葉片，是常用的中草藥之一。桑葉總黃酮是桑葉中的主要活性成分。桑葉黃酮類成分主要包括蘆丁、槲皮素、異槲皮素和二氫山萘等。桑葉(干重)中含總黃酮類化合物約為2. 53%左右，是所有植物莖葉黃酮類化合物含量較高的一種。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，桑葉黃酮具有降血糖、抗炎、抗氧化和降血脂等功效。目前桑葉總黃酮的提取主要是以酒精溶液為溶劑，提取法有超聲輔助法、熱回 流提取法、浸提法和超臨界CO2提取法等。這些方法不同程度地存在提取時(shí)間長、效率低等問題，無法滿足人們對現(xiàn)代化大生產(chǎn)的需求。微波輔助提取(Microwave-AssistedExtraction, MAE)是利用微波加熱來加速溶劑對固體樣品中目標(biāo)萃取物的萃取過程。其作用機(jī)理是微波射線能夠使植物細(xì)胞內(nèi)溫度突然升高，使其內(nèi)部壓力超過細(xì)胞壁膨脹能力而導(dǎo)致細(xì)胞破裂，使細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)傳遞到周圍溶劑中被溶解而使提取率大大提高。水是吸收微波最好的介質(zhì)，水作為一種極性溶劑，可以有效吸收微波能，促進(jìn)細(xì)胞壁的溶脹破裂，提高植物有效成分的提取效率。而現(xiàn)有技術(shù)中并沒有以水作為提取溶劑結(jié)合微波輔助提取的方法。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述技術(shù)問題，本發(fā)明目的在于縮短桑葉總黃酮的提取時(shí)間，減少環(huán)境污染和生產(chǎn)成本，提供了一種更為高效、環(huán)保的從桑葉中提取總黃酮的方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下
一種從桑葉中提取總黃酮的方法，包括如下步驟
(1)將新鮮桑葉洗凈、干燥、粉碎后過160目得桑葉粉；
(2)在桑葉粉中加入一定量的純凈水，混合均勻、密封后放入微波萃取儀中進(jìn)行微波輔助提取，提取一次；
(3)提取完成后，將提取液過濾，測定總黃酮提取率。進(jìn)一步的,步驟(I)中桑葉洗凈后于50°C烘箱干燥,使干燥后的桑葉含水量在5%以下。進(jìn)一步的，步驟(2)中微波功率為500W，提取時(shí)間2 6min，提取溫度為90 100。。。進(jìn)一步的，步驟(2)中桑葉粉和純凈水的比例在1:25 l:30g/mL。采用本發(fā)明的方法得到的桑葉提取液，用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”測定總黃酮的含量達(dá)到2. 22%左右。本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在
本發(fā)明以水作為提取溶劑結(jié)合微波輔助提取桑葉總黃酮與其它方法相比具有快速、高效、省溶劑、選擇性強(qiáng)、環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明以水作為提取溶劑，不僅環(huán)保，而且大大降低了提取桑葉總黃酮的生產(chǎn)成本；在微波的作用下，桑葉的細(xì)胞壁破裂，導(dǎo)致黃酮類成分充分溶出擴(kuò)散到溶劑中，從而提高了提取率；同時(shí)微波能夠破壞葉綠素的結(jié)構(gòu)，避免葉綠素顏色在測定吸光值時(shí)的影響。本發(fā)明提供上述桑葉中總黃酮的提取方法，可以在制備食品、藥品中應(yīng)用，達(dá)到充分利用桑葉資源的目的。


·
圖I為采用不同提取方法的總黃酮提取率的柱狀圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機(jī)粉碎，然后過160目(篩子)得到桑葉粉。取0.2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進(jìn)行萃取，功率為500W，提取溫度為95°C，提取時(shí)間為4min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計(jì)算桑葉總黃酮的提取率達(dá)到1.703% (相對于桑葉粉的重量)。實(shí)施例2
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機(jī)粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:30g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進(jìn)行萃取，功率為500W，提取溫度為95°C，提取時(shí)間為6min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計(jì)算桑葉總黃酮的提取率達(dá)到2. 018%。實(shí)施例3
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機(jī)粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:30g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進(jìn)行萃取，功率為500W，提取溫度為100°C，提取時(shí)間為4min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計(jì)算桑葉總黃酮的提取率達(dá)到1.902%。實(shí)施例4
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機(jī)粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進(jìn)行萃取，功率為500W，提取溫度為90°C，提取時(shí)間為6min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計(jì)算桑葉總黃酮的提取率達(dá)到I. 828%。實(shí)施例5 將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機(jī)粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進(jìn)行萃取，功率為500W，提取溫度為100°C，提取時(shí)間為6min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計(jì)算桑葉總黃酮的提取率達(dá)到2. 141%。實(shí)施例6
將采摘的新鮮桑葉沖洗干凈，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑葉含水量降至5%以下。將干燥后的桑葉放入高速粉碎機(jī)粉碎，然后過160目得到桑葉粉。取O. 2g桑葉粉放入微波萃取管中，按照l:29g/mL的比例加入純凈水，然后密封后放入微波萃取儀中進(jìn)行萃取，功率為500W，提取溫度為100°C，提取時(shí)間為2min。提取完成后，將提取液過濾至IOmL容量瓶中，定容，采用“亞硝酸鈉一硝酸鋁一氫氧化鈉比色法”在510nm測定提取液吸光值，計(jì)算桑葉總黃酮的提取率達(dá)到2. 189%。為了驗(yàn)證本發(fā)明提取方法的提取效果，以下幾種提取方法進(jìn)行了對比試驗(yàn)
I)熱回流提取取Ig桑葉粉，按照l:29g/mL的比例加入純凈水，100°C條件下提取80min，提取液過濾，定容于50mL容量瓶，測定吸光值，計(jì)算總黃酮提取率。2)超聲輔助提取取O. 2g桑葉粉，按照l:29g/mL的比例加入純凈水，于60°C條件下提取80min，提取液過濾、定容于IOmL容量瓶，測定吸光值，計(jì)算總黃酮提取率。3 )浸泡提取取O. 2g桑葉粉，按照1:29g/mL的比例加入純凈水，于室溫條件下浸泡24h，提取液過濾、定容于IOmL容量瓶，測定吸光值，計(jì)算總黃酮提取率。如圖I所示，上述三種方法總黃酮提取率和本發(fā)明的總黃酮提取率相比，本發(fā)明的總黃酮提取率明顯高于現(xiàn)有技術(shù)中的其他三種方法。以上所述及圖中所示的僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式。應(yīng)當(dāng)指出，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明的原理的前提下，還可以作出若干變型和改進(jìn)，這些也應(yīng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種從桑葉中提取總黃酮的方法，包括如下步驟 (1)將新鮮桑葉洗凈、干燥、粉碎后過160目得桑葉粉； (2)在桑葉粉中加入一定量的純凈水，混合均勻、密封后放入微波萃取儀中進(jìn)行微波輔助提取，提取一次； (3)提取完成后，將提取液過濾，測定總黃酮提取率。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從桑葉中提取總黃酮的方法，其特征在于步驟(I)中桑葉洗凈后于50°C烘箱干燥，使干燥后的桑葉含水量在5%以下。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述從桑葉中提取總黃酮的方法，其特征在于步驟(2)中微波功率為500W，提取時(shí)間2 6min，提取溫度為90 100°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述從桑葉中提取總黃酮的方法，其特征在于步驟(2)中桑葉粉和純凈水的比例在1:25 l:30g/mL。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從桑葉中提取總黃酮的提取方法，包括如下步驟將新鮮桑葉洗凈，干燥，粉碎，過160目得桑葉粉；然后將桑葉粉與純凈水按照一定比例混合均勻，放入微波萃取設(shè)備里進(jìn)行萃取，萃取一段時(shí)間后過濾，定容，測定桑葉總黃酮的含量。本發(fā)明首次以水作為溶劑，結(jié)合微波輔助法提取桑葉總黃酮。本發(fā)明具有快速高效、提取率高和環(huán)境友好的優(yōu)點(diǎn)。而且減少了有機(jī)溶劑提取導(dǎo)致葉綠素等雜質(zhì)對測定結(jié)果的影響，更有利于后續(xù)的分離純化工作。
文檔編號A61K36/605GK102872201SQ20121033592
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月12日
發(fā)明者賀偉強(qiáng) 申請人:嘉興職業(yè)技術(shù)學(xué)院