專(zhuān)利名稱(chēng)：一種經(jīng)低溫干燥制備納米美洲大蠊的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種經(jīng)低溫干燥制備納米美洲大蠊的制備方法。
背景技術(shù)：
據(jù)文獻(xiàn)記載，美洲大蠊是蜚蠊科中體積最大的昆蟲(chóng)，原產(chǎn)于南美洲，我國(guó)各地均有分布，尤以我國(guó)南方地區(qū)更為常見(jiàn)。美洲大蠊是傳統(tǒng)的中藥材，以干燥和鮮成蟲(chóng)入藥，其性寒味咸，有辛辣味，有散瘀、消積、解毒、利水、消腫等功效；主治兒童疳積、扁桃腺炎、身體包塊、癰瘡腫痛和蜈蚣、毒蛇咬傷等。近年來(lái)隨著科技不斷地發(fā)展，經(jīng)多年研究發(fā)現(xiàn)，美洲大蠊表皮含有鞏膜質(zhì)和甲殼質(zhì)、溴、鋅、鎳、猛、鉀、鈣、鈦、氯、硫、硅、鋁、鎂等元素。肌肉水解13種氨基酸。此外，身體貯藏微生素BI、維生素B2、煙酸和抗壞血酸等，淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原兒 茶酸葡萄甙等。全體含麥角硫因、龍蝦肌堿、胡蘆巴堿、甘氨酸、甜菜堿、肛堿、三甲胺、腺嘌呤等。美洲大蠊的藥理作用主要表現(xiàn)在抗腫瘤作用、提高免疫作用、保肝作用、促進(jìn)組織修復(fù)作用、抗炎和鎮(zhèn)痛作用等。納米中藥是采用納米技術(shù)將中藥有效成分、有效部位、原藥或其復(fù)方多種中藥制成小于IOOnm的納米粒復(fù)方制劑。其不是簡(jiǎn)單的將中藥材進(jìn)行粉碎至納米數(shù)量級(jí)，而是針對(duì)中藥的有效部分/成分進(jìn)行納米技術(shù)加工處理，達(dá)到納米藥物給藥系統(tǒng)NDDS(Nanoparticle Drug Delivery System)要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備納米粒徑小于IOOnm納米美洲大蠊的制備方法，為了達(dá)到上述目的，需要將美洲大蠊鮮蟲(chóng)經(jīng)低溫干燥。本發(fā)明采取的技術(shù)方案是提供一種經(jīng)低溫干燥制備納米美洲大蠊的制備方法，其特征在于包括以下步驟A、低溫處理，美洲大蠊成蟲(chóng)于O -40°C冷庫(kù)處死、保存；B、低溫微波提取，從冷庫(kù)中取出，常溫下解凍、除去雜質(zhì)及非藥用部位，將剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體置于提取罐中，加入剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體重量2 20倍的水并導(dǎo)入微波提取，使上述剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體和水的混合液以2(Γ30億次/秒速度作極性變化運(yùn)動(dòng)，微波提取的溫度為1(T40°C，時(shí)間為O. 5 8h ；C、低溫減壓濃縮，將步驟B得到的提取液在溫度1(T40°C下進(jìn)行低溫減壓濃縮，時(shí)間為3 72h ；D、一次粉碎干燥，將步驟C低溫減壓濃縮后得到的塊狀物料，置于粉碎-干燥機(jī)，使物料進(jìn)行一次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為500-4500轉(zhuǎn)/分；E、一次分離，經(jīng)一次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到納米美洲大蠊和廢物料；
F、二次粉碎干燥，一次分離得到的廢物料被重新返回粉碎-干燥機(jī)進(jìn)行二次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為500-4500轉(zhuǎn)/分；G、二次分離，經(jīng)二次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到納米美洲大蠊和廢物料；經(jīng)一次分離和二次分離后得到的納米美洲大蠊合并即為納米美洲大蠊成
品O經(jīng)一次分離和二次分離得到的納米美洲大蠊粒徑為flOOnm。本發(fā)明優(yōu)選的一種粉碎干燥條件為粉碎-干燥機(jī)的轉(zhuǎn)速為2000轉(zhuǎn)/分。
通過(guò)本發(fā)明提供的制備方法得到的納米美洲大蠊加入藥學(xué)上可接受的輔料或者輔助性成分制成更適宜于臨床應(yīng)用的劑型，如丸劑、散劑、片劑、栓劑、顆粒劑、膜劑、膠囊齊U、微囊劑、滴丸劑、氣霧劑、注射劑、膏劑或者口服溶液劑；上述劑型的藥物組合物主要用于活血散瘀、解毒利疳、利尿消腫；用于癥瘕積聚，小兒疳積，腳氣水腫，疔瘡，腫毒及蛇蟲(chóng)咬傷、創(chuàng)面修復(fù)、原發(fā)性肝癌等。通過(guò)本發(fā)明提供的制備方法得到的納米美洲大蠊具有以下有益效果I、經(jīng)低溫處理(美洲大蠊成蟲(chóng)于(T-40°C冷庫(kù)處死、保存)、低溫微波提取(1(T40°C )和低溫減壓濃縮(1(T40°C )，最大限度的保留了藥物活性成分，如丙氨酸等；2、顆粒細(xì)小、均勻，分散性好，粒徑為(TlOOnm ；3、提高了吸收率和生物利用率；4、降低患者使用量和提高治療效果；5、具有安全性，降低某些對(duì)胃腸的刺激。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例和試驗(yàn)例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的描述，但它們不是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步限制。實(shí)施例I :美洲大蠊成蟲(chóng)于0°C冷庫(kù)處死、保存；從冷庫(kù)中取出IOOKg美洲大蠊成蟲(chóng)，常溫下解凍、除去雜質(zhì)及非藥用部位，將剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體置于提取罐中，加入剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體重量2倍的水并導(dǎo)入微波提取，使上述剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體和水的混合液以2(Γ30億次/秒速度作極性變化運(yùn)動(dòng)，微波提取的溫度為10°C，時(shí)間為O. 5h ;將得到的提取液在溫度10°C下進(jìn)行低溫減壓濃縮，時(shí)間為3h ;將低溫減壓濃縮后得到的塊狀物料，置于粉碎-干燥機(jī)，使物料進(jìn)行一次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為500轉(zhuǎn)/分；經(jīng)一次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為(TlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；一次分離得到的廢物料被重新返回粉碎-干燥機(jī)進(jìn)行二次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為500轉(zhuǎn)/分；經(jīng)二次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為(TlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；經(jīng)一次分離和二次分離后得到的納米美洲大蠊合并即為納米美洲大蠊成品。本實(shí)施例得到的納米美洲大蠊粒徑在(TlOOnm，體表面積大，晶界處的原子數(shù)比率高達(dá)15飛0% ;經(jīng)檢測(cè)，該美洲大蠊納米提取物的干燥品中含總氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)計(jì)為12.0% (質(zhì)量百分比)。實(shí)施例2 :美洲大蠊成蟲(chóng)于-10°C冷庫(kù)處死、保存；從冷庫(kù)中取出IOOKg美洲大蠊成蟲(chóng)，常溫下解凍、除去雜質(zhì)及非藥用部位，將剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體置于提取罐中，加入剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體重量5倍的水并導(dǎo)入微波提取，使上述剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體和水的混合液以2(Γ30億次/秒速度作極性變化運(yùn)動(dòng)，微波提取的溫度為20°C，時(shí)間為2h ;將得到的提取液在溫度20°C下進(jìn)行低溫減壓濃縮，時(shí)間為15h ;將低溫減壓濃縮后得到的塊狀物料，置于粉碎-干燥機(jī)，使物料進(jìn)行一次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為4500轉(zhuǎn)/分；經(jīng)一次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為(TlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；一次分離得到的廢物料被重新返回粉碎-干燥機(jī)進(jìn)行二次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為4500轉(zhuǎn)/分；經(jīng)二次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為(TlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；經(jīng)一次分離和二次分離后得到的納米美洲大蠊合并即為納米美洲大蠊成品。本實(shí)施例得到的納米美洲大蠊粒徑在(TlOOnm，體表面積大，晶界處的原子數(shù)比率高達(dá)15飛0% ;經(jīng)檢測(cè)，該美洲大蠊納米提取物的干燥品中含總氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)計(jì)為14.9% (質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例3 :美洲大蠊成蟲(chóng)于-20°C冷庫(kù)處死、保存；從冷庫(kù)中取出IOOKg美洲大蠊成蟲(chóng)，常溫下解凍、除去雜質(zhì)及非藥用部位，將剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體置于提取罐中，加入剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體重量10倍的水并導(dǎo)入微波提取，使上述剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體和水的混合液以2(Γ30億次/秒速度作極性變化運(yùn)動(dòng)，微波提取的溫度為30°C，時(shí)間為4h ;將得到的提取液在溫度30°C下進(jìn)行低溫減壓濃縮，時(shí)間為30h ;將低溫減壓濃縮后得到的塊狀物料，置于粉碎-干燥機(jī)，使物料進(jìn)行一次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為2000轉(zhuǎn)/分；經(jīng)一次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為(TlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；一次分離得到的廢物料被重新返回粉碎-干燥機(jī)進(jìn)行二次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為2000轉(zhuǎn)/分；經(jīng)二次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為OlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；經(jīng)一次分離和二次分離后得到的納米美洲大蠊合并即為納米美洲大蠊成品。本實(shí)施例得到的納米美洲大蠊粒徑在(TlOOnm，體表面積大，晶界處的原子數(shù)比率高達(dá)15飛0% ;經(jīng)檢測(cè)，該美洲大蠊納米提取物的干燥品中含總氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)計(jì)為15. 5% (質(zhì)量百分比)。實(shí)施例4 :美洲大蠊成蟲(chóng)于_30°C冷庫(kù)處死、保存；從冷庫(kù)中取出IOOKg美洲大蠊成蟲(chóng)，常溫下解凍、除去雜質(zhì)及非藥用部位，將剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體置于提取罐中，加入剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體重量15倍的水并導(dǎo)入微波提取，使上述剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體和水的混合液以2(Γ30億次/秒速度作極性變化運(yùn)動(dòng)，微波提取的溫度為40°C，時(shí)間為6h ;將得到的提取液在溫度40°C下進(jìn)行低溫減壓濃縮，時(shí)間為50h ;將低溫減壓濃縮后得到的塊狀物料，置于粉碎-干燥機(jī)，使物料進(jìn)行一次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)/分；經(jīng)一次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為(TlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；一次分離得到的廢物料被重新返回粉碎-干燥機(jī)進(jìn)行二次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)/分；經(jīng)二次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為OlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；經(jīng)一次分離和二次分離后得到的納米美洲大蠊合并即為納米美洲大蠊成品。本實(shí)施例得到的納米美洲大蠊粒徑在(TlOOnm，體表面積大，晶界處的原子數(shù)比率高達(dá)15飛0% ;經(jīng)檢測(cè)，該美洲大蠊納米提取物的干燥品中含總氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)計(jì)為14.0% (質(zhì)量百分比)。實(shí)施例5 :美洲大蠊成蟲(chóng)于_40°C冷庫(kù)處死、保存；從冷庫(kù)中取出IOOKg美洲大蠊成蟲(chóng)，常溫下解凍、除去雜質(zhì)及非藥用部位，將剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體置于提取罐中，加入剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體重量20倍的水并導(dǎo)入微波提取，使上述剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體和水的混合液以2(Γ30億次/秒速度作極性變化運(yùn)動(dòng)，微波提取的溫度為30°C，時(shí)間為8h ;將得到的提取液在溫度30°C下進(jìn)行低溫減壓濃縮，時(shí)間為72h ;將低溫減壓濃縮后得到的塊狀物料，置于粉碎-干燥機(jī)，使物料進(jìn)行一次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為1500轉(zhuǎn)/分；經(jīng)一次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為(TlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；一次分離得到的廢物料被重新返回粉碎-干燥機(jī)進(jìn)行二次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為1500轉(zhuǎn)/分；經(jīng)二次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到粒徑為(TlOOnm的納米美洲大蠊和廢物料；經(jīng)一次分離和二次分離后得到的納米美洲大蠊合并即為納米美洲大蠊成品。本實(shí)施例得到的納米美洲大蠊粒徑在(TlOOnm，體表面積大，晶界處的原子數(shù)比率高達(dá)15飛0% ;經(jīng)檢測(cè)，該美洲大蠊納米提取物的干燥品中含總氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)計(jì) 為13.6% (質(zhì)量百分比)。參比實(shí)施例美洲大蠊提取物制劑的制備a、粗碎將干燥的美洲大蠊進(jìn)行粉碎，制得美洲大蠊粗粉，備用；b、浸泡按照每IOOkg的粗粉加入3飛倍量的水，在7(T78°C的溫度條件下浸泡
0.5^2小時(shí)制得粗粉混合液，備用；C、三次提取粗粉混合液采用煎煮的方法進(jìn)行三次提取，對(duì)粗粉混合液進(jìn)行第一次提取時(shí)，提取時(shí)間為7、小時(shí)；然后向經(jīng)第一次提取后的余液中加入余液2 4倍量的水后進(jìn)行第二次提取，提取時(shí)間為5 7小時(shí)；最后向經(jīng)第二次提取后的余液中加入余液2 4倍量的水后進(jìn)行第三次提取，提取時(shí)間為3飛小時(shí)，分別制得三次的提取液，備用；d、第一次過(guò)濾將三次的提取液合并混合，然后進(jìn)行過(guò)濾制得一級(jí)濾液，備用；e、第一次濃縮將一級(jí)濾液濃縮至7(T90°C時(shí)相對(duì)密度為I. 05^1. 25的一級(jí)濃縮液，備用；f、醇化處理向一級(jí)濃縮液中逐漸加入濃度為93 97%w/w的乙醇，并充分?jǐn)嚢瑁蛊浜剂窟_(dá)到45飛5%為止，在7(T90°C的溫度條件下保溫2(Γ40分鐘，然后靜置1(Γ 4小時(shí)，制得醇化液，備用；g、第二次過(guò)濾將醇化液棄去上層油脂，下層藥液進(jìn)行過(guò)濾制得二級(jí)濾液，備用；h、第二次濃縮將二級(jí)濾液進(jìn)行乙醇回收處理后，濃縮至7(T90°C時(shí)相對(duì)密度為
1.15^1. 30的二級(jí)濃縮液，備用；i、膏劑制備將二級(jí)濃縮液在常壓條件下濃縮至水分< 25 35%的膏劑，即得含美洲大蠊提取物，備用；成藥按照有效成分混合物(美洲大蠊提取物)純化水甘油=IOOOg:800^1200mlr6ml的重量比向有效成分混合物中加入純化水和甘油，充分?jǐn)嚢杈鶆?，?jīng)板框過(guò)濾，濾液煮沸30分鐘后，分裝成IOOml/瓶或50ml/瓶，再經(jīng)高溫高壓滅菌消
毒，冷至室溫，即得成藥。
試驗(yàn)例以本發(fā)明提供的制備方法制備的納米美洲大蠊為活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或者輔助性成分制成用于治療散瘀消腫病癥的藥物組合物，可以制成散劑、膏劑、片齊U、膠囊等多種形式，以滿(mǎn)足不同患者的用藥習(xí)慣以實(shí)施例I飛制備的納米美洲大蠊為散劑。上述散劑用于治療散瘀消腫病癥的臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)一、患者分組資料散瘀消腫患者(包括原發(fā)性肝癌手術(shù)切除后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移和無(wú)法手術(shù)切除帶瘤的患者以及經(jīng)手術(shù)治療需創(chuàng)面修復(fù)的患者)175例，符合診斷標(biāo)準(zhǔn)。隨即分為治療組和對(duì)照組，治療組125例，男性65例，女性60例，年齡16 40歲；對(duì)照組50例，男性25例 ，女性25例，年齡16 40歲。兩組患者年齡、性別和病程經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異無(wú)顯著性意義，具有可比性。二、治療方法治療組f 5 :取按照實(shí)施例I飛中制備方法制得的納米美洲大蠊散劑，四川好醫(yī)生攀西藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，口服，一次2 5g;—日3次；連續(xù)服用I個(gè)月；對(duì)照組I :云南白藥酊，云南白藥集團(tuán)股份限公司生產(chǎn)，口服，一次T5ml，一日3次；連續(xù)服用I個(gè)月。對(duì)照組2 :美洲大蠊提取物制劑，按照參比實(shí)施例方法制備，口服，一次10ml，一日3次；連續(xù)服用I個(gè)月。三、療效比較結(jié)果表I所示為七組療效比較，其中治療組125例，對(duì)照組50例，表2所示為七組15天和I個(gè)月內(nèi)療效比較(表I和表2中η代表人數(shù))。評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)治愈無(wú)瘀斑，無(wú)腫脹，無(wú)疼痛；有效疼痛輕，可意識(shí)到，但不影響日常工作休息，局部略有青紫，以紫為主，面積小于IcmX Icm ;腫脹輕,周徑增加小于5% ；無(wú)效疼痛重，腫脹重，周徑增加大于10%。局部青紫明顯，以青為主，面積大于4cmX4cm。表I :
權(quán)利要求
1.ー種經(jīng)低溫干燥制備納米美洲大蠊的制備方法，其特征在于包括以下步驟 A、低溫處理，美洲大蠊成蟲(chóng)于O -40°C冷庫(kù)處死、保存； B、低溫微波提取，從冷庫(kù)中取出，常溫下解凍、除去雜質(zhì)及非藥用部位，將剩余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體置于提取罐中，加入剰余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體重量2 20倍的水并導(dǎo)入微波提取，使上述剰余美洲大蠊干燥蟲(chóng)體和水的混合液以2(T30億次/秒速度作極性變化運(yùn)動(dòng)，微波提取的溫度為10 40で，時(shí)間為0. 5 8h ； C、低溫減壓濃縮，將步驟B得到的提取液在溫度1(T40°C下進(jìn)行低溫減壓濃縮，時(shí)間為3 72h ； D、一次粉碎干燥，將步驟C低溫減壓濃縮后得到的塊狀物料，置于粉碎-干燥機(jī)，使物料進(jìn)行一次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為500-4500轉(zhuǎn)/分； E、一次分離，經(jīng)一次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到納米美洲大蠊和廢物料； F、二次粉碎干燥，一次分離得到的廢物料被重新返回粉碎-干燥機(jī)進(jìn)行二次粉碎干燥，粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為500-4500轉(zhuǎn)/分； G、二次分離，經(jīng)二次粉碎干燥的物料通過(guò)分級(jí)機(jī)排出粉碎-干燥機(jī)，得到納米美洲大蠊和廢物料；經(jīng)一次分離和二次分離后得到的納米美洲大蠊合并即為納米美洲大蠊成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的經(jīng)低溫干燥制備納米美洲大蠊的制備方法，其特征在于所述粉碎-干燥機(jī)轉(zhuǎn)速為2000轉(zhuǎn)/分。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的經(jīng)低溫干燥制備納米美洲大蠊的制備方法，其特征在于經(jīng)一次分離和二次分離得到的納米美洲大蠊粒徑為0 100nm。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種經(jīng)低溫干燥制備納米美洲大蠊的制備方法，經(jīng)過(guò)低溫處理、低溫提取、低溫減壓濃縮、粉碎干燥、分離等步驟得到的納米美洲大蠊粒徑為0~100nm。通過(guò)本發(fā)明提供的制備方法得到的納米美洲大蠊顆粒細(xì)小、均勻，分散性好，粒徑為0~100nm；提高了吸收率和生物利用率；降低患者使用量和提高治療效果；具有安全性，降低某些對(duì)胃腸的刺激。
文檔編號(hào)A61P1/16GK102846667SQ20121031536
公開(kāi)日2013年1月2日 申請(qǐng)日期2012年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月23日
發(fā)明者耿福能 申請(qǐng)人:耿福能