專利名稱：一種祛痰止咳組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥和保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種祛痰止咳組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
咳嗽是呼吸系統(tǒng)病癥中常見的一種，為高發(fā)病。從生理學的角度來看，咳嗽是人體呼吸道受到刺激(如炎癥、異物)、由神經(jīng)末梢發(fā)出沖動傳入延髓咳嗽中樞引起的一種生理反射，通過咳嗽動作以排出呼吸道分泌物或異物(如粘痰、細菌體、纖維)，以此來保持呼吸道的清潔和通暢。無痰的劇烈干咳，或有痰而過于頻繁地劇咳，不僅增加病人痛苦，影響休息和睡眠，增加體力消耗，而且可能加重病情。目前用于治療咳嗽的藥物可分為西藥類和中藥兩大類，其中西藥又按作用機制不同分為中樞性止咳藥和外周性止咳藥。中樞性止咳藥物通過抑制咳嗽中樞，使其不能下達咳嗽的指令而止咳，中樞性鎮(zhèn)咳藥則直接作用于咳嗽神經(jīng)中樞，對咳嗽反射產(chǎn)生選擇性抑制作用而止咳。中樞性鎮(zhèn)咳藥大多數(shù)作用強大，僅適用于劇烈而頻繁的無痰性干咳，痰多者則須禁用，這類藥物雖然對咳嗽療效顯著，但有的有成癮性。外周性止咳藥主要通過對 支氣管的局部麻醉作用來止咳，其止咳作用較中樞性止咳藥弱，如咳嗽糖漿，口服后可覆蓋在咽喉部粘膜表面，保護局部黏膜少受刺激，并促進唾液分泌和吞咽動作，起到輕度止咳作用。另一種是外周性止咳口服藥片一莫吉司坦，是一種上市不久的外周性非麻醉性鎮(zhèn)咳藥物。與西藥相比，中藥在止咳的同時一般還具有化痰作用，其優(yōu)點是藥性溫和、副作用小，但藥效不如西藥顯著，且治療周期比較長。中藥又可分為中成藥和中草藥兩大類，常見的中成藥有京都念慈庵、潘高壽、克咳、急支糖漿、通宣理肺丸、川貝枇杷露、蛇膽川貝液、VC銀翹片、羅漢果止咳沖劑等；常用的中草藥主要有紫蘇葉、黃芩、杏仁、甘草、枳殼、桔梗、橘紅、前胡、麻黃、桑葉、菊花、連翹、薄荷、蘆根、沙參、桅子、麥冬、貝母、桑白皮、魚腥草、掛金燈、薏苡仁、冬瓜子、半夏、茯苓、陳皮、白芥子、天花粉、玉竹、百合等。應用中藥治療咳嗽時，需遵循中醫(yī)理論辨證論治，細分寒熱虛實，對癥用藥方能有較好的療效。近年來，中藥在化痰止咳方面顯示了獨特的優(yōu)點，因而受到了患者青睞。但隨著開發(fā)利用范圍和強度的不斷加大，很多優(yōu)良資源已經(jīng)出現(xiàn)稀缺的局面，有的甚至瀕臨滅絕，如何解決資源供給難題急待解決。青錢柳paliurus (Batal. ) Iljinsk)為我國特有的胡桃科青錢柳屬單種屬珍稀植物。據(jù)《中國中藥資源志要》記載，其樹皮、葉具有清熱消腫、止痛的功能，可用于治療頑癬。江西民間長期取其葉制作飲料，因其昧甜，有清熱解暑、降血壓、降血糖等功能，故又稱甜茶、神茶。研究發(fā)現(xiàn)，青錢柳葉含多種活性成分，如具有降糖和增加糖耐量的多糖，具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗腫瘤作用的黃酮類、酚酸類和三萜類化合物。但是青錢柳及其提取物在祛痰止咳方面的應用，尚未見報道。另外，青錢柳是國家重點保護的瀕危植物之一，目前其可利用的資源稀少，有限的資源零星分布于深山老林之中，或保存于自然保護區(qū)內(nèi)；而且其有性繁殖系數(shù)低，無性繁殖困難，嚴重制約其開發(fā)利用。為了解決上述問題，發(fā)明人利用細胞工程技術(shù)，以青錢柳無菌幼葉為外植體，誘導出愈傷組織。選擇綠色、較為疏松的愈傷組織繼續(xù)篩選和繼代培養(yǎng)，獲得疏松易碎、生長旺盛、適于懸浮培養(yǎng)的優(yōu)良愈傷組織，建立了青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系。在此基礎(chǔ)上，優(yōu)化了懸浮培養(yǎng)條件，得到活性成分富集的青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞。該條件下懸浮細胞生長迅速，最大生長量(干質(zhì)量)達到15. 56g/ L，總?cè)飘a(chǎn)量達1179. 85 mg/L。相關(guān)研究，已經(jīng)發(fā)表于《深圳大學學報理工版》(2011年9月第28卷第5期，430-435頁)。因此，青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞完全可以替代青錢柳，從而有效保護植物資源。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種以青錢柳或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞為原料的祛痰止咳組合物。研究表明，本發(fā)明所述組合物具有明確的祛痰、止咳作用，而且因其來源于天然植物資源，安全性好。 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案
一種祛痰止咳藥用組合物，包含青錢柳、青錢柳提取物、青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物。優(yōu)選的，所述青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞，通過如下方法制備
以青錢柳葉、莖段等營養(yǎng)器官為外植體誘導愈傷組織，對所誘導的愈傷組織進行繼代、篩選和改良，選取生長旺盛的優(yōu)良愈傷組織建立青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系；然后采用生物發(fā)酵罐或生物反應器規(guī)?；囵B(yǎng)，收獲新鮮細胞，干燥，即得。優(yōu)選的，所述青錢柳提取物或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物，是指以青錢柳或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞為原料，以水或309Γ95%乙醇為溶媒，采用常規(guī)提取、濃縮、干燥方法，得到的粗提物，或者再經(jīng)過分離、純化得到的三萜類活性部位。所述提取方法優(yōu)選為，以95%乙醇為溶媒，55°C下超聲提取兩次，每次30分鐘。本發(fā)明所述的祛痰止咳組合物，還可以包含其他治療咳嗽的藥物。所述其他治療咳嗽的藥物，選自紫蘇葉、黃芩、杏仁、甘草、枳殼、桔梗、橘紅、前胡、麻黃、桑葉、菊花、連翹、薄荷、蘆根、沙參、桅子、麥冬、貝母、桑白皮、魚腥草、掛金燈、薏苡仁、冬瓜子、半夏、茯苓、陳皮、白芥子、天花粉、玉竹、百合中的一種或幾種。本發(fā)明的另一個目的是提供一種祛痰止咳組合物的制備方法，所述組合物包含青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物，包括如下步驟
以青錢柳葉、莖段等營養(yǎng)器官為外植體誘導愈傷組織，對所誘導的愈傷組織進行繼代、篩選和改良，選取生長旺盛的優(yōu)良愈傷組織建立青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系；然后采用生物發(fā)酵罐或生物反應器規(guī)?；囵B(yǎng)，收獲新鮮細胞，干燥，得到所述青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞，直接制成臨床上可以接受的制劑，或者加入藥用輔料，制成臨床上可以接受的制劑，即得；或以青錢柳葉、莖段等營養(yǎng)器官為外植體誘導愈傷組織，對所誘導的愈傷組織進行繼代、篩選和改良，選取生長旺盛的優(yōu)良愈傷組織建立青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系；然后采用生物發(fā)酵罐或生物反應器規(guī)?；囵B(yǎng)，收獲新鮮細胞，干燥，得到所述青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞；以水或309Γ95%乙醇為溶媒，采用常規(guī)提取、濃縮、干燥方法，得到粗提物，直接制成臨床上可以接受的制劑，或者加入藥用輔料，制成臨床上可以接受的制劑，即得；或
以青錢柳葉、莖段等營養(yǎng)器官為外植體誘導愈傷組織，對所誘導的愈傷組織進行繼代、篩選和改良，選取生長旺盛的優(yōu)良愈傷組織建立青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系；然后采用生物發(fā)酵罐或生物反應器規(guī)模化培養(yǎng)，收獲新鮮細胞，干燥，得到所述青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞；以水或30°/Γ95%乙醇為溶媒，提取液經(jīng)過分離、純化，得到三萜類活性部位，直接制成臨床上可以接受的制劑，或者加入藥用輔料，制成臨床上可以接受的制劑，即得。本發(fā)明的另一個目的，是提供青錢柳、青錢柳提取物、青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物，在制備祛痰止咳的藥物或保健食品中的應用。所述青錢柳、青錢柳提取物、青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物，可以單獨，也可以聯(lián)合其他治療咳嗽的藥物，制備所述藥物或保健食品。所述其他治療咳嗽的藥物，選自紫蘇葉、黃芩、杏仁、甘草、枳殼、桔梗、橘紅、前胡、麻黃、桑葉、菊花、連翹、薄荷、蘆根、沙參、桅子、麥冬、貝母、桑白皮、魚腥草、掛金燈、薏苡仁、冬瓜子、半夏、茯苓、陳皮、白芥子、天花粉、玉竹、百合中的一種或幾種。有關(guān)青錢柳愈傷組織懸浮培養(yǎng)，可以采用《青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)及三萜化合物積累》(《深圳大學學報理工版》，2011年9月第28卷第5期，430-435頁)中記載的培養(yǎng)優(yōu)化培養(yǎng)條件，即MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基、2，4 一 DO. 8mg/L、NAA1. 8mg/L、6_BA0. 8mg/L、KTO. 8mg/L、蔗糖40g/L，pH值6· 0 ;每l(Tl5ml培養(yǎng)基接種量為Ig (鮮質(zhì)量)。 青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞；以水或309Γ95%乙醇為溶媒，提取液的分離、純化方法可以選自水提醇沉、醇提水沉、大孔樹脂吸附、硅膠柱層析、凝膠柱層析、高效液相法、中壓柱層析、重結(jié)晶等方法中的一種或幾種，
本發(fā)明所述“藥用輔料”，選自淀粉、羧甲基纖維素、微晶纖維、β_環(huán)糊精、卵磷脂等常規(guī)使用的藥用輔料。本發(fā)明所述“臨床上可以接受的制劑”，可以是片劑、膠囊劑、乳劑、粉劑、注射劑、大輸液、凍干粉、滴丸、乳懸液、水懸液、水溶液、膠體、膠體溶液、緩釋制劑、納米制劑等。藥理研究證明，青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞醇提物以及三萜類活性部位具有良好的祛痰止咳作用。試驗例I青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞醇提物的祛痰止咳作用 試驗藥物青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞醇提物(以下簡稱“醇提取物”)
選取I公斤干燥的青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞，粉碎后過40目篩，55°C下，以料液比為1:10的95%乙醇超聲提取兩次，每次提取30分鐘，離心分離，合并提取液，減壓濃縮，噴霧干燥，即得。實驗動物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18 22 g，SPF級。實驗方法
(I)對濃氨水致咳小鼠的影響將50只小鼠隨機分為模型組、試驗組(設(shè)3組，醇提物低、中、高劑量組分別為500、1500、4500mg/kg體重)、陽性對照組(美沙芬，30 mg/kg體重)，每組10只。灌胃給藥，每天I次，連續(xù)3天，模型組以等體積溶媒灌胃。末次給藥后I小時進行氨水引咳實驗。將小鼠逐只放入特制的透明噴霧試驗箱內(nèi)，安靜I分鐘，采用超聲波霧化器以恒定壓力勻速將280ml/L的氨水噴入試驗箱內(nèi)，噴霧持續(xù)10秒。觀察咳嗽情況，以小鼠張口咳嗽為指標，記錄咳嗽潛伏期(從開始噴霧到引起小鼠第I次咳嗽的時間)及2分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)。(2)對小鼠氣管酚紅排泌量的影響將60只小鼠隨機分為模型組、試驗組(設(shè)3組，醇提物低、中、高劑量組分別為500、1500、4500mg /kg體重)、陽性對照組(氯化銨，I. O g/kg體重)和正常對照組，每組10只。各組小鼠每天灌胃給藥I次，連續(xù)3天，模型組和正常對照組以等體積溶媒灌胃。末次給藥后30分鐘，按10 ml/kg體重的劑量給模型組、用藥組、陽性對照組的每只小鼠腹腔注射50 g/L酚紅生理鹽水溶液，注射后30分鐘，以后頸椎脫臼處死小鼠；分離氣管，剪下自甲狀軟骨下緣至氣管分叉處的一段氣管，將各氣管段放入預先盛有2 ml生理鹽水的試管中，旋渦震蕩器震蕩5分鐘，再以超聲波清洗20分鐘，加入50 g/L NaHCO3溶液I ml，以1500轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘；取上清液于546 nm處測OD值。正常組小鼠相應氣管段經(jīng)同樣處理后為對照。按酚紅測定標準曲線回歸方程計算酚紅排泄量，根據(jù)所測酚紅含量和動物體重計算校正酚紅含量。實驗結(jié)果
(I)醇提物對濃氨水致咳小鼠的影響實驗結(jié)果如表I所示，醇提物中劑量(1500mg/kg體重)和高劑量(4500mg/kg體重)能顯著延長氨水引起小鼠咳嗽的潛伏期，且呈現(xiàn)較為明顯 的量效關(guān)系。高、中、低劑量均能極顯著的減少2分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)。表I青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞醇提物對濃氨水致咳小鼠的影響
組別I劑量(mg/kg體重)I咳嗽潛伏期(秒)I咳嗽次數(shù)
模型組--12·34±2·4518·24±2·94
醇提物低劑量組_50015.01±6. 1414. 12±3.49#
醇提物中劑量組—150020.60±4.27*9. 50±1.83#
醇提物高劑量組石0026.91±6. 78#8.01±2. 55#
陽性對照組|30|31.48±8. 3(Γ丨6. 11±1.62#
注與模型組進行比較:上標表示P彡O. 05,上標“**”表示P彡O. 01。(2)醇提物對小鼠氣管酚紅排泌量的影響實驗結(jié)果如表2所示。從表中數(shù)據(jù)可知青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞醇提物連續(xù)灌胃給藥3天，可極顯著地增加酚紅的排泄量，表明其具有較好的祛痰作用。表2青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞醇提物對小鼠氣管酚紅排泌量的影響
組另Il_齊量(mg/kg體重)g分紅排泄量(mg/L)
莫型組-I. 54±0.50
提物低劑量組_ 5002. 60 ± O. 94**
醇提物中劑量組 1500_2.81±0.48#—
物高劑量組—45002. 95± I. 18**
￥座對照組 IlOOO丨3.28±0.91**—
注與模型組進行比較:上標表示P彡O. 05,上標“**”表示P彡O. 01。實驗結(jié)論青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞醇提物具有較好的祛痰、止咳作用效果。試驗例2 :青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞三萜類活性部位祛痰止咳作用
試驗藥物青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞三萜類活性部位(以下簡稱“三萜活性部位”)
選取I公斤干燥的青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞，粉碎后過40目篩，55°C下，以料液比為1:10的95%乙醇超聲提取兩次，每次提取30分鐘，離心分離，合并提取液，減壓濃縮，濃縮液以水復溶，上X-5大孔樹脂柱，水洗去雜，以95%乙醇洗脫，濃縮得到大孔樹脂純化物，再以Sephadex LH-20凝膠柱層析,得到三職活性部位。三萜活性部位定性定量檢測
(O總?cè)贫ㄐ詸z測方法采用高效薄層層析方法進行定性檢測。鋁質(zhì)高效預制薄板(Merck公司)；展開劑石油醚/乙酸乙酯/甲醇=30/10/7 ；L-B特征顯色。(2)總?cè)贫繙y定方法比色法測定總?cè)坪俊?br> 檢測標準曲線的繪制精確吸取熊果酸標準溶液(90μ g/mL)200y L、400y L、600 μ L、800 μ L、1000 μ L、1200 μ L、1400 μ L、1800 μ L、2200 μ L，分別加入具塞試管，水浴揮
干。分別加入50 g / L香草醛-冰乙酸和高氯酸各O. 3mL和l.OmL，混勻，70°C水浴15 min，迅速冷卻后加入4. OmL冰乙酸,混勻后，于550 nm波長測定吸光度,建立檢測回歸方程。供試樣品溶液的制備精確稱取適量的待測三萜活性部位樣品，甲醇溶解，按熊果酸標準對照品溶液的制備方法，制備成供試樣品溶液。樣品測定上述供試樣品溶液，按照標準曲線測定條件進行吸光度的測定，計算百分含量。樣品測定結(jié)果所述三萜活性部位總?cè)坪繛?0. 15%。實驗動物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18 22 g, SPF級。實驗方法 (I)對濃氨水致咳小鼠的影響將50只小鼠隨機分為模型組、試驗組(設(shè)3組，三萜活性部位低、中、高劑量組分別為60、180、540 mg/kg體重)、陽性對照組(美沙芬，30 mg/kg體重)，每組10只。灌胃給藥，每天I次，連續(xù)3天，模型組以等體積溶媒灌胃。末次給藥后I小時進行氨水引咳實驗。將小鼠逐只放入特制的透明噴霧試驗箱內(nèi)，安靜I分鐘，采用超聲波霧化器以恒定壓力勻速將280ml/L的氨水噴入試驗箱內(nèi)，噴霧持續(xù)10秒。觀察咳嗽情況，以小鼠張口咳嗽為指標，記錄咳嗽潛伏期(從開始噴霧到引起小鼠第I次咳嗽的時間)及2分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)。 (2)對小鼠氣管酚紅排泌量的影響將60只小鼠隨機分為模型組、試驗組(設(shè)3組，三萜活性部位低、中、高劑量組分別為60、180、540 mg/kg體重)、陽性對照組(氯化銨，I. Og/kg體重)和正常對照組，每組10只。各組小鼠每天灌胃給藥I次，連續(xù)3天，模型組和正常對照組以等體積溶媒灌胃。末次給藥后30分鐘，按10 ml/kg體重的劑量給模型組、用藥組、陽性對照組的每只小鼠腹腔注射50 g/L酚紅生理鹽水溶液，注射后30分鐘，以后頸椎脫臼處死小鼠；分離氣管，剪下自甲狀軟骨下緣至氣管分叉處的一段氣管，將各氣管段放入預先盛有2 ml生理鹽水的試管中，旋渦震蕩器震蕩5分鐘，再以超聲波清洗20分鐘，加入50 g/L NaHCO3溶液I ml，以1500轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘；取上清液于546 nm處測OD值。正常組小鼠相應氣管段經(jīng)同樣處理后為對照。按酚紅測定標準曲線回歸方程計算酚紅排泄量，根據(jù)所測酚紅含量和動物體重計算校正酚紅含量。實驗結(jié)果
(I)三萜活性部位對濃氨水致咳小鼠的影響實驗結(jié)果如表3所示，三萜活性部位低劑量(60 mg/kg體重)、中劑量(180 mg/kg體重)和高劑量(540 mg/kg體重)均能極顯著延長氨水引起小鼠咳嗽的潛伏期，呈現(xiàn)較為明顯的量效關(guān)系。高、中、低劑量均能極顯著的減少2分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)，也呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。表3青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞醇提物對濃氨水致咳小鼠的影響
權(quán)利要求
1.一種祛痰止咳藥用組合物，包含青錢柳、青錢柳提取物、青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于所述青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞，通過如下方法制備 以青錢柳葉、莖段等營養(yǎng)器官為外植體誘導愈傷組織，對所誘導的愈傷組織進行繼代、篩選和改良，選取生長旺盛的優(yōu)良愈傷組織建立青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系；然后采用生物發(fā)酵罐或生物反應器規(guī)?；囵B(yǎng)，收獲新鮮細胞，干燥，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于所述青錢柳提取物或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物，是指以青錢柳或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞為原料，以水或309Γ95%乙醇為溶媒，采用常規(guī)提取、濃縮、干燥方法，得到的粗提物，或者再經(jīng)過分離、純化得到的三萜類活性部位。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其特征在于所述提取方法為，以95%乙醇為溶媒，55°C下超聲提取兩次，每次30分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于還包含其他治療咳嗽的藥物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于所述其他治療咳嗽的藥物，選自紫蘇葉、黃芩、杏仁、甘草、枳殼、桔梗、橘紅、前胡、麻黃、桑葉、菊花、連翹、薄荷、蘆根、沙參、桅子、麥冬、貝母、桑白皮、魚腥草、掛金燈、薏苡仁、冬瓜子、半夏、茯苓、陳皮、白芥子、天花粉、玉竹、百合中的一種或幾種。
7.一種祛痰止咳組合物的制備方法，其特征在于所述組合物包含青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物，包括如下步驟 以青錢柳葉、莖段等營養(yǎng)器官為外植體誘導愈傷組織，對所誘導的愈傷組織進行繼代、篩選和改良，選取生長旺盛的優(yōu)良愈傷組織建立青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系；然后采用生物發(fā)酵罐或生物反應器規(guī)模化培養(yǎng)，收獲新鮮細胞，干燥，得到所述青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞，直接制成臨床上可以接受的制劑，或者加入藥用輔料，制成臨床上可以接受的制劑，即得；或 以青錢柳葉、莖段等營養(yǎng)器官為外植體誘導愈傷組織，對所誘導的愈傷組織進行繼代、篩選和改良，選取生長旺盛的優(yōu)良愈傷組織建立青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系；然后采用生物發(fā)酵罐或生物反應器規(guī)?；囵B(yǎng)，收獲新鮮細胞，干燥，得到所述青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞；以水或309Γ95%乙醇為溶媒，采用常規(guī)提取、濃縮、干燥方法，得到粗提物，直接制成臨床上可以接受的制劑，或者加入藥用輔料，制成臨床上可以接受的制劑，即得；或 以青錢柳葉、莖段等營養(yǎng)器官為外植體誘導愈傷組織，對所誘導的愈傷組織進行繼代、篩選和改良，選取生長旺盛的優(yōu)良愈傷組織建立青錢柳細胞懸浮培養(yǎng)體系；然后采用生物發(fā)酵罐或生物反應器規(guī)?；囵B(yǎng)，收獲新鮮細胞，干燥，得到所述青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞；以水或30°/Γ95%乙醇為溶媒，提取液經(jīng)過分離、純化，得到三萜類活性部位，直接制成臨床上可以接受的制劑，或者加入藥用輔料，制成臨床上可以接受的制劑，即得。
8.青錢柳、青錢柳提取物、青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物，在制備祛痰止咳的藥物或保健食品中的應用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應用，其特征在于所述青錢柳、青錢柳提取物、青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物，單獨或者聯(lián)合其他治療咳嗽的藥物，制備所述藥物或保健食品。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應用，其特征在于所述其他治療咳嗽的藥物，選自紫蘇葉、黃芩、杏仁、甘草、枳殼、桔梗、橘紅、前胡、麻黃、桑葉、菊花、連翹、薄荷、蘆根、沙參、桅子、麥冬、貝母、桑白皮、魚腥草、掛金燈、薏苡仁、冬瓜子、半夏、茯苓、陳皮、白芥子、天花粉、玉竹、百合中的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種祛痰止咳組合物及其制備方法。所述祛痰止咳組合物包含青錢柳、青錢柳提取物、青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物。本發(fā)明還提供青錢柳、青錢柳提取物、青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞或青錢柳懸浮培養(yǎng)細胞提取物在制備祛痰止咳的藥物或保健食品中的應用。本發(fā)明拓寬了青錢柳的醫(yī)藥應用，為患者提供了一種效果好、副作用小的祛痰止咳藥物。另外，運用現(xiàn)代植物組織和細胞培養(yǎng)技術(shù)，規(guī)?；囵B(yǎng)青錢柳細胞，以該培養(yǎng)細胞替代青錢柳，從而有效的保護珍稀植物資源，做到了環(huán)境友好，可持續(xù)發(fā)展。
文檔編號A61K36/52GK102764294SQ20121027113
公開日2012年11月7日 申請日期2012年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月1日
發(fā)明者上官新晨, 尹忠平, 張清峰, 徐明生, 王文君, 陳繼光 申請人:江西農(nóng)業(yè)大學