專利名稱：一種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物及試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物及試劑。
背景技術(shù)：
幽門螺旋桿菌，Helicobacter pylori,簡(jiǎn)稱Hp。首先由巴里·馬歇爾(BarryJ. Marshall)和羅賓 沃倫(J. Robin Warren) 二人發(fā)現(xiàn)，此二人因此獲得2005年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。幽門螺桿菌是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的細(xì)菌。長(zhǎng)2. 5 4. Oym,寬O. 5 1.0 μ m。在胃粘膜上皮細(xì)胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，除典型的形態(tài)外，有時(shí)可出現(xiàn)桿狀或圓球狀。幽門螺旋桿菌的感染是慢性活動(dòng)性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴組織(MALT)淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年 世界衛(wèi)生組織/國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(WH0/IARC)將幽門螺桿菌定為I類致癌原。因此，幽門螺旋桿菌的檢測(cè)具有現(xiàn)實(shí)意義。自1983年幽門螺旋桿菌(Hp)分離培養(yǎng)成功以來，對(duì)幽門螺桿菌感染的檢測(cè)已發(fā)展出了許多方法，包括有細(xì)菌學(xué)、病理學(xué)、血清學(xué)、同位素示蹤、分子生物學(xué)等。目前檢測(cè)Hp的方法主要分為侵入性及非侵入性兩大類。侵入性診斷方法主要是通過胃鏡咬取胃粘膜活檢組織檢查Hp，包括快速尿素酶試驗(yàn)(RUT)、組織學(xué)檢查、細(xì)菌培養(yǎng)、Hp基因檢測(cè)如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)、寡核苷酸探針雜交等。非侵入性檢測(cè)方法不需要通過胃鏡咬取胃粘膜活檢組織檢查Hp,主要包括13C或14C尿素呼氣試驗(yàn)(Urea Br eathingTest, U BT)、糞便Hp抗原檢測(cè)、Hp抗體檢測(cè)、尿液Hp抗體試驗(yàn)等。從微生物學(xué)角度來說，細(xì)菌培養(yǎng)是診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但是幽門螺桿菌是微需氧菌，環(huán)境氧要求5 8%，在大氣或絕對(duì)厭氧環(huán)境下不能生長(zhǎng)，培養(yǎng)條件較為嚴(yán)格，一般醫(yī)院缺少相應(yīng)的技術(shù)和設(shè)備。病理組織學(xué)檢測(cè)胃Hp感染的診斷價(jià)值已為廣大學(xué)者所肯定。但鉗取的活檢組織是否在Hp感染部位，影響病理診斷結(jié)果。實(shí)際工作中，通過多點(diǎn)活檢(胃竇、角切跡和胃體3處活檢)提高診斷H P感染準(zhǔn)確性。RUT試驗(yàn)因其試劑廉價(jià)、反應(yīng)迅速而得到廣泛應(yīng)用，是內(nèi)鏡檢查檢測(cè)胃Hp感染的首選方式。但因反應(yīng)強(qiáng)度取決于活檢標(biāo)本內(nèi)的細(xì)菌濃度，取材受Hp在胃內(nèi)灶性分布的影響，使其敏感度和特異度低。入侵性方法在取活檢時(shí)帶有一定盲目性，非入侵性方法無法判斷幽門螺旋桿菌與胃內(nèi)病變的關(guān)系。因此，提供ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物及試劑具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明提供ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物及試劑。該組合物及試劑在胃鏡下可以觀察到幽門螺旋桿菌在胃內(nèi)的分布情況。組合物及試劑中尿素和食用紫甘藍(lán)色素價(jià)廉易得，對(duì)人體無不良反應(yīng)。檢測(cè)幽門螺桿菌結(jié)果與快速尿素酶方法和病理組織學(xué)檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果一致。為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案
本發(fā)明提供了ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物，其包括尿素、食用紫甘藍(lán)色素。在胃鏡下通過活檢鉗道向胃粘膜噴灑尿素和食用紫甘藍(lán)色素混合液，利用幽門螺旋桿菌含有尿素酶，分解尿素產(chǎn)生氨，使得胃粘膜上幽門螺旋桿菌感染部位PH值升高，食用紫甘藍(lán)色素作為PH值指示劑，通過顏色變化顯示PH值變化，從而間接檢測(cè)出幽門螺旋桿菌的存在，顯示出幽門螺旋桿菌在胃內(nèi)的分布情況。作為優(yōu)選,尿素、食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為4 6:1 3。作為優(yōu)選,尿素、食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為5:1 3。作為優(yōu)選，尿素、食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為5:1。本發(fā)明提供了ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的試劑，其包括尿素、食用紫甘藍(lán) 色素和水。作為優(yōu)選,尿素、食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為4 6:1 3:8 12。作為優(yōu)選,尿素、食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為5:1 3:10。作為優(yōu)選，尿素、食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為5:1 10。本發(fā)明提供的檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的試劑，是將本發(fā)明提供的檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物溶于溶劑制得，其中溶劑可以為水，也可以為酒精等，凡是能夠溶解本發(fā)明提供的檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物的溶劑均在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。本發(fā)明提供ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的試劑。該試劑在胃鏡下可以觀察到幽門螺旋桿菌在胃內(nèi)的分布情況。尿素和食用紫甘藍(lán)色素價(jià)廉易得，對(duì)人體無不良反應(yīng)。檢測(cè)幽門螺桿菌結(jié)果與快速尿素酶方法和病理組織學(xué)檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果一致。既能有效提高鉗取活檢組織檢測(cè)幽門螺桿菌的準(zhǔn)確性，亦能直接判斷有無幽門螺旋桿菌感染?？稍谖哥R檢查的同時(shí)檢測(cè)幽門螺旋桿菌。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明公開了ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的試劑，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)エ藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技木。本發(fā)明提供了ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物，其包括尿素、食用紫甘藍(lán)色素。作為優(yōu)選,尿素、食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為4 6:1 3。作為優(yōu)選,尿素、食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為5:1 3。作為優(yōu)選，尿素、食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為5:1。本發(fā)明提供了ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的試劑，其包括尿素、食用紫甘藍(lán)色素和水。作為優(yōu)選,尿素、食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為4 6:1 3:8 12。作為優(yōu)選，尿素、食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為5:1 3:10。作為優(yōu)選,尿素、食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為5:1 10。
本發(fā)明提供ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的試劑。該試劑在胃鏡下可以觀察到幽門螺旋桿菌在胃內(nèi)的分布情況。尿素和食用紫甘藍(lán)色素價(jià)廉易得，對(duì)人體無不良反應(yīng)。檢測(cè)幽門螺桿菌結(jié)果與快速尿素酶方法和病理組織學(xué)檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果一致。既能有效提高鉗取活檢組織檢測(cè)幽門螺桿菌的準(zhǔn)確性，亦能直接判斷有無幽門螺旋桿菌感染。本發(fā)明提供的了檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的試劑中所用原料均可由市場(chǎng)購(gòu)得。下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)ー步闡述本發(fā)明實(shí)施例I胃鏡檢查前,用尿素5g、食用紫甘藍(lán)色素lg、水50mL,配置混合溶液備用。胃鏡檢查觀察胃黏膜情況并照相記錄，然后通過活檢鉗道插入噴管，向胃粘膜上噴灑尿素、食用紫甘藍(lán)色素溶液，觀察顏色變化情況并照相記錄。檢查結(jié)束前，吸盡胃內(nèi)殘留液體。術(shù)中對(duì)變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊，對(duì)不變色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊作為對(duì)照， 活檢組織在體外快速尿素酶方法檢測(cè)幽門螺桿菌，然后將活檢組織浸泡于中性福爾馬林液中，常規(guī)脫水、包埋、切片、進(jìn)行Giemsa染色，用病理學(xué)方法檢測(cè)幽門螺桿菌。對(duì)照三種方法檢測(cè)幽門螺桿菌效果。在變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陽(yáng)性。在不變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陰性。實(shí)施例2胃鏡檢查前，用尿素4g、食用紫甘藍(lán)色素3g、水60mL,配置混合溶液備用。胃鏡檢查觀察胃黏膜情況并照相記錄，然后通過活檢鉗道插入噴管，向胃粘膜上噴灑尿素、食用紫甘藍(lán)色素溶液，觀察顏色變化情況并照相記錄。檢查結(jié)束前，吸盡胃內(nèi)殘留液體。術(shù)中對(duì)變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊，對(duì)不變色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊作為對(duì)照，活檢組織在體外快速尿素酶方法檢測(cè)幽門螺桿菌，然后將活檢組織浸泡于中性福爾馬林液中，常規(guī)脫水、包埋、切片、進(jìn)行Giemsa染色，用病理學(xué)方法檢測(cè)幽門螺桿菌。對(duì)照三種方法檢測(cè)幽門螺桿菌效果。在變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陽(yáng)性。在不變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陰性。實(shí)施例3胃鏡檢查前,用尿素6g、食用紫甘藍(lán)色素2g、水40mL,配置混合溶液備用。胃鏡檢查觀察胃黏膜情況并照相記錄，然后通過活檢鉗道插入噴管，向胃粘膜上噴灑尿素、食用紫甘藍(lán)色素溶液，觀察顏色變化情況并照相記錄。檢查結(jié)束前，吸盡胃內(nèi)殘留液體。術(shù)中對(duì)變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊，對(duì)不變色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊作為對(duì)照，活檢組織在體外快速尿素酶方法檢測(cè)幽門螺桿菌，然后將活檢組織浸泡于中性福爾馬林液中，常規(guī)脫水、包埋、切片、進(jìn)行Giemsa染色，用病理學(xué)方法檢測(cè)幽門螺桿菌。對(duì)照三種方法檢測(cè)幽門螺桿菌效果。在變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陽(yáng)性。在不變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陰性。實(shí)施例4胃鏡檢查前,用尿素5g、食用紫甘藍(lán)色素3g、水40mL,配置混合溶液備用。胃鏡檢查觀察胃黏膜情況并照相記錄，然后通過活檢鉗道插入噴管，向胃粘膜上噴灑尿素、食用紫甘藍(lán)色素溶液，觀察顏色變化情況并照相記錄。檢查結(jié)束前，吸盡胃內(nèi)殘留液體。術(shù)中對(duì)變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊，對(duì)不變色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊作為對(duì)照，活檢組織在體外快速尿素酶方法檢測(cè)幽門螺桿菌，然后將活檢組織浸泡于中性福爾馬林液中，常規(guī)脫水、包埋、切片、進(jìn)行Giemsa染色，用病理學(xué)方法檢測(cè)幽門螺桿菌。對(duì)照三種方法檢測(cè)幽門螺桿菌效果。
在變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陽(yáng)性。在不變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陰性。實(shí)施例5胃鏡檢查前,用尿素4g、食用紫甘藍(lán)色素lg、水60mL,配置混合溶液備用。胃鏡檢查觀察胃黏膜情況并照相記錄，然后通過活檢鉗道插入噴管，向胃粘膜上噴灑尿素、食用紫甘藍(lán)色素溶液，觀察顏色變化情況并照相記錄。檢查結(jié)束前，吸盡胃內(nèi)殘留液體。術(shù)中對(duì)變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊，對(duì)不變色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊作為對(duì)照，活檢組織在體外快速尿素酶方法檢測(cè)幽門螺桿菌，然后將活檢組織浸泡于中性福爾馬林液中，常規(guī)脫水、包埋、切片、進(jìn)行Giemsa染色，用病理學(xué)方法檢測(cè)幽門螺桿菌。對(duì)照三種方法檢測(cè)幽門螺桿菌效果。在變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陽(yáng)性。在不變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陰性。實(shí)施例6胃鏡檢查前，用尿素5g、食用紫甘藍(lán)色素lg，配置組合物備用。胃鏡檢查觀察胃黏膜情況并照相記錄，然后將上述組合物溶于50mL水通過活檢鉗道插入噴管，向胃粘膜上噴灑尿素、食用紫甘藍(lán)色素組合物，觀察顏色變化情況并照相記錄。檢查結(jié)束前，吸盡胃內(nèi)殘留液體。術(shù)中對(duì)變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊，對(duì)不變色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊作為對(duì)照，活檢組織在體外快速尿素酶方法檢測(cè)幽門螺桿菌，然后將活檢組織浸泡于中性福爾馬林液中，常規(guī)脫水、包埋、切片、進(jìn)行Giemsa染色，用病理學(xué)方法檢測(cè)幽門螺桿菌。對(duì)照三種方法檢測(cè)幽門螺桿菌效果。在變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陽(yáng)性。在不變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陰性。
實(shí)施例7胃鏡檢查前，用尿素4g、食用紫甘藍(lán)色素3g，配置備用。胃鏡檢查觀察胃黏膜情況并照相記錄，然后將上述組合物溶于40mL水通過活檢鉗道插入噴管，向胃粘膜上噴灑尿素、食用紫甘藍(lán)色素組合物，觀察顏色變化情況并照相記錄。檢查結(jié)束前，吸盡胃內(nèi)殘留液體。術(shù)中對(duì)變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊，對(duì)不變色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊作為對(duì)照，活檢組織在體外快速尿素酶方法檢測(cè)幽門螺桿菌，然后將活檢組織浸泡于中性福爾馬林液中，常規(guī)脫水、包埋、切片、進(jìn)行Giemsa染色，用病理學(xué)方法檢測(cè)幽門螺桿菌。對(duì)照三種方法檢測(cè)幽門螺桿菌效果。在變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陽(yáng)性。在不變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陰性。 實(shí)施例8胃鏡檢查前，用尿素6g、食用紫甘藍(lán)色素2g，配置組合物備用。胃鏡檢查觀察胃黏膜情況并照相記錄，然后將上述組合物溶于50mL75%的酒精，通過活檢鉗道插入噴管，向胃粘膜上噴灑組合物，觀察顏色變化情況并照相記錄。檢查結(jié)束前，吸盡胃內(nèi)殘留液體。術(shù)中對(duì)變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊，對(duì)不變色的胃粘膜區(qū)域取活檢組織I塊作為對(duì)照，活檢組織在體外快速尿素酶方法檢測(cè)幽門螺桿菌，然后將活檢組織浸泡于中性福爾馬林液中，常規(guī)脫水、包埋、切片、進(jìn)行Giemsa染色，用病理學(xué)方法檢測(cè)幽門螺桿菌。對(duì)照三種方法檢測(cè)幽門螺桿菌效果。在變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陽(yáng)性。在不變成藍(lán)色的胃粘膜區(qū)域取的活檢組織，用體外快速尿素酶方法和進(jìn)行組織切片Giemsa染色方法檢測(cè)幽門螺桿菌均呈陰性。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物，其特征在于，其包括尿素、食用紫甘藍(lán)色素。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為4 6:1 3。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為5:1 3。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘藍(lán)色素的質(zhì)量比為5:1。
5.ー種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的試劑，其特征在于，其包括尿素、食用紫甘藍(lán)色素和水。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為4 6:1 3:40 60。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為5:1 3:50。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘藍(lán)色素和水的質(zhì)量比為5:1:50。
全文摘要
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種檢測(cè)幽門螺旋桿菌胃內(nèi)分布的組合物及試劑。該組合物和試劑在胃鏡下可以觀察到幽門螺旋桿菌在胃內(nèi)的分布情況。組合物及試劑中尿素和食用紫甘藍(lán)色素價(jià)廉易得，對(duì)人體無不良反應(yīng)。檢測(cè)幽門螺桿菌結(jié)果與快速尿素酶方法和病理組織學(xué)檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果一致。
文檔編號(hào)A61K49/00GK102688505SQ20121018358
公開日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2012年6月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月5日
發(fā)明者垚森 申請(qǐng)人:垚森