專利名稱：翼首草總皂苷提取物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種翼首草總皂苷提取物及其制備方法和用途，屬于藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatiod Arthritis,簡稱RA)是一種常見的以慢性多關(guān)節(jié)炎病變?yōu)橹饕憩F(xiàn)的全身性免疫性疾病，全世界共有上億病人。據(jù)統(tǒng)計，RA國外的患病率為 I 2%，個別地區(qū)高達(dá)5% ;我國發(fā)病率約為O. 74%，現(xiàn)有病人1000萬人左右。據(jù)調(diào)查表明，在正常人群中，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率占正常人群的O. 35%左右。本病致殘率高，未及時診治的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者二年致殘率50%，三年致殘率達(dá)70%。而已經(jīng)患類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者，平均壽命縮短10 15年，所以RA嚴(yán)重影響勞動能力，研制RA的治療藥物， 對于緩解該類疾病的臨床癥狀，提高病人的生存質(zhì)量，保障生產(chǎn)力，具有積極的意義。藏藥翼首草，為川續(xù)斷科植物匙葉翼首草Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke) Hoeck的干燥全草，具有清熱解毒、祛風(fēng)濕、止痛功效。翼首草為藏醫(yī)常用藏藥，又名“榜姿毒烏”，為藏藥特征明顯的典型民族藥物，用藥歷史悠久，藏醫(yī)歷來將其主要用于治療風(fēng)濕性等疾病，除藏醫(yī)及其密切相關(guān)的蒙醫(yī)外，中醫(yī)藥和其它傳統(tǒng)醫(yī)藥基本沒有應(yīng)用翼首草的歷史。在藏醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，以翼首草的臨床應(yīng)用為依據(jù)，對翼首草提取物抗風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作用及機(jī)理進(jìn)行了試驗(yàn)研究，結(jié)果表明翼首草提取物抗RA作用是肯定的，對于實(shí)驗(yàn)性佐劑關(guān)節(jié)炎動物模型原發(fā)性炎癥及繼發(fā)性關(guān)節(jié)炎均有較好的抗炎效果，并能減輕滑膜的病理改變，同時也有明顯的鎮(zhèn)痛作用，這與藏醫(yī)臨床以翼首草治療風(fēng)濕、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎應(yīng)用相吻合。(沈芄，藏藥翼首草抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作用與機(jī)理研究，成都中醫(yī)藥大學(xué)，2002年.)對翼首草的化學(xué)成分研究表明，翼首草中主要含有齊墩果烷型三萜類皂苷、環(huán)烯醚萜苷類化合物、生物堿、多糖等成分。對翼首草有效成分的研究表明，采用大鼠急性足腫脹實(shí)驗(yàn)、小鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)、小鼠急性耳腫脹實(shí)驗(yàn)和小鼠急性滲出實(shí)驗(yàn)等方法，證明了翼首草正丁醇部位總皂苷具有顯著的抗炎活性[關(guān)昕璐，等.翼首草的抗炎作用與急毒實(shí)驗(yàn)研究.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報.2004,27 (2) :71 73]。翼首草中環(huán)烯醚萜苷類的主要成分馬錢素，具有明顯的抗炎藥理作用，但其結(jié)構(gòu)類似物具有免疫增強(qiáng)作用。[龐偉.藏藥翼首草的研究與應(yīng)用·中國民族醫(yī)藥雜志.2007，(5) :63-65]。專利申請?zhí)?00910196870. X， 該發(fā)明中提供了翼首草總皂苷有效部位提取物，其主要成分為齊墩果烷型五環(huán)三萜皂苷， 總皂苷含量50-90%，該總皂苷提取物能顯著抑制腫瘤細(xì)胞增殖，該總皂苷提取物中直接采用大孔樹脂分離得到，提取物中含有環(huán)烯醚萜苷。綜合現(xiàn)有文獻(xiàn)可知，目前僅有翼首草中總皂苷及馬錢素具有抗炎鎮(zhèn)痛作用、以及總皂苷抗腫瘤的報道，還未見翼首草總皂苷治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的活性成分的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種翼首草總皂苷提取物及其制備方法和用途。本發(fā)明的另一目的在于提供了一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物。
本發(fā)明提供了一種翼首草總皂苷提取物，它來源于川續(xù)斷科植物匙葉翼首草 Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke)Hoeck的干燥全草，該提取物中，總阜苷含量大于 50% w/w,環(huán)烯醚職苷含量為0-5% w/w。進(jìn)一步地，該提取物中，總阜苷含量大于80% w/w。進(jìn)一步優(yōu)選地，該提取物中，總皂苷含量為80-90% w/w。本發(fā)明還提供了上述翼首草總皂苷提取物的制備方法，它包括如下操作步驟a、取翼首草，加水提取，濾過，濾液濃縮后，采用非極性或弱極性大孔吸附樹脂上樣，先以水洗去雜質(zhì)后，棄去洗脫液；以60-85% v/v乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液后；b、取步驟a的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑后，加入醋酸鉛溶液，攪拌，濾過，取沉淀，懸浮于乙醇中脫鉛，取溶液濃縮至稠膏狀，干燥，即得翼首草總皂苷提取物。其中，步驟a中選用D101、AB-8或HPD-300型大孔吸附樹脂；以65-75% v/v乙醇洗脫；步驟b中，取步驟a的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑后，復(fù)溶于30-95% v/v乙醇中， 加入飽和中性醋酸鉛溶液,攪拌,濾過,濾液備用,取沉淀,懸浮于30-95% v/v乙醇中，用硫化氫氣體或陽離子交換樹脂脫鉛，過濾，取濾液濃縮，干燥，即得翼首草總皂苷提取物。進(jìn)一步地，步驟a中選用DlOl型大孔吸附樹脂；以70% v/v乙醇洗脫；步驟b中， 乙醇濃度為60-85% v/v。更進(jìn)一步地,步驟b中，乙醇濃度優(yōu)選為65-75% v/v。更進(jìn)一步地，大孔吸附樹脂洗脫的具體操作步驟如下將上樣液的濃度配制為O. 1-0. 2g生藥/ml，采用DlOl型大孔吸附樹脂上樣，上樣流速為l_3BV/h，上樣量以藥材計為藥材樹脂=(O. 5-1. 5) I w/w,以3-5BV水洗脫，流速為l_3BV/h，棄去洗脫液；以2-4BV的70%乙醇洗脫，洗脫流速為2_4BV/h，洗脫液減壓回收溶劑，干燥，即得。
進(jìn)一步優(yōu)選地，將上樣液的濃度配制為O. Ig生藥/ml，采用DlOl型大孔吸附樹脂室溫下上樣，上樣流速為2BV/h，上樣量以藥材計為藥材樹脂=I : 1，以4BV水洗脫，流速為2BV/h，棄去洗脫液；以3BV的70%乙醇洗脫，洗脫流速為3BV/h。本發(fā)明還提供了上述翼首草總皂苷提取物在制備治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物中的用途。本發(fā)明還提供了一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，它是由上述的翼首草總皂苷提取物為活性成分，加上藥學(xué)上常用的輔料制備而成的制劑。本發(fā)明提供的翼首草總皂苷提取物，為翼首草的總皂苷部位，具有明顯的抗佐劑性關(guān)節(jié)炎作用，抗炎鎮(zhèn)痛作用良好，表明該翼首草總皂苷提取物能夠有效治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，為臨床用藥提供了新的選擇。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。


圖IAA大鼠后肢原發(fā)性腫脹癥狀，左為正常對照組，右為模型對照組；圖2AA大鼠前肢繼發(fā)性腫脹癥狀，左為正常對照組，右為模型對照組。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I本發(fā)明翼首草總皂苷提取物的制備取翼首草原藥材IOOOg切段，加1600ml水潤濕，再用6000ml水煎煮提取2次，每次I. 5h，濾過，濾液濃縮后，離心除去沉淀，水提物稀釋至O. Ig生藥/ml藥液，采用DlOl型大孔吸附樹脂室溫下上樣，上樣流速為2BV/h，上樣量為樹脂用量的I倍(藥材樹脂= I I)，以4BV水洗脫，流速為2BV/h，棄去洗脫液；以3BV的70 % v/v乙醇洗脫，洗脫流速為3BV/h，洗脫液減壓回收乙醇，溶于60% v/v乙醇中，加入過量飽和的中性醋酸鉛溶液，攪拌，使得翼首草總皂苷完全沉淀，濾過，取沉淀懸浮于70% v/v乙醇中，通入過量硫化氫氣體脫鉛，濾過，取濾液再通入空氣脫去硫化氫氣體，減壓回收乙醇至稠膏狀，干燥，即得總皂苷提取物。以齊墩果酸為對照品，采用比色法測定提取物中總皂苷含量，結(jié)果見表I。表I
權(quán)利要求
1.一種翼首草總皂苷提取物，其特征在于它來源于川續(xù)斷科植物匙葉翼首草 Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke)Hoeck的干燥全草，該提取物中，總阜苷含量大于 50% w/w,環(huán)烯醚職苷含量為0-5% w/w。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的翼首草總皂苷提取物，其特征在于該提取物中，總皂苷含量大于 80% w/w。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的翼首草總皂苷提取物，其特征在于該提取物中，總皂苷含量為 80-90% w/w ο
4.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述翼首草總皂苷提取物的制備方法，其特征在于它包括如下操作步驟a、取翼首草，加水提取，濾過，濾液濃縮后，采用非極性或弱極性大孔吸附樹脂上樣，先以水洗去雜質(zhì)后,棄去洗脫液；以60-85% v/v乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液后；b、取步驟a的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑后，加入醋酸鉛溶液，攪拌，濾過，取沉淀，脫鉛后，干燥，即得翼首草總皂苷提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于步驟a中選用D101、AB-8或HPD-300 型大孔吸附樹脂；以65-75% v/v乙醇洗脫；步驟b中，取步驟a的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑后，復(fù)溶于30-95% v/v乙醇中，加入飽和中性醋酸鉛溶液，攪拌，濾過，濾液備用，取沉淀，懸浮于30-95% v/v乙醇中，用硫化氫氣體或陽離子交換樹脂脫鉛后，過濾，取濾液濃縮，干燥，即得翼首草總皂苷提取物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于步驟a中選用DlOl型大孔吸附樹脂； 以70% v/v乙醇洗脫；步驟b中，乙醇濃度為60-85% v/v。
7.根據(jù)權(quán)利要求4-6任意一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于大孔吸附樹脂洗脫的具體操作步驟如下將上樣液的濃度配制為O. 1-0. 2g生藥/ml，采用DlOl型大孔吸附樹脂上樣，上樣流速為l_3BV/h，上樣量以藥材計為藥材樹脂=(O. 5-1. 5) I w/w,以3-5BV水洗脫，流速為 l-3BV/h，棄去洗脫液；以2-4BV的70%乙醇洗脫，洗脫流速為2_4BV/h。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于將上樣液的濃度配制為O.Ig生藥/ ml，采用DlOl型大孔吸附樹脂室溫下上樣，上樣流速為2BV/h，上樣量以藥材計為藥材樹脂=I : 1，以4BV水洗脫，流速為2BV/h，棄去洗脫液；以3BV的70%乙醇洗脫，洗脫流速為 3BV/h0
9.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的翼首草總皂苷提取物在制備抗炎、鎮(zhèn)痛或治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物中的用途。
10.一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，其特征在于它是由權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的翼首草總皂苷提取物為活性成分，加上藥學(xué)上常用的輔料制備而成的制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種翼首草總皂苷提取物，它來源于川續(xù)斷科植物匙葉翼首草Pterocephalus hookeri(C.B.Clarke)Hoeck的干燥全草，該提取物中，總皂苷含量大于50％w/w，環(huán)烯醚萜苷含量為0-5％w/w。本發(fā)明還提供了該提取物的制備方法和用途。本發(fā)明提供的翼首草總皂苷提取物，為翼首草的總皂苷部位，具有明顯的抗佐劑性關(guān)節(jié)炎作用，抗炎鎮(zhèn)痛作用良好，表明該翼首草總皂苷提取物能夠有效治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，為臨床用藥提供了新的選擇。
文檔編號A61P19/02GK102579518SQ20121006115
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月9日
發(fā)明者古銳, 孟憲麗, 張藝, 賴先榮 申請人:成都中醫(yī)藥大學(xué)