專利名稱：4℃呈液態(tài)37℃呈固態(tài)的生物材料及制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種生物醫(yī)藥材料。
背景技術：
現(xiàn)有的醫(yī)藥材料很多，但還沒有一種能在人體可接受的溫度范圍內(nèi)在液態(tài)和固態(tài)間變化的材料，因此很多場合的使用受到限制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料及制備方法和用途。本發(fā)明的技術解決方案是一種4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料，其特征是在4°C時呈液態(tài)，在37°C時呈固態(tài)；其制備方法為(1)將食藥用菌在4- °C的低溫條件下進行酶解處理，經(jīng)過濾得到低溫食藥用菌提取液；置于4°C無菌條件下保存；(2)細胞培養(yǎng)將纖維細胞、上皮細胞、成骨細胞中的一種或數(shù)種，混合或單獨培養(yǎng)；細胞培養(yǎng)時，在常規(guī)細胞培養(yǎng)液中加入1-40%重量百分比的上述食藥用菌提取液，經(jīng) 1-12周培養(yǎng)，將上清收集保存于4°C無菌環(huán)境備用；(3)酶解反應取來源于深海魚或哺乳動物的真皮或骨骼組織；將上述組織和步驟(2)得到的上清按照1-12 1重量比加入4°C的酶解液中反應；反應后在4°C無菌環(huán)境下過濾，過濾精度范圍0. 10 μ m-0. 22 μ m ；濾過液PH調(diào)整至7. 4，得到產(chǎn)品，保存于4°C無菌環(huán)境中。一種4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料的制備方法，其特征是包括下列步驟(1)將食藥用菌在4- °C的低溫條件下進行酶解處理，經(jīng)過濾得到低溫食藥用菌提取液；置于4°C無菌條件下保存；(2)細胞培養(yǎng)將纖維細胞、上皮細胞、成骨細胞中的一種或數(shù)種，混合或單獨培養(yǎng)；細胞培養(yǎng)時，在常規(guī)細胞培養(yǎng)液中加入1-40%重量百分比的上述食藥用菌提取液，經(jīng) 1-12周培養(yǎng)，將上清收集保存于4°C無菌環(huán)境備用；(3)酶解反應取來源于深海魚或哺乳動物的真皮或骨骼組織；將上述組織和步驟(2)得到的上清按照1-12 1重量比加入4°C的酶解液中反應；反應后在4°C無菌環(huán)境下過濾，過濾精度范圍0. 10 μ m-0. 22 μ m ；濾過液PH調(diào)整至7. 4，得到產(chǎn)品，保存于4°C無菌環(huán)境中。所述食藥用菌為雞油菌、干巴菌、牛肝菌、雞縱菌、羊肚菌、金福菇、黃傘、榛蘑、青蘑、猴頭菇、紅蘑、灰樹花、茶薪菇、紫芝、大杯蕈、茶樹菇、滑子蘑、珊瑚菇、長根菇、榆黃蘑、 真姬菇、阿魏蘑、杏鮑菇、鮑魚菇中的一種或數(shù)種，但不僅限于此。步驟(1)的酶解處理時，使用的酶為果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、β-淀粉酶中的一種或數(shù)種；料液重量比1 1-19 ；酶解反應時間1-190 小時；PH值3-9 ；酶濃度與食藥用菌重量比為酶0.01-5 食藥用菌100 ；步驟⑴中的過濾精度為0. 10 μ m-0. 22 μ m。步驟(3)中的酶解條件為PH值3-5. 4;酶解反應溫度4-9攝氏度；料液重量比1 1-19 ；酶解反應時間72-480小時；酶的種類金屬蛋白酶、巰基蛋白酶、絲氨酸羧肽酶、組織蛋白酶、內(nèi)肽酶、無花果蛋白酶、酸蛋白酶中的一種或數(shù)種，但不僅限于此；酶濃度與原料重量比為酶0. 01-5 原料100。一種4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料在制備一過性或永久性阻塞、半阻塞體中的應用。是作為鼻淚管、腫瘤血管或輸精管的一過性或永久性阻塞、半阻塞材料。本發(fā)明制作方法簡便，原料易得，操作方便，制得的產(chǎn)品在攝氏4度時呈液態(tài)，37 度時呈固態(tài)，可用于具有治療目的的一過性或永久性阻塞、半阻塞體內(nèi)管腔(如鼻淚管、腫瘤血管、輸精管等等)，可作為藥物、基因、疫苗的緩釋平臺以及靶向給藥載體。下面結合實施例對本發(fā)明作進一步說明。
具體實施例方式一種4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料的制備方法，包括下列步驟(1)將食藥用菌在(例4°C、15°C、29°C )的低溫條件下進行酶解處理，經(jīng)過濾得到低溫食藥用菌提取液；置于4°C無菌條件下保存；(2)細胞培養(yǎng)將纖維細胞、上皮細胞、成骨細胞中的一種或數(shù)種，混合或單獨培養(yǎng)；細胞培養(yǎng)時，在常規(guī)細胞培養(yǎng)液中加入1-40% (例1^^20^^40%)重量百分比的上述食藥用菌提取液，經(jīng)1-12周(例1周、7周、12周)培養(yǎng)，將上清收集保存于4°C無菌環(huán)境備用；(3)酶解反應取來源于深海魚或哺乳動物的真皮或骨骼組織；將上述組織和步驟(2)得到的上清按照1-12 1(例1 1、6 1、12 1)重量比加入4°C的酶解液中反應；反應后在4°C無菌環(huán)境下過濾，過濾精度范圍0. 10 μ m-0. 22ym(M0. ΙΟμπκΟ. 18 μ m、 0. 22 μ m)；濾過液PH調(diào)整至7. 4，得到產(chǎn)品，保存于4°C無菌環(huán)境中。所述食藥用菌為雞油菌、干巴菌、牛肝菌、雞縱菌、羊肚菌、金福菇、黃傘、榛蘑、青蘑、猴頭菇、紅蘑、灰樹花、茶薪菇、紫芝、大杯蕈、茶樹菇、滑子蘑、珊瑚菇、長根菇、榆黃蘑、 真姬菇、阿魏蘑、杏鮑菇、鮑魚菇中的一種或數(shù)種，但不僅限于此。步驟(1)的酶解處理時，使用的酶為果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶、α-淀粉酶、 葡萄糖淀粉酶、β-淀粉酶中的一種或數(shù)種；料液重量比1 1-19(例1 1、1 10、 1 19)；酶解反應時間1-190小時(例1小時、100小時、190小時)；PH值3_9 (例3、6、 9)；酶濃度與食藥用菌重量比為酶0.01-5 食藥用菌100(例0.01 100,3 100、 5 100)；步驟(1)中的過濾精度為 0. 10 μ m-0. 22 μ m(例 0. ΙΟμπκΟ. 18 μ m、0. 22 μ m)。步驟(3)中的酶解條件為PH值3-5.4(例3、4、幻；酶解反應溫度4_9攝氏度 (例4°C、6°C、9°C )；料液重量比1 1-19(例1 Ul IOU 19)；酶解反應時間 72-480小時(例72小時、200小時、480小時)；酶的種類金屬蛋白酶、巰基蛋白酶、絲氨酸羧肽酶、組織蛋白酶、內(nèi)肽酶、無花果蛋白酶、酸蛋白酶中的一種或數(shù)種，但不僅限于此；酶濃度與原料(即組織和上清)重量比為酶0.01-5 原料100(例0.01 100,3 100、 5 100)。 上述4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料在制備一過性或永久性阻塞、半阻塞體中的應用，是作為鼻淚管、腫瘤血管或輸精管的一過性或永久性阻塞、半阻塞材料。
權利要求
1.一種4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料，其特征是在4°C時呈液態(tài)，在37°C時呈固態(tài)；其制備方法為(1)將食藥用菌在4HTC的低溫條件下進行酶解處理，經(jīng)過濾得到低溫食藥用菌提取液；置于4°C無菌條件下保存；(2)細胞培養(yǎng)將纖維細胞、上皮細胞、成骨細胞中的一種或數(shù)種，混合或單獨培養(yǎng)；細胞培養(yǎng)時，在常規(guī)細胞培養(yǎng)液中加入1-40%重量百分比的上述食藥用菌提取液，經(jīng)1-12周培養(yǎng)，將上清收集保存于4°C無菌環(huán)境備用；(3)酶解反應取來源于深海魚或哺乳動物的真皮或骨骼組織；將上述組織和步驟(2) 得到的上清按照1-12 1重量比加入4°C的酶解液中反應；反應后在4°C無菌環(huán)境下過濾， 過濾精度范圍0. 10 μ m-0. 22 μ m ；濾過液PH調(diào)整至7. 4，得到產(chǎn)品，保存于4°C無菌環(huán)境中。
2.—種權利要求1所述的4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料的制備方法，其特征是 包括下列步驟(1)將食藥用菌在4- °C的低溫條件下進行酶解處理，經(jīng)過濾得到低溫食藥用菌提取液；置于4°C無菌條件下保存；(2)細胞培養(yǎng)將纖維細胞、上皮細胞、成骨細胞中的一種或數(shù)種，混合或單獨培養(yǎng)；細胞培養(yǎng)時，在常規(guī)細胞培養(yǎng)液中加入1-40%重量百分比的上述食藥用菌提取液，經(jīng)1-12周培養(yǎng)，將上清收集保存于4°C無菌環(huán)境備用；(3)酶解反應取來源于深海魚或哺乳動物的真皮或骨骼組織；將上述組織和步驟(2) 得到的上清按照1-12 1重量比加入4°C的酶解液中反應；反應后在4°C無菌環(huán)境下過濾， 過濾精度范圍0. 10 μ m-0. 22 μ m ；濾過液PH調(diào)整至7. 4，得到產(chǎn)品，保存于4°C無菌環(huán)境中。
3.根據(jù)權利要求2所述的4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料的制備方法，其特征是 所述食藥用菌為雞油菌、干巴菌、牛肝菌、雞縱菌、羊肚菌、金福菇、黃傘、榛蘑、青蘑、猴頭菇、紅蘑、灰樹花、茶薪菇、紫芝、大杯蕈、茶樹菇、滑子蘑、珊瑚菇、長根菇、榆黃蘑、真姬菇、 阿魏蘑、杏鮑菇、鮑魚菇中的一種或數(shù)種。
4.根據(jù)權利要求2所述的4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料的制備方法，其特征是 步驟(1)的酶解處理時，使用的酶為果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、β-淀粉酶中的一種或數(shù)種；料液重量比1 1-19 ；酶解反應時間1-190小時；PH 值3-9 ；酶濃度與食藥用菌重量比為酶0.01-5 食藥用菌100 ；步驟(1)中的過濾精度為 0. 10 μ m-o. 22μ 0
5.根據(jù)權利要求2、3或4所述的4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料的制備方法，其特征是步驟(3)中的酶解條件為PH值3-5. 4 ；酶解反應溫度4-9攝氏度；料液重量比 1 1-19;酶解反應時間72-480小時；酶的種類金屬蛋白酶、巰基蛋白酶、絲氨酸羧肽酶、組織蛋白酶、內(nèi)肽酶、無花果蛋白酶、酸蛋白酶中的一種或數(shù)種；酶濃度與原料重量比為酶0.01-5 原料100。
6.一種權利要求1所述的4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料在制備一過性或永久性阻塞、半阻塞體中的應用。
7.根據(jù)權利要求6所述的4°C呈液態(tài)37°C呈固態(tài)的生物材料在制備一過性或永久性阻塞、半阻塞體中的應用，其特征是是作為鼻淚管、腫瘤血管或輸精管的一過性或永久性阻塞、半阻塞材料。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種4℃呈液態(tài)37℃呈固態(tài)的生物材料及制備方法和用途，產(chǎn)品經(jīng)食藥用菌的酶解、細胞培養(yǎng)、組織酶解等步驟制得。可作為鼻淚管、腫瘤血管或輸精管的一過性或永久性阻塞、半阻塞材料。本發(fā)明制作方法簡便，原料易得，操作方便，制得的產(chǎn)品在攝氏4度時呈液態(tài)，37度時呈固態(tài)，可用于具有治療目的的一過性或永久性阻塞、半阻塞體內(nèi)管腔(如鼻淚管、腫瘤血管、輸精管等等)，可作為藥物、基因、疫苗的緩釋平臺以及靶向給藥載體。
文檔編號A61L31/14GK102552987SQ20121000781
公開日2012年7月11日 申請日期2012年1月12日 優(yōu)先權日2012年1月12日
發(fā)明者福原理加 申請人:福原理加