專利名稱：包括至少一種蛋白水解酶以及至少一種脂肪分解酶的組合的組合物，用于防止甘油三酯 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種組合物，其包括至少一種蛋白水解酶(比如枯草桿菌蛋白酶)以及至少一種脂肪分解酶的組合，有利地通過在腸內(nèi)降解2-單酰甘油，用于防止甘油三酯的合成。有利的是，本發(fā)明的組合物包括幾種脂肪酶。本發(fā)明還涉及這種組合物用作藥物、化妝品劑、醫(yī)療器械、膳食組合物、膳食補(bǔ)充劑或營養(yǎng)食品，尤其用于防止或治療肥胖、動脈粥樣硬化、2型糖尿病或用于預(yù)防或減少超重。
背景技術(shù)：
通常當(dāng)今公認(rèn)的是，在發(fā)達(dá)國家中很多人當(dāng)中超重和肥胖、2型糖尿病、心血管疾病和低能量的頻率增加，是由于我們消費的產(chǎn)品中所含卡路里的利用不佳，其中大多時候 是脂肪非常高的。這種代謝缺陷或代謝綜合征影響了近5000萬美國人(近1/4的美國成年人)和大約3000萬歐洲人。年齡在20至30歲之間的約7%的成年人以及年齡在40歲以上的40%的成年人符合發(fā)展有這種綜合征的標(biāo)準(zhǔn)。代謝綜合征代表了同時發(fā)生并增加心血管疾病、中風(fēng)和2型糖尿病風(fēng)險的一組因素。僅具有這些因素中的一個——血壓升高、高胰島素水平、圍繞腰部過多的脂肪或膽固醇水平異?！黾恿嘶忌蠂?yán)重疾病的風(fēng)險；當(dāng)幾個因素組合時，風(fēng)險就更大了。脂肪，憑借它們的物理、化學(xué)、生理性質(zhì)，在人們的營養(yǎng)方面發(fā)揮了重大作用。除了人們以食物形式攝入的脂肪以外，身體本身也制造脂質(zhì)。膳食脂肪和脂肪組織的脂肪主要是由甘油三酯組成的，甘油三酯是帶有三個與其結(jié)合的脂肪酸的甘油分子。甘油三酯被分為脂質(zhì)(脂肪)，但是只有三個脂肪酸是脂肪，因為甘油是多元醇，更正確地其屬于碳水化合物類。例如，甘油溶于水且不溶于油；因此甘油不是脂肪。結(jié)合至甘油的脂肪酸的結(jié)構(gòu)上的差異使得這些脂肪是不同的并影響它們的粘度狀態(tài)。因此食物中的甘油三酯有著很大的多樣性，比如橄欖油、向日葵油和大豆油、黃油、牛油、豬油、人造黃油等。這些脂肪酸，通過對于所有本身不被吸收的甘油三酯常見的過程，在腸中被吸收。它們必須通過消化道中脂肪酶的作用被分解成甘油二酯、單甘油酯和游離脂肪酸；只有這些各種產(chǎn)物是可吸收的，而甘油三酯不是。脂肪分解脂肪酶或脂肪分解酶是口、胃和胰腺分泌的酶，其將甘油三酯(TAG)切割成小到足以被吸收的分子。不幸的是，脂肪酶僅在甘油的位置I和3進(jìn)攻甘油三酯(TAG)，導(dǎo)致游離脂肪酸和2單酰甘油(包括一個在位置2結(jié)合的脂肪酸的甘油分子)的形成。如果脂肪酶的活性更大，甚至可獲得游離脂肪酸和甘油。所有這些分子被身體吸收。但是事情變得復(fù)雜了 一旦這些產(chǎn)物被吸收，身體在腸上皮細(xì)胞(腸細(xì)胞)重新合成(重新形成)已經(jīng)被脂肪酶(比如胰脂肪酶)斷裂成尤其是游離脂肪酸和2-單酰甘油的甘油三酯(見

圖1，其代表通過脂肪酶的甘油三酯的分解(三酰甘油，TAG)，然后甘油三酯在腸細(xì)胞上重新形成)。尤其通過四種酶(?；鵆oA合成酶、單甘油酯轉(zhuǎn)酰酶、甘油二酯轉(zhuǎn)酰酶和甘油二酯合成酶)的活性獲得這種甘油三酯(TAG)的重新形成，所述酶按照合成的幾個階段而發(fā)揮作用。然后游離脂肪酸將在位置I和3結(jié)合2-單酰甘油，其將重新形成甘油三酯。這些甘油三酯，不溶于血液，將整合乳糜微粒，其將演變?yōu)閂LDL、LDL和HDL，并將甘油三酯(TAG )、膽固醇和磷脂運輸?shù)秸麄€身體。這些新的甘油三酯將因此結(jié)合到脂蛋白中并存儲在脂肪細(xì)胞(adipocytes)(脂肪細(xì)胞(cellules graisseuses))中。由身體吸收的甘油三酯,被斷裂成更小的脂肪后,再次作為甘油三酯存儲。由于它們儲存在脂肪細(xì)胞中，因此身體并沒有立即利用它們的能量。當(dāng)它們結(jié)合到甘油時，如以甘油三酯的形式，身體不能代謝脂肪酸。要被代謝的話，脂肪酸必 須是游離的。這種代謝缺陷，有人稱之為肥胖基因(James V. Neel - DiabetesMellitus:thrifty^genotype rendered detrimental by“progress”_American Journalof Human Genetics - vol. 14 - pages 353-362),其構(gòu)成甘油三酯的重建和儲存,對于數(shù)千年前的早期人類是有利的。事實上，儲存脂肪的能力對于生存是必要的。在繁榮的時期，當(dāng)狩獵時使得可能殺死獵物，人們進(jìn)食更多并保持脂肪儲備。通過這種方式儲存脂肪，人們?nèi)缓罂梢栽谶@些艱難時期通過消耗他們的脂肪儲備在饑餓時期長期生存。這些均由Stephen Cunnane 在他的書“The survival of the fattest” 中(TheKey to Human Brain Evolution, World Scientific Publishing Co, New Jersey, UnitedStates, 2005, www. worldscibooks. com)已經(jīng)得到了很好的解釋，其解釋道具有最大脂肪儲備的人，長期糧食短缺時能最好的生存。同樣是這些人，其腦中富含omega-3脂肪酸，并且比他們的同類生物變得更加智能和更加先進(jìn)。在這一時期，代謝缺陷因此成為進(jìn)化優(yōu)勢，并在自然選擇方面成為優(yōu)勢。這在起源于原始人種的人類的情況中尤其如此。美拉尼西亞人的實例是顯而易見的。這些人離開臺灣乘坐獨木舟然后殖民到所有太平洋島嶼。那些克服了旅程的人們就是那些具有最大脂肪儲備的人。自然選擇促進(jìn)最大的生存，然后那些人有了帶有肥胖基因的兒童。因此美拉尼西亞人的60-70%是2型糖尿病患者。但是，今天，在發(fā)達(dá)國家中饑餓得到了也許是過量的滿足，這種儲存能力已成為一個災(zāi)難。事實上，在腸細(xì)胞或腸的細(xì)胞中甘油三酯的重新合成為人類的健康帶來災(zāi)難性的后果。特別是，這種甘油三酯的重新形成誘導(dǎo)-乳糜微粒的大小和數(shù)目的增加，乳糜微粒在血液中運輸甘油三酯、膽固醇和磷月旨，-由于所有被困在甘油三酯中的脂肪酸并且不被身體所代謝，動脈粥樣硬化的風(fēng)險增加，促進(jìn)動脈斑塊的形成和通常動脈血栓的形成，-循環(huán)中壞膽固醇的水平增加，-脂肪細(xì)胞的數(shù)目和大小增加，因此發(fā)展體重增加或肥胖。
此外，血液中過量的甘油三酯減少可被代謝的游離脂肪酸的量；因此，能源短缺。因此，在一些嚴(yán)重的情況下，肥胖基因相當(dāng)明顯，甚至飯后感到血液中沒有獲得營養(yǎng)的感覺。這種不愉快的感覺產(chǎn)生對零食的欲望，不斷的饑餓感使得消耗食物和飲料以便感覺好些。這種代謝缺陷，不能利用我們吸收的脂肪酸中含有的卡路里的事實，但是其中甘油三酯的形式是不可用的，因為脂肪酸被困在其中，導(dǎo)致一系列并發(fā)癥，由Reaven稱為X綜合征或由Kaplan稱為“致命四重奏”。-G. M. Reaven -斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院_退伍軍人服務(wù)醫(yī)療中心部門，內(nèi)分泌、老年學(xué)和代謝科，Palo Alto, CA,美國-Syndrome X 6 years later - Journal of InternalMedicine 1994;236 (Supplement 736):13-22 ；-G. M. Reaven - Simon & Schuster - Rockefeller Center, 1230Avenue of theAmericas -紐約，NY 10020 - Syndrome X-Overcoming the silent killer that can give you a heart attack - Copyright 2000 G. M. Raven, T. Strom 和 B. Fox ;Norman M. Kaplan MD-The Deadly Quartet-Arch Inter. Med-vol 149, July1989:1514-1520。為了找到其需要的能量，被剝奪可獲得的被代謝的脂肪酸的我們的身體，將利用身體內(nèi)無處不在的葡萄糖。這就是使得我們所說的人類是混合動力車。但是葡萄糖，與脂肪酸不同，有許多缺點-燃燒時，其僅釋放出每克4卡路里，而脂肪酸釋放每克9卡路里，-但最重要的，葡萄糖，要被利用且穿透細(xì)胞，需要激素胰島素。此外，對于葡萄糖穿透所有其細(xì)胞，身體必須超越其能力并在極端條件下分泌甚至更多的胰島素。因此，在身體的一些位置，特別是胰腺可不再分泌這么多的胰島素，引起胰島素抵抗的現(xiàn)象；葡萄糖在血液中積累，并不再能穿透細(xì)胞。這就是所謂的葡萄糖不耐受性；身體變成胰島素抗性。這種高胰島素血癥有負(fù)面作用；過多的胰島素防止脂肪酸離開脂肪細(xì)胞，即稱為脂解作用。因此仍更多的缺乏所要用的可獲得的脂肪酸；因為沒有更多的脂肪酸離開脂肪細(xì)胞，尤其對那些患肥胖的人而言沒有減重的可能性。因此，代謝中可獲得的脂肪酸的缺乏仍然較大，并且對葡萄糖的利用更強(qiáng)烈，從中仍產(chǎn)生其它并發(fā)癥，比如甘油三酯血癥和膽固醇血癥的增加。所有這些代謝異常導(dǎo)致血脂異常、高血壓、高尿酸血癥以及血糖水平高于正常，由于葡萄糖不能很好的穿透細(xì)胞并在血液中積累引起高血糖癥。所有這些代謝并發(fā)癥可以然后導(dǎo)致2型糖尿病，其長期保持。在脂肪細(xì)胞中脂肪的積累，尤其是對于男性在腹部和腰圍周圍以及對于女性在臀部，還將長期保持。所有這些代謝問題，將影響個體的精神，其然后經(jīng)常處于低谷，這可能會在患有這些代謝異常的所述個體中導(dǎo)致情緒失衡或神經(jīng)崩潰，尤其是強(qiáng)烈感到不滿和不斷的饑餓感。此外，大腦因此缺乏供養(yǎng)。過量的胰島素破壞一些血液指標(biāo)脂肪細(xì)胞因子、TNP β、IL-6、PAI I、肥胖菌素(adiposine)、血管緊張素、瘦素、脂聯(lián)素、抵抗素、MCSF、TGFL等在血液中增加。所有這些炎癥產(chǎn)物突出生物的不平衡并使得個體脂質(zhì)和碳水化合物的代謝不穩(wěn)定。
之前的工作尋求捷徑的甘油三酯的合成與克服這種代謝缺陷的新的途徑。因此，發(fā)現(xiàn)各種方法來縮減脂肪細(xì)胞的儲存并使得這些脂肪細(xì)胞中儲存的脂肪酸是可生物利用的。尤其是用于這一目的的物質(zhì)包括富含類黃酮的茶提取物來阻斷破壞腎上腺素的酶O’ -甲基轉(zhuǎn)移酶，或者富含黃烷-3-醇的葡萄籽提取物以及富含生物類黃酮的松樹樹皮，后兩者增加產(chǎn)熱，即從脂肪細(xì)胞釋放脂肪酸；同樣，從可可豆中提取的多酚具有相同的作用。大量使用安非他明及其它異構(gòu)體或中間體幫助釋放困在脂肪細(xì)胞中的脂肪。但是，這些產(chǎn)物是非常危險的，現(xiàn)在都已被禁止。還嘗試了用共軛的亞油酸(CLA)縮短脂肪細(xì)胞路徑，亞油酸不進(jìn)入甘油三酯(TAG)合成循環(huán)，并具有不用通過脂肪細(xì)胞而進(jìn)行燃燒的中等鏈的油。

發(fā)明內(nèi)容
本申請人尋求找到對抗代謝綜合征、挑戰(zhàn)肥胖基因并使用所有脂肪的能量，而不促進(jìn)脂肪堆積形成的一種更好的手段。本申請人注意到許多實驗室提出脂肪酶阻斷劑的使用以防止TAG分解和重新形成。但是，本申請人發(fā)現(xiàn)了一種令人驚奇的方式，抗脂肪酶的產(chǎn)物是絕對不能有效減重的，而且在現(xiàn)實中，通過增加腸內(nèi)剩余TAG的量對身體具有有害的作用。本發(fā)明所提出的解決方案是通過使用蛋白水解酶或蛋白酶與至少一種脂肪分解酶或脂肪酶的組合來抑制、減少和/或防止甘油三酯在身體腸細(xì)胞或腸的細(xì)胞中的重新形成。通過施用這種蛋白水解酶，特別是脂肪酶，以優(yōu)良的方式且對身體沒有危險，來避免甘油三酯的重新合成。因此,本申請人發(fā)現(xiàn)·蛋白水解酶在腸細(xì)胞中破壞有助于甘油三酯重新合成的四種酶(?；鵆oA合成酶、單甘油酯轉(zhuǎn)酰酶、甘油二酯轉(zhuǎn)酰酶和甘油二酯合成酶)的活性，·但是特別是，如果尤其使用有利地作用于腸甘油三酯位置2的脂肪酶，2-單酰甘油的產(chǎn)生降低，這是甘油三酯重新合成的中心點。這種代謝通路被所有生化學(xué)者認(rèn)為是80%的甘油三酯的合成通路；其它較低效率的通路是從3-磷酸甘油酯的重新合成并且只產(chǎn)生20%的甘油三酯。本發(fā)明因此具有這樣一個目的，一種包括至少一種蛋白水解酶或蛋白酶和至少一種脂肪分解酶或脂肪酶的組合的組合物，其有利地通過降解2-單酰甘油，用于防止尤其是在腸細(xì)胞或腸的細(xì)胞中甘油三酯的合成或重新形成。有利地,根據(jù)本發(fā)明，蛋白水解酶選自枯草桿菌蛋白酶、枯草菌蛋白酶(nagarse)、納豆激酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶、彈性蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、舍雷肽酶及其混合物。在根據(jù)本發(fā)明一個特別有利的方式中，蛋白水解酶是枯草桿菌蛋白酶或納豆激酶或者枯草桿菌蛋白酶或納豆激酶與一種或更多種其它蛋白水解酶的混合物。根據(jù)本發(fā)明的一個具體特征，相對于組合物總重量，蛋白水解酶按重量5-30%、典型地按重量10-20%的比例出現(xiàn)。根據(jù)本發(fā)明的另一個具體特征，相對于組合物總重量，脂肪分解酶按重量70-95 %、典型地按重量80-90 %的比例出現(xiàn)。有利地，根據(jù)本發(fā)明，組合物使得能夠施用范圍在IOmg和200mg之間，更尤其是IOmg和IOOmg之間，典型地20mg和IOOmg之間，例如，50mg和IOOmg之間的蛋白水解酶的
每天劑量。有利地,根據(jù)本發(fā)明，組合物使得能夠施用范圍在IOOmg和400mg之間，更尤其是IOOmg和300mg之間，典型地IOOmg和200mg之間，或200mg和300mg之間的脂肪分解酶的
每天劑量。
在本發(fā)明的一個具體實施方式
中，組合物制劑成口服施用的。有利地，根據(jù)本發(fā)明，組合物以硬或軟膠囊、片劑、顆粒、粉或口服溶液的形式提供。根據(jù)本發(fā)明的一個具體特征，組合物以硬或軟膠囊或胃耐受性片劑的形式提供。有利地，組合物是胃耐受性的，從而組合物在腸內(nèi)釋放蛋白水解酶和脂肪分解酶。在根據(jù)本發(fā)明的一個有利的方式中，組合物是藥物、化妝品、營養(yǎng)食品或膳食組合物、膳食補(bǔ)充劑、或醫(yī)療器械，并可以包括從藥物、化妝品、膳食或營養(yǎng)食品的角度而言可接受的任何載體或合適的賦形劑，以及本領(lǐng)域已知的常規(guī)添加劑。在根據(jù)本發(fā)明的一個有利的方式中，組合物包括至少一種脂肪酶，比如提取自米曲霉(Thermomyces Ianuginosus)、雪白根霉(Rhizopus niveus)、婁地青霉(Penicilliumroqueforti )、卡門伯特青霉(Penicillium camemberti )、白地霉(Geotrichum candidum)、皺落假絲酵母(Candida rugosa)、解脂假絲酵母(Candida lipolytica)、近平滑假絲酵母(Candida parapsilosis)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米根霉(Rhizopus oryzae)、爪睡毛霉(Mucor javanicus)的脂肪酶,或來自南極假絲酵母(Candidaanthartica)、白地霉(Geotrichum candidum)的脂肪酶,或提取自燕麥的脂肪酶,及其混合物。在一個特別有利的方式中，組合物包括幾種脂肪酶。有利地，在本發(fā)明上下文中所用的脂肪酶在甘油三酯位置2上是有活性的，并且將減少2-單酰甘油并防止甘油三酯再次形成，其為一種產(chǎn)生80%甘油三酯的通路。根據(jù)本發(fā)明的一個具體特征，組合物包括至少一種脂肪酶，其選自南極假絲酵母(Candida anthartica)的 Cal A 或 Cal B 的脂肪酶、白地霉(Geotrichum candidum)、皺落假絲酵母(Candida rugosa),以及這些脂肪酶的二元或三元混合物。通常情況下，組合物包括南極假絲酵母(Candida anthartica)的 Cal A 或 Cal B、白地霉(Geotrichum candidum)和皺落假絲酵母(Candida rugosa)的混合物。在一個具體的實施方式中，本發(fā)明的組合物意圖用于防止或減少超重、月旨肪生成或過量的膽固醇，或典型地在化妝品組合物或醫(yī)療器械中作為消蜂窩組織(anticellulite)劑。在另一個具體的實施方式中，本發(fā)明的組合物或產(chǎn)物意圖用于防止或治療肥胖或動脈粥樣硬化、或心血管疾病、或2型糖尿病，并且通常被稱為代謝綜合征，以對抗肥胖基因。本發(fā)明還具有這樣的一個目的，一種含有如下的組合物或產(chǎn)物
-至少一種蛋白水解酶，比如枯草桿菌蛋白酶，以及-至少一種脂肪酶，比如南極假絲酵母(Candidaanthartica)的Cal A或Cal B、白地霉(Geotrichum candidum)、皺落假絲酵母(Candida rugosa)脂肪酶，或這些脂肪酶的二元或三元混合物。作為一個組合產(chǎn)物，有利地通過在腸內(nèi)降解2-單酰甘油，同時、單獨或交錯使用來防止甘油三酯的合成。有利地，根據(jù)本發(fā)明，蛋白水解酶選自枯草桿菌蛋白酶、枯草菌蛋白酶、納豆激酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶、彈性蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、舍雷肽酶及其混合物 。在根據(jù)本發(fā)明的一個有利的方式中，脂肪酶是提取自米曲霉(ThermomycesIanuginosus)、雪白根霉(Rhizopus niveus)、婁地青霉(Penicillium roqueforti )、卡門伯特青霉(Penicillium camemberti)、白地霉(Geotrichum candidum)、皺落假絲酵母(Candida rugosa)、解脂假絲酵母(Candida lipolytica)、近平滑假絲酵母(Candidaparapsilosis)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米根霉(Rhizopus oryzae)、爪睡毛霉(Mucor javanicus)的脂肪酶,或是提取自南極假絲酵母(Candida anthartica)、白地霉(Geotrichum candidum)或來自燕麥的脂肪酶。蛋白酶通常以明膠膠囊的形式施用。蛋白酶有利地每天施用兩到三次，每餐一個明膠膠囊。通常情況下,產(chǎn)物包括至少一種南極假絲酵母(Candida anthartica)的脂肪酶，比如南極假絲酵母(Candida anthartica)的脂肪酶Cal A或Cal B、白地霉(Geotrichumcandidum)脂肪酶、皺落假絲酵母(Candida rugosa)脂肪酶和/或提取自燕麥的脂肪酶。這是尤其有利的，因為這些脂肪酶在甘油三酯的位置2發(fā)揮作用并因此斷裂2-單酰甘油，并幫助蛋白酶防止甘油三酯在體內(nèi)重新形成。沒有2-單酰甘油，TAG重新合成要困難得多(記住這種通路產(chǎn)生體內(nèi)80%的TAG)。脂肪酶通常以明膠膠囊的形式施用。脂肪酶有利地每天施用三次，每餐一個明膠月父囊。在一個具體的實施方式中，本發(fā)明的組合物或產(chǎn)物意圖用于藥物、化妝品劑、醫(yī)療器械、膳食組合物、營養(yǎng)食品或膳食補(bǔ)充劑。在一個具體的實施方式中，本發(fā)明的組合物或產(chǎn)物意圖用于防止或減少超重、月旨肪生成或過量的膽固醇，或作為消蜂窩組織劑。在另一個具體的實施方式中，本發(fā)明的組合物或產(chǎn)物意圖用于防止或治療肥胖、動脈粥樣硬化、心血管疾病、或2型糖尿病，并且通常被稱為代謝綜合征，以對抗肥胖基因。
具體實施例方式下面的實施例意圖說明本發(fā)明，不以任何方式限制其范圍。實施例I :施用蛋白水解酶(如枯草桿菌蛋白酶)和脂肪分解酶(比如南極假絲酵母(Candida anthartica)的 Cal A、白地霉(Geotrichum candidum)脂肪酶和皺落假絲酵母(Candida rugosa)脂肪酶)的組合誘導(dǎo)的活性來防止甘油三酯合成的研究使用大鼠進(jìn)行活性和測試劑量研究。這些大鼠分為三組(測試條件)，每組10只。第一個條件，對照組，不接受任何活性產(chǎn)物。
其它兩個條件，各包括10只大鼠的組，分別接受8天(每天一次)50mg枯草桿菌蛋白酶和IOOmg南極假絲酵母(Candida anthartica)的Cal A脂肪酶的混合物(對于組I),以及50mg枯草桿菌蛋白酶和50mg白地霉(Geotrichum candidum)脂肪酶和50mg皺落假絲酵母(Candida rugosa)脂肪酶的混合物(對于組2)。8天后，所有的大鼠，包括對照組，接受相當(dāng)于在人的一湯匙(15毫升)的橄欖油劑量。此橄欖油施用至所有大鼠之后，橄欖油的施用后I小時、2. 5小時和5小時從所有的動物采血。然后從采集的血液計算甘油三酯的水平。在對照大鼠中，對于三個樣本(I小時、2. 5小時和5小時)在血液中發(fā)現(xiàn)高量的TAG。組I和2在血液中沒有TAG。
然后以一周的間隔再施用兩次橄欖油——條件I和2始終繼續(xù)接受枯草桿菌蛋白酶與上述脂肪酶的組合。結(jié)果與另外兩次的相同。在組I和2中TAG不重新形成，而對照組，對于三個樣本血液中具有高濃度的TAG。因此可以得出結(jié)論，枯草桿菌蛋白酶和脂肪酶的組合防止形成甘油三酯(TAG)。實施例2 10只小型豬的研究在10只小型豬上進(jìn)行研究。這些豬被分為四組-一只對照豬-組I中三只豬-組2中三只豬-組3中三只豬對照豬不接受酶。其它三個條件接受三種酶的制劑。制劑I由IOmg枯草桿菌蛋白酶和300mg Cal A脂肪酶以及胰酶組成。其以20mg/kg的劑量向組I的豬施用。制劑2由IOmg枯草桿菌蛋白酶和300mg皺落假絲酵母(Candida rugosa)脂肪酶以及胰酶組成。其以40mg/kg的劑量向組2的豬施用。制劑3由IOmg枯草桿菌蛋白酶和300mg白地霉(Geotrichum candidum)脂肪酶以及胰酶組成。其以40mg/kg的劑量向組3的豬施用。給予8天制劑，每天一次。每2個小時取血液樣本持續(xù)2天，在血液樣本中測量結(jié)果(甘油三酯水平)。研究的結(jié)果表明對照豬產(chǎn)生豐富的甘油三酯，而在其它三個條件中的豬產(chǎn)生相對較少的甘油三酯(見圖2)。第二研究進(jìn)行8天之后，利用這個時間作為對照動物，從上述各條件取一只豬(從組I取一只豬、從組2取一只豬和從組3取一只豬)。每批剩余的兩只豬接受如上述的那些相同的酶制劑。然后指出，沒有任何豬，包括對照豬，產(chǎn)生很多甘油三酯。由此可以得出結(jié)論，8天前給予的酶具有延遲作用在血液中仍有活性，以 及在8天前接受酶的對照動物中脂蛋白降低。
權(quán)利要求
1.一種組合物，其包括至少一種蛋白水解酶以及至少一種脂肪分解酶的組合，有利地通過在腸內(nèi)降解2-單酰甘油，用于防止甘油三酯的合成。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其中蛋白水解酶選自枯草桿菌蛋白酶、枯草菌蛋白酶、納豆激酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶、彈性蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、舍雷肽酶及其混合物，優(yōu)選枯草桿菌蛋白酶或納豆激酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或權(quán)利要求2所述的組合物，其用作藥物、化妝品劑、醫(yī)療器械、膳食組合物、營養(yǎng)食品或膳食補(bǔ)充劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求I至3任一項所述的組合物，其用于防止或減少超重、脂肪生成或過量 的膽固醇、或用作消蜂窩組織劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求I至3任一項所述的組合物，其用于防止或治療肥胖、動脈粥樣硬化、或2型糖尿病。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其制劑成口服施用。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其以硬或軟膠囊、片劑、顆粒、粉或口服溶液的形式提供。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的組合物，其以明膠膠囊或胃耐受性片劑的形式提供。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其能夠施用50-100mg蛋白水解酶的每天劑量。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其能夠施用200-300mg脂肪分解酶的每天劑量。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其中脂肪酶選自提取自米曲霉 Thermomyces lanuginosus、雪白根霉 Rhizopus niveus、婁地青霉 Penicilliumroqueforti、卡門伯特青霉 Penicillium camemberti、白地霉 Geotrichum candidum、皺落假絲酵母Candida rugosa、解脂假絲酵母Candida lipolytica、近平滑假絲酵母Candidaparapsilosis、黑曲霉 Aspergillus niger、米根霉 Rhizopus oryzae、爪口圭毛霉 Mucorjavanicus 的脂肪酶，或南極假絲酵母 Candida anthartica、白地霉 Geotrichum candidum的脂肪酶，或提取自燕麥的脂肪酶，及其混合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的組合物,其中脂肪酶是南極假絲酵母Candidaanthartica的Cal A或Cal B脂肪酶、白地霉Geotrichum candidum、皺落假絲酵母Candida rugosa,或這些脂肪酶的混合物。
13.—種產(chǎn)品，含有 -至少一種蛋白水解酶，比如枯草桿菌蛋白酶，以及 -至少一種脂肪酶，比如南極假絲酵母Candida anthartica的Cal A或Cal B脂肪酶、白地霉Geotrichum candidum、皺落假絲酵母Candida rugosa脂肪酶,或這些脂肪酶的混合物， 作為一個組合產(chǎn)品，有利地通過在腸內(nèi)降解2-單酰甘油，同時、單獨或交錯使用來防止甘油三酯的合成。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種組合物，其包括至少一種蛋白水解酶(比如枯草桿菌蛋白酶)以及至少一種脂肪分解酶的組合，有利地通過在腸內(nèi)降解2-單酰甘油，用于防止甘油三酯的合成。本發(fā)明還具有一個主題是這種組合物用作藥物、化妝品劑、醫(yī)療器械、膳食組合物、膳食補(bǔ)充劑或營養(yǎng)食品，尤其用于防止或治療肥胖、動脈粥樣硬化、2型糖尿病或用于預(yù)防或減少超重。
文檔編號A61K38/48GK102811731SQ201180005178
公開日2012年12月5日 申請日期2011年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月29日
發(fā)明者M·龍比 申請人:艾馬卡研究股份有限公司