專利名稱：供外部施用的抗菌和外傷用藥物組合物及其制造方法
技術領域：
本發(fā)明屬于抗菌藥物制劑和其制造技術。其可用于醫(yī)學和獸醫(yī)學中作為皮膚和軟組織創(chuàng)口所致發(fā)燒感染的預防措施和醫(yī)療維持，以在手術后期間加速創(chuàng)口愈合，以及用于制藥工業(yè)中以制造醫(yī)藥品。
背景技術：
已知國際非專有藥名為磷霉素(fosfomycin)的抗生素具有多種抗菌作用，并提供針對許多革蘭氏陽性(gram-positive)和革蘭氏陰性微生物的殺桿菌作用，可通過其不經(jīng)腸形式靜脈內(nèi)注射(主要為磷霉素鈉鹽)成功用于皮膚、軟組織、骨骼和關節(jié)感染的治療[1，
2,3, 4, 5] ο
已發(fā)現(xiàn)磷霉素可滲入吞噬細胞(嗜中性粒細胞和巨噬細胞)中，刺激其吞噬細胞活性，并對細胞內(nèi)定位的微生物具有殺菌作用[6，7]。也已證實，磷霉素可減少發(fā)炎性反應穿孔階段，并滲入由多層微生物締合產(chǎn)生的生物膜中，使其在其它抗生素作用下易受損和變得松散[8，9，10]。除上文所述的性質(zhì)外，磷霉素(其不經(jīng)腸形式)在局部投藥情況下能夠刺激止血和血管生成過程，活化單核細胞和成纖維細胞進入炎癥區(qū)域中的趨化作用，增加產(chǎn)生組織粘連蛋白的巨噬細胞數(shù)量；這就是呈粉末、洗滌液、乳膏或任何其它形式的有專利權(quán)的此抗生素作為外傷用外部投予藥劑的較佳原因[11]。所述專利是所提出的藥物組合物的最接近的類似物，并且已被認可作為本發(fā)明的原型。所述原型的一個問題在于缺乏吸附和滲透特性，妨礙了針對組織溶解和微生物降解產(chǎn)物的早期含量和吸附作用的必要評估，因此降低了治療功效水平。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明基于使用不經(jīng)腸形式的磷霉素和精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅(B HSiO2)解決了產(chǎn)生供外部施用的抗菌和外傷用藥物組合物的問題，所述磷霉素和精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅對于傳染性和發(fā)炎性疾病的治療具有較高的治療功效。為了解決分配的任務，已經(jīng)提出使用一種供外部施用的抗菌和外傷用藥物組合物，其含有作為治療物質(zhì)的磷霉素抗生素(呈粉末形式)以及精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅，其中重量比磷霉素精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅w/w為(25到75質(zhì)量％) : (75到25質(zhì)量%)。還提出使用供外部施用的抗菌和外傷用藥物組合物來解決分配的任務，所述藥物組合物含有作為治療物質(zhì)的磷霉素抗生素(呈粉末形式)以及精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅，其中重量比磷霉素精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅w/w為(25到75質(zhì)量％) : (75到25質(zhì)量％)，且所得混合物通過碰撞和研磨活動機械化。如果通過碰撞和研磨活動將所得混合物機械化，以使尺寸< 5微米的精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅部分不少于40%，那么所提出的藥物組合物的治療功效將增加。
為了制備所述藥物組合物，使用西班牙公司“ErciOS”制造的磷霉素(不經(jīng)腸投藥形式)。使用由俄羅斯公司CJSC “Polysorb”制造的“Polysorb”藥物(藥理學組腸道吸附溶液(enterosorbing solution);活性物質(zhì)膠狀二氧化娃)作為BHSiO2,其含有圓形二氧化硅納米粒子(尺寸為5到20 nm)組合成尺寸彡90微米的聚集體(不規(guī)則微粒)(注冊號Na 001140/01-100908)。組合物配方的選擇是基于借助微米級BHSiO2粒子吸附工藝可轉(zhuǎn)化的磷霉素分子以及在B HSiO2粒子與磷霉素物質(zhì)的混合物通過碰撞研磨機械化工藝機械活化期間B HSiO2粒子減少。選擇B HSiO2是因為其與其它物質(zhì)的不同之處在于無害；具有吸附、滲透和吸濕特性；其用于醫(yī)學中以治療感染的創(chuàng)口，并且其還包括在眾所周知的外傷用組合物清單中，所述外傷用組合物含有磷霉素抗生素并通過與所提出的組合物不同的方法制備[12，13，14， 15]ο此外，選擇B HSiO2還由于SiO2納米粒子因其藥理學有益的生物相容性、生物分 布、生物降解和無害特性(與結(jié)構(gòu)表現(xiàn)的松散度無關)而不同，可用作細胞內(nèi)抗生素遞送到巨噬細胞中的抗生素載體，這些巨噬細胞集中在炎癥區(qū)域，即，感染組織中抗生素濃度明顯增加，并刺激這些免疫系統(tǒng)細胞的抗菌活性，由此將使得在皮膚和軟組織傳染性和發(fā)炎性疾病治療情況下抗菌劑的治療功效確實增加[16，17]。所述通過磷霉素抗生素粉末混合物以及借助強烈的碰撞研磨操作進行B HSiO2機械活化制備前文所述藥物組合物的方法允許增加上面吸附磷霉素分子且主要由巨噬細胞吞噬的精細分散的B HSiO2粒子(小于5微米)[18]。為實現(xiàn)這一目標，將重量比磷霉素抗生素BHSi02w/w (25到75質(zhì)量％) : (75到25質(zhì)量％)的上述物質(zhì)的混合物暴露于強烈的碰撞研磨機械活化工藝，直到所述細粉狀部分的重量比增加到40%。含有精細分散的B HSiO2和其表面上可改變地封閉的磷霉素分子的所得粉末狀組合物可以供外部施用的粉末狀組合物形式或以I到10%水性懸浮液形式使用。選擇等于(25到75質(zhì)量％) : (75到25質(zhì)量％)的磷霉素=BHSiO2比率因此由以下兩個因素的組合決定
1)在組合物重量中BHSiO2含量增加到超過75%的情況下，組合物的治療功效因磷霉素活性藥物物質(zhì)的質(zhì)量分率降低而下降；
2)在組合物重量中BHSiO2含量降低到少于25%的情況下，組合物的治療功效實際上與最初的磷霉素抗生素的基礎功效沒有不同。為得到所述組合物，使用機械化學方法，其包括通過強烈的機械碰撞一壓力和剪切變形進行的固體組分混合物加工，所述機械碰撞主要在對各物質(zhì)執(zhí)行碰撞研磨活動的不同種類研磨機中實現(xiàn)。將重量比為(25到75質(zhì)量％) :(75到25質(zhì)量％)的固體磷霉素抗生素物質(zhì)和精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅的混合物暴露于珠磨機機械活化。與通過簡單的組分混合或蒸發(fā)溶液來制備所述混合物相比較，所用混合物制備方法有助于以某種方式避免化學降解，并實現(xiàn)粉末組分的完全均一性，且由此使組合物具有高藥物活性。宜使用組合物懸浮液的粒度測定法作為最小必需機械碰撞劑量的定量標準。小于5微米的粒子的質(zhì)量分率超過40%是必要的。粉末混合物的機械加工是在旋轉(zhuǎn)式、振動式和行星式研磨機中進行?？墒褂们?、磁心(core)等作為磨削體。所述組合物的實驗動物(豚鼠和兔)藥理學測試顯示，與初始的磷霉素相比較，由所述方法制備的所述組合物具有較高抗菌和外傷功效。以此方式，使用所述藥物組合物和其制造方法提供下文所述的益處
1)針對較少皮膚和軟組織創(chuàng)口的抗菌療法以及手術創(chuàng)口生疤期的功效和質(zhì)量在臨床上顯著增加；
2)藥物制造技術具有生態(tài)安全性、無廢料且價格低。
具體實施例方式下文所列實例將說明本發(fā)明。 實例I.粉末狀組合物的制造磷霉素/BHSi02。在圓形旋轉(zhuǎn)式研磨機中加工重量比為3:1、1:1和1:3的磷霉素與B HSiO2的混合物2和4小時。表I中列出了有關水性懸浮液的粒度組成的數(shù)據(jù)(使用Micro-Sizer 201激光粒度儀)以及對抗生素含量的HPLC分析(以占初始物質(zhì)的％表示)。從表I可看出，所選組合物制造條件使精細分散的B HSiO2部分(粒度小于5微米)的分率增加到某一值(不少于總重量的40%)并且避免了抗生素化學降解。由B HSiO2粒子測得的磷霉素吸附率為20%到25%。
表I
不同組合物變化形式中水性懸浮液的粒度組成和磷霉素含量
I BHSO2粒子*的尺寸和含盈丨輯基^~
組合物含量 %量
_ <2齡的％|<5齡挪一(％>
taSS BHSaOb—5J
iP_feKHSQiC3:l),機誠活化 2 小 D |||-2■
爵霉素^HSQ1 (11),機賠化2小 12A45 6m
_W____
*-精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅
實例2.磷霉素和藥物組合物治療功效的確定。已經(jīng)研究機械化2小時且由重量比為I: I (即(50質(zhì)量％) : (50質(zhì)量％))的抗生素/ BHSiO2混合物構(gòu)成的磷霉素。實驗是根據(jù)“測試動物使用法規(guī)(Regulationsfor test animals use)” (USSR衛(wèi)生部規(guī)則附錄#755，1977年12月8日)，使用成年兔“金吉拉兔(Chinchilla)” (雄性，重量3-3，5 kg)和隨機繁殖的豚鼠(雄性，重量0，8-0, 9 kg)進行。實驗模型。I.切口
用無菌解剖刀在脫毛稱合區(qū)(depilated coupling area)的左側(cè)和右側(cè)上產(chǎn)生幾個切口(使用1，5%奴弗卡因(novocain)溶液進行局部麻醉)；對于豚鼠，切口為2 cm長且0，8cm深且肌層疫攣(muscular layer seizure),而對于兔,切口為2 cm長且I cm深,且肌層痙攣。在8天時間內(nèi)每一天(從真正的第一天開始)，用無菌生理鹽水溶液浸洗動物對照組的創(chuàng)口，用以膏藥固定的無菌薄紗覆蓋。測試組動物的創(chuàng)口用無菌生理鹽水浸洗，隨后干燥，接著撒上均勻的磷霉素無菌粉末層(2到3 mm)或同樣的藥物組合物層(對于豚鼠)，測試兔的創(chuàng)口用無菌2，5%磷霉素溶液或無菌5%藥物組合物懸浮液沖洗，之后將其干燥并用以膏藥固定的無菌薄紗覆蓋。在9天期間，監(jiān)測再生過程動力學。醫(yī)師測量創(chuàng)口開放區(qū)域的長度，并目測評估創(chuàng)口邊緣和壁、流出液的存在和性質(zhì)、壞死的存在?？捎^察到表2和表3中的測試結(jié)果。 2.感染的熱灼傷
通過將利用燃燒器火焰變熱的金屬敷料器附著到皮膚上并保持40秒，在脫毛耦合區(qū)的左側(cè)和右側(cè)產(chǎn)生數(shù)個皮膚表皮灼傷(使用1，5%奴弗卡因溶液進行局部麻醉)。在ambustial區(qū)的中心中，皮內(nèi)插入0，I ml體積金黃色葡萄球菌aureus)(ATCC編號25923 F-49)每日懸浮液，劑量為101° CFU/ml。在13天時間內(nèi)每一天(從真正的第一天開始)，用無菌生理鹽水溶液浸洗動物對照組的灼傷，干燥并用以膏藥固定的無菌薄紗覆蓋。測試動物的灼傷用無菌2，5%磷霉素溶液或無菌5%藥物組合物懸浮液沖洗，之后將其干燥，并用以膏藥固定的無菌薄紗覆蓋。在14天期間監(jiān)測灼傷狀況動力學。醫(yī)師測量在灼傷創(chuàng)口中心中灼傷創(chuàng)口表面和壞死面積?？捎^察到表4中的結(jié)果。用程序Statistica 6，O進行統(tǒng)計學數(shù)據(jù)處理。實驗數(shù)據(jù)是以中值(Me)、低和高四分位數(shù)(LQ-HQ)提供,差異的可靠性已使用學生t標準(Student t-criterion)計算,且p〈0，05 值。結(jié)果
I.在切口實驗的情況下，48小時后，豚鼠具有下文所述結(jié)果平滑的創(chuàng)口邊緣，清晰的底部，明顯的條帶和側(cè)向傾斜的肌肉肌層，在創(chuàng)口中心中，存在極少量腐漿液性流出液，未觀察到微生物污染。第2天到第9天，觀察到開放創(chuàng)口面積減小。此參數(shù)已用作再生指數(shù)。從表2中所示的數(shù)據(jù)可看出，與對照組相比較，磷霉素粉末形式和磷霉素BHSiO2 (w/w 1:1)的藥物組合物確實增進切口再生過程，同時考慮到從第6天起所述組合物的治療功效確實高于磷霉素的事實。表2
在外部施用情況下磷霉素和藥物組合物(粉末形式)對豚鼠切口再生過程的影響。
權(quán)利要求
1.一種供外部施用的抗菌和外傷用藥物組合物,其含有磷霉素(fosfomycin)抗生素作為治療劑，其因其粉末形式以及含有重量比磷霉素精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅(25到75質(zhì)量％) : (75到25質(zhì)量％)的精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅而不同。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的組合物，其不同之處在于其精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅粒子(其尺寸小于5微米)部分，其不少于40%。
3.一種供外部投藥的抗菌和外傷用藥物組合物的制造方法，其包括將磷霉素與其它組分混合，所述制造方法由于以下事實而不同將粉末狀磷霉素與粉末狀精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅以重量比(25到75質(zhì)量％) : (75到25質(zhì)量％)混合；使所得到的混合物經(jīng)歷機械化碰撞研磨活動。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制造方法，其因機械化碰撞研磨活動使所述精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅粒子的量(尺寸小于5微米)不少于40%而引起關注。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥理學、醫(yī)學、獸醫(yī)學和制藥工業(yè)。其特別屬于供外部投藥的新穎復合抗菌和外傷用制劑的制造方法，所述新穎復合抗菌和外傷用制劑在治療皮膚和軟組織感染的情況下產(chǎn)生較高治療功效。提出的藥物組合物活性劑是磷霉素和精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅。所述藥物組合物制造方法包括將磷霉素與精細分散的納米結(jié)構(gòu)化二氧化硅混合。其主要差異在于，重量比相應地為(25到75質(zhì)量%):(75到25質(zhì)量%)的所述物質(zhì)混合物被暴露于借助碰撞和研磨活動進行的機械加工，直到細粉狀部分的重量比例增加(<5微米)且變得不少于40%。
文檔編號A61K47/04GK102811724SQ201180004410
公開日2012年12月5日 申請日期2011年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月20日
發(fā)明者維克托歷沃維奇·利莫諾夫, 康斯坦丁瓦連京諾維奇·蓋杜爾, 亞歷山大瓦萊雷維奇·杜什金 申請人:維克托歷沃維奇·利莫諾夫