專利名稱：從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域中從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
甘草(Licorice)又名甜草、蜜草、美草等，藥用部分為豆科(Leguminosae)甘草屬 {Glycyrrhiza)植物的根及根狀莖。甘草在我國分布十分廣泛，蘊(yùn)藏量大，藥理作用顯著，是我國最常用的藥用植物之一，多年來一直是國內(nèi)外科研工作者研究的重點(diǎn)對(duì)象。同吋，也正因?yàn)楦什莸乃幚碜饔蔑@著和用途廣泛，導(dǎo)致甘草的需求量一直以來只增不減，因此，甘草資源短缺問題日漸突出，逐漸成為一大難題。目前，醫(yī)藥生產(chǎn)企業(yè)常采用水提、含水醇提、堿提等方法從甘草藥材中提取甘草酸，提取后所剰余的甘草藥渣通常作為エ業(yè)廢料棄去。對(duì)于甘草藥渣這一エ業(yè)生產(chǎn)廢料的醫(yī)療價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的進(jìn)ー步闡明，有利于解決エ業(yè)上生產(chǎn)廢物處理的難題，更加充分合理的利用甘草植物資源和保護(hù)生態(tài)環(huán)。我們?cè)谘芯抗ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)甘草藥渣中富含大量的黃酮類化合物，其結(jié)構(gòu)與甘草原藥材中所含黃酮類化合物基本相似，同時(shí)在エ業(yè)生產(chǎn)的過程中也有新類型的化合物產(chǎn)生。為了進(jìn)ー步闡明甘草藥渣與原植物生物活性及物質(zhì)基礎(chǔ)的差異，我們以抗腫瘤、抗炎、醌還原酶誘導(dǎo)活性為指導(dǎo)，對(duì)甘草的藥渣和原植物的化學(xué)成分進(jìn)行了分離、分析和對(duì)比。結(jié)果顯示，甘草藥渣總黃酮(由13種結(jié)構(gòu)明確的黃酮類化合物組成)具有很好的抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)作用、抑制腫瘤細(xì)胞增殖和遷移作用、醌還原酶誘導(dǎo)作用、腫瘤血管生成抑制作用、抗炎作用，可用于抗炎藥物、抗腫瘤藥物、腫瘤化學(xué)預(yù)防藥物的開發(fā)和應(yīng)用?；诖宋覀兘⒘藦母什菟幵锌焖佟⒌统杀镜母患行Р课弧什菟幵傸S酮的方法，結(jié)合HPLC分析、檢測(cè)，確定了 13種黃酮類化合的結(jié)構(gòu)和3種主要成分的含量測(cè)定方法，明確了主成分的含量要求甘草查耳酮A含量>6%，甘草黃酮B含量>0. 7%， α，2’，4，4’ -四羥基查耳酮含量>0. 1%。因此，研制開發(fā)ー種從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的方法及其應(yīng)用一直是亟待解決的新課題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供ー種從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的方法及其應(yīng)用，該有效成分組具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)作用、抑制腫瘤細(xì)胞增殖和遷移作用、醌還原酶誘導(dǎo)作用、腫瘤血管生成抑制作用、抗炎作用，可用于抗炎藥物、抗腫瘤藥物、腫瘤化學(xué)預(yù)防藥物的開發(fā)和應(yīng)用。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的ー種從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組，由 13種黃酮類化合物組成，具有如表1中所示結(jié)構(gòu)(其中甘草查耳酮A含量>6%，甘草黃酮B 含量>0. 7%，α，2，，4，4，-四羥基查耳酮含量>0. 1%)
表1甘草藥渣有效成分組組成
權(quán)利要求
1. ー種從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組，其特征在干由13種黃酮類化合物組成，具有如表1中所示結(jié)構(gòu)(其中甘草查耳酮A含量>6%，甘草黃酮B含量>0. 7%， α，2，，4，4，-四羥基查耳酮含量>0. 1%) 表1甘草藥渣有效成分組組成
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的制備方法一， 其特征在于其制備方法包括如下步驟，(1)干燥甘草藥渣，粉碎后經(jīng)溶劑提取法，采用60%-100%的乙醇或甲醇提取，減壓回收提取液得粗提物；(2)粗提物用蒸餾水混懸得到提取物混懸溶液，依次用石油醚或環(huán)己烷、乙酸乙酯萃?。?3)步驟(2)所得乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱色譜法分離，以石油謎/乙酸乙酯或石油醚 /丙酮混合溶劑梯度洗脫；(4)上述步驟(3)中所得流分經(jīng)聚酰胺柱色譜分離，以甲醇/水或乙醇/水為流動(dòng)相洗脫，得到有效成分組。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的制備方法，其特征在于萃取溶劑與提取物混懸溶液體積比為1 :3 — 3 :1，萃取次數(shù)為2 — 5次。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的制備方法，其特征在于硅膠柱色譜洗脫溶劑為10 :1 — 1 2的石油謎/乙酸乙酯或石油謎/丙酮。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的制備方法，其特征在于聚酰胺柱色譜流動(dòng)相為甲醇/水或乙醇/水，從甲醇/水或乙醇/水混合溶劑比例為1 :9 一 9 :1，甲醇/水或乙醇/水混合比例為3 :7 — 6 :4部分得目標(biāo)有效成分組。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的制備方法ニ， 其特征在于其制備方法包括如下步驟，(1)干燥甘草藥渣，粉碎后經(jīng)溶劑提取法，采用60%-100%的乙醇或甲醇提取，減壓回收提取液得粗提物；(2)粗提物經(jīng)大孔吸附樹脂進(jìn)ー步純化，依次用甲醇/水或乙醇/水洗脫；(3)步驟(2)所得洗脫物經(jīng)聚酰胺柱色譜分離，以甲醇/水或乙醇/水為流動(dòng)相洗脫， 得到有效成分組。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的制備方法，其特征在于大孔吸附樹脂色譜洗脫溶劑甲醇/水或乙醇/水混合溶劑比例為1 :9 一 9 :1，甲醇/水或乙醇/水混合比例為5 :5 — 9 :1部分洗脫物合并得粗產(chǎn)品。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的制備方法，其特征在于聚酰胺柱色譜分離，流動(dòng)相為甲醇/水或乙醇/ 7jC,從甲醇/水或乙醇/水混合溶劑比例為1 :9 一 9 :1，甲醇/水或乙醇/水混合比例為3 :7 — 6 :4部分得目標(biāo)有效成分組。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組，其特征在于具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)作用、醌還原酶誘導(dǎo)作用、抗炎作用，可用于抗炎藥物、抗腫瘤藥物、腫瘤化學(xué)預(yù)防藥物的開發(fā)和應(yīng)用。
全文摘要
一種應(yīng)用于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域中的從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的方法及其應(yīng)用，一種從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組，由13種黃酮類化合物組成，從甘草藥渣中制備抗炎、抗腫瘤有效成分組的制備方法，其制備方法包括如下步驟，干燥甘草藥渣，粉碎后經(jīng)溶劑提取法，采用乙醇或甲醇提取，減壓回收提取液得粗提物；粗提物用蒸餾水混懸得到提取物混懸溶液，依次用石油醚或環(huán)己烷、乙酸乙酯萃??；所得乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱色譜法分離，以石油醚/乙酸乙酯或石油醚/丙酮混合溶劑梯度洗脫；所得流分經(jīng)聚酰胺柱色譜分離，以甲醇/水或乙醇/水為流動(dòng)相洗脫，得到有效成分組。該發(fā)明有效成分組組成明確，且具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)作用、抑制腫瘤細(xì)胞增殖和遷移作用、醌還原酶誘導(dǎo)作用、腫瘤血管生成抑制作用、抗炎作用。
文檔編號(hào)A61P35/04GK102552239SQ201110456688
公開日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者李寧, 馬忠俊 申請(qǐng)人:沈陽藥科大學(xué)