專利名稱：一種以十字花科植物提取物作為活性成分的藥物制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于制藥技術領域，具體涉及一種以十字花科植物提取物作為活性成分的藥物制劑，其中植物提取物中的活性成分為異硫氰酸酯類化合物或其衍生物的混合物，活性成分在提取物中的重量百分比大于50%，每個藥物制劑單位中活性成分的含量大于lmg，可以制成臨床上相關疾病的藥物制劑。
背景技術：
人類流行病學研究結果表明食十字花科蔬菜:如青花菜、羽衣甘藍、抱子甘藍、花椰菜、辣根、大白菜等可以預防如胰腺癌、肺癌、直腸癌、乳腺癌及前列腺癌等多種癌癥的發(fā)生。硫代葡萄糖苷是植物體內合成的一類含氮次級化合物，廣泛分布在高等植物、海綿體、紅藻類等450種生物中，其中以十字花科植物如辣根、芥末、油菜籽、花椰菜、青花菜中的硫代葡萄糖苷含量最高。其中辣根中苯乙基硫代葡萄糖苷含量最高，辣根(A rm oracia Iapath ifolia Gilib.)，又名西洋山葵，馬蘿卜，為十字花科辣根屬多年生草本植物。其肉質根及地下莖外皮較厚，黃白色或肉白色，圓柱型，全部入土長約30 60cm,莖粗約5 6cm,原產(chǎn)歐洲南部，以陸地栽培為主，資源非常豐富。所有硫代葡萄糖苷都由一個含糖基團、硫酸鹽基團和可變的非糖側鏈(R)組成?；赗基團的不同，硫代葡萄糖苷可以分為3類:脂肪族硫代葡萄糖苷、芳香族硫代葡萄糖苷和吲哚硫代葡萄糖苷，其中苯乙基硫代葡萄糖苷在內源性黑芥子硫苷酸酶或胃腸微生物作用下水解生成苯乙基異硫氰酸酯，大量研究結果顯示苯乙基異硫氰酸酯療效最為確切。為保證本發(fā)明的藥物制劑療效，制劑中限定了功效成分苯乙基硫代葡萄糖苷和苯乙基異硫氰酸酯的含量，以期研制成功臨床使用方便的藥物，為廣大的相關疾病患者解除病苦。

發(fā)明內容
本發(fā)明采用了兩種提取方法，分別富集了苯乙基硫代葡萄糖苷和苯乙基異硫氰酸酯，制成藥物口服制劑，經(jīng)動物試驗證明可有效治療前列腺相關疾病和癌癥，有望開發(fā)成功治療前列腺增生、前列腺炎和前列腺癌、皮膚癌等疾病的藥物。本發(fā)明十字花科植物提取物中活性成分異硫氰酸酯類化合物或其衍生物混合物占總提取物的50%，混合物包括苯乙基異硫氰酸酯、烯丙基異硫氰酸酯和芐基異硫氰酸等，HPLC可標定成分大于30%，其中苯乙基異硫氰酸酯在總提取物中的含量大于30%。本發(fā)明十字花科植物提取物中活性成分異硫氰酸酯類化合物或其衍生物活性成分在單位藥物制劑中的含量大于lmg。所述十字花科植物選自辣根、西蘭花、水田芥、芥末和油菜籽、冬獨行菜中的一種，優(yōu)選辣根，其中辣根提取物中可以含有苯乙基異硫氰酸酯，也可以是苯乙基硫代葡萄糖苷。所述提取物中苯乙基異硫氰酸酯提取方法包括如下步驟:(I)稱取辣根粉適量，在溫度35_40°C，時間l_3h，pH 6-7, Vc添加量為辣根粉的
0.1-0.3 %，辣根粉的粒度為60-100目的條件下水解，過濾，濾渣部分搓成粉末備用；
(2)取粉末狀濾渣，以70 %乙醇-水微沸提取2-3次，每次l_3h，料液比I: 10-10-20g/mL，提取液靜置，合并上清液過濾，減壓濃縮得粗浸膏；(3)粗浸膏用水分散，以石油醚萃取至無色或淡黃色，回收石油醚得提取物浸膏。所述苯乙基硫代葡萄糖苷提取方法包括如下步驟:(I)取辣根粉IOOg適量，用微波加熱法將酶失活，加入70 %乙醇煮沸提取兩次，每次60min，靜止至上清液澄清，取上清液濃縮成2L溶液備用；(2)濃縮液上堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂，用純化水沖洗5-8倍柱體積，再用
0.5-lmol/L的NaOH溶液作為洗脫劑解離吸附在樹脂上的苯乙基異硫氰酸酯葡萄糖苷，調PH值中性，減壓濃縮即得。本發(fā)明苯乙基異硫氰酸酯-N-乙酰半胱氨酸共軛物衍生物活性分子與藥用輔料混合制成，活性成分存在的方式可以是固體也可以是液體，其給藥方式可以是口服制劑也可以是非腸道給藥。本發(fā)明含有十字花科植物提取物作為活性成分的藥物制劑，活性成分在單位藥物制劑中的含量大于lmg，其特征在于單位藥物制劑是指各種可以計算的口服制劑，包括但不局限于:片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑；所說的非腸道給劑型包括但不局限于注射劑、氣 霧劑、栓劑或皮下給藥劑型。本發(fā)明的藥物制劑還含有一種或多種可藥用的附加成分，例如明礬、穩(wěn)定劑、抗菌劑、緩沖劑、著色劑、矯味劑、輔料等。其中，0-1000份可藥用的活性成分載體包括:1.0-1000重量份表面活性劑或增溶劑，所述的表面活性劑包括，但不局限于 聚氧乙烯月桂醇醚、聚氧乙烯單硬脂酸甘油酯、硬脂酸聚烴氧酯、維生素E琥珀酸聚乙二醇酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、泊洛沙姆、聚乙二醇、吐溫、聚山梨酯等；所述的增溶劑包括，但不局限于:聚乙烯吡咯烷酮K17、聚乙烯吡咯烷酮K25、聚乙烯吡咯烷酮K30、聚乙烯吡咯烷酮K90、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000中的一種或一種以上的混合物。2.0-500份重量油性成分，所述的油性成分包括，但不局限于:大豆油、玉米油、花生油、硬脂酸、軟脂酸、葵花籽油、橄欖油、芝麻油、棉籽油、低芥酸菜子油、油酸、中鏈脂肪酸甘油三酯、單辛葵酸甘油酯、單乙酸甘油酯、二乙酸甘油酯、三乙酸甘油酯中的一種或一種以上的混合物。3.由上述1、2中的一種或多種藥用載體組成的混合載體。4.通過其它輔料制成其它合適的劑型，具體的輔料包括，但不局限于:a)吸附劑和稀釋劑，其包括但不局限于:α乳糖(_水)、無水乳糖、β環(huán)糊精、羥丙基β環(huán)糊精、微晶纖維素、微晶纖維素丸心、乳糖淀粉丸心、碳酸鈣、碳酸氫鈣、改性淀粉、蔗糖八乙酸酯、羧甲基淀粉納、羥丙基纖維素、硬脂酸、甘露醇、山梨醇、山梨酯、羧甲基纖維素鈉、多孔淀粉、微粉硅膠中的一種或一種以上的組合。其中優(yōu)選β環(huán)糊精，最佳用量為2.0-500重量份，b)潤滑劑，其包括但不局限于:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、聚乙二醇、微粉硅膠、滑石粉。其中優(yōu)選聚乙二醇，通常用量為0-30重量份。c)黏合劑，其包括但不局限于:聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素(200目)、聚乙二醇等。其中優(yōu)選聚乙二醇6000，通常用量為0-100重量份。d)包衣材料，其包括但不局限于:羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、二甲氨乙基甲基丙烯酯-中性甲基丙烯酯聚合物、聚乙二醇‘二氧化鈦、氧化鐵紅、山梨酸鉀等。其中優(yōu)選羥丙基甲基纖維素E15、聚乙二醇4000、乙基纖維素。通常用量為0.5-20
重量份。以苯乙基異硫氰酸酯為主要活性成分的藥物制劑中，活性成分的數(shù)量是1-25重量份，表面活性劑數(shù)量是5-200重量份，油性成分的數(shù)量是0.5-100重量份，其他輔料的數(shù)量是0.5-1500重量份。以苯乙基異硫氰酸酯為主要活性成分的藥物制劑中，活性成分的數(shù)量是1-25重量份，環(huán)糊精的數(shù)量是1-100重量份，其他輔料的數(shù)量是0.5-1500重量份。以苯乙基異硫代葡萄糖苷為主要活性成分的藥物制劑中，活性成分的數(shù)量是1-25重量份，環(huán)糊精的數(shù)量是1-100重量份，其他輔料的數(shù)量是0.5-1500重量份。以苯乙基異硫代葡萄糖苷為主要活性成分的藥物制劑中，活性成分的數(shù)量是1-25重量份，糊精或淀粉的數(shù)量是1-100重量份，其他輔料的數(shù)量是0.5-1500重量份。本發(fā)明片劑的制備方法是:本發(fā)明提取物和環(huán)糊精、崩解劑、稀釋劑分別仔細研細，混合均勻，用黏合劑職稱軟材，篩濾制粒，置50-60°C條件下干燥，再篩濾整粒后加入潤滑劑，混合均勻，壓片。本發(fā)明的藥物可以是按常規(guī)制劑方法制備成的膠囊劑，其制備方法是化合物與所述藥學上可接受載體分別研細過篩，混合均勻，裝膠囊，或用黏合劑制成軟材，篩濾制粒，置50-60°C條件下干燥，再篩濾制粒后加入潤滑劑，混合均勻，裝膠囊。本發(fā)明的藥物可以是按常規(guī)制劑方法制備成的顆粒劑，其制備方法為按處方量取化合物與上述輔料混合后，噴霧干 燥，干式制粒，整粒即得產(chǎn)品；或將原輔料混合按處方量加入黏合劑，制成軟材，將上述軟材經(jīng)12目篩制粒，再于30-75°C干燥，12目篩整粒，將整粒好的顆粒加入已過80目篩的椰子香精混合均勻，分裝即得顆粒劑。本發(fā)明的藥物可以是按常規(guī)制劑方法制備成粉劑，其制劑粉劑方法是:含化合物的組合物和稀釋劑分別研細過篩，混合均勻，分裝。盡管在上文中，描述本發(fā)明的指出了具體的劑型，但是其它類型的口服固體制劑，例如泡騰片、快速分散片、骨架片、小片、多層片、脈沖緩釋片、微型片等形式，均可以被生產(chǎn)，而且這些劑型也包括在本發(fā)明的范圍內。本發(fā)明的組合物還可以是液體制劑。包括但不局限于，含水或含油懸浮液、溶液、乳液、糖漿和酏劑。組合物還可配制成干產(chǎn)品，在使用前用水或其它合適賦形劑配制。該液體制劑可含有添加劑，包括，但不局限于，懸浮劑、乳化劑、非水賦形劑和防腐劑。懸浮劑包括，但不局限于，山梨糖醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖、糖漿、羧甲基纖維素、白明膠、羥基乙基纖維素、硬脂酸鋁凝膠和氫化食用脂肪。乳化劑包括嗎，但不局限于，卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯和阿拉伯樹膠。非水賦形劑包括，但不局限于，食用油、杏仁油、精制椰子油、油月旨、丙二醇和乙醇。防腐劑包括，但不局限于，甲基或丙基對羧基苯甲酸酯和山梨酸。本發(fā)明的組合物還可配制成栓劑，其含有栓劑基礎物，包括，但不局限于，可可脂或甘油。本發(fā)明的組合物還可配制用于吸入，它可以是包括，但不限于，溶液、懸浮液或乳液形式，它可作為干粉或氣溶膠形式，使用推進劑，例如二氯二氯甲烷或三氯氟甲烷給藥。本發(fā)明的組合物還可配制成含有含水或非水賦形劑的外用制劑，其包括，但不局限于，乳液、油膏、洗液、軟膏、藥膏、斑點或膜。
其中，按照藥品組合物中活性成分的體外溶出及穩(wěn)定性，優(yōu)選硬膠囊、軟膠囊或液體硬膠囊、片劑、丸劑，最優(yōu)選腸溶硬膠囊、腸溶軟膠囊、腸溶液體硬膠囊、腸溶片劑和腸溶丸劑，。
具體實施例實施例一:提取物I十字花科植物提取物中苯乙基異硫氰酸酯在提取物中的含暈大于30%制備方法(I)稱取辣根粉IOOg適量，加入2kg水中，在溫度40°C，時間2h，pH6_7，Vc添加量為辣根粉的0.2g，辣根粉的粒度為60-100目的條件下水解，過濾，濾渣部分搓成粉末備用；(2)取粉末狀濾渣，以10倍量70%乙醇-水微沸提取2次，每次2.5h，合并濾液，減壓濃縮得粗浸膏；(3)粗浸膏以水分散，以石油醚萃取至無色或淡黃色，回收石油醚得提取物浸膏
0.3g0實施例二:提取物2十字花科植物提耳又物中苯乙基硫代匍萄糖苷在提耳又物中的含暈大于30 %制備萬法(I)取辣根粉IOOg適量，用微波加熱法將酶失活，加入70 %乙醇煮沸提取兩次，每次60min，靜止至上清液澄清，取上清液濃縮成2L溶液備用；(2)濃縮液上堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂，用純化水沖洗5-8倍柱體積，再用
0.5-lmol/L的NaOH溶液作為洗脫劑解離吸附在樹脂上的苯乙基異硫氰酸酯葡萄糖苷，調PH值中性，減壓濃縮即得，得浸膏O j g。實施例三:制備提取物I腸溶軟膠囊
提取物IIOOmg 中鏈脂肪酸甘油酯Ig 大豆油900mg 聚氧乙烯蓖麻油Ig工藝:取處方量藥物加熱熔融，攪拌混合均勻后，采用壓制法制成軟膠囊，外面包裹腸溶衣即得腸溶軟膠囊，共計10粒。實施例四:制備提取物I腸溶膠囊提取物IIOOmgβ_ 環(huán)糊精Ig提取物I溶于3_5ml乙醇溶液充分溶解，β -環(huán)糊精制成水飽和溶液，將提取物I乙醇溶液緩慢加入β -環(huán)糊精制成水飽和溶液，充分攪拌后用薄膜蒸發(fā)器減壓揮發(fā)乙醇溶齊U，將硬脂酸聚烴氧(40)酯500mg、糊精適量均勻加入含提取物的β-環(huán)糊精溶液中，制成軟材，濕法制粒，低溫干燥后裝入膠囊，外面包裹腸溶衣即得腸溶膠囊，共計10粒。實施例五:提取物2片劑/膠囊/腸溶片劑/腸溶膠囊
提取物2IOOmg將提取物2和環(huán)糊精、崩解劑、稀釋劑分別仔細研細，混合均勻，用黏合劑職稱軟材，篩濾制粒，置50-60°C條件下干燥，再篩濾整粒后加入潤滑劑，混合均勻，壓片，共計10片。把制得的顆粒裝入硬膠囊即得膠囊。在制得的片劑和膠囊外包腸溶衣，即得腸溶片劑或腸溶膠囊。實施例六:體外細胞篩選試驗及結果前列腺細胞培養(yǎng)3天后，在無菌環(huán)境下將提取物I和提取物2用注射用水配成1000ug/ml、500ug/ml、100ug/ml，3個劑量組每組3個復合孔，0.1%的DMSO為溶劑對照組，非那雄胺為陽性對照。藥物處理3天后MTT法測定細胞活性，計算各藥物對前列腺細胞增生的抑制率。抑制率=(空白對照活細胞數(shù)-給藥組細胞活性)/空白對照細胞活性*100%表I藥物對前列腺細胞增生的抑制率)
權利要求
1.一種以十字花科植物提取物作為活性成分的藥物制劑，其特征在于十字花科植物提取物中活性成分為異硫氰酸酯類化合物或其衍生物的混合物，活性成分占提取物的重量百分比大于50%，活性成分在單位藥物制劑中的含量大于lmg。
2.根據(jù)權利要求1所述的異硫氰酸酯類化合物或其衍生物的混合物，其特征在于苯乙基異硫氰酸酯或其葡萄糖苷占活性成分異硫氰酸酯類化合物或其衍生物的30%以上。
3.根據(jù)權利要求1所述含有十字花科植物提取物，其特征在于十字花科植物選自辣根、西蘭花、水田芥、芥末、油菜籽和冬獨行菜中的一種，優(yōu)選辣根。
4.根據(jù)權利利要求1-2所述的苯乙基異硫氰酸酯，其特征在于苯乙基異硫氰酸酯提取方法包括如下步驟: (1)稱取辣根粉適量，在溫度35-40°C，時間l_3h，pH6-7, Vc添加量為辣根粉的0.1-0.3 %，辣根粉的粒度為60-100目的條件下水解，過濾，濾渣部分搓成粉末備用； (2)取粉末狀濾洛，以70%乙醇-水微沸提取2-3次，每次l-3h，料液比I: 10-10-20g/mL，提取液靜置，合并上清液過濾，減壓濃縮得粗浸膏； (3)粗浸膏用水分散，以石油醚萃取至無色或淡黃色，回收石油醚得提取物浸膏。
5.根據(jù)權利利要求1-2所述的苯乙基硫代葡萄糖苷，其特征在于苯乙基硫代葡萄糖苷提取方法包括如下步驟: (1)取辣根粉IOOg適量，用微波加熱法將酶失活，加入70%乙醇煮沸提取兩次，每次60min,靜止至上清液澄清，取上清液濃縮成2L溶液備用； (2)濃縮液上堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂，用純化水沖洗5-8倍柱體積，再用0.5-lmol/L的NaOH溶 液作為洗脫劑解離吸附在樹脂上的苯乙基異硫氰酸酯葡萄糖苷，調PH值中性，減壓濃縮即得。
6.根據(jù)權力要求I含有十字花科植物提取物作為活性成分的藥物制劑，其特征在于單位藥物制劑是指各種可以計數(shù)的口服制劑，所述的口服制劑包括但不局限于:片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑、氣霧劑、栓劑或皮下給藥劑型。
7.根據(jù)權利要求1含有十字花科植物提取物作為活性成分的藥物制劑，其特征在于用于治療腫瘤、各種炎癥及組織增生。
8.根據(jù)權利要求1含有十字花科植物提取物作為活性成分的藥物制劑，其特征在于用于治療前列腺癌、皮膚癌和前列腺炎及前列腺增生。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種以十字花科植物提取物作為活性成分的藥物制劑，其中植物提取物中的活性成分為異硫氰酸酯類化合物或其衍生物的混合物，活性成分在提取物中的重量百分比大于50％，每個藥物制劑單位中活性成分的含量大于1mg，可以制成臨床上相關疾病的藥物制劑。
文檔編號A61K36/31GK103181942SQ20111045364
公開日2013年7月3日 申請日期2011年12月30日 優(yōu)先權日2011年12月30日
發(fā)明者張文芳 申請人:張文芳