專利名稱：用于治療心腦血栓性疾病的藥物活性成分和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物活性成分的制備及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
血栓是指血液成分在血液流動(dòng)過(guò)程中，在血管或心臟內(nèi)膜表面形成的一種半凝塊狀物質(zhì)。血栓形成與心腦血管疾病密切相關(guān)，是威脅中老年人身體健康的重要疾病之一。促使血栓形成的因素較多，主要有血管內(nèi)皮損傷、內(nèi)外凝血系統(tǒng)異常和血流動(dòng)力學(xué)異常等。隨著對(duì)血栓形成機(jī)制研究的進(jìn)一步闡明，針對(duì)血栓形成的特點(diǎn)和原因，國(guó)內(nèi)外研究和開(kāi)發(fā)很多抗血栓形成的新藥，既有抑制血栓(抗凝血)形成和抑制血小板聚集的藥物，又有溶解血栓的藥物。前二者主要是對(duì)血栓和增大具有抑制作用，后者主要是將已形成的血栓進(jìn)行溶解，從而消除血栓性疾病對(duì)人類造成的危害。近幾年來(lái)，抗血栓藥物的研究和開(kāi)發(fā)迅猛發(fā)展，大量抗血栓形成、抑制血小板活性和溶解血栓的藥物不斷出現(xiàn)，為血栓相關(guān)疾病的治療和預(yù)防建立了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。但是，我們應(yīng)該清醒的看到，這些藥物并不是十全十美，還存在很多缺點(diǎn)和問(wèn)題，為了開(kāi)發(fā)出更適合臨床使用的抗血栓藥物，仍需要國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥科研人員的不斷努力奮斗。豨薟草為常用中藥，始載于《新修本草》，《中國(guó)藥典》(2005年版)規(guī)定豨薟為菊科植物腺梗豨薟Sigesbeckia pubescens Makino，東方豨薟S. orientalis L.和毛梗豨薟 S. glabrescens Makino的干燥地上部分。豨薟草，味苦性寒，入肝腎經(jīng)。具有祛風(fēng)濕，利筋骨的功能，臨床常用其治療四肢麻痹、筋骨疼痛、風(fēng)濕痹痛，半身不遂、風(fēng)疹濕瘡等癥。豨薟草從古到今的臨床應(yīng)用主要用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，進(jìn)行性肌萎縮性側(cè)索硬化癥，銀屑病，截癱，中風(fēng)，高血壓，冠心病，白癜風(fēng)等，常以單味藥或入藥復(fù)方制劑以治療上述疾病，特別是在中醫(yī)臨床治療和預(yù)防中風(fēng)方面該藥的使用頻率較多， 隨著現(xiàn)代科學(xué)的發(fā)展和研究的日益深入，豨薟草在心血管系統(tǒng)、抗炎、免疫系統(tǒng)、抗病原微生物以及抗早孕方面均具有較好的作用，傳統(tǒng)用于治療急慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痹痛等癥，近年來(lái)在心血管方面疾病，對(duì)高血壓、冠心病、高膽固醇血癥、中風(fēng)的早期預(yù)防及后遺癥、面神經(jīng)癱瘓等治療均具有較好的臨床療效，豨薟通栓丸是臨床上治療腦血栓的中成藥，該藥能夠明顯抑制血小板聚集，降低血粘度，抗缺氧，增加腦血流量，抗血栓的作用，而且毒性較低。近年來(lái)藥理方面的研究證明豨薟草水煎劑經(jīng)胃給藥的急性毒性LD50為19. 2708g/kg-l 相當(dāng)于生藥的414. 3g/kg，小鼠腹腔注射最大耐受量為人用量400倍。對(duì)抗炎作用豨桐丸水煎劑，對(duì)大鼠因注射甲醛或雞蛋清所產(chǎn)生的關(guān)節(jié)腫有明顯的抗炎作用，其療效與水楊酸鈉300mg/kg腹腔注射相似，采用蛋白熱凝固法和大鼠腳腫脹法實(shí)驗(yàn)，也具有抗炎作用。抗血栓作用家兔靜脈注射豨薟草提取物，可使血栓明顯減輕，抑制率為51.4%。孟倩超、俞桂新等人篩選了豨薟草的抗凝血、抗血栓作用的有效部位，結(jié)果令人滿意。說(shuō)明豨薟草有抗血栓作用、抗炎作用、及細(xì)胞免疫和體液免疫有明顯的抑制作用。目前已經(jīng)從國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)可知三種供藥用的豨薟屬植物中分得九十余個(gè)化合物，主要為二萜及其苷和倍半萜類，少量的黃酮和留醇類化合物。
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從化學(xué)成分的研究來(lái)看豨薟草植物的成分主要為二萜類化合物。詳細(xì)分析文獻(xiàn)資料可知有關(guān)豨薟草藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)沒(méi)有明確闡明，特別是近年來(lái)的藥理實(shí)驗(yàn)及我們對(duì)豨薟草的化學(xué)和藥理研究的結(jié)果可知，其抗凝血、抗血栓作用、免疫抑制、抗炎和鎮(zhèn)痛是明確的，同時(shí)由于其毒性小，在臨床上未見(jiàn)報(bào)道其毒副作用，從有明確療效的傳統(tǒng)中藥和天然藥物中發(fā)展抗血栓藥物是目前研制新型抗血栓藥物的有效途徑之一。經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)篩選發(fā)現(xiàn)豨薟精醇對(duì)體外、內(nèi)血栓形成、血小板聚集和粘附、優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間、血栓模型血液流變學(xué)和血栓素B2(TXB》、前列環(huán)素I2(PGU)以及對(duì)出、凝血時(shí)間的影響有較好的作用，為有活性的化合物，它在植物中的含量為0. 08-0.2%，含量較高。化合物為無(wú)色針形結(jié)晶。ESIMS測(cè)得化合物分子量為345. 2353[M+Na]+，分子式為 C2QH3403。頂光譜中有羥基與雙鍵的特征吸收峰，分別為3448CHT1與1637CHT1。測(cè)定其旋光值為[α ]25d_3. 22 (c 0. 15，MeOH)。分析化合物的13C-NMR及DEPT譜，可知化合物結(jié)構(gòu)中含 4 個(gè) C，5 個(gè) CH，7 個(gè) CH2,4 個(gè) CH3 (位移值分別為 δ 29. 07，δ 23. 32，δ 16. 60，δ 14. 95)。結(jié)合H譜與HSQC譜，可將H質(zhì)子信號(hào)與相應(yīng)C信號(hào)進(jìn)行歸屬。分析HMBC譜，δ四.07 CH3與 δ 78. 22 CH, δ 54. 65 CH, δ 39. 56 C, δ 16. 60 CH3 存在遠(yuǎn)程相關(guān)，δ 23. 32 CH3 與 δ 129. 49 CH, δ 76. 76 CH, δ 38. 05 C, δ 32. 94CH2 存在遠(yuǎn)程相關(guān)，δ 16. 60 CH3 與 δ 78. 22 CH, δ 54. 65 CH, δ 39. 56 C, δ 29. 07 CH3 存在遠(yuǎn)程相關(guān)，δ 14. 95 CH3 與 δ 54. 65 CH, δ 50. 98 CH, δ 38. 31 C，δ 37. 55 CH2存在遠(yuǎn)程相關(guān)，據(jù)此可搭建一系列結(jié)構(gòu)片段。進(jìn)一步分析1H-1H COSY 譜，δ 28. 48 CH2 與 δ 37. 55 CH2, δ 78. 22 CH, δ 22. 71 CH2 與 δ 54. 65 CH, δ 36. 46 CH2, δ 18. 77 CH2 與 δ 50. 98 CH, δ 32. 94 CH2,以及 δ 76. 76 CH 與 δ 64. 01 CH2 存在 COSY 相關(guān)，結(jié)合HMBC相關(guān)信號(hào)可搭建出化合物的平面結(jié)構(gòu)。分析化合物NOESY相關(guān)譜，H-3， H-5，H-9與H-17存在相關(guān)信號(hào)，說(shuō)明這幾個(gè)H空間位置接近，提示其空間取向相同。H-18 與H-20存在相關(guān)信號(hào)，提示其空間取向一致。H-5與H-20無(wú)NOESY相關(guān)，提示其空間取向相反，AB環(huán)反式稠和。根據(jù)以上信息得化合物結(jié)構(gòu)式為
權(quán)利要求
1.一種用于治療心腦血栓性疾病的藥物活性成分，其特征在于其中豨薟精醇純度大于等于98%。
2.權(quán)利要求1所述的藥物活性成分的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將原料藥材菊科植物豨薟草，加入有機(jī)溶劑，回流提取，提取若干次，每次2-3小時(shí)，每次加入的溶劑體積與生藥的體積比為10 16 1，將提取液合并過(guò)濾，濾液減壓回收溶劑，至無(wú)溶劑味，得提取液；藥渣棄去或涼干另用；(2)將步驟(1)獲得的提取液，以水飽和過(guò)的乙酸乙酯進(jìn)行萃取，萃取若干次，每次使用的萃取溶劑量與提取液的體積比為0.3 1.0 1.0;合并萃取液，減壓回收溶劑，得浸膏狀物；(3)將步驟( 獲得的浸膏狀物，加入50-60°C熱水，攪拌溶解，加入的水量與浸膏的體積比為2 4 1，將此液過(guò)大孔樹脂為填料的柱色譜，浸膏狀物與大孔樹脂的體積比為 1 15 100，以水洗脫至流出液無(wú)色，再以30%、50%和70%的甲醇或乙醇溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集含豨薟精醇部分的洗脫液，以HPLC或TLC檢測(cè)，合并含豨薟精醇部分的洗脫液， 減壓回收溶劑，得浸膏；⑷步驟⑶所得浸膏，與60-100目的硅膠拌樣，浸膏與硅膠的體積比為1 1.2 2. 5 ；上樣硅膠與上柱色譜硅膠的體積比為1 4 20，以二元有機(jī)溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，以 TLC檢測(cè)，合并含豨薟精醇部分的洗脫液；(5)將步驟(4)含豨薟精醇部分的洗脫液，減壓回收溶劑，將粘稠物溶于少量甲醇、乙醇或丙酮中，加入少量乙酸乙酯，甲醇、乙醇或丙酮與乙酸乙酯的體積比為1 1 2，密閉放置，有大量無(wú)色透明晶體析出，濾出晶體，母液繼續(xù)放置，晶體析出，重復(fù)上述操作3-5 次，直至豨薟精醇幾乎全部析出，合并析出的豨薟精醇晶體；6)將步驟( 析出的豨薟精醇晶體，加入甲醇、乙醇或丙酮；加熱溶解，重結(jié)晶，得到無(wú)色透明晶體，干燥得到純度> 98%豨薟精醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物活性成分的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中有機(jī)溶劑為10 100%乙醇、10 100%甲醇、10 100%丙酮、乙酸乙酯、氯仿中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物活性成分的制備方法，其特征在于所述步驟中洗脫用的二元有機(jī)溶劑系統(tǒng)為石油醚和乙酸乙酯、石油醚和丙酮、乙酸乙酯和甲醇、乙酸乙酯和乙醇、氯仿和丙酮、氯仿和乙酸乙酯、氯仿和乙醇、氯仿和甲醇、二氯甲烷和丙酮、二氯甲烷和乙醇、二氯甲烷和甲醇溶劑系統(tǒng)中的任一種，洗脫梯度是30 1 1 1。
5.含有權(quán)利要求1所述的藥物活性成分的藥物制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物制劑，其特征在于所述藥物制劑的每制劑單位含藥物活性成分l_200mg。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物制劑，其特征在于所述藥物制劑為口服固體制劑，包括片劑、膠囊、微丸、顆粒劑和緩釋劑；每制劑單位含藥物活性成分5-200mg。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物制劑，其特征在于所述藥物制劑為液體制劑，包括口服液、凍干粉針或小水針注射劑；每制劑單位含藥物活性成分5-200mg。
9.權(quán)利要求5-8任一項(xiàng)所述的藥物制劑在制備治療心腦血栓性疾病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療心腦血栓性疾病的藥物活性成分豨薟精醇，其純度大于等于98％。本發(fā)明還涉及其制備方法以及應(yīng)用制劑。該制劑包括作為藥物活性成分的豨薟精醇及其相關(guān)的制劑。本發(fā)明制備豨薟精醇的方法，操作簡(jiǎn)便，生產(chǎn)成本低，環(huán)境污染低，所制備的豨薟精醇純度高達(dá)98％以上，收率高。采用本發(fā)明所提供的方法所制備的豨薟精醇和制劑不僅穩(wěn)定性良好，安全可靠，而且質(zhì)量穩(wěn)定，治療效果顯著，特別是用于治療心腦血栓性疾病的藥物。
文檔編號(hào)A61P9/10GK102429944SQ20111040986
公開(kāi)日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2011年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月9日
發(fā)明者付宏征, 李偉 申請(qǐng)人:北京大學(xué), 吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院