專利名稱：桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及桔?？傇碥赵谒幬镏械膽?。
背景技術(shù)：
桔梗為桔?？浦参锝酃latycodon grandiflorum(Jacq. )A. DC.的根，是我國的傳統(tǒng)中藥，藥用歷史悠久，應用廣泛。其味苦、辛，性平。主歸肺經(jīng)。具有宣肺化痰，利咽，排膿的功效，臨床主要用于咳嗽痰多，胸悶不暢，咽痛音 ，肺癰吐膿等癥的治療。桔梗的現(xiàn)代研究始于20世紀40年代，其主要有效成分為齊墩果酸型五環(huán)三萜皂苷。國內(nèi)外研究學者先后發(fā)現(xiàn)桔?？傇碥站哂锌寡趸?、抗炎鎮(zhèn)痛、祛痰鎮(zhèn)咳、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用，而關(guān)于其抗肺炎支原體作用的研究目前尚未見報道。肺炎支原體(Mycoplasma Pneumoniea,MP)是引起非典型肺炎的主要病原體之一， 也是呼吸道感染常見的病原體。MP引起的支原體肺炎約占肺炎發(fā)病率的22%，居非典型肺炎首位，且近年來發(fā)病率呈逐年遞增的趨勢。MP感染人群以兒童為主，臨床表現(xiàn)多種多樣， 可引起呼吸系統(tǒng)輕癥感染，亦可引起嚴重的爆發(fā)性肺炎導致死亡。此外，MP感染尚可引起多系統(tǒng)、多器官的肺外并發(fā)癥，如腦膜炎、心包炎、心肌炎、免疫性溶血性貧血等。MP亦可感染羊、牛、豬、雞等家畜，引起動物肺炎等疾病。對于群養(yǎng)家畜，MP可在種群內(nèi)、外迅速傳播、爆發(fā)，導致家畜大量死亡，造成嚴重的經(jīng)濟損失。目前臨床對于MP感染的治療主要以抗生素為主。MP沒有細胞壁結(jié)構(gòu)，對β-內(nèi)酰胺類抗菌素天然耐藥，而四環(huán)素類、氨基糖甙類較大的毒副作用不適合生長發(fā)育期的青少年使用，故臨床常以大環(huán)內(nèi)酯類為首選抗MP治療藥物。但大環(huán)內(nèi)酯類抗菌素應用時可引起惡心、嘔吐、黃疸、轉(zhuǎn)氨酶增高等副作用，同時由于MP易引起反復感染及抗生素的不規(guī)范使用，結(jié)果導致近年來MP耐藥菌株感染率逐年增加。而耐藥菌株的不斷增加又導致臨床抗感染治療不徹底，一但機體免疫力低下又引起復發(fā)，形成惡性循環(huán)。因此，有必要從中藥著手， 探索具有抗肺炎支原體作用的藥物，以避免抗生素引起的不良反應及耐藥性。在家畜MP感染治療上，由于MP感染治療療程較長(約需2周)，長期服用抗菌素會使其在動物體內(nèi)大量積蓄，導致動物肌肉、脂肪、內(nèi)臟等組織及副產(chǎn)品奶、蛋等中抗菌素含量超標，直接影響經(jīng)濟效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用。桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用桔梗總皂苷作為治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，桔?？傇碥諡榻酃Ｋ犷悺⑦h志酸類、 桔梗二酸類、桔梗酸A內(nèi)酯類皂苷中的一種或幾種的組合物。桔梗作為藥食同源植物，其市場需求量極大，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了其新的藥理活性，將進一步擴大其藥用范圍及市場需求。同時本發(fā)明將打破支原體肺炎治療市場抗生素的壟斷局面，避免了抗生素對人體的毒副作用及耐藥性。本發(fā)明桔梗總皂苷在治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用中，桔?？傇碥兆鳛橹委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，發(fā)現(xiàn)具有抗肺炎支原體作用；體外試驗表明，其抗MP的MIC值為16-64 μ g/ml ；MBC為64-1 μ g/ml ；體內(nèi)試驗證明， BALB/C小鼠經(jīng)滴鼻感染MP后，分別灌胃8mg/Kg和16mg/Kg桔梗總皂苷10天后，均可明顯減輕小鼠肺臟的病理損害，調(diào)解機體免疫功能，對MP感染具有治療作用。本發(fā)明中桔?？傇碥兆鳛橹委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分， 將桔?？傇碥罩苽涑沙Ｒ?guī)劑型后，對MP引起的感染性疾病是有效的；本發(fā)明中桔梗總皂苷作為飼料添加劑或治療藥物，既可防治家畜MP感染，又避免了抗菌素超標問題。


圖1為具體實施方式
一中桔?？傇碥阵w外抗MP時效曲線圖，其中 表示MBC，·表示MIC，▲表示1/2MIC，X表示空白；圖2為具體實施方式
一中小鼠肺臟病理組織學實驗中空白對照組的病變情況圖；圖3為具體實施方式
一中小鼠肺臟病理組織學實驗中模型對照組的病變情況圖；圖4為具體實施方式
一中小鼠肺臟病理組織學實驗中陽性對照藥組的病變情況圖；圖5為具體實施方式
一中小鼠肺臟病理組織學實驗中桔梗高劑量組的病變情況圖；圖6為具體實施方式
一中小鼠肺臟病理組織學實驗中桔梗低劑量組的病變情況圖。
具體實施例方式具體實施方式
一本實施方式桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用桔?？傇碥兆鳛橹委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，桔?？傇碥諡榻酃Ｋ犷?、遠志酸類、桔梗二酸類、桔梗酸A內(nèi)酯類皂苷中的一種或幾種的組合物。桔梗總皂苷為兩種或兩種以上物質(zhì)組成時按任意比混合。桔?？傇碥阵w外抗MP試驗如下1實驗材料肺炎支原體國際標準株(ATCCFH15531)，購自美國菌種保藏中心。桔?？傇碥?，實驗室提取，提取物總皂苷含量在80%以上。PPLO培養(yǎng)基、96孔板、加樣器、恒溫培養(yǎng)箱。2方法和結(jié)果2. 1桔?？傇碥盏奶崛〖昂繙y定2. 1. 1桔梗總皂苷的提取a、取桔梗飲片(市售)，加8倍體積75%乙醇，加熱回流提取3次，每次池，濾過，合并濾液；b、濾液減壓回收乙醇至稠膏狀，得桔梗提取物；C、再將桔梗提取物加生藥量10倍量的水溶解，上于AB-8大孔吸附樹脂柱，依次以4倍柱體積的水、20%、30%、40%、50%乙醇洗脫，合并40%、50%乙醇洗脫液，減壓回收至無醇味，即得桔梗有效部位；d、將該桔梗有效部位以水溶解，依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次，棄萃取液，再用水飽和正丁醇萃取5 次，合并正丁醇液，減壓回收，蒸干，即得桔?？傇碥铡?br> 2. 2桔?？傇碥盏暮繙y定2. 2. 1對照品溶液的制備稱取經(jīng)60°C減壓干燥至恒重的桔梗皂苷D8. OOmg, M 70 %甲醇適量溶解，置50mL容量瓶中，用70 %甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2. 2. 2供試品溶液的制備稱取桔?？傇碥?. Omg,加70%甲醇適量溶解，置IOmL 容量瓶中，用70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2. 2. 3檢測波長的選擇量取對照品溶液1. 5mL及供試品溶液lmL，于70°C水浴蒸發(fā)至干，加入5%香草醛-冰醋酸(臨用新配)0. 20mL,高氯酸0. 80mL,于60°C水浴顯色 15min后冰水冷卻lOmin。加入冰醋酸5mL，搖勻。立即在紫外分光光度計下與400 800nm 波長下掃描，同時以空白溶液作參比。結(jié)果，對照品及供試品的最大吸收波長均在475nm，故選擇475nm為檢測波長。2. 2. 4線性關(guān)系考察量取對照品溶液0. 6,1. 5,2. 4,3. 3,4. 2mL,置具塞試管中， 于70°C水浴蒸發(fā)至干，加入5%香草醛-冰醋酸(臨用新配)0. 20mL，高氯酸0. 80mL，于60°C 水浴顯色15min后冰水冷卻lOmin。各加入冰醋酸5mL，搖勻，以同法平行處理的空白溶劑為空白，在475nm處測定吸光度。結(jié)果見表1。表1吸光度A與對照品質(zhì)量C (mg)的關(guān)系
權(quán)利要求
1.桔梗總皂苷在治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用桔梗總皂苷作為治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，桔?？傇碥諡榻酃Ｋ犷悺⑦h志酸類、桔梗二酸類、桔梗酸A內(nèi)酯類皂苷中的一種或幾種的組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔?？傇碥掌瑒┑闹苽淙缦乱?、 稱取50g桔?？傇碥铡OOg淀粉、50g糊精、20g微晶纖維素、40ml體積濃度為80%的乙醇溶液和8g羧甲基淀粉鈉；二、稱取的桔?？傇碥者^100目篩，然后與稱取的淀粉、糊精、微晶纖維素和5g羧甲基淀粉鈉混合，再加入稱取的乙醇溶液，混合后制成軟材，經(jīng)制顆、干燥和整粒后加入余量的羧甲基淀粉鈉混勻，然后壓片，包薄膜衣，干燥即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔梗總皂苷在治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔梗總皂苷膠囊劑的制備如下 一、稱取50g桔?？傇碥铡OOg淀粉、50g糊精、30ml體積濃度為80 %的乙醇溶液和IOg微粉硅膠；二、稱取的桔?？傇碥者^100目篩，然后與稱取的淀粉和糊精混合，再加入稱取的乙醇溶液，混合后制成軟材，經(jīng)制顆、干燥和整粒后加入稱取的微粉硅膠混勻，裝入膠囊即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔梗總皂苷在治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔梗總皂苷采用口服給藥，口服給藥所用桔梗總皂苷顆粒劑的制備如下 一、稱取50g桔?？傇碥铡?00g蔗糖、IOOg糊精和180ml體積濃度為80%的乙醇溶液；二、 稱取的桔?？傇碥者^100目篩，然后與稱取的蔗糖和糊精混合，再加入稱取的乙醇溶液，混合后制成軟材，經(jīng)制顆、干燥和整粒后即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔?？傇碥瘴⑼鑴┑闹苽淙缦?一、稱取IOOg桔梗總皂苷、400g糊精和50g淀粉；二、稱取的桔?？傇碥者^100目篩，然后與稱取的糊精混合，再加入稱取的淀粉，混勻制得藥丸坯料，然后再制丸機中制成中藥微丸， 干燥，整粒，包薄膜衣，干燥即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔?？傇碥哲浤z囊劑的制備如下 一、稱取IOOg桔?？傇碥蘸?00g大豆油；二、稱取的桔?？傇碥者^100目篩，然后與稱取的大豆油混合，用膠體磨研細，制成軟膠囊1000粒，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔?？傇碥詹捎每诜o藥，口服給藥所用桔?？傇碥湛诜旱闹苽淙缦?一、稱取15g桔?？傇碥?、3g苯甲酸鈉和Ig甜蜜素；二、稱取的桔?？傇碥者^100目篩，然后與稱取的苯甲酸鈉和甜蜜素混合，加水至1000ml，攪勻，灌裝，滅菌，即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔梗總皂苷在治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔?？傇碥詹捎谜衬そo藥，粘膜給藥所用桔?？傇碥账▌┑闹苽淙缦乱弧?稱取150g桔?？傇碥?、350g聚乙二醇600和IOOOg聚乙二醇PEG6000 ；二、稱取的桔梗總皂苷過100目篩，然后與50°C熔融的聚乙二醇600、聚乙二醇PEG6000混合，澆膜，冷卻，制成 1000粒，即得。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔?？傇碥詹捎煤粑澜o藥，呼吸道給藥所用桔?？傇碥諊婌F劑的制備如下一、稱取15g桔梗總皂苷、0. 5g阿斯巴甜、Ig薄荷香精和0. 5g對羥基苯甲酸乙酯；二、稱取的桔?？傇碥者^100目篩，然后與稱取的阿斯巴甜、薄荷香精及對羥基苯甲酸乙酯混合， 加純化水至1000ml，搖勻，濾過，分裝至噴霧瓶中，即得。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述桔梗總皂苷在治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，其特征在于桔梗總皂苷采用注射給藥，注射給藥所用注射用桔梗總皂苷凍干粉的制備如下一、稱取5g桔梗總皂苷；二、稱取的桔?？傇碥者^100目篩，然后與950ml水混合，調(diào)節(jié)pH值至7. 0，濾過，再加注射用水至1000ml，滅菌，冷藏，濾過，濃縮，冷凍干燥，制成粉末， 分裝，即得。
全文摘要
桔?？傇碥赵谥委熀皖A防肺炎支原體感染性疾病藥物中的應用，它涉及桔梗總皂苷在藥物中的應用。應用桔梗總皂苷作為治療和預防肺炎支原體感染性疾病藥物中的活性成分，桔?？傇碥諡榻酃Ｋ犷?、遠志酸類、桔梗二酸類、桔梗酸A內(nèi)酯類皂苷中的一種或幾種的組合物。本發(fā)明中桔?？傇碥站哂锌狗窝字гw作用；體外試驗表明，其抗MP的MIC值為16-64μg/ml；MBC為64-128μg/ml；體內(nèi)試驗證明，BALB/C小鼠經(jīng)滴鼻感染MP后，分別灌胃8mg/Kg和16mg/Kg桔?？傇碥?0天后，均可明顯減輕小鼠肺臟的病理損害，調(diào)解機體免疫功能，對MP感染具有治療作用。
文檔編號A61P31/04GK102274264SQ20111022578
公開日2011年12月14日 申請日期2011年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月8日
發(fā)明者姚琳, 張俊威, 王偉明, 王昶, 許慶瑞, 譚思思, 高菲 申請人:黑龍江省中醫(yī)研究院