專利名稱：從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法。
背景技術(shù)：
白花蛇舌草0 辦Oii1S i/i/fiAsa (Willd) Roxb.)為茜草科耳草屬植物，全草入藥，具有清熱解毒、活血化瘀、抗菌消炎和抗腫瘤等多種生理活性?；瘜W(xué)成分主要包括黃酮類、環(huán)烯醚萜苷類、蒽醌類等化合物。環(huán)烯醚萜苷類是天然產(chǎn)物中一類重要的化合物，也是白花蛇舌草中主要類化學(xué)物質(zhì)之一，白花蛇舌草中常見的環(huán)烯醚萜類化合物主要有雞矢藤苷甲酯、去乙酰基車葉草苷酸甲酯、車葉草苷酸和車葉草苷。它具有細(xì)胞毒、抗腫瘤、抗氧化等多種生物活性。環(huán)烯醚萜類化合物屬于臭蟻二醛的半縮醛衍生物，半縮醛結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易發(fā)生水解或再酸性介質(zhì)中發(fā)生重排等變化。李存滿等研究了白花蛇舌草中環(huán)烯醚萜苷類化合物的穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)環(huán)烯醚萜苷類化合物在室溫純水介質(zhì)中存放于玻璃瓶中較穩(wěn)定，60°C 放置時(shí)間不宜超過他。環(huán)烯醚萜苷類化合物的富集方法主要通過大孔吸附樹脂的分離純化來實(shí)現(xiàn)，中國專利申請?zhí)?00810010309. 3，一種白花蛇舌草提取物及其分離制備方法，以白花蛇舌草藥材為原料，經(jīng)水提取、醇沉、膜分離、非極性大孔樹脂分離和工業(yè)色譜分離等步驟，獲得提取物。該方法雜質(zhì)多，對膜損壞較大，成本高。中國專利申請?zhí)?00610028468. 7，白花蛇舌草中環(huán)烯醚萜類化合物單體的提取、分離方法，采用醇水溶液兩次提取，大孔樹脂柱分離，水醇洗脫，洗脫液濃縮后上kphadex LH-20住曾想，醇水洗脫，濃縮，結(jié)晶，得到E_6_0-香豆酰雞屎藤次苷甲酯，該法存在重現(xiàn)性差、耗時(shí)長、自動化程度低等缺點(diǎn)。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，目前尚無采用超臨界流體從白花蛇舌草中萃取環(huán)烯醚萜苷的方法報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了提供一種簡便、低耗能、環(huán)保、快速有效從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)
從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法，其特征在于包括以下工藝步驟(1)將白花蛇舌草全草粉碎成粗粉，加入超臨界萃取罐中，以乙醇為夾帶劑進(jìn)行萃取，收集萃取物； (2)將上述萃取物放入索氏抽提器中，加入5-6倍量的乙醇溶液，反復(fù)抽取3-6小時(shí)，提取液濃縮至無醇味；(3)將上述濃縮液通過大孔吸附樹脂柱，依次用0-10%乙醇和30-80%乙醇洗脫，收集洗脫液，經(jīng)膜濃縮、過濾，真空干燥得到總環(huán)烯醚萜苷。步驟(1)所述超臨界CO2萃取條件為萃取壓力為25_35MPa，萃取溫度為30-50°C， 超臨界CO2流量為20-3^g/h，萃取時(shí)間為1-6小時(shí)，解析壓力為4-llMPa，解析溫度為 45-60 0C，夾帶劑乙醇體積分?jǐn)?shù)為70-95%。步驟(2)所述索氏抽提用乙醇體積分?jǐn)?shù)為50-70%。
步驟(3)所述大孔吸附樹脂選自XDA-I、ADS-7、NKA、HPD450中的一種。步驟(3)所述膜濃縮為先通過超濾膜，透過液再加入納濾膜濃縮，所述超濾膜為截留分子量3000-8000的中空超濾膜，納濾膜截留分子量為200-300，材質(zhì)可選聚醚砜或聚四氟乙烯。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，有益效果是本發(fā)明采用超臨界流體萃取，萃取率高，對環(huán)境污染少，自動化程度較高，可擴(kuò)大規(guī)?；a(chǎn)；本發(fā)明采用樹脂吸附與膜分離濃縮技術(shù)聯(lián)用，藥液經(jīng)樹脂精制后使污染膜的成分大大降低，是超濾應(yīng)用很有效的預(yù)處理方法，而且超濾能起到進(jìn)一步精制的作用，提高有效成分的含量，清除樹脂的脫落微粒，本發(fā)明工藝不需要加熱，對有效成分起到一定的保護(hù)作用，提高了產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
取白花蛇舌草全草粉碎成粗粉，取^g投入超臨界萃取罐內(nèi)，加入體積百分比為80%的乙醇溶液作為夾帶劑，加入量為0. IOkg ；在萃取壓力27. 6MPa，萃取溫度40°C，CO2流量為 22kg/h的條件下萃取2小時(shí)；控制解析罐壓力為4MPa，溫度為45°C，收集萃取物；將萃取物放入索氏抽提器中，加入5倍量60%的乙醇溶液，反復(fù)抽取3小時(shí)，提取液減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過XDA-I大孔吸附樹脂柱，依次用去離子水及50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，洗脫液通過截留分子量3000的中空聚醚砜超濾膜系統(tǒng)，濾過液再通過截留分子量為200的聚醚砜納濾膜，收集濃縮液，真空干燥得到總環(huán)烯醚萜苷提取物2. lg，提取物中環(huán)烯醚萜成分總含量為78%。實(shí)施例2:
取白花蛇舌草全草粉碎成粗粉，取^g投入超臨界萃取罐內(nèi)，加入體積百分比為80%的乙醇溶液作為夾帶劑，加入量為0. 12kg ；在萃取壓力29. IMPa，萃取溫度32°C，CO2流量為 30kg/h的條件下萃取1小時(shí)；控制解析罐壓力為6MPa，溫度為56°C，收集萃取物；將萃取物放入索氏抽提器中，加入6倍量75%的乙醇溶液，反復(fù)抽取6小時(shí)，提取液減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過HPD450大孔吸附樹脂柱，依次用10%乙醇及70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，洗脫液通過截留分子量4000的中空聚四氟乙烯超濾膜系統(tǒng)，濾過液再通過截留分子量為200的聚四氟乙烯納濾膜，收集濃縮液，真空干燥得到總環(huán)烯醚萜苷提取物2. 3g，提取物中環(huán)烯醚萜成分總含量為76%。實(shí)施例3:
取白花蛇舌草全草粉碎成粗粉，取^g投入超臨界萃取罐內(nèi)，加入體積百分比為80%的乙醇溶液作為夾帶劑，加入量為0. 15kg ；在萃取壓力25. 5MPa，萃取溫度44°C，CO2流量為 35kg/h的條件下萃取3小時(shí)；控制解析罐壓力為7MPa，溫度為58°C，收集萃取物；將萃取物放入索氏抽提器中，加入5倍量70%的乙醇溶液，反復(fù)抽取5小時(shí)，提取液減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過XDA-I大孔吸附樹脂柱，依次用10%乙醇及40%乙醇洗脫，收集40%乙醇洗脫液，洗脫液通過截留分子量8000的中空聚醚砜超濾膜系統(tǒng)，濾過液再通過截留分子量為300的聚四氟乙烯納濾膜，收集濃縮液，真空干燥得到總環(huán)烯醚萜苷提取物2. 5g，提取物中環(huán)烯醚萜成分總含量為75%。實(shí)施例4:取白花蛇舌草全草粉碎成粗粉，取^g投入超臨界萃取罐內(nèi)，加入體積百分比為80%的乙醇溶液作為夾帶劑，加入量為0. 18kg ；在萃取壓力32. 8MPa，萃取溫度47°C，CO2流量為 20kg/h的條件下萃取6小時(shí)；控制解析罐壓力為llMPa，溫度為49°C，收集萃取物；將萃取物放入索氏抽提器中，加入5倍量90%的乙醇溶液，反復(fù)抽取4小時(shí)，提取液減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過ADS-7大孔吸附樹脂柱，依次用去離子水及80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，洗脫液通過截留分子量6000的中空聚四氟乙烯超濾膜系統(tǒng)，濾過液再通過截留分子量為300的聚醚砜納濾膜，收集濃縮液，真空干燥得到總環(huán)烯醚萜苷提取物2. 2g，提取物中環(huán)烯醚萜成分總含量為73%。
實(shí)施例5:
取白花蛇舌草全草粉碎成粗粉，取^g投入超臨界萃取罐內(nèi)，加入體積百分比為80%的乙醇溶液作為夾帶劑，加入量為0. 14kg ；在萃取壓力34. 4MPa，萃取溫度50°C，CO2流量為 ^kg/h的條件下萃取5小時(shí)；控制解析罐壓力為8MPa，溫度為60°C，收集萃取物；將萃取物放入索氏抽提器中，加入6倍量95%的乙醇溶液，反復(fù)抽取5小時(shí)，提取液減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過NKA大孔吸附樹脂柱，依次用10%乙醇及60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，洗脫液通過截留分子量5000的中空聚醚砜超濾膜系統(tǒng)，濾過液再通過截留分子量為 200的聚四氟乙烯納濾膜，收集濃縮液，真空干燥得到總環(huán)烯醚萜苷提取物2. 3g，提取物中環(huán)烯醚萜成分總含量為74%。
權(quán)利要求
1.從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法，其特征在于包括以下工藝步驟(1)將白花蛇舌草全草粉碎成粗粉，加入超臨界萃取罐中，以乙醇為夾帶劑進(jìn)行萃取，收集萃取物；(2)將上述萃取物放入索氏抽提器中，加入5-6倍量的乙醇溶液，反復(fù)抽取3-6小時(shí)，提取液濃縮至無醇味；(3)將上述濃縮液通過大孔吸附樹脂柱，依次用0-10%乙醇和30-80% 乙醇洗脫，收集洗脫液，經(jīng)膜濃縮、過濾，真空干燥得到總環(huán)烯醚萜苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法，其特征在于，步驟(1)所述超臨界CO2萃取條件為萃取壓力為25-35MPa，萃取溫度為30_50°C，超臨界CO2 流量為20-3^g/h，萃取時(shí)間為1-6小時(shí)，解析壓力為4-llMPa，解析溫度為45_60°C，夾帶劑乙醇體積分?jǐn)?shù)為70-95%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法，其特征在于，步驟(2)所述索氏抽提用乙醇體積分?jǐn)?shù)為50-70%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法，其特征在于，步驟(3)所述大孔吸附樹脂選自XDA-I、ADS-7、NKA、HPD450中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法，其特征在于，步驟(3)所述膜濃縮為先通過超濾膜，透過液再加入納濾膜濃縮，所述超濾膜為截留分子量 3000-8000的中空超濾膜，納濾膜截留分子量為200-300，材質(zhì)可選聚醚砜或聚四氟乙烯。
全文摘要
本發(fā)明提供從白花蛇舌草中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法，其特征在于以白花蛇舌草為原料，采用超臨界CO2萃取方法，以乙醇為夾帶劑進(jìn)行萃取，萃取物用乙醇溶液抽提，濃縮，通過大孔吸附樹脂，乙醇洗脫，洗脫液經(jīng)膜濃縮、干燥，獲得總環(huán)烯醚萜苷。該方法效率高、不使用有害試劑、對環(huán)境污染程度低，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。
文檔編號A61P35/00GK102302586SQ20111022555
公開日2012年1月4日 申請日期2011年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月8日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司