專利名稱：高純度銀杏內(nèi)酯組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高純度銀杏內(nèi)酯及組合物，具體而言涉及從銀杏葉中提取高純度銀杏內(nèi)酯的生產(chǎn)工藝。
背景技術(shù)：
銀杏(Ginkgo biloba L.)是一種重要的藥用植物，銀杏葉是銀杏科植物銀杏的葉子，其味苦澀、性平，其所含的銀杏總黃酮和萜內(nèi)酯具有重要的藥用價(jià)值。上世紀(jì)70年代，德國率先為銀杏提取物(簡稱GBE)制定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，即標(biāo)準(zhǔn)銀杏提取物(銀杏總黃酮 > M %，萜內(nèi)酯> 6 %，銀杏酸< IOppm)，該標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)而也成為了銀杏提取物的國際國際標(biāo)準(zhǔn)。進(jìn)一步的研究表明，銀杏萜內(nèi)酯(ginkgolides，GK)為銀杏葉提取物中主要的藥效成分，為二萜類酯化合物，包括銀杏內(nèi)酯A、B、C、J和M(GKA、GKB、GKC、GKJ、GKM)等。銀杏內(nèi)酯作為公認(rèn)的血小板活化因子(platelet activating factor, PAF)受體拮抗劑，其拮抗 PAF的藥理作用已得到充分證實(shí).銀杏內(nèi)酯中抗PAF活性最高的是GKB，其次為GKA，再次為 GKC，最后為GKJ。20世紀(jì)90年代，日本開發(fā)出了含有白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯的銀杏葉制劑，用于治療脫髓鞘神經(jīng)病、腦脊髓病和腦水腫等。中國是銀杏的故鄉(xiāng)，資源占世界的70%左右， 廣大國民卻以高價(jià)購買國外產(chǎn)品，而這些產(chǎn)品的原料大部分是中國廉價(jià)提供的。隨著老齡社會的到來，對于抗衰老、提高認(rèn)知能力的藥物需求日益增加。利用銀杏葉資源，開發(fā)出質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的藥品或保健品，將是一件有益于國計(jì)民生的大事。目前，關(guān)于高純度銀杏內(nèi)酯的提取方法報(bào)道也有很多，其中多數(shù)集中在銀杏內(nèi)酯B 以及銀杏內(nèi)酯A和白果內(nèi)酯的分離純化研究。南開大學(xué)發(fā)明了一種采用大孔樹脂發(fā)分離銀杏內(nèi)酯的方法，采用大空酰胺樹脂層析，結(jié)晶等方法制備得到高純度銀杏內(nèi)酯，但是所得到的高純度內(nèi)酯中缺乏白果內(nèi)酯，而白果內(nèi)酯是銀杏內(nèi)酯中發(fā)揮神經(jīng)系統(tǒng)藥理作用的重要組分。潘見曾發(fā)明了一種配位法分離白果內(nèi)酯的方法，該方法所使用樹脂需要引入金屬離子所謂配體，同時(shí)吸附還要在非水體系進(jìn)行，該方法在實(shí)際應(yīng)用中存在很多問題。綜合國內(nèi)一百余項(xiàng)專利可知，目前對銀杏內(nèi)酯的分離純化方面，主要集中的各中內(nèi)酯單體的分離， 而針對天然銀杏葉中內(nèi)酯天然組合高純度產(chǎn)物的分離研究較少，本專利采用一種簡單的工藝，分離得到高純度天然比例銀杏總內(nèi)酯，有效保持了銀杏葉固有的天然屬性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于提供一種高純度銀杏內(nèi)酯組合物。本發(fā)明制備工藝簡單、可靠。高純度銀杏內(nèi)酯組合物可作為有效組分制成心腦血管和精神神經(jīng)疾病類藥品或保健品的各種制劑(膠囊、片劑、口服液、沖劑、散劑、針劑等)使用。本發(fā)明的目的可通過下述的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)本發(fā)明提供的高純度銀杏內(nèi)酯是白色粉末，味微苦，銀杏總內(nèi)酯> 80 %，銀杏內(nèi)酯 A含量10-20 %，銀杏內(nèi)酯B含量為10-20 %，銀杏內(nèi)酯C含量為5_15 %，白果內(nèi)酯含量為 30-50 %，總內(nèi)酯含量為80-95 %。
制備方法是以銀杏葉為原料，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20-80%乙醇溶液加熱回流浸提提取， 提取液濃縮回收乙醇，過大孔樹脂柱分離，乙醇解吸，再次回收乙醇，所得溶液直接加水稀釋或?qū)⒏稍锏勉y杏提取物粉末后加水稀釋后，再通過加入凝膠型氫鍵吸附樹脂，收集流出液，濃縮、干燥，乙醇溶解、活性碳脫色，濃縮、干燥即得到高純度天然比例銀杏內(nèi)酯提取物 (^ 80% )產(chǎn)品。本發(fā)明提供的高純度銀杏內(nèi)酯制備方法包括的步驟1)以銀杏葉為原料，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20-80%乙醇溶液70-90°C加熱回流浸提提取2 次，每次0.5-3小時(shí)。提取液濃縮回收乙醇。2)過大孔樹脂柱分離，吸附柱的柱徑比為3-10 1，樹脂與銀杏葉的重量比為 0. 5-3 1，用50% -90%乙醇解吸，優(yōu)選50-70%。吸附和解吸的流速為0. 5-3BV/H(BV 床體積，H:小時(shí))，再次回收乙醇。3)所得溶液直接加水稀釋或?qū)⒏稍锏勉y杏提取物粉末后加水稀釋后(濃度為 0. 1-20%))，再通過加入凝膠型氫鍵吸附樹脂吸附與解吸，吸附柱的柱徑比為3-10 1，收集流出液和解吸液，吸附和解吸的流速為0. 5-3BV/H.解吸液為5% -30%的乙醇水溶液。 優(yōu)選5-10%。4)濃縮、干燥得初步銀杏內(nèi)酯粗提取物產(chǎn)品。5)按提取物和無水乙醇1 20-50(重量體積)比例，溶解銀杏內(nèi)酯粗提取物， 活性碳脫色(提取物和活性碳重量比例為1 1-5)。6)濃縮、干燥即得到白色高純度銀杏內(nèi)酯提取物(彡80% )產(chǎn)品。所述的分離過程中所用的大孔樹脂為以苯乙烯為主要骨架的大孔樹脂ME-1、 FL-2、AB-8或DlOl。所述的凝膠型吸附樹脂為MG-I、MG_2、OU-I。(以上樹脂均由天津歐瑞生物科技有限公司提供)本發(fā)明提供的組合物是以高純度銀杏內(nèi)酯作為有效成分，配以醫(yī)藥是上可以接受的助劑制成組合物，可作為銀杏內(nèi)酯藥品或保健品的各種制劑(膠囊、片劑、口服液、沖劑、 散劑、針劑等)使用。本發(fā)明從源頭做起，從而保證了所得產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定可控。制備工藝簡單、可靠， 成本低，過程中不使用毒性有機(jī)溶劑，是一種環(huán)境友好型工藝。高純度銀杏內(nèi)酯作為有效成分制成組合物可作為銀杏內(nèi)酯藥品或保健品的各種制劑(膠囊、片劑、口服液、沖劑、散劑、 針劑等)使用。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例可以進(jìn)一步說明本發(fā)明實(shí)施例1取IOOkg銀杏葉加入提取釜中，加入80%的乙醇600L，70°C下攪拌提取池，放出提取液，再向提取釜中加入80%的乙醇400L，70°C下攪拌提取池，放出提取液。合并兩次提取液，減壓回收乙醇，加水稀釋至400L，靜置證，過濾得清液。清液上100L ME-I大孔吸附樹脂(天津歐瑞生物有限公司)，控制流速100L/h，吸附完畢后用200L純水沖洗，流速100L/ h，沖洗完畢后用300L 70%的乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇得流浸膏，加純水稀釋至800L。稀釋液上100L MG-2凝膠型氫鍵吸附樹脂(天津歐瑞生物有限公司)，控制流速200L/h，然后用200L 5%的乙醇解吸，收集流出液和解吸液，濃縮干燥得450g銀杏內(nèi)酯粗品，樹脂用70%的乙醇沖洗300L再生后備下次重復(fù)使用。450g銀杏內(nèi)酯粗品用45L無水乙醇加熱(60°C )攪拌溶解，加入活性炭675g，保溫?cái)嚢?0min，過濾，濾液中再加入活性炭 675g，保溫?cái)嚢?0min，過濾，濾液濃縮干燥，得白色總銀杏內(nèi)酯383g。經(jīng)檢測，銀杏內(nèi)酯A含量為15.2%，銀杏內(nèi)酯B含量為16.5%，銀杏內(nèi)酯C含量為10%，白果內(nèi)酯含量為40.3%， 總內(nèi)酯含量為81.0%。實(shí)施例2取200kg銀杏葉加入提取釜中，加入80%的乙醇1200L，70°C下攪拌提取池，放出提取液，再向提取釜中加入80%的乙醇400L，70°C下攪拌提取池，放出提取液。合并兩次提取液，減壓回收乙醇，加水稀釋至800L，靜置證，過濾得清液。清液上200L DlOl大孔吸附樹脂(天津歐瑞生物科技有限公司提供)，控制流速200L/h，吸附完畢后用純水沖洗400L，流速200L/h，沖洗完畢后用600L 70%的乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇得流浸膏，加純水稀釋至1600L。稀釋液上200L MG-2凝膠型氫鍵吸附樹脂(天津歐瑞生物有限公司)， 控制流速400L/h，然后用400L 5%的乙醇解吸，收集流出液和解吸液，濃縮干燥得930g銀杏內(nèi)酯粗品，樹脂用70%的乙醇沖洗600L再生后備下次重復(fù)使用。930g銀杏內(nèi)酯粗品用 93L無水乙醇加熱(60°C )攪拌溶解，加入活性炭1395g，保溫?cái)嚢?0min，過濾，濾液中再加入活性炭1395g，保溫?cái)嚢?0min，過濾，濾液濃縮干燥，得近白色總銀杏內(nèi)酯770g。經(jīng)檢測， 銀杏內(nèi)酯A含量為18. 5%，銀杏內(nèi)酯B含量為19. 5%，銀杏內(nèi)酯C含量為12. 2%,白果內(nèi)酯含量為44.3%,總內(nèi)酯含量為94. 5% 0實(shí)施例3取IOOOg銀杏葉提取物(本公司生產(chǎn)，總黃酮含量25%，總內(nèi)酯含量7%，加120L 純水?dāng)嚢枞芙?，溶液?0L MG-2凝膠型氫鍵吸附樹脂(天津歐瑞生物有限公司)，控制流速30L/h，然后用60L 5%的乙醇解吸，收集流出液和解吸液，濃縮干燥得140g銀杏內(nèi)酯粗品，樹脂用70%的乙醇沖洗300L再生后備下次重復(fù)使用。140g銀杏內(nèi)酯粗品用14L無水乙醇加熱(60°C)攪拌溶解，加入活性炭210g，保溫?cái)嚢?0min，過濾，濾液中再加入活性炭 210g，保溫?cái)嚢?0min，過濾，濾液濃縮干燥，得近白色總銀杏內(nèi)酯120g。經(jīng)檢測，銀杏內(nèi)酯 A含量為14.5%，銀杏內(nèi)酯B含量為16.3%，銀杏內(nèi)酯C含量為11.2%，白果內(nèi)酯含量為 41.6%，總內(nèi)酯含量為83.6%。
權(quán)利要求
1.一種高純度銀杏內(nèi)酯，其特征在于它是白色粉末，味微苦，銀杏內(nèi)酯A含量10-20%， 銀杏內(nèi)酯B含量為10-20 %，銀杏內(nèi)酯C含量為5-15 %，白果內(nèi)酯含量為30-50 %，總內(nèi)酯含量為80-95%。制備方法是以銀杏葉或銀杏提取物為原料，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20-80%乙醇溶液加熱回流浸提提取，提取液濃縮回收乙醇，過大孔樹脂柱分離，乙醇解吸，再次回收乙醇，所得溶液直接加水稀釋或?qū)⒏稍锏勉y杏提取物粉末后加水稀釋后，再通過加入凝膠型氫鍵吸附樹脂吸附和解吸，收集流出液和解吸液，濃縮、干燥，然后用活性碳脫色，干燥即得產(chǎn)品。。
2.一種權(quán)利要求1所述的高純度銀杏內(nèi)酯的制備方法，其特征在于它包括的步驟1)以銀杏葉為原料，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20-80%乙醇溶液于70-90°C加熱回流浸提提取2 次，每次0. 5-3小時(shí)，提取液濃縮回收乙醇；2)過大孔樹脂柱分離，吸附柱的柱徑比為3-10 1，樹脂與銀杏葉的重量比為 0. 5-3 1，用50% -90%乙醇解吸，優(yōu)選50-70%;吸附和解吸的流速為0. 5_;3BV/H，再次回收乙醇；3)所得溶液直接加水稀釋或?qū)⒏稍锏勉y杏提取物粉末后加水稀釋，濃度為0.1-20%, 再通過加入凝膠型氫鍵吸附樹脂吸附和解吸，吸附柱的柱徑比為3-10 1，收集流出液和解吸液，吸附和解吸的流速為0. 5-3BV/H ；解吸液為5% -20%的乙醇水溶液；4)濃縮、干燥，即得到銀杏內(nèi)酯粗提取物。5)銀杏內(nèi)酯粗提取物用無水乙醇溶解(提取物重量和乙醇體積的比例為1 10-50)， 然后加入活性碳脫色(提取物和活性碳的重量比為1 1-5)。6)濃縮、干燥，即得高純度銀杏內(nèi)酯提取物。
3.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的分離過程中所用的大孔樹脂為以苯乙烯為主要骨架的大孔樹脂ME-l、FL-2、AB-8或D101。
4.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的凝膠型氫鍵吸附樹脂為MG-l、MG-2、 OU-I。
5.權(quán)利要求1所述的高純度銀杏內(nèi)酯組合物，其特征在于它是以高純度銀杏內(nèi)酯組合物作為有效成分，配以醫(yī)藥是上可以接受的助劑制成的藥品或保健品。
6.權(quán)利要求5所述的高純度銀杏內(nèi)酯的組合物制成的銀杏內(nèi)酯藥品或保健品的膠囊劑、片劑、口服液、沖劑、散劑或針劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種高純度銀杏內(nèi)酯及組合物，它是白色粉末，味微苦，銀杏內(nèi)酯A含量10-20％，銀杏內(nèi)酯B含量為10-20％，銀杏內(nèi)酯C含量為5-15％，白果內(nèi)酯含量為30-50％，總內(nèi)酯含量為80-95％。以銀杏葉為原料，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20-80％乙醇溶液加熱回流浸提提取，提取液濃縮回收乙醇，過大孔樹脂柱分離，乙醇解吸，產(chǎn)物加水稀釋后，再通過凝膠型氫鍵吸附樹脂吸附和解吸，收集流出液和解吸液，濃縮、干燥，乙醇溶解、活性碳脫色、濃縮干燥。制備工藝簡單、可靠、成本低、收率高，過程中不使用毒性有機(jī)溶劑，是一種環(huán)境友好型工藝。高純度銀杏內(nèi)酯作為有效成分制成組合物可作為銀杏內(nèi)酯藥品或保健品的各種制劑(膠囊、片劑、口服液、沖劑、散劑、針劑等)使用。
文檔編號A61P25/28GK102293790SQ20111020967
公開日2011年12月28日 申請日期2011年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月26日
發(fā)明者歐來良, 王為超 申請人:天津泰陽制藥有限公司