專利名稱：可注射的乳房修復(fù)材料、其制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種適用于整形外科及整形美容的材料，具體地說，涉及一種可注射的乳房修復(fù)材料、其制備方法及其應(yīng)用，屬于組織工程領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
乳房修復(fù)包括豐胸、乳房不對(duì)稱修復(fù)、哺乳后的乳房松弛下垂、以及乳腺切除以后的修復(fù)在臨床上有巨大的需求。當(dāng)前主要有以下幾種方法用于乳房修復(fù)。假體植入假體隆胸具有效果好，形態(tài)自然優(yōu)美，手感逼真等優(yōu)點(diǎn)；缺點(diǎn)是手術(shù)創(chuàng)傷比較大，恢復(fù)慢，硬化率高。人體免疫反應(yīng)、包膜攣縮、乳房變硬是常見的并發(fā)癥。感染、 位置不當(dāng)?shù)纫彩羌袤w植入隆胸的潛在風(fēng)險(xiǎn)。自體脂肪移植這種方法是從身體上脂肪較多堆積的部位提取活體脂肪，然后將這些脂肪注射到胸部，使胸部抬高，達(dá)到隆胸的效果。該方法的優(yōu)點(diǎn)是材料是自體組織，從理論上不存在“排異”的問題，也不存在非自體組織的并發(fā)癥問題；但脂肪容易被機(jī)體吸收， 脂肪存活率低，未存活的脂肪容易引起感染鈣化等病變。在自體脂肪移植手術(shù)中由于不能及時(shí)建立血供造成大量脂肪細(xì)胞的壞死，細(xì)胞膜破裂，脂肪滴滲漏，這是造成脂肪存活率低的主要原因。皮瓣修復(fù)這種方法適應(yīng)癥為乳房腫瘤切除術(shù)后的乳房再造，可采用對(duì)側(cè)胸三角皮瓣帶蒂移植修復(fù)、背闊肌肌皮瓣移植修復(fù)、橫形腹直肌肌皮瓣移植修復(fù)、以及游離皮瓣移植修復(fù)等手術(shù)，手術(shù)創(chuàng)傷大，對(duì)供區(qū)以及受區(qū)的選擇要求高，術(shù)后并發(fā)癥較多，恢復(fù)期長。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種可注射的乳房修復(fù)材料、其制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明的可注射的乳房修復(fù)材料，包括自體脂肪干細(xì)胞和自體脂肪顆粒，其中每 IOOml脂肪顆粒中包含脂肪干細(xì)胞的數(shù)量為IO6-IO8個(gè)。本發(fā)明的可注射的乳房修復(fù)材料的制備方法，包括下列步驟
1)從自體分離脂肪組織，從自體脂肪組織中提取脂肪干細(xì)胞；
2)將獲得的脂肪干細(xì)胞進(jìn)行純化和擴(kuò)增；
3)將培養(yǎng)擴(kuò)增后的脂肪干細(xì)胞與自體脂肪顆?；旌闲纬删鶆蚍稚⒌慕M織工程再生材料。本發(fā)明的可注射的乳房修復(fù)材料，具有用于豐胸、乳房不對(duì)稱修復(fù)、哺乳后的乳房松弛下垂、乳腺切除手術(shù)后的修復(fù)及體表凹陷性缺損的填充修復(fù)的用途。本發(fā)明具有如下技術(shù)效果
本發(fā)明中利用脂肪干細(xì)胞的多向分化潛能，脂肪干細(xì)胞在體內(nèi)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞， 從而生成毛細(xì)血管；脂肪干細(xì)胞亦分泌血管生長因子進(jìn)一步促進(jìn)毛細(xì)血管的生成。毛細(xì)血管的生成有利于為移植的脂肪顆粒提供氧和其他營養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)移植脂肪組織的存活。應(yīng)用范圍包括隆胸、乳房不對(duì)稱修復(fù)、哺乳后的乳房松弛下垂、以及乳腺切除以后的修復(fù)及凹陷填充。本發(fā)明中使用的細(xì)胞是從患者自身脂肪組織內(nèi)分離得到的自體脂肪干細(xì)胞，因而避免了倫理爭議和免疫排斥反應(yīng)?？梢圆捎贸槲ㄟM(jìn)行脂肪組織的取材，操作簡單，給患者帶來的創(chuàng)傷和痛苦小。本發(fā)明中使用的自體脂肪干細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)擴(kuò)增后與患者自身脂肪組織混合，脂肪干細(xì)胞將分化成為血管內(nèi)皮細(xì)胞生成毛細(xì)血管，并分泌血管生長因子促進(jìn)毛細(xì)血管的生成，從而大大提高移植脂肪組織的存活率。本發(fā)明中使用的含有自體脂肪干細(xì)胞的脂肪顆粒可以通過注射器注入患者體內(nèi)， 可以根據(jù)塑形需要注射入患者乳房內(nèi)除腺體外的任何部位，手術(shù)過程非常簡單，不留疤痕。 患者容易接受。


圖1為本發(fā)明中的脂肪干細(xì)胞在顯微鏡下的照片； 圖2-1為采用本發(fā)明進(jìn)行豐胸手術(shù)前的效果圖2-2為采用本發(fā)明進(jìn)行豐胸手術(shù)后6個(gè)月的效果圖； 圖3-1為采用本發(fā)明進(jìn)行乳房不對(duì)稱修復(fù)例術(shù)前的效果圖； 圖3-2為采用本發(fā)明進(jìn)行乳房不對(duì)稱修復(fù)例術(shù)后6個(gè)月的效果圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 自體脂肪干細(xì)胞的提取、純化、培養(yǎng)
(1)將獲得的脂肪組織(30毫升)內(nèi)血管等多余組織剔除后用含有抗生素的D-PBS (美國Sigma公司)沖洗2_3遍；
(2)沖洗干凈的脂肪加入2mg/ml的I型膠原酶(美國Worthington
公司)于37°C消化60-90 min，完全培養(yǎng)基(DMEM+10% FBS,均為美國Gibco公司)終止消化；
(3)200目篩網(wǎng)過濾人脂肪組織消化后的產(chǎn)物；
(4)過濾后以1500轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心10min,完全培養(yǎng)基重懸， 苔盼藍(lán)(中國國藥集團(tuán))染色后計(jì)數(shù)；
(5)在完全培養(yǎng)基中以lX105/cm2的密度將人脂肪干細(xì)胞接種在
T25的塑料培養(yǎng)瓶(美國Corning公司)中，并置于37°C、5%的二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)；
(6)待人脂肪干細(xì)胞長至85%左右時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。傳代時(shí)先移去
血清培養(yǎng)基，然后每瓶加入anl 0. 25%胰酶(Sigma，美國)室溫消化5分鐘，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓后加入血清培養(yǎng)基終止消化，收集消化得到的細(xì)胞懸液以1500轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心10 min，完全培養(yǎng)基重懸后以1 :3的比例重新接種細(xì)胞，待細(xì)胞長滿后得到第一代人脂肪干細(xì)胞。(7)人脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增按照步驟(6)的方法進(jìn)行。脂肪干細(xì)胞在顯微鏡下觀察如圖1所示。實(shí)施例2 將本發(fā)明的乳房修復(fù)材料用于豐胸
(1)患者62歲，抽取患者脂肪組織100 ml，按照實(shí)施例1進(jìn)行脂肪干細(xì)胞的提取、純化、培養(yǎng)。(2)第一次抽取脂肪組織后，經(jīng)過40天進(jìn)行第二次抽脂手術(shù)，獲得550ml脂肪組織，實(shí)驗(yàn)室中對(duì)脂肪組織進(jìn)行洗滌、低速離心、去油去水、去除纖維結(jié)締組織等處理，獲得完整的脂肪顆粒。(3)將步驟(1)中培養(yǎng)的脂肪干細(xì)胞收集后均勻混合入步驟(2)獲得的脂肪顆粒中獲得可注射復(fù)合物。(4)將步驟(3)中得到的可注射復(fù)合物由整形外科醫(yī)生通過多隧道多層次的方式注射入患者乳房的脂肪組織、乳腺后間隙、以及皮下組織中。兩側(cè)分別注射150毫升。注射手術(shù)完成后常規(guī)抗生素治療三天，術(shù)后嚴(yán)密隨訪。6個(gè)月后患者經(jīng)乳頭胸圍由術(shù)前的82cm 增大到術(shù)后的84cm。核磁共振影像學(xué)檢測患者左側(cè)乳房體積增加105毫升，右側(cè)乳房體積增加94毫升。術(shù)前術(shù)后對(duì)比照片如圖2-1和圖2-2所示，可以看見豐胸效果顯著。
實(shí)施例3 將本發(fā)明的乳房修復(fù)材料用于乳房不對(duì)稱修復(fù)
(1)患者41歲，抽取患者脂肪組織80 ml，按照實(shí)施例一進(jìn)行脂肪干細(xì)胞的提取、純化、培養(yǎng)。(2)第一次抽取脂肪組織后，經(jīng)過沈天進(jìn)行第二次抽脂手術(shù)，獲得300ml脂肪組織，實(shí)驗(yàn)室中對(duì)脂肪組織進(jìn)行洗滌、低速離心、去油去水、去除纖維結(jié)締組織等處理，獲得完整的脂肪顆粒。(3)將步驟(1)中培養(yǎng)的脂肪干細(xì)胞收集后均勻混合入步驟(2)獲得的脂肪顆粒中獲得可注射復(fù)合物。(4)將步驟(3)中得到的可注射復(fù)合物由整形外科醫(yī)生通過多隧道多層次的方式注射入患者乳房的脂肪組織、乳腺后間隙、以及皮下組織中?；颊咦髠?cè)注射50毫升，右側(cè)注射120毫升。注射手術(shù)完成后常規(guī)抗生素治療三天，術(shù)后嚴(yán)密隨訪，術(shù)后6個(gè)月觀察發(fā)現(xiàn)修復(fù)效果良好，兩側(cè)乳房對(duì)稱。核磁共振影像學(xué)檢測患者左側(cè)乳房體積增加31毫升，右側(cè)乳房體積增加87毫升?；颊咝g(shù)前術(shù)后對(duì)比照片如圖3-1和圖3-2所示，可以看見乳房修復(fù)效果很好。
權(quán)利要求
1.一種可注射的乳房修復(fù)材料，其特征在于，所說的材料包括自體脂肪干細(xì)胞和自體脂肪顆粒，其中每IOOml脂肪顆粒中包含脂肪干細(xì)胞的數(shù)量為IO6-IO8個(gè)。
2.權(quán)利要求1所述的可注射的乳房修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，包括下列步驟1)從自體分離脂肪組織，從自體脂肪組織中提取脂肪干細(xì)胞；2)將獲得的脂肪干細(xì)胞進(jìn)行純化和擴(kuò)增；3)將培養(yǎng)擴(kuò)增后的脂肪干細(xì)胞與自體脂肪顆?；旌闲纬删鶆蚍稚⒌慕M織工程再生材料。
3.權(quán)利要求1所述可注射的乳房修復(fù)材料，具有用于豐胸、乳房不對(duì)稱修復(fù)、哺乳后的乳房松弛下垂、乳腺切除手術(shù)后的修復(fù)及體表凹陷性缺損的填充修復(fù)的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種可注射的乳房修復(fù)材料，其特征在于，所說的材料包括自體脂肪干細(xì)胞和自體脂肪顆粒，其中每100ml脂肪顆粒中包含脂肪干細(xì)胞的數(shù)量為106-108個(gè)。本發(fā)明還提供了一種可注射的乳房修復(fù)材料的制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明中使用的細(xì)胞是從患者自身脂肪組織內(nèi)分離得到的自體脂肪干細(xì)胞，因而避免了倫理爭議和免疫排斥反應(yīng)。本發(fā)明中使用的含有自體脂肪干細(xì)胞的脂肪顆粒可以通過注射器注入患者體內(nèi)，可以根據(jù)塑形需要注射入患者乳房內(nèi)除腺體外的任意部位，應(yīng)用非常簡單。
文檔編號(hào)A61L27/36GK102284084SQ20111014174
公開日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月30日
發(fā)明者徐妍, 王影 申請(qǐng)人:王影