專利名稱：微波輔助提取海藻多酚的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及海藻中天然產(chǎn)物的提取，尤其是微波輔助提取海藻中多酚的方法。
背景技術(shù)：
海藻多酚是從海藻中提取出來的多酚類化合物的總稱。研究表明，海藻多酚具有抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抗氧化及化學防御等活性，具有廣闊的應用前景(中國海洋藥物雜志，2007年10月第沈卷第5期，53 59頁)。海帶多酚(kelppolyphenols，KP)是一類重要的褐藻多酚化合物，由于其生長環(huán)境獨特而具有多種生理功效，尤其作為天然食品添加劑中的抗氧化劑、防腐劑等方面具有重要的意義。此外，海藻多酚還具有抗腫瘤、抗病毒、 化學防御、除臭等生物活性。傳統(tǒng)上，海藻尤其是海帶綜合利用產(chǎn)品主要是褐藻膠、甘露醇、 碘和氯化鉀等。近年來，隨著對褐藻的次級代謝產(chǎn)物——褐藻多酚化合物(phlorotarmins) 研究的深入，其獨特的生物活性日益受到人們的關(guān)注。目前海藻多酚的提取方法主要有極性溶劑提取法、超臨界提取法等。但是，現(xiàn)有技術(shù)中并無系統(tǒng)的研究海藻多酚提取方法的報道，因此需要開發(fā)針對大量樣品處理的海藻多酚提取的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種高效快速提取海藻中多酚類化合物的方法。本發(fā)明所述的微波輔助提取海藻多酚的方法包括微波輔助的的溶劑提取的步驟， 即在溶劑提取過程中使用微波處理原料與溶劑的混合物，具體是將原料與溶劑的混合物置于頻率為M50Mhz、功率為500 2500瓦的微波場中提取，所述溶劑是按體積比含有0. 5 1 %甘油的醇-丙酮-水混合溶劑。上述本發(fā)明的方法中，提取的微波功率優(yōu)1500 2000瓦。上述本發(fā)明的方法中，所采用的溶劑系統(tǒng)以醇-丙酮-水混合溶劑為基礎(chǔ)，它是Cl 4的低碳醇、丙酮和水按體積比2 1 2 1 8的混合物，優(yōu)選按照體積比 2:1: 3 6所組成的混合溶劑。其中的低碳醇優(yōu)選甲醇或乙醇，最優(yōu)選乙醇。在上述本發(fā)明的微波輔助提取海藻多酚的方法中，另一優(yōu)選的技術(shù)方案是在所述的溶劑提取步驟前加入原料的預處理步驟，具體方法是將粉碎后的海藻原料與醇-丙酮-水混合溶劑充分混合后置于頻率為M50Mhz、功率為500 2500瓦的微波場中處理 30 60秒；該預處理的微波功率優(yōu)選1000 1500瓦。本發(fā)明的最優(yōu)選方案為①采集海藻原料，干燥粉碎；優(yōu)選處理方案是將海藻原料干燥至含水量50 70% 后粉碎成直徑不超過5mm的碎片；②預處理向上述處理后的海藻原料中加入醇-丙酮-水混合溶劑，Mm Nmiim m= 1 5 10，均勻混合后置于頻率為M50Mhz、功率為1000 1500瓦的微波場中處理 30 60秒；其中的醇-丙酮-水混合溶劑是(卜4的低碳醇、丙酮和水按體積比2 1 2 1 8的混合物；優(yōu)選體積比2 1 3 6;③向步驟②的混合物中加入甘油，均勻混合，加入的甘油體積為醇-丙酮-水混合溶劑體積的0.5 ；④將步驟③的混合物置于頻率為M50Mhz、功率為1500 2000瓦的微波場中提取，處理時間為10 20分鐘，分1 4次，相鄰兩次處理間隔10 15分鐘；⑤過濾，濾液冷凍干燥得海藻多酚粗產(chǎn)品。本發(fā)明所述的上述提取海藻多酚的方法中，微波預處理或微波提取的步驟采用本發(fā)明所述的上述方法能實現(xiàn)對海藻多酚快速高效的提取，并且適用于大量樣品的處理。
具體實施例方式下面的實施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。如無特殊說明，本發(fā)明中采用沒食子酸(Gallic Acid, Sigma)為標準平，采用 Folin-Ciocalteu法檢測多酚含量，具體檢測方法參見“Folin-Ciocalteu法測定葡萄和葡萄酒中的總多酚”一文(中國南方果樹，2007年第36卷第6期，86 87頁)。實施例1①原料的采集與處理9月于大連市黑石礁海區(qū)潮間帶采集海帶(褐藻)，自來水清洗干凈后切成2 3cm見方小塊兒，40士2°C烘干至含水量約60%，然后用粉碎機打碎成直徑不超過5mm的碎片備用。②預處理取20g上述處理后的海藻原料，置于容積500ml的聚四氟乙烯反應釜內(nèi)，加入200ml乙醇-丙酮-水混合溶劑，其中、醇V丙酮V水=2 2 1 ；攪拌均勻后將反應釜置于微波頻率為M50Mhz的微波爐中，設(shè)定輸出功率1000瓦，處理60秒后室溫放置2小時；③向步驟②的混合物中滴加2ml甘油，充分攪拌至均勻混合；④將步驟③的混合物置于頻率為M50Mhz的微波爐中，設(shè)定輸出功率2000瓦，分 4次提取，每次3min，相鄰兩次處理間隔10 15分鐘；⑤反應產(chǎn)物冷卻至室溫，過濾，冷凍干燥處理得海藻多酚粗產(chǎn)品。產(chǎn)物檢測取步驟⑤過濾后的濾液直接進行Folin-Ciocalteu檢測多酚含量，經(jīng)換算，多酚提取率2. 34%。實施例2按照實施例1的方法采集處理樣品，然后進行微波預處理取20g海藻原料，置于容積500ml的聚四氟乙烯反應釜內(nèi)，加入100ml乙醇-丙酮-水混合溶劑，其中V _ V 酬V7k= 2 1 3;攪拌均勻后將反應釜置于微波頻率的微波爐中，設(shè)定輸出功率1500瓦，處理30秒后室溫放置Ih ；③向步驟②的混合物中滴加Iml甘油，充分攪拌至均勻混合；④將步驟③的混合物置于頻率為M50Mhz的微波爐中，設(shè)定輸出功率1500瓦，分 4次提取，每次3min，相鄰兩次處理間隔10 15分鐘；⑤反應產(chǎn)物冷卻至室溫，過濾，冷凍干燥處理得海藻多酚粗產(chǎn)品。
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產(chǎn)物檢測同實施例1，測得多酚提取率2. 07%。實施例3按照實施例1的方法采集處理樣品，然后進行微波預處理取20g海藻原料，置于容積500ml的聚四氟乙烯反應釜內(nèi)，加入200ml乙醇-丙酮-水混合溶劑，其中V _ V 酬V7k= 2 1 6;攪拌均勻后將反應釜置于微波頻率的微波爐中，設(shè)定輸出功率1500瓦，處理60秒后室溫放置濁；③向步驟②的混合物中滴加Iml甘油，充分攪拌至均勻混合；④將步驟③的混合物置于頻率為M50Mhz的微波爐中，設(shè)定輸出功率2000瓦，分 4次提取，每次3min，相鄰兩次處理間隔10 15分鐘；⑤反應產(chǎn)物冷卻至室溫，過濾，冷凍干燥處理得海藻多酚粗產(chǎn)品。產(chǎn)物檢測同實施例1，測得多酚提取率2.沈％。對比實施例3組樣品A、B和C，分別按照如下方法處理及檢測A 按照實施例1的方法處理樣品、提取及檢測；B:按照實施例1的方法采集處理樣品，取20g上述處理后的海藻原料，置于容積 500ml的聚四氟乙烯反應釜內(nèi)，加入200ml乙醇-丙酮-水混合溶劑，其中Vie V_ V *= 2 2 1;并滴加2ml甘油，充分攪拌至均勻混合；按照實施例1步驟④的參數(shù)進行提?。籆 其余操作均按照實施例1的方法，但刪除步驟③滴加甘油的操作；三組樣品產(chǎn)物檢測方法同實施例1，測得三組樣品多酚的提取率分別是A :234%， B 187%, C :162%o
權(quán)利要求
1.一種微波輔助提取海藻多酚的方法，包括溶劑提取的步驟，其特征在于溶劑提取過程中使用微波處理原料與溶劑的混合物，具體是將原料與溶劑的混合物置于頻率為 M50Mhz、功率為500 2500瓦的微波場中提取，所述溶劑是按體積比含有0. 5 甘油的醇-丙酮-水混合溶劑。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的微波功率為1500 2000瓦。
3.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述溶劑中的醇-丙酮-水混合溶劑是C1 4的低碳醇、丙酮和水按體積比2 1 2 1 8的混合物。
4.權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述的低碳醇、丙酮和水的體積比為 2 1 3 6。
5.權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述的低碳醇是甲醇或乙醇。
6.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的溶劑提取步驟前還有原料的預處理步驟，具體方法是將粉碎后的海藻原料與醇-丙酮-水混合溶劑充分混合后置于頻率為 M50Mhz、功率為500 2500瓦的微波場中處理30 60秒。
7.權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述的預處理微波功率為1000 1500瓦。
8.權(quán)利要求1所述的方法，包括如下步驟①采集海藻原料，干燥粉碎；②預處理向上述處理后的海藻原料中加入醇-丙酮-水混合溶劑，Mgfi V混合溶劑= 1 5 10，均勻混合后置于頻率為M50Mhz、功率為1000 1500瓦的微波場中處理30 60秒；其中的醇-丙酮-水混合溶劑是(卜4的低碳醇、丙酮和水按體積比2 1 2 1 8的混合物；③向步驟②的混合物中加入甘油，均勻混合，加入的甘油體積為醇-丙酮-水混合溶劑體積的0.5 ；④將步驟③的混合物置于頻率為M50Mhz、功率為1500 2000瓦的微波場中提取，處理時間為10 20分鐘，分1 4次，相鄰兩次處理間隔10 15分鐘；⑤過濾，濾液冷凍干燥得海藻多酚粗產(chǎn)品。
9.權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于步驟①的海藻原料處理方法為干燥至含水量 50 70%后粉碎成直徑不超過5mm的碎片。
全文摘要
一種微波輔助提取海藻多酚的方法，該方法使用溶劑提取，溶劑提取過程中使用微波處理原料與溶劑的混合物，具體是將原料與溶劑的混合物置于頻率為2450Mhz、功率為500～2500瓦的微波場中提取，所述溶劑是按體積比含有0.5～1％甘油的醇-丙酮-水混合溶劑。采用本發(fā)明所述的上述方法能實現(xiàn)對海藻多酚快速高效的提取，并且適用于大量樣品的處理。
文檔編號A61P39/06GK102166230SQ201110096248
公開日2011年8月31日 申請日期2011年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月14日
發(fā)明者姜健 申請人:大連民族學院