專利名稱：來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞用于老化皮膚再生的用途的制作方法
來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞用于老化皮
膚再生的用途本發(fā)明涉及來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞用于為了美容目的和為了預(yù)防皮膚疾病使老化但健康且未損傷皮膚再生的用途。此外，本發(fā)明涉及用于老化皮膚再生的美容方法。目前，年輕漂亮的皮膚已經(jīng)日益地得到社會(huì)心理的中肯，并且由于該原因，大量的被認(rèn)為能對(duì)抗或逆轉(zhuǎn)皮膚老化的局部制劑被投放市場(chǎng)。然而，但是在很大程度上缺乏任何持續(xù)效果的合理醫(yī)學(xué)科學(xué)證據(jù)。一方面，皮膚老化取決于年齡，個(gè)體差異很大(內(nèi)在的或者年代性老化)，并且另一方面依賴于外部損傷因素，特別是累積的陽(yáng)光(UV)-暴露、營(yíng)養(yǎng)不良、藥物濫用、機(jī)械性損耗，還有尼古丁濫用(外在老化)。老化皮膚本身表現(xiàn)出表皮以及真皮變薄(萎縮)，皺紋形成增加和喪失彈性(真皮的彈性組織變性)，皮膚干燥和喪失膨壓以及可能的皮膚色素沉著不規(guī)則(例如目光斑)。 皮膚的終生再生(穩(wěn)態(tài))一方面基于通過(guò)最底層(基底層)中角質(zhì)形成細(xì)胞的干細(xì)胞分裂連續(xù)更換表皮，當(dāng)上行至角質(zhì)外層(角質(zhì)層)時(shí)隨后分化成角質(zhì)盤。在老化皮膚中該過(guò)程是失調(diào)的，由此導(dǎo)致萎縮。如果角質(zhì)形成細(xì)胞的分化極大地機(jī)能異常，退化會(huì)變得有可能，即發(fā)展成所謂的白色皮膚癌(鱗狀，基底細(xì)胞癌)或者癌前病變(光線性角化病)。這主要是長(zhǎng)期陽(yáng)光暴露皮膚區(qū)域的情況，這強(qiáng)調(diào)了 UV-輻射的觸發(fā)相關(guān)性。因此，不僅僅因?yàn)槊廊菰颍糜诶匣つw再生的可持續(xù)治療方法是需要的。具有完全功能性的表皮對(duì)于保護(hù)真皮下面的結(jié)構(gòu)和功能也是重要的，因?yàn)槠つw的該兩個(gè)區(qū)室的細(xì)胞系統(tǒng)(表皮的角質(zhì)形成細(xì)胞和真皮的成纖維細(xì)胞或血管內(nèi)皮)通過(guò)可溶性因子(例如細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子)彼此通信。因此，具有完全功能性的表皮還可有助于真皮的年齡相關(guān)性改變一即帶有具有彈性組織變性和血管擴(kuò)張(毛細(xì)管擴(kuò)張)的真皮萎縮一的再生。對(duì)于表皮穩(wěn)態(tài)具有決定性的重要的角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞或者干細(xì)胞位于上皮毛根鞘(外層根鞘0RS)內(nèi)，即在較下層的真皮內(nèi)，并且因此，被保護(hù)不被有害的UV-輻射 (特別有害的UV-B僅僅穿透表皮)。這些ORS細(xì)胞可在生長(zhǎng)期從拔取的頭發(fā)分離并且還可以在實(shí)驗(yàn)室中增殖。皮膚的色素再沉著已知應(yīng)用從自體毛根鞘衍生的ORS干細(xì)胞或者黑素細(xì)胞前體細(xì)胞(Vanscheidt 和 Hunziker，Dermatology，904，2009，WO 2009/049734)。此外，慢性創(chuàng)傷用來(lái)自自體毛根鞘的表皮角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞處理(EpiDex , Euroderm ；Tausche φ, Wound Repair and Regeneration, 11(4), 248-252, 2003, EP 1 198 557 Bi, EP 1 326 654 Bi)。除了慢性創(chuàng)傷處理，還公開(kāi)了用角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞處理其它皮膚缺陷，例如手術(shù)去除皮膚腫瘤或者紋身后或者由于損傷等之后進(jìn)行處理(EP 1 198 557B1, EP 1 702 979 Al)。表皮神經(jīng)嵴干細(xì)胞(EPI-NCSC)是多能干細(xì)胞，它衍生自胚胎神經(jīng)嵴并且位于毛根鞘內(nèi)。這些干細(xì)胞永久自我更新并且能夠分化成神經(jīng)嵴的所有重要的細(xì)胞衍生物，包括神經(jīng)元、神經(jīng)支持細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、骨/軟骨細(xì)胞和黑素細(xì)胞。這些干細(xì)胞甚至可以產(chǎn)生中胚層代表性的細(xì)胞類型。在脊柱損傷的小鼠模型中表明，這些干細(xì)胞可以與成體骨骼肌纖維融合，所引入的細(xì)胞核是有功能的并且成體骨骼肌是干細(xì)胞的細(xì)胞核長(zhǎng)期存活的適宜環(huán)境(Sieber-Blum 和 Hu，Stem Cell Rev. , 4 (4), 256-60, 2008) 作者從在小鼠骨骼肌中的這些研究得出結(jié)論，此類多能干細(xì)胞可提供有吸引力的特性用于未來(lái)的細(xì)胞替代療法和 /或生物醫(yī)學(xué)開(kāi)發(fā)。本發(fā)明的目的是使老化但健康且未損傷皮膚再生。該目的通過(guò)使用來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞用于老化但健康且未損傷皮膚再生而得以解決。術(shù)語(yǔ)“健康且未損傷皮膚”描述無(wú)缺陷的皮膚，特別是沒(méi)有創(chuàng)傷以及沒(méi)有炎癥性、 感染性或者變性皮膚疾病、良性或惡性皮膚腫瘤或者其前體(例如光線性角化病、惡性雀斑樣痣)、術(shù)后皮膚轉(zhuǎn)化例如皮膚移植后皮膚轉(zhuǎn)化等。術(shù)語(yǔ)“老化皮膚”在本發(fā)明上下文中指優(yōu)選具有至少一種下列老化癥狀的內(nèi)在和/ 或外在老化皮膚變薄(萎縮)、細(xì)皺紋形成、喪失彈性(彈性組織變性)、在低水平創(chuàng)傷后出血傾向增加的易損性以及可能的色素沉著不規(guī)則，并且還具有深皺紋或皺縮，具有干燥的、可能的魚鱗/角化皮膚表面、降低的皮脂腺活性、降低的皮膚膨壓、降低的皮膚脂肪含量、傾向于破裂和假瘢痕、小血管擴(kuò)張(毛細(xì)管擴(kuò)張)、再生能力的喪失以及與此相關(guān)的傷口愈合功能障礙。這些表現(xiàn)形式源于調(diào)節(jié)皮膚細(xì)胞(特別是角質(zhì)形成細(xì)胞和成纖維細(xì)胞) 增殖和分化并且由此調(diào)節(jié)皮膚穩(wěn)態(tài)的轉(zhuǎn)錄因子或者腫瘤抑制基因(例如NF-K B、C-MyC, P53)活性失調(diào)。例如，對(duì)于NF-kB有可能表現(xiàn)出，在年老的小鼠中，阻斷NF-KB弓丨起了處于兩周內(nèi)的生物學(xué)上更年輕的皮膚病癥達(dá)到有限的時(shí)間段。根據(jù)本發(fā)明，老化但健康且未損傷皮膚的再生除了具有美容方面的優(yōu)勢(shì)外還具有醫(yī)學(xué)優(yōu)勢(shì)。引入到皮膚內(nèi)的角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞不僅使表皮變厚成為完全分化的角質(zhì)形成細(xì)胞，而且還有規(guī)則地分裂并由此隨著時(shí)間的推移替代分裂更慢的“老”細(xì)胞以及變性的細(xì)胞。此外，它們通過(guò)分泌細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子正面影響在它們直接環(huán)境中的細(xì)胞(成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、黑素細(xì)胞)，這作為整體而言從長(zhǎng)遠(yuǎn)看改善了皮膚的健康和老化狀況，由此減少了皺紋形成(膠原纖維的再生)，增加了彈性(彈性纖維的再生)和降低了可能存在的色素沉著不規(guī)則(黑色素產(chǎn)生和分布的調(diào)節(jié))。通過(guò)影響皮膚的微循環(huán)改善了皮膚的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，這例如還增加了營(yíng)養(yǎng)狀況和皮脂腺活性并且由此皮膚的油狀況正?；Ｒ虼?，根據(jù)本發(fā)明的老化但健康且未損傷皮膚的再生不僅包括美容性再生，而且還包括皮膚的醫(yī)學(xué)預(yù)防性再生。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞用于老化但健康未損傷人和哺乳動(dòng)物皮膚再生的專用美容用途。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞用于預(yù)防人和哺乳動(dòng)物皮膚疾病的用途，所述皮膚疾病優(yōu)選選自基于皮膚內(nèi)聚、皮膚穩(wěn)態(tài)、皮膚分化和/或皮膚屏障作用的遺傳性或獲得性機(jī)能障礙的皮膚疾病，優(yōu)選大皰性表皮松解、著色性干皮病、早老、魚鱗病、手術(shù)干預(yù)后和X-射線照射后狀態(tài)以及外源性誘導(dǎo)的萎縮或增生，特別是增生性瘢痕和瘢痕瘤，優(yōu)選局部或全身皮質(zhì)類固醇誘導(dǎo)的萎縮。因此，本發(fā)明還涉及所述細(xì)胞用于制備用于預(yù)防皮膚疾病的藥物的用途。
可以使用自體以及同種異體和異種細(xì)胞，而自體細(xì)胞對(duì)于避免免疫反應(yīng)是優(yōu)選的。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明涉及用于老化但健康且未損傷皮膚再生的美容方法， 包括在老化但健康且未損傷皮膚上應(yīng)用來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞的步驟。對(duì)于老化皮膚的處理，采用優(yōu)選來(lái)自患者本身毛根鞘的干細(xì)胞或者優(yōu)選從它們衍生的角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞，即所謂的自體角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞。來(lái)自毛根鞘的角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞包含多能干細(xì)胞，其在一生中都再生上皮皮膚結(jié)構(gòu)。因?yàn)樵撛?，?duì)于年老的供體它們也具有高的增殖潛能。這些干細(xì)胞或者前體細(xì)胞不僅可以非創(chuàng)傷性制備，而且還可以從任何幾乎不長(zhǎng)頭發(fā)供體重復(fù)制備，并且無(wú)需皮膚活組織檢查。因此，這些細(xì)胞的應(yīng)用使得可以幾乎無(wú)創(chuàng)傷可能性地持續(xù)再生老化皮膚，特別是表皮。來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞以及它們的制備、分離、增殖和儲(chǔ)存是皮膚學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員十分熟悉的。優(yōu)選地，用于開(kāi)展本發(fā)明的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞從毛根鞘，特別是生長(zhǎng)期(毛發(fā)生長(zhǎng)初期階段)內(nèi)的外部上皮毛根鞘制備。這些細(xì)胞的制備是十分簡(jiǎn)單的，無(wú)痛的并且不具有任何健康風(fēng)險(xiǎn)。例如，用于制備細(xì)胞的毛發(fā)可以通過(guò)拔取終毛得到，特別是頭皮的生長(zhǎng)初期毛發(fā)。當(dāng)毛發(fā)來(lái)源于待處理的人或哺乳動(dòng)物時(shí)是有優(yōu)勢(shì)的。優(yōu)選地，術(shù)語(yǔ)“制備”還包括至少部分分離和/或富集以及增殖或?qū)ε囵B(yǎng)細(xì)胞的選擇。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，例如通過(guò)濃度0.01%至10%，優(yōu)選0.025%至0. 和更加優(yōu)選大約0. 05%胰蛋白酶的胰蛋白酶溶液，任選與EDTA —起并且優(yōu)選在PBS中，于優(yōu)選大約 20°C或者更優(yōu)選37°C下優(yōu)選在5至60分鐘、更優(yōu)選10至15分鐘內(nèi)，從所去除毛發(fā)的毛根鞘酶促釋放所述細(xì)胞。該類型的酶促去除對(duì)于待制備的細(xì)胞是特別溫和的。同樣，其它的酶系統(tǒng)，例如分散酶可以采用。用于制備的進(jìn)一步可能的步驟包括通過(guò)加入血清和Ca/Mg 終止酶促釋放，將懸浮液離心和將包含細(xì)胞的沉淀物懸浮于/引入到適宜在皮膚上應(yīng)用的溶液中或者生物可降解的或者非生物可降解的載體基質(zhì)中。優(yōu)選的應(yīng)用是將包含細(xì)胞的沉淀物懸浮于包含凝血酶的溶液中，這使得可以以薄層將所應(yīng)用的細(xì)胞立即固定在用血纖蛋白原預(yù)處理的皮膚上，并且因此能夠在任何身體區(qū)域的皮膚上同質(zhì)非閉塞性應(yīng)用。優(yōu)選地， 對(duì)于本發(fā)明的方法，采用來(lái)自毛根鞘的自體干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞。任選地，可將細(xì)胞作為懸浮液或者沉淀物或者任選作為細(xì)胞提取物使用。當(dāng)這樣做時(shí)，它們可以引入到生物相容性溶液中或者生物相容性載體中。應(yīng)用步驟優(yōu)選地通過(guò)每一待處理皮膚區(qū)域具有IO2至109、更優(yōu)選具有IO3至IO5個(gè)細(xì)胞/cm2的懸浮液，通過(guò)例如注射器或者作為噴霧劑或者以生物相容性載體或者非織造網(wǎng)方式給與而開(kāi)展。這可以使用生物相容性溶液(例如PBS、細(xì)胞培養(yǎng)基、凝血酶)或者通過(guò)生物相容性生物載體(例如血纖蛋白、透明質(zhì)酸、膠原)或合成載體(例如聚氨基甲酸酯、 羧基甲基纖維素、聚賴氨酸、納米微粒)的方式開(kāi)展。細(xì)胞可以作為活的能增殖的或者生長(zhǎng)停滯的細(xì)胞(例如通過(guò)用絲裂霉素C處理或者X-射線照射的手段)使用或者還可以作為細(xì)胞提取物(例如凍干物、超聲處理物、刺激物)使用。此外，可以采用在不同的體外培養(yǎng)條件下(例如可變的PO2-和/或pC02-濃度，可變的培養(yǎng)基，可變的基質(zhì)底物，可變的與細(xì)胞直接接觸的或者在兩室培養(yǎng)系統(tǒng)中分開(kāi)的飼養(yǎng)層細(xì)胞，深層培養(yǎng)或者器官型培養(yǎng))從這些細(xì)胞衍生的細(xì)胞。在本發(fā)明上下文中，術(shù)語(yǔ)“應(yīng)用”包括將細(xì)胞簡(jiǎn)單地應(yīng)用在皮膚上。優(yōu)選地，為了此目的，例如通過(guò)血纖蛋白粘附，將細(xì)胞固定在皮膚上，并且用通常的包裹繃帶保護(hù)。然而，任何其他適宜形式的應(yīng)用是可以的，例如通過(guò)將細(xì)胞整合在生物或合成基質(zhì)中并且隨后應(yīng)用它們。此外，細(xì)胞可以優(yōu)選地直接引入到皮膚內(nèi)。為了此目的，待處理的皮膚在應(yīng)用前被物理性和/或機(jī)械性去表皮，并且這優(yōu)選地通過(guò)皮膚磨削術(shù)、表面應(yīng)用激光(例如 Fraxel re:pair CO2-激光，Soltamedical，美國(guó))、或者表面針穿刺(例如Dermaroller , Skintes, CH)實(shí)現(xiàn)，因此產(chǎn)生了平坦的或者優(yōu)選單點(diǎn)，即表皮中的格子型點(diǎn)陣缺陷，這使得在例如經(jīng)表皮應(yīng)用中可以將應(yīng)用的細(xì)胞穿透到皮膚內(nèi)。通過(guò)在該消除過(guò)程中包括上真皮層，還存在真皮刺激和真皮再生。在本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案中，在應(yīng)用細(xì)胞前，通過(guò)表面皮膚磨削術(shù)、應(yīng)用激光和/或表面針穿刺的方法將表皮物理性和/或機(jī)械性剝脫。在更加優(yōu)選的實(shí)施方案中，在應(yīng)用細(xì)胞前，通過(guò)Fraxel設(shè)備激光和/或滾輪磨皮機(jī)，以具有可變穿透深度的部分/點(diǎn)陣的去表皮的形式，將表皮剝脫。在應(yīng)用或者引入過(guò)程中，來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞優(yōu)選以提取物、懸浮液、溶液或包含于生物可容性生物或合成載體中的形式作為富集或者分離的細(xì)胞存在。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞可以通過(guò)培養(yǎng)體外增殖和/或通過(guò)專門的培養(yǎng)條件(例如可變的PO2-和/或pC02-濃度， 可變的培養(yǎng)基，可變的基質(zhì)底物，可變的直接細(xì)胞接觸的或者兩室培養(yǎng)系統(tǒng)內(nèi)分開(kāi)的飼養(yǎng)層細(xì)胞，深層培養(yǎng)或者器官型培養(yǎng)等)的方式根據(jù)有利的標(biāo)準(zhǔn)，例如諸如干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞含量，干細(xì)胞潛能(單能對(duì)多能)，增殖能力，分化潛能，存活能力等選擇。在本發(fā)明上下文中，“選擇”意思是指有意地選擇特定干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞或者具有有益特性的伴隨細(xì)胞(在飼養(yǎng)層細(xì)胞環(huán)境下沒(méi)有干細(xì)胞或者角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞具有諸如交互刺激干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞增殖或分化的功能)。在應(yīng)用后，細(xì)胞處理的皮膚優(yōu)選包裹性覆蓋，特別是當(dāng)皮膚被機(jī)械性預(yù)處理并且仍然部分“開(kāi)放”時(shí)，以便保護(hù)皮膚以及所應(yīng)用的細(xì)胞不被干燥、感染和機(jī)械性拉緊并且為了創(chuàng)造細(xì)胞生長(zhǎng)的最佳環(huán)境。為了防止自體、特別是同種異體或者異種細(xì)胞的免疫反應(yīng)，優(yōu)選施用至少一種抑制(自身)免疫反應(yīng)的活性劑，優(yōu)選局部或全身皮質(zhì)類固醇和/或局部鈣調(diào)磷酸酶-抑制劑。還進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，額外應(yīng)用黑素細(xì)胞前體細(xì)胞對(duì)老化皮膚的結(jié)構(gòu)和生理學(xué)具有有利的作用。因此，在優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明方法涉及特別是在應(yīng)用干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞之前、之后或者優(yōu)選同時(shí)，向皮膚額外應(yīng)用黑素細(xì)胞前體細(xì)胞。最優(yōu)選的是在制備來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞的過(guò)程中不分離黑素細(xì)胞前體細(xì)胞。除了干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞的其它前體細(xì)胞和任選的黑素細(xì)胞前體細(xì)胞，根據(jù)本發(fā)明使用的細(xì)胞可以優(yōu)選包括毛根鞘中包含的其他細(xì)胞。此外，本發(fā)明涉及用于在具有老化但健康且未損傷皮膚的哺乳動(dòng)物和人中預(yù)防皮膚疾病的上述方法，特別是用于預(yù)防選自基于皮膚內(nèi)聚、皮膚穩(wěn)態(tài)、皮膚分化和/或皮膚屏障作用的遺傳性或獲得性機(jī)能障礙的皮膚疾病的皮膚疾病，優(yōu)選大皰性表皮松解、著色性干皮病、早老、魚鱗病、手術(shù)干預(yù)后和χ-射線照射后狀態(tài)和外源性誘導(dǎo)的萎縮或增生，特別是增生性瘢痕和瘢痕瘤，優(yōu)選局部或全身皮質(zhì)類固醇誘導(dǎo)的萎縮。該方法的優(yōu)選實(shí)施方案可從上述美容方法類推得到。本發(fā)明將通過(guò)下列示例性應(yīng)用的方式舉例說(shuō)明。 實(shí)施例從具有特征在于不規(guī)則表皮萎縮、細(xì)皺紋形成、頰毛細(xì)管擴(kuò)張、干燥和皮膚張力降低的強(qiáng)UV-老化面部皮膚的50歲婦女的頭皮拔取50根生長(zhǎng)初期毛發(fā)，分離毛根并將它們?cè)谝鹊鞍酌溉芤?PBS中的0.05%胰蛋白酶/0.02% EDTA，無(wú)Ca/Mg)中于37 °C下溫育10 分鐘。通過(guò)加入含Ca/Mg和20%人AB血清的PBS使胰蛋白酶失活后，通過(guò)顯微鏡證實(shí)從毛干毛根鞘釋放所有上皮細(xì)胞。在經(jīng)過(guò)細(xì)胞篩和隨后的離心(1200rpm，10分鐘，室溫)后，將分離的細(xì)胞置于含Ca/Mg和5%葡萄糖的PBS中，并且滴加應(yīng)用于前額和頰的區(qū)域(0. Iml 每5cm2，相當(dāng)于 5xl03個(gè)細(xì)胞/cm2)，前額和頰的區(qū)域用飛梭雷射CO2-激光預(yù)處理(網(wǎng)格樣磨削 20%的所處理表皮面積直至上真皮，穿透深度 100 μ m)。隨后用現(xiàn)代的創(chuàng)傷繃帶包裹性覆蓋所處理區(qū)域總共一周。三天后第一次更換繃帶。之后，所處理的皮膚在早晨用> 50因子的防曬霜處理并且在晚上用護(hù)理洗劑處理。在3個(gè)月內(nèi)存在令人印象深刻的皮膚表面光滑化，其中皮膚干燥減輕，張力增加和表皮結(jié)構(gòu)均一化，并且頰部毛細(xì)管擴(kuò)張稍微退化，并且總體上對(duì)于患者具有非常滿意的美容結(jié)果。
權(quán)利要求
1.來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞用于老化但健康且未損傷皮膚再生的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，用于人和哺乳動(dòng)物皮膚的美容性處理。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，用于預(yù)防人和哺乳動(dòng)物中的皮膚疾病，所述皮膚疾病優(yōu)選選自基于皮膚內(nèi)聚、皮膚穩(wěn)態(tài)、皮膚分化和/或皮膚屏障作用的遺傳或獲得性機(jī)能障礙的皮膚疾病，優(yōu)選大皰性表皮松解、著色性干皮病、早老、魚鱗病、手術(shù)干預(yù)后和χ-射線照射后狀態(tài)和外源性誘導(dǎo)的萎縮或增生，特別是增生性瘢痕和瘢痕瘤，優(yōu)選局部或全身皮質(zhì)類固醇誘導(dǎo)的萎縮。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的用途，用于制備藥物。
5.用于老化但健康且未損傷皮膚再生的美容方法，包括在老化但健康且未損傷皮膚上應(yīng)用來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞的步驟。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞是自體細(xì)胞。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6的方法，其中在應(yīng)用細(xì)胞之前優(yōu)選通過(guò)表面皮膚磨削術(shù)、應(yīng)用激光和/或表面針穿刺將表皮物理性和/或機(jī)械性剝脫。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中在應(yīng)用細(xì)胞之前，通過(guò)Fraxel設(shè)備激光和/或滾輪磨皮機(jī)，以具有可變穿透深度的部分/點(diǎn)陣去表皮的形式，將表皮剝脫。
9.根據(jù)權(quán)利要求5至8任一項(xiàng)的方法，其中細(xì)胞是作為提取物、懸浮液、溶液或包含于生物可容性生物載體或合成載體中的富集的或分離的細(xì)胞形式。
10.根據(jù)權(quán)利要求5至8任一項(xiàng)的方法，其中來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞通過(guò)體外培養(yǎng)繁殖和/或選擇。
11.根據(jù)權(quán)利要求5至10任一項(xiàng)的方法，其中在應(yīng)用細(xì)胞之前、期間和/或之后，施用至少一種抑制(自身)免疫反應(yīng)的活性劑，優(yōu)選局部或全身性皮質(zhì)類固醇和/或局部鈣調(diào)磷酸酶抑制劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求5至11任一項(xiàng)的方法，其中向皮膚額外應(yīng)用黑素細(xì)胞前體細(xì)胞。
13.根據(jù)權(quán)利要求5至12任一項(xiàng)的方法，其中除了來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞和任選的黑素細(xì)胞前體細(xì)胞，所述細(xì)胞包括毛根鞘中包含的另外的細(xì)胞， 優(yōu)選其它前體細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明涉及來(lái)自毛根鞘的干細(xì)胞和/或角質(zhì)形成細(xì)胞前體細(xì)胞用于為了美容目的和為了預(yù)防皮膚疾病使老化但健康且未損傷皮膚再生的用途。此外，本發(fā)明涉及用于老化皮膚再生的美容方法。
文檔編號(hào)A61K35/36GK102458424SQ201080024813
公開(kāi)日2012年5月16日 申請(qǐng)日期2010年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月5日
發(fā)明者T·亨齊克 申請(qǐng)人:思親瑞海爾有限公司