專利名稱：一種冬凌草甲素類成分干粉吸入劑及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種冬凌草甲素類成分干粉吸入劑及其制備方法和用途，屬于醫(yī)藥技 術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
冬凌草，又名冰凌草(Rabdosia rubescens (Hamst))，系唇形科香茶菜屬植物，味 甘苦，性微寒。全草為民間常用草藥，具有清熱解毒、消炎止痛、健胃活血等功效。現(xiàn)代藥理 學(xué)、毒理學(xué)研究表明，該植物抗腫瘤作用良好，毒性不明顯，被譽為“紫杉醇第二”。從冬凌草 葉的提取物中分離出五種二萜類化合物，即冬凌草甲、乙、丙、丁及戊素，為其主要抗癌活性 成分，對食管癌、肺癌、白血病等具有很好的治療效果。目前臨床用藥主要有冬凌草片劑、膠 囊劑、糖漿劑、注射劑及粉針劑等傳統(tǒng)劑型，但是冬凌草甲素等抗癌成分在水中溶解度很小 且生物半衰期短等不足限制了其在臨床中的應(yīng)用。經(jīng)口腔給藥的吸入劑有很多優(yōu)點藥物經(jīng)吸入可以快速沉降在食管、氣管和肺部， 能避免或減少身體其他部位的毒副作用，肺部吸收面積大，膜通透性高，血流豐富，藥物吸 收迅速，無肝臟首過效應(yīng)，有利于提高藥物的生物利用度和在肺部的藥物濃度，而且肺部 給藥可用于肺部疾病的治療，目前已經(jīng)有很多肺部治療藥物的吸入劑上市。干粉吸入劑 (drypowderinhalers, DPIs)不使用拋射劑和溶劑，依靠氣流使藥物粉末霧化，進(jìn)而使藥物 粉末傳遞到肺部，具有應(yīng)用方便、吸收迅速、靶向定位的特點，是一種新型給藥系統(tǒng)。目前冬 凌草甲素類成分干粉吸入劑的研究未見報道。此外目前已上市的干粉吸入劑一般以乳糖為輔料載體，然而乳糖中的雜蛋白有可 能引起嚴(yán)重的過敏反應(yīng)，因此亟需開發(fā)非乳糖載體的干粉吸入制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種冬凌草甲素類成分干粉吸入劑及其制備方法。本發(fā)明的 另一個目的是提供本發(fā)明所述干粉吸入劑在制備治療食管癌、肺部腫瘤和白血病藥物中的應(yīng)用。針對上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案—種冬凌草甲素類成分的干粉吸入劑，其特征在于它是由冬凌草甲素類成分與藥 學(xué)上可接受的輔料組成的藥物組合物，通過口腔吸入給藥。所述的冬凌草甲素類成分由冬凌草甲素、冬凌草乙素、冬凌草丙素、冬凌草丁素、 冬凌草戊素中的一種或多種組成。冬凌草甲素類成分與所述的輔料的質(zhì)量比為1 0.01-1 100，優(yōu)選為 1 0.1-1 50。所述的干粉吸入劑，其特征在于粉末的粒徑(以D5tl計)在0. 1-1000微米之間，優(yōu) 選為粉末的粒徑(以D5tl計)在1-500微米之間所述的干粉吸入劑，其特征在于所述的輔料選用糖類、醇類、氨基酸類、磷脂類、肺源性表面活性物質(zhì)、環(huán)糊精類、高分子物質(zhì)、助流劑、抗氧劑、檸檬酸及其鹽、磷酸鹽中的一 種或幾種。所述的糖類，選自乳糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖中的一種或 幾種；所述的醇類，選自甘露醇、木糖醇、麥芽糖醇、山梨醇中的一種或幾種；所述的氨基酸 類，選自甘氨酸、門冬氨酸、丙氨酸、色氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、 胱氨酸、賴氨酸、脯氨酸、精氨酸中的一種或幾種；所述的磷脂，選自大豆磷脂、卵磷脂、磷 脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、合成磷脂中的一種或幾種；所述的肺源性表面活性物質(zhì)，選自二 棕櫚酰磷脂酰膽堿、二月桂酰磷脂酰膽堿、膽固醇中的一種或幾種；所述的環(huán)糊精類，選自 α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、Y-環(huán)糊精、大環(huán)糊精、各種取代度的α-環(huán)糊精衍生物、各種取 代度的β-環(huán)糊精衍生物，各種取代度的Y-環(huán)糊精衍生物、羥丙基-β-環(huán)糊精、磺丁基 醚-β -環(huán)糊精、支鏈環(huán)糊精、甲基化環(huán)糊精、二甲基β -環(huán)糊精、羥乙基環(huán)糊精、低分子量 β -環(huán)糊精聚合物(分子量為3000 6000)、乙基環(huán)糊精、乙酰基環(huán)糊精、離子性環(huán)糊精衍 生物、羧甲基環(huán)糊精、硫酸酯環(huán)糊精中的一種或多種；所述的高分子物質(zhì)，選自可生物降解 的高分子物質(zhì)例如白蛋白、糊精、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素衍生物、淀粉衍生物、聚乳酸、聚 乳酸-羥基乙酸、聚乙二醇、泊洛沙姆、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸鈉、海藻酸鈉、Solutol HS 15中 的一種或幾種；所述的助流劑，選自微粉硅膠、滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸、硬酯富馬酸鈉中 的一種或幾種；所述的抗氧劑，選自維生素C、維生素C棕櫚酸酯、維生素C各類衍生物、輔 酶Q10、維生素Ε、聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯、維生素E各類衍生物中的一種或幾種。所述冬凌草甲素類成分干粉吸入劑的輔料優(yōu)選的方式為乳糖，或者是亮氨酸和苯 丙氨酸，亮氨酸和苯丙氨酸的重量比為1 50-50 1。所述的冬凌草甲素類成分干粉吸入劑的制備方法，其制備步驟如下將冬凌草甲素類成分通過粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末與輔料混合均勻制成吸 入用粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將冬凌草甲素類成分與輔料混合均勻， 通過粉碎或噴霧干燥制成吸入用粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將冬凌草 甲素類成分和處方中部分輔料混合均勻，通過粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末與處方中剩 余輔料混合均勻制成吸入用粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)。所述的冬凌草甲素類成分干粉吸入劑在制備治療食管癌、肺部腫瘤和白血病藥物 中的應(yīng)用。本發(fā)明中所述的D5tl是一個樣品的累計粒度分布百分?jǐn)?shù)達(dá)到50%時所對應(yīng)的粒 徑。它的物理意義是粒徑大于它的粉末顆粒占50%，小于它的粉末顆粒也占50%，用來表 示粉體的平均粒度。本發(fā)明中所述的D9tl是一個樣品的累計粒度分布數(shù)達(dá)到90%時所對應(yīng)的粒徑。它 的物理意義是粒徑小于它的粉末顆粒占90%，用來表示粉體粗端的粒度指標(biāo)。本發(fā)明的有益效果主要是1、所述的冬凌草甲素類成分干粉吸入劑應(yīng)用方便、吸收迅速、無肝臟首過效應(yīng)，肺 部藥物濃度高，與口服給藥相比大大提高了冬凌草甲素類成分治療食管癌、肺部腫瘤和白 血病的效果。2、冬凌草甲素類成分與輔料混合成為干粉吸入劑，在實際研究中發(fā)現(xiàn)，藥物易于 結(jié)塊，因此需要與輔料進(jìn)行配比，克服提取物易結(jié)塊的難題，申請人經(jīng)過大量實驗獲知，將藥物與輔料配比控制在特定范圍內(nèi)，特別是輔料選用亮氨酸和苯丙氨酸或是不同粒徑的乳 糖，可以做成吸入性能優(yōu)良的干粉吸入劑。3、通過本發(fā)明的研究，冬凌草甲素類成分干粉吸入劑可以采用亮氨酸和苯丙氨酸 為輔料，而不使用乳糖，避免了乳糖中的雜蛋白有可能引起的嚴(yán)重過敏反應(yīng)，亮氨酸和苯丙 氨酸聯(lián)合使用，可以較好的避免冬凌草甲素類成分結(jié)塊，并且粉末密度小，流動性好，不吸 濕，具有良好的粉末分散性和肺部沉積性，肺部沉積率達(dá)到了 30 %以上。
具體實施例方式下面結(jié)合實例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明的范圍并不受這些實例的任 何限制。實施例1將冬凌草甲素采用氣流粉碎至D9tl = 2. 6微米，與D5tl = 120微米的乳糖按質(zhì)量比 1 9進(jìn)行混合，混合均勻后，粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。實施例2將冬凌草乙素、微粉硅膠按質(zhì)量比1 1進(jìn)行混合，采用氣流粉碎至D9tl = 3. 5微 米，粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。實施例3將冬凌草丙素采用氣流粉碎至D9tl = 3. 3微米，與D9tl = 4. 2微米的乳糖、D5tl = 150 微米的乳糖按質(zhì)量比為1 1 7進(jìn)行混合，混合均勻后，粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸 入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。干粉吸入劑肺部沉積率考察按照中華人民共和國2010年版藥典規(guī)定方法考察，制劑的肺部沉積率達(dá)到 25. 62%,室溫條件下放置到M個月后，制劑的肺部沉積率沒有顯著變化。實施例4冬凌草丁素、亮氨酸、甘露醇的處方質(zhì)量比為1 1 8，將冬凌草丁素和亮氨酸采 用氣流粉碎至D9tl = 3. 2微米，再與D5tl = 130微米的甘露醇進(jìn)行混合，混合均勻后，粉末包 裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。干粉吸入劑肺部沉積率考察按照中華人民共和國2010年版藥典規(guī)定方法考察，制劑的肺部沉積率達(dá)到 22. 83%,室溫條件下放置到M個月后，制劑的肺部沉積率沒有顯著變化。實施例5冬凌草戊素、亮氨酸、苯丙氨酸的處方質(zhì)量比為1 4 5，將冬凌草戊素和亮氨酸 采用氣流粉碎至D9tl = 4. 1微米，再與D5tl = 130微米的苯丙氨酸進(jìn)行混合，混合均勻，粉末 包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。實施例6冬凌草甲素、冬凌草乙素、亮氨酸的處方質(zhì)量比為1 1 1，溶于95%的乙醇中， 噴霧干燥，得到D9tl = 3. 6微米的粉末，再與粉末8倍量的D5tl = 130微米的苯丙氨酸進(jìn)行混 合，混合均勻，粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。實施例7
冬凌草甲素、海藻糖、甘氨酸、大豆磷脂、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、泊洛沙姆188、 硬酯富馬酸鈉、聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯、維生素C棕櫚酸酯的處方質(zhì)量比為 10 1 1 1 1 1 1 1 1，分散于95%的乙醇中，噴霧干燥，得到粒徑D9tl = 4. 3微米的粉末，再與粉末8倍量的德國美劑樂;[nhaLac 120乳糖進(jìn)行混合，混合均勻，在 通氮氣保護(hù)的條件下，粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。實施例8冬凌草甲素、乳糖、檸檬酸三鈉、磷酸二氫鈉的處方質(zhì)量比為10 10 1 1，研 磨得到D9tl = 4. 5微米的粉末，再與粉末8倍量的德國美劑樂；[nhaLac 70乳糖進(jìn)行混合， 混合均勻，在通氮氣保護(hù)的條件下，粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入 劑。實施例9將冬凌草甲素采用羥丙基-β -環(huán)糊精包合，噴霧干燥至D9tl = 3. 9微米，粉末與D5tl =130微米的甘露醇、D5tl = 60微米的亮氨酸按質(zhì)量比1 5 2的比例進(jìn)行混合，混合均 勻后包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。實施例10將冬凌草乙素采用羥丙基-β -環(huán)糊精包合，噴霧干燥至D9tl = 3. 5微米，與德國美 劑樂InhaLaC 230乳糖按質(zhì)量比1 9的比例進(jìn)行混合，混合均勻后包裝入膠囊或泡罩或 干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。實施例11將冬凌草甲素采用磺丁基醚-β -環(huán)糊精包合，噴霧干燥至D9tl = 3. 9微米，與德國 美劑樂hhaLaC 70乳糖按質(zhì)量比1 9的比例進(jìn)行混合，混合均勻后包裝入膠囊或泡罩或 干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。實施例12冬凌草甲素、半乳糖、山梨醇、脯氨酸、白蛋白、聚乙二醇6000、滑石粉、輔酶QlO的 處方質(zhì)量比為10 :1:1:1:1:1:1: 1，在通氮氣保護(hù)的條件下，研磨得到D9tl = 4. 7微米的粉末，再與粉末8倍量的D5tl = 130微米的乳糖進(jìn)行混合，混合均勻，粉末包裝入 膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。實施例13將冬凌草甲素采用氣流粉碎至D9tl = 3. 5微米，與D9tl = 4. 7微米的亮氨酸、D50 = 130微米的苯丙氨酸按質(zhì)量比為1 2 6進(jìn)行混合，混合均勻后，粉末包裝入膠囊或泡罩 或干粉吸入器內(nèi)，獲得干粉吸入劑。干粉吸入劑的粉體學(xué)性質(zhì)考察按照堆密度測定法，測得堆密度為0. 26g/ml。干粉吸入劑肺部沉積率考察按照中華人民共和國2010年版藥典規(guī)定方法考察，制劑的肺部沉積率達(dá)到 33. 95%,室溫條件下放置到M個月后，制劑的肺部沉積率沒有顯著變化。實施例14抗肺部腫瘤藥效實驗方法苯并芘經(jīng)皮穿刺肺內(nèi)注射的方法建立大鼠肺腫瘤動物模型，取建模大鼠150只，隨機(jī)分為15組，每組10只。每天1次，用藥7天。給藥方式第1-13組為吸入劑 吸入給藥，分別按照實施例1-13獲得吸入劑，給藥劑量為IOmg冬凌草甲素類成分/kg ；第 14組口服冬凌草甲素，給藥劑量10mg冬凌草甲素/kg;第15組為生理鹽水對照組。停藥 次日處死大鼠，解剖大鼠肺臟，觀察肺臟病變情況。實驗結(jié)果吸入劑給藥各組的大鼠的肺部出現(xiàn)腫塊或結(jié)節(jié)病變的發(fā)生率最低為 10%，最高為30%，冬凌草甲素口服給藥組大鼠的肺部出現(xiàn)腫塊或結(jié)節(jié)病變的發(fā)生率為 90%，生理鹽水組為100%，吸入劑給藥各組與冬凌草甲素口服給藥組、塵理鹽水組有顯著 性差異(P < 0. 05)，治療效果最好的為按實施例13制備的吸入劑。實施例15抗食管癌藥效實驗方法用6周齡的Wistar大鼠飼以N-亞硝基肌氨酸乙酯的前體鹽酸肌氨酸乙酯 和亞硝酸鈉誘發(fā)食管鱗癌動物模型，取建模大鼠150只，隨機(jī)分為15組，每組10只。每天1 次，用藥7天。給藥方式第1-13組為吸入劑吸入給藥，分別按照實施例1-13獲得吸入劑， 給藥劑量為IOmg冬凌草甲素類成分/kg ；第14組口服冬凌草甲素，給藥劑量10mg冬凌草 甲素/kg;第15組為生理鹽水對照組。停藥次日處死大鼠，解剖大鼠，觀察病變情況。實驗結(jié)果吸入劑給藥各組的大鼠的癌抑制率最低為53%，最高為86%，冬凌草 甲素口服給藥組大鼠的癌抑制率為13 %，生理鹽水組為0，吸入劑給藥各組與冬凌草甲素 口服給藥組、生理鹽水組有顯著性差異(P < 0. 05)，治療效果最好的為按實施例13制備的 吸入劑。實施例16抗白血病藥效實驗方法將小鼠粒單白血病細(xì)胞系TOHI-3尾靜脈接種于BALB/c小鼠建立動物模型。 取建模小鼠150只，隨機(jī)分為15組，每組10只。每天1次，用藥7天。給藥方式第1-13 組為吸入劑吸入給藥，分別按照實施例1-13獲得吸入劑，給藥劑量為IOmg冬凌草甲素類成 分/kg ；第14組口服冬凌草甲素，給藥劑量10mg冬凌草甲素/kg ；第15組為生理鹽水對照 組。停藥次日處死小鼠，通過光鏡、熒光顯微鏡、電鏡觀測骨髓多項指標(biāo)。實驗結(jié)果吸入劑給藥各組給藥后小鼠的骨髓白血病細(xì)胞凋亡率顯著升高，冬凌 草甲素口服給藥組和生理鹽水組小鼠的骨髓白血病細(xì)胞凋亡率沒有顯著變化。
權(quán)利要求
1.一種冬凌草甲素類成分的干粉吸入劑，其特征在于它是由冬凌草甲素類成分與藥學(xué) 上可接受的輔料組成的藥物組合物，通過口腔吸入給藥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干粉吸入劑，其特征在于所述的冬凌草甲素類成分由冬凌草 甲素、冬凌草乙素、冬凌草丙素、冬凌草丁素、冬凌草戊素中的一種或多種組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干粉吸入劑，其特征在于冬凌草甲素類成分與所述的輔料的 質(zhì)量比為 1 0.01-1 100，優(yōu)選為 1 0.1-1 50。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干粉吸入劑，其特征在于粉末的粒徑(以D5tl計)在0.1-1000 微米之間，優(yōu)選為粉末的粒徑(以D5tl計)在1-500微米之間。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干粉吸入劑，其特征在于所述的輔料選用糖類、醇類、氨基酸 類、磷脂類、肺源性表面活性物質(zhì)、環(huán)糊精類、高分子物質(zhì)、助流劑、抗氧劑、檸檬酸及其鹽、 磷酸鹽中的一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的輔料，其特征在于所述的糖類，選自乳糖、半乳糖、葡萄糖、果 糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖中的一種或幾種；所述的醇類，選自甘露醇、木糖醇、麥芽糖醇、山 梨醇中的一種或幾種；所述的氨基酸類，選自甘氨酸、門冬氨酸、丙氨酸、色氨酸、蘇氨酸、谷 氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、胱氨酸、賴氨酸、脯氨酸、精氨酸中的一種或幾種；所述 的磷脂，選自大豆磷脂、卵磷脂、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、合成磷脂中的一種或幾種；所 述的肺源性表面活性物質(zhì)，選自二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二月桂酰磷脂酰膽堿、膽固醇中的一 種或幾種；所述的環(huán)糊精類，選自α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、Y-環(huán)糊精、大環(huán)糊精、各種取代 度的α-環(huán)糊精衍生物、各種取代度的β-環(huán)糊精衍生物，各種取代度的Y-環(huán)糊精衍生 物、羥丙基-β -環(huán)糊精、磺丁基醚-β -環(huán)糊精、支鏈環(huán)糊精、甲基化環(huán)糊精、二甲基β -環(huán) 糊精、羥乙基環(huán)糊精、低分子量β-環(huán)糊精聚合物(分子量為3000 6000)、乙基環(huán)糊精、 乙酰基環(huán)糊精、離子性環(huán)糊精衍生物、羧甲基環(huán)糊精、硫酸酯環(huán)糊精中的一種或多種；所述 的高分子物質(zhì)，選自可生物降解的高分子物質(zhì)例如白蛋白、糊精、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素 衍生物、淀粉衍生物、聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸、聚乙二醇、泊洛沙姆、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸 鈉、海藻酸鈉、Solutol HS 15中的一種或幾種；所述的助流劑，選自微粉硅膠、滑石粉、硬脂 酸鎂、硬脂酸、硬酯富馬酸鈉中的一種或幾種；所述的抗氧劑，選自維生素C、維生素C棕櫚 酸酯、維生素C各類衍生物、輔酶Q10、維生素Ε、聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯、維生素 E各類衍生物中的一種或幾種。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的干粉吸入劑，其特征在于所述的輔料是乳糖。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的干粉吸入劑，其特征在于所述的輔料是亮氨酸和苯丙氨酸， 亮氨酸和苯丙氨酸的重量比為1 50-50 1。
9.一種制備權(quán)利要求1所述的干粉吸入劑的方法，其制備步驟如下將冬凌草甲素類成分通過粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末與輔料混合均勻制成吸入用 粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將冬凌草甲素類成分與輔料混合均勻，通過 粉碎或噴霧干燥制成吸入用粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將冬凌草甲素 類成分和處方中部分輔料混合均勻，通過粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末與處方中剩余輔 料混合均勻制成吸入用粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)。
10.權(quán)利要求1的干粉吸入劑在制備治療食管癌、肺部腫瘤和白血病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種冬凌草甲素類成分干粉吸入劑及其制備方法和用途。它是以冬凌草甲素類成分為活性成分，與藥學(xué)上可接受的輔料混合形成的藥物組合物，按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案開發(fā)的干粉吸入劑，與口服給藥相比大大提高了冬凌草甲素類成分治療治療食管癌、肺部腫瘤和白血病的效果。
文檔編號A61K31/357GK102058566SQ20101060424
公開日2011年5月18日 申請日期2010年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月24日
發(fā)明者呂慧俠, 張振海 申請人:中國藥科大學(xué)