專利名稱：玉郎傘總黃酮及其單體成分在制備抗腫瘤藥物中的作用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及玉郎傘總黃酮及其單體化合物成分在制備腫瘤治療藥物中的作用。
背景技術(shù)：
玉郎傘，又名龍眼參，為豆科(Leguminosae)蝶型花亞科(Papilionaceae)崖豆藤屬(Millettia)Bf^S (Millettia pulchra kurz var. Iaxior Dunn Ζ. Wei)白勺根，為廣西壯、瑤醫(yī)常用藥材，最初記載于《廣西中藥志》，用于治療小兒疳積、產(chǎn)后及病后虛弱、跌打腫痛、骨折、風(fēng)濕關(guān)節(jié)腫痛、中風(fēng)偏癱、小兒智力低下及老年癡呆癥等，具有活血散瘀、消腫止痛、寧神的功效，是中藥搽劑“消腫止痛酊”的主要藥材之一。玉郎傘含有黃酮、皂苷、多糖等多種成分，據(jù)報道，玉郎傘多糖可保護(hù)肝細(xì)胞損傷及大鼠急性腦缺血再灌注的損傷并可清除超氧陰離子自由基和羥自由基；玉郎傘黃酮可降低原發(fā)性高血壓，增加冠脈流量及降低心肌缺血性損傷，可清除超氧陰離子自由基和羥自由基，對二甲苯致小鼠耳腫脹、 角叉菜膠致小鼠足腫脹及大鼠急性胸膜炎具有抑制作用。本發(fā)明的目的是提取制備玉郎傘總黃酮及其單體化合物并研究其抗腫瘤作用，為玉郎傘這一資源豐富的民族藥用植物提供新的利用途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所說的玉郎傘總黃酮及單體化合物提取自玉郎傘(Millettia pulchra kurz var. Iaxior Dunn Z.Wei)。原材料于2005年6月采自廣西，經(jīng)鑒定為豆科棺物疏葉崖豆的根(玉郎余)。本發(fā)明中，玉郎傘總黃酮及分離自其中的12個單體黃酮類化合物水黃皮素 (MPL-01)、2'，β-二甲氧基-呋喃-[2〃，3〃 4' ,3' ]-二氫查爾酮(MPL-04)、2'-甲氧基-呋喃-[2〃，3〃 4' ,3']-查爾酮(MPL-06)、呋喃-[2〃，3〃 7，8]-黃酮(MPL-07)、 2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮(MPL-08)、2'-甲氧基-呋喃-[2"，3〃 7，8]_ 黃酮(MPL-09)、[2]苯并吡喃[4，3_b]_ 呋喃并[2，3_h][l]苯并吡喃-6(10H)-酮 (MPL-IO)、6-甲氧基-2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮(MPL-Il)、芒柄花素 (MPL-12)、5-甲氧基-2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5 〃，6 〃 7，8]黃酮(MPL-13)、7_ 甲氧基-3〃 -羥基-3〃 -甲基-8-(1" - 丁烯基)_ 黃酮(MPL-16)、6-羥基-2〃，2〃 -二甲基-吡喃-[5"，6" :7，8]黃酮(MPL-17)均具有對多種腫瘤細(xì)胞生長抑制的作用，并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；其中玉郎傘總黃酮體內(nèi)可對小鼠S180肉瘤、肝癌H22具有顯著抑制作用。本發(fā)明中6-羥基-2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮為新的化合物。本發(fā)明中玉郎傘總黃酮及單體成分可與藥學(xué)上適當(dāng)?shù)妮d體一起被使用，可以制作成片劑、針劑、膠囊、口服液等多種劑型。本發(fā)明優(yōu)點(1)本發(fā)明分離得到的玉郎傘總黃酮及黃酮單體成分具有顯著抗腫瘤活性并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；
(2)本發(fā)明的提取分離玉郎傘總黃酮及黃酮單體成分的工藝簡單；(3)本發(fā)明為新型抗癌藥物的研制奠定了基礎(chǔ)。
具體實施例方式實施例一玉郎傘總黃酮及已知單體化合物的提取分離及鑒定采用90%乙醇加熱回流提取后又用50%乙醇回流提取，將其各極性段的化合物充分提取，提取液減壓濃縮得到醇浸膏。醇浸膏加入溶劑溶解，拌入吸附劑(硅膠、硅藻土等)，拌合物晾干后裝入索式提取器中用不同極性溶劑(正己烷、乙酸乙酯、甲醇等)洗脫，將醇浸膏分成正己烷、乙酸乙酯及甲醇部分。其中正己烷部分主要含有黃酮，為總黃酮部分。除去溶劑后的正己烷部分膏和乙酸乙酯部分膏經(jīng)過硅膠柱層析，LH-20凝膠柱層析以及制備TLC等手段，分離并鑒定了 11個化合物，分別為水黃皮素(MPL-01)、2'，β-二甲氧基-呋喃-[2〃，3〃 4' ,3' ]-二氫查爾酮(MPL-04)、2'-甲氧基-呋喃-[2"， 3" 4'，3']-查爾酮(MPL-06)、呋喃-[2〃，3〃 7，8]-黃酮(MPL-07)、2 〃，2 〃 -二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮(MPL-08)、2'-甲氧基-呋喃-[2 〃，3 〃 7，8]_黃酮 (MPL-09)、[2]苯并吡喃[4，3-b]_ 呋喃并[2，3_h][l]苯并吡喃-6 (IOH)- (MPL-10), 6-甲氧基-2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7,8]黃酮(MPL-Il)、芒柄花素(MPL-12)、 5-甲氧基_2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮(MPL-13)、7-甲氧基-3〃 -羥基-3〃 -甲基-8-(1" - 丁烯基)_ 黃酮(MPL-16)。表1玉郎傘中分離得到的化合物的名稱和結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.玉郎傘總黃酮提取物的制備方法，其特征在于它包含下列步驟干燥玉郎傘藥材， 粉碎，用90%乙醇加熱回流提取后又用50%乙醇回流提取，將其各極性段的化合物充分提取，提取液減壓濃縮得到醇浸膏。醇浸膏加入溶劑溶解，拌入吸附劑(硅膠、硅藻土等)，拌合物晾干后裝入索式提取器中用正己烷洗脫，為玉郎傘總黃酮部分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，干燥玉郎傘藥材，粉碎，用90%和50%乙醇溶液分別提取后，減壓濃縮濾液得醇浸膏，將其拌硅藻土裝入層析柱，用正己烷洗脫得到玉郎傘總黃酮提取物。
3.權(quán)利要求1或2所述的玉郎傘總黃酮提取物主要含有水黃皮素、2'，β-二甲氧基-呋喃-[2〃，3〃 4'，3' ]_ 二氫查爾酮、2'-甲氧基-呋喃-[2〃，3〃 4'，3']-查爾酮、呋喃-[2〃，3〃 7，8]_黃酮、2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮、2'-甲氧基-呋喃-[2〃，3〃 7，8]_黃酮、[2]苯并吡喃W，3-b]_呋喃并[2，3-h][l]苯并吡喃-6(10H)_酮、6-甲氧基-2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮、芒柄花素、 5-甲氧基-2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，幻黃酮、7-甲氧基-3〃 -羥基-3〃 -甲基-8-(1" - 丁烯基)_黃酮、6-羥基-2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮等12 種化合物。
4.6-羥基_2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5"，6〃 7，8]黃酮為一種新的化合物。
5.權(quán)利要求1、2或3所述的玉郎傘提取物在制備治療腫瘤藥物中的用途。
6.一種治療腫瘤藥物，它含有權(quán)利要求1的玉郎傘總黃酮提取物。
7.水黃皮素、2'，β-二甲氧基-呋喃-[2〃，3〃4'，3' ]_ 二氫查爾酮、2'-甲氧基-呋喃-[2〃，3〃 4' ,3' ]_ 查爾酮、呋喃-[2〃，3〃 7，8]_ 黃酮、2〃，2〃 -二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮、2'-甲氧基-呋喃-[2〃，3〃 7，8]-黃酮、[2]苯并吡喃[4，3-b]_呋喃并[2，3-h][l]苯并吡喃-6 (IOH)-酮、6-甲氧基_2"，2〃 -二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8]黃酮、芒柄花素、5-甲氧基-2〃，2〃 - 二甲基-吡喃-[5〃，6〃 7，8] 黃酮、7-甲氧基-3〃 -羥基-3〃 -甲基-8-(1" - 丁烯基)_黃酮、6-羥基-2〃，2〃 -二甲基-吡喃-[5"，6" :7，8]黃酮在制備治療腫瘤藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了一類新型抗腫瘤植物提取物及單體化合物。以豆科植物疏葉崖豆的根(俗名玉郎傘(Millettia pulchra kurz var.laxior Dunn Z.Wei)為原料，經(jīng)溶劑提取和多種層析方法分離其總黃酮及一系列單體黃酮類化合物并鑒定其結(jié)構(gòu)。體外抗腫瘤實驗表明，總黃酮及12個單體化合物對多種惡性腫瘤具有明顯的抑制作用，可通過線粒體途徑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。總黃酮口服給藥可顯著抑制小鼠S180肉瘤、肝癌H22及人裸屬接種乳腺癌。本發(fā)明中的玉郎傘總黃酮及單體黃酮類化合物不僅對研究與開發(fā)新的抗腫瘤藥物提供了先導(dǎo)化合物，并可應(yīng)用于臨床作為預(yù)防和治療癌癥的新藥物。
文檔編號A61K31/343GK102462727SQ201010547238
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月17日
發(fā)明者斯建勇, 曹麗 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所