專利名稱：一種用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從植物原料中提取醫(yī)用配置品的方法，具體涉及一種菝葜根莖提 取物的提制備工藝。
背景技術(shù)：
慢性前列腺炎(Chronic Prostatitis, CP)是中青年男性的一種常見病、多發(fā)病， 最新的醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，25%到50%的男性在一生中至少患過一次慢性前列腺炎，在中青年 男性常見疾病的泌尿男科門診疾病中，CP患者比例高達(dá)40%，其發(fā)病人數(shù)還不斷呈上升趨 勢，因此，CP被世界衛(wèi)生組織稱為“21世紀(jì)病”。CP雖然不是一種致命性疾病，但患病年齡 多在20-45歲之間，給患者造成的肉體痛苦和帶來的精神壓力常常令人不可名狀，已成為 嚴(yán)重影響男性生活質(zhì)量與生存質(zhì)量的大敵。然而，令人遺憾的是迄今為止，并沒有理想的CP 治療藥物和特殊的治療措施。雖然自抗菌藥問世以來，引起CP的微生物有所改變，但發(fā)病 率并未下降，說明CP的治療存在一定困難。因此新型的CP治療藥物的研究與開發(fā)就顯得 十分必要，而且業(yè)已成為世人關(guān)注的焦點(diǎn)。目前市場上CP治療藥物品種雖然不少，但多數(shù)用抗生素類化學(xué)藥品，治標(biāo)難治 本，復(fù)發(fā)率高，且總治愈率也僅僅27%左右；中醫(yī)臨床辨證論治兼顧標(biāo)本兼治，有效率可達(dá) 78%左右，但對于處于當(dāng)今激烈競爭前沿的男性青壯年的廣大CP患者，堅持長期煎煮用 藥，顯然不適應(yīng)時代的要求，同時，由于原藥材的品質(zhì)、煎煮方法等又很難保證臨床療效的 穩(wěn)定性；目前市場上僅有的諸如前列腺炎栓、立通清淋等也存在著或因過頭廣告宣傳、或因 給藥途徑不便、或因缺乏標(biāo)本兼治而令患者選擇面狹小。因此，研究開發(fā)符合CP病因、兼顧 整體調(diào)節(jié)和標(biāo)本兼治的新型CP中藥新藥，具有十分廣闊的市場前景。金剛藤系百合科植物菝葜(Smilax China. L)的干燥根莖，始載于《名醫(yī)別錄》、《本 草綱目》，性甘、酸、平，可解毒消腫、祛風(fēng)利濕，民間用于治療乳糜尿、白帶、風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的任務(wù)是提供一種用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物及其制備方法。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案是本發(fā)明提供的用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物，是以菝葜根莖為原料，按以 下方法制備得到的產(chǎn)物a、以菝葜根莖為原料，洗凈，晾干，粉碎，過20目篩，得原料粗粉；b、將原料粗粉用3倍量60%乙醇水浴加熱提取3次，每次3小時；C、合并提取液，過濾，濃縮至每Iml相當(dāng)于Ig原生藥的總浸膏；d、將總浸膏用HCl調(diào)節(jié)酸堿度至pH 4 5，加氯化鈉至1. 5mol/L，得處理后的總 提取液；e、取與總浸膏等重的HPD100型大孔樹脂，以95%乙醇浸泡12小時，隨后裝入層析 柱中，以95%乙醇沖洗至沖出的醇液澄清，將總提取液與處理后的大孔樹脂混合，靜態(tài)吸附12小時后裝入層析柱中進(jìn)行動態(tài)吸附至流下的液體無色后用酚酸性成分顏色反應(yīng)示蹤，至 反應(yīng)顏色無變化時停止沖洗；f、用蒸餾水沖洗已吸附完全的樣品柱，至洗出液為中性，然后用pH為7的70%乙 醇洗脫，洗脫流速2. 5BV. 1Γ1，收集上樣量10倍體積的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，即得 到本發(fā)明用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物，本專利申請中也稱該用于治療慢性前列腺 炎的菝葜提取物為菝葜大孔樹脂純化物(編號SCPD001)。本發(fā)明提供的用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物的制備方法，包括以下步驟a、以菝葜根莖為原料，洗凈，晾干，粉碎，過20目篩，得原料粗粉；b、將原料粗粉用3倍量60%乙醇水浴加熱提取3次，每次3小時；C、合并提取液，過濾，濃縮至每Iml相當(dāng)于Ig原生藥的總浸膏；d、將總浸膏用HCl調(diào)節(jié)酸堿度至pH 4 5，加氯化鈉至1. 5mol/L，得處理后的總 提取液；e、取與總浸膏等重的HPD100型大孔樹脂，以95%乙醇浸泡12小時，隨后裝入層析 柱中，以95%乙醇沖洗至沖出的醇液澄清，將總提取液與處理后的大孔樹脂混合，靜態(tài)吸附 12小時后裝入層析柱中進(jìn)行動態(tài)吸附至流下的液體無色后用酚酸性成分顏色反應(yīng)示蹤，至 反應(yīng)顏色無變化時停止沖洗；f、用蒸餾水沖洗已吸附完全的樣品柱，至洗出液為中性，然后用pH為7的70% 乙醇洗脫，洗脫流速2. 5BV. 1Γ1，收集上樣量10倍體積的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干， 即得到本發(fā)明提供的用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物，即菝葜大孔樹脂純化物(編號 SCPDOO1)。實(shí)驗(yàn)資料本發(fā)明提供的用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物的藥效學(xué)評價本實(shí)驗(yàn)以非細(xì)菌性前列腺炎模型、細(xì)菌性前列腺炎模型以及經(jīng)典的抗炎抗菌模 型，采取平行比較法對菝葜總提取物(SCE001)和由總提取物進(jìn)一步分部得到的乙酸乙酯 提取物(SCFE003)、正丁醇部位(SCFB004)及菝葜大孔樹脂純化物(SCPD001)治療慢性前列 腺炎作用進(jìn)行了平行比較評價，為綜合確定菝葜治療慢性前列腺炎有效提取物提供實(shí)驗(yàn)依 據(jù)，奠定科學(xué)基礎(chǔ)。1.本發(fā)明提供的用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物治療非細(xì)菌性前列腺炎的 實(shí)驗(yàn)資料1. 1儀器試劑與動物XF9030自動血液細(xì)胞分析儀(南京普朗醫(yī)用設(shè)備有限公司)；戊巴比妥鈉(中國 醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司，批號F20050915)；消痔靈注射液(吉林省集安益盛藥業(yè)股份 有限公司)；硫酸慶大霉素注射液(河南輔仁懷慶堂制藥有限公司)。SD大鼠，雄性，體重250 300g，由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。實(shí)驗(yàn)動物從業(yè)證湖北省實(shí)驗(yàn)動物從業(yè)人員考核合格證(證書編號G20080516)。1. 2 方法1. 2. 1非細(xì)菌性前列腺炎模型的建立取65只SD大鼠，腹腔注射戊巴比妥鈉(l%，4ml/100g)麻醉，將大鼠四肢固定在 固定板上，剪除下腹兩后肢之間的毛發(fā)，于無菌條件下沿腹中線切開腹壁，逐層打開下腹， 暴露膀胱，用鑷子輕輕提起膀胱及兩側(cè)精囊，前列腺體位于精囊底部，暴露附于精囊內(nèi)側(cè)的前列腺背葉，于兩側(cè)分別注入25%消痔靈注射液0. 2ml，將前列腺、精囊和膀胱復(fù)位，縫合 腹壁肌肉和皮膚，在傷口處噴慶大霉素，消毒紗布包扎，放回鼠籠。另取13只大鼠，操作如上，但不注入致炎劑，作為手術(shù)對照組。造模后，各組大鼠精神狀態(tài)較差，活動減少，食欲不佳，大鼠死亡6只，其余的大鼠 于術(shù)后第3天開始逐步恢復(fù)。連續(xù)觀察7天，各組大鼠傷口愈合良好，精神狀態(tài)恢復(fù)。1.2.2分組與給藥造模7天后將造模成功的72只模型大鼠(包括注入致炎劑的尚存活60只和沒 有注入致炎劑的存活的12只)隨機(jī)分為生理鹽水組、SCE001組、SCFE003組、SCFB004組、 SCPDOO1組，每組12只，分別以生理鹽水、SCEOO 1、SCFE003、SCFB004、SCPDOO1灌胃，劑量按 臨床用藥和與試驗(yàn)結(jié)果總和折算為IOg (原生藥)/kg,每日1次，每天上午9 00 10 30灌 胃，連續(xù)8天。正常對照組給予等量生理鹽水，其他條件與前面5組一致。第9天稱取禁食 12h空腹的動物體重，尾靜脈取血，然后用生理鹽水稀釋后測定白細(xì)胞總數(shù)。取血完畢，斷頭處死動物，剖腹觀察前列腺的形態(tài)、大小，與周圍組織粘連情況等， 并取出前列腺，用分析天平稱取腺體重量。腺體常規(guī)固定，石蠟切片，HE染色，光鏡下觀察 組織病理學(xué)改變。1. 2. 3統(tǒng)計方法所有數(shù)據(jù)用i±s表示，采用單因素方差分析和多重比較，數(shù)據(jù)統(tǒng)計用SPSS12.0軟 件包處理。1. 3實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析1. 3. 1對非細(xì)菌性前列腺炎大鼠模型血液中白細(xì)胞數(shù)的影響見表1。表1菝葜各用藥組對大鼠白細(xì)胞的影響
權(quán)利要求
一種用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物，它是以菝葜根莖為原料，按以下方法制備得到的產(chǎn)物a、以菝葜根莖為原料，洗凈，晾干，粉碎，過20目篩，得原料粗粉；b、將原料粗粉用3倍量60％乙醇水浴加熱提取3次，每次3小時；c、合并提取液，過濾，濃縮至每1ml相當(dāng)于1g原生藥的總浸膏；d、將總浸膏用HCl調(diào)節(jié)酸堿度至pH 4～5，加氯化鈉至1.5mol/L，得處理后的總提取液；e、取與總浸膏等重的HPD100型大孔樹脂，以95％乙醇浸泡12小時，隨后裝入層析柱中，以95％乙醇沖洗至沖出的醇液澄清，將總提取液與處理后的大孔樹脂混合，靜態(tài)吸附12小時后裝入層析柱中進(jìn)行動態(tài)吸附至流下的液體無色后用酚酸性成分顏色反應(yīng)示蹤，至反應(yīng)顏色無變化時停止沖洗；f、用蒸餾水沖洗已吸附完全的樣品柱，至洗出液為中性，然后用pH為7的70％乙醇洗脫，洗脫流速2.5BV.h 1，收集上樣量10倍體積的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，即得到用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物。
2.一種用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物的制備方法，包括以下步驟a、以菝葜根莖為原料，洗凈，晾干，粉碎，過20目篩，得原料粗粉；b、將原料粗粉用3倍量60%乙醇水浴加熱提取3次，每次3小時；c、合并提取液，過濾，濃縮至每Iml相當(dāng)于Ig原生藥的總浸膏；d、將總浸膏用HCl調(diào)節(jié)酸堿度至pH4 5，加氯化鈉至1. 5mol/L，得處理后的總提取液；e、取與總浸膏等重的HPD100型大孔樹脂，以95%乙醇浸泡12小時，隨后裝入層析柱 中，以95%乙醇沖洗至沖出的醇液澄清，將總提取液與處理后的大孔樹脂混合，靜態(tài)吸附 12小時后裝入層析柱中進(jìn)行動態(tài)吸附至流下的液體無色后用酚酸性成分顏色反應(yīng)示蹤，至 反應(yīng)顏色無變化時停止沖洗；f、用蒸餾水沖洗已吸附完全的樣品柱，至洗出液為中性，然后用PH為7的70%乙醇洗 脫，洗脫流速2. 5BV. 1Γ1，收集上樣量10倍體積的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，即得到用 于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物及其制備方法，本發(fā)明以菝葜根莖為原料，將菝葜根莖干燥粉碎后，在80～85℃下用3倍量60%乙醇回流提取3次，每次3小時。將提取液合并，過濾，再經(jīng)過對總提取液的處理，用HPD100型大孔樹脂進(jìn)行純化，得到大孔樹脂純化物，即本發(fā)明用于治療慢性前列腺炎的菝葜提取物。該提取物不僅對非細(xì)菌性前列腺炎、細(xì)菌性前列腺炎，還是對經(jīng)典的抗菌消炎模型，均顯示出良好的藥效作用，不僅能抑制炎性細(xì)胞的產(chǎn)生，還能顯著改善前列腺炎的纖維增生，對慢性前列腺炎具有明顯的標(biāo)本兼治作用。
文檔編號A61P13/08GK101966308SQ20101052563
公開日2011年2月9日 申請日期2010年10月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月30日
發(fā)明者周璐敏, 熊朝梅, 阮金蘭, 陳靜 申請人:華中科技大學(xué)