專利名稱：一種落新婦根提取物的制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種落新婦根提取物的制備 方法及其用途。
背景技術(shù)：
落新婦Astilbe chinensis (Maxim.) Franch. et Sav為虎耳草科落新婦屬植物，其 味辛、苦，性溫。該植物根莖入藥，在民間有廣泛應(yīng)用，主要用于治療跌打損傷、風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎、風(fēng)熱感冒、毒蛇咬傷等。落新婦在我國(guó)東北地區(qū)分布廣泛，資源豐富，容易采集，并且應(yīng) 用價(jià)值高，具有極大的開發(fā)潛力。自由基是一類具有不配對(duì)電子的活潑化學(xué)基團(tuán)。目前認(rèn) 為，人類疾病如各種炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化、早老性癡呆、帕金森氏病、急性腦血管病、癌癥、衰 老等，均與自由基的氧化刺激密切相關(guān)。由于氧化損傷的機(jī)制在疾病的發(fā)生發(fā)展中起著重 要的作用，因此，中藥的抗氧化作用是其達(dá)到治療效果的重要因素。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)前主要使 用的抗氧化劑多為人工合成抗氧化劑，其對(duì)人的健康存在許多負(fù)面影響。因此，近年來，學(xué) 術(shù)界對(duì)植物中存在的天然抗氧化劑的研究興趣與日俱增。為了尋找高效的抗氧化物質(zhì)，對(duì) 天然抗氧化劑的研究顯得非常重要。目前抗氧化的研究已成為熱點(diǎn)，但對(duì)落新婦根提取物 的抗氧化活性研究鮮見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在探討落新婦根提取物的制備方法及其用途，為醫(yī)學(xué)、食品科學(xué)等領(lǐng)域 開發(fā)天然抗氧化劑提供新資源。1、一種落新婦根提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟(一)取落新婦根40目粉末，用6-8倍量70%乙醇室溫下浸提8h-10h，靜置過濾；( 二)將濾渣再分別用8倍量與6倍量70%的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，30°C， 80W，超聲 30min ；(三)合并濾液，回收溶劑即得總提取物；(四)將(三)中總提取物用水混懸，再用石油醚和乙酸乙酯分別萃取總提取物3 次；(五)分別合并石油醚層和乙酸乙酯層萃取液；(六)將(五)中石油醚層和乙酸乙酯層萃取液分別減壓濃縮，冷凍干燥，得到落 新婦根石油醚層提取物和乙酸乙酯層提取物。2、權(quán)利要求1所述的落新婦根提取物的制備方法，特征在于其原料為落新婦 Astilbechinensis (Maxim.) Franch. et Sav 的根。3、一種落新婦根提取物的用途，其特征在于該落新婦根提取物對(duì)ABTS+自由基和 DPPH自由基有很強(qiáng)的清除作用。4、一種落新婦根提取物的用途，其特征在于該落新婦根提取物可開發(fā)為天然抗氧 化藥品，代替人工合成的抗氧化劑治療因人體內(nèi)自由基過多而產(chǎn)生的疾病。
3
5、權(quán)利要求3、4任一項(xiàng)所述的落新婦根提取物的用途，特征在于其制備原料為落 新婦 Astilbe chinensis (Maxim. )Franch. et Sav 的根。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明中的“ ％，，是重量百分比。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明所述的涉及一種落新婦根提提取物的制備方法及其用途包括以下實(shí)施例， 下面的實(shí)施例可進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例1:(一)取落新婦根40目粉末100g，用6倍量70%乙醇室溫下浸提8h，靜置過濾；( 二)將濾渣再分別用8倍量與6倍量70%的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，30°C， 80W，超聲 30min ；(三)合并濾液，回收溶劑即得總提取物；(四)將(三)中總提取物用水混懸，再用石油醚和乙酸乙酯分別萃取總提取物3 次；(五)分別合并石油醚層和乙酸乙酯層萃取液；(六)將(五)中石油醚層和乙酸乙酯層萃取液分別減壓濃縮，冷凍干燥，得到落 新婦根石油醚層提取物和乙酸乙酯層提取物；(七)將(六)石油醚層提取物和乙酸乙酯層提取物進(jìn)行抗氧化試驗(yàn)，該提取物對(duì) ABTS+自由基和DPPH自由基有很強(qiáng)的清除作用。實(shí)施例2 (一)取落新婦根40目粉末200g，用8倍量70%乙醇室溫下浸提10h，靜置過濾；( 二)將濾渣再分別用8倍量與6倍量70%的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，30°C， 80W，超聲 30min ；(三)合并濾液，回收溶劑即得總提取物；(四)將(三)中總提取物用水混懸，再用石油醚和乙酸乙酯分別萃取總提取物3 次；(五)分別合并石油醚層和乙酸乙酯層萃取液；(六)將(五)中石油醚層和乙酸乙酯層萃取液分別減壓濃縮，冷凍干燥，得到落 新婦根石油醚層提取物和乙酸乙酯層提取物；(七)將(六)中石油醚層提取物和乙酸乙酯層提取物進(jìn)行抗氧化試驗(yàn)，該提取物 對(duì)ABTS+自由基和DPPH自由基有很強(qiáng)的清除作用。藥理試驗(yàn)例落新婦根提取物的抗氧化活性1材料與方法1. 1實(shí)驗(yàn)樣品來源藥材采自吉林省臨江，由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院胡全德教授鑒定為落新婦 Astilbe chinensis (Maxim. ) Franch. et Sav 的根。1. 2 儀器76新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)；百靈 LAl 14型電子天平(110g/0. OOOlg)(常熟市百靈天平儀器有限公司)；電子計(jì)數(shù)天平(500g/0. OOlg)(金羊天平儀器廠)；KQ-250DB型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公 司)；101-2A型數(shù)顯電熱鼓吹干燥箱(上海錦屏儀器儀表有限公司通州分公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 儀(上海亞榮生化儀器廠)；移液槍(20ul)；水浴鍋。1. 3 試齊[JDPPH溶液，蒸餾水，無水乙醇，甲醇，ABTS,過硫酸鉀，鐵氰化鉀，磷酸鹽緩沖液(PH =6. 6)，三氯乙酸，三氯化鐵，Vc (維生素C)。2實(shí)驗(yàn)方法與步驟2. 1藥材組分的提取取落新婦根40目粉末200g，用8倍量70%乙醇室溫下浸提10h，靜置過濾，將濾渣 再分別用8倍量與6倍量70%的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，30°C，80W，超聲30min，合并濾 液，回收溶劑即得總提取物，總提取物用水混懸，再用石油醚和乙酸乙酯分別萃取總提取物 3次，分別合并石油醚層和乙酸乙酯層萃取液，將石油醚層和乙酸乙酯層萃取液分別減壓濃 縮，冷凍干燥，得到落新婦根石油醚層提取物0. 5g和乙酸乙酯層提取物25. 2g。2. 2ABTS法測(cè)定抗氧化活性2. 2. 1樣品溶液的制備分別精確稱取干燥至恒重的石油醚層和乙酸乙酯層提取物30mg，用水定容 于IOmL容量瓶中，配成濃度為3mg/mL的樣品母液，將樣品母液用水逐級(jí)稀釋成濃度為 0. 018mg/mL, 0. 037mg/mL, 0. 075mg/mL, 0. 15mg/mL, 0. 31mg/mL, 0. 62mg/mL 的樣品溶液，備用。2. 2. 2ABTS+ 溶液的制備5mL, 14mM的ABTS和5mL，4. 9mMk2S208混合產(chǎn)生ABTS+_，黑暗中靜止16h，使用之前 用乙醇稀釋工作液，要求其在734nm波長(zhǎng)下的吸光度為0. 70士0. 02。2. 2. 3樣品測(cè)定取3mL樣品溶液加入158 μ LABTS+' (Asample)，用乙醇做空白，158 μ LABTS+'和3mL水 為標(biāo)準(zhǔn)液(A。。ntral)，反應(yīng)6min后在734nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，用VC(維生素C)作對(duì)照。清除率(%) = [(Acontrol-Asample)/Acontrol] X 100%2. 3DPPH法測(cè)定抗氧化活性2. 3. 1樣品溶液的制備分別準(zhǔn)確稱取干燥至恒重的石油醚層和乙酸乙酯層提取物30mg，用無水乙醇定容 于IOmL容量瓶中，配成濃度為3mg/mL的樣品母液，將樣品母液用無水乙醇逐級(jí)稀釋成濃度 為 0. 018mg/mL, 0. 037mg/mL, 0. 075mg/mL, 0. 15mg/mL, 0. 31mg/mL, 0. 62mg/mL 的樣品溶液，2. 3. 2DPPH溶液的制備精密稱取DPPH樣品0. 01 g，加入無水乙醇定容至50mL容量瓶中，得到濃度為 0. 2mg/mL的DPPH母液。從母液中移取10mL，用無水乙醇定容至50mL容量瓶中，得到濃度 為0. 04mg/mL的DPPH溶液，避光備用。2. 3. 3樣品測(cè)定取樣品溶液按表1加入反應(yīng)液，搖勻后于室溫避光靜置30min，在515nm處測(cè)定吸 光度值。用VC作對(duì)照。
表1石油醚層和乙酸乙酯層提取物樣品溶液加樣表
權(quán)利要求
一種落新婦根提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟(一)取落新婦根40目粉末，用6 8倍量70％乙醇室溫下浸提8h 10h，靜置過濾；(二)將濾渣再分別用8倍量與6倍量70％的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，30℃，80W，超聲30min；(三)合并濾液，回收溶劑即得總提取物；(四)將(三)中總提取物用水混懸，再用石油醚和乙酸乙酯分別萃取總提取物3次；(五)分別合并石油醚層和乙酸乙酯層萃取液；(六)將(五)中石油醚層和乙酸乙酯層萃取液分別減壓濃縮，冷凍干燥，得到落新婦根石油醚層提取物和乙酸乙酯層提取物。
2.權(quán)利要求1所述的落新婦根提取物的制備方法，特征在于其原料為落新婦 Astilbechinensis (Maxim.) Franch. et Sav 的根。
3.一種落新婦根提取物的用途，其特征在于該落新婦根提取物對(duì)ABTS+自由基和DPPH 自由基有很強(qiáng)的清除作用。
4.一種落新婦根提取物的用途，其特征在于該落新婦根提取物可開發(fā)為天然抗氧化藥 品，代替人工合成的抗氧化劑治療因人體內(nèi)自由基過多而產(chǎn)生的疾病。
5.權(quán)利要求3、4任一項(xiàng)所述的落新婦根提取物的用途，特征在于其制備原料為落新婦 Astilbe chinensis (Maxim.) Franch. et Sav 的根。
全文摘要
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種落新婦根提取物的制備方法及其用途。取落新婦根粉末，用70％乙醇室溫下浸提8h-10h，靜置過濾，將濾渣再分別用8倍量與6倍量70％的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，30℃，80W，超聲30min，合并濾液，回收溶劑即得總提取物，用石油醚和乙酸乙酯分別萃取總提取物3次，分別合并石油醚層和乙酸乙酯層萃取液，將石油醚層和乙酸乙酯層萃取液分別減壓濃縮，冷凍干燥，得到落新婦根石油醚層提取物和乙酸乙酯層提取物。該落新婦根提取物對(duì)ABTS+自由基和DPPH自由基有很強(qiáng)的清除作用，可開發(fā)為天然抗氧化藥品，代替人工合成的抗氧化劑治療因人體內(nèi)自由基過多而產(chǎn)生的疾病。
文檔編號(hào)A61P19/02GK101972287SQ201010519690
公開日2011年2月16日 申請(qǐng)日期2010年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月18日
發(fā)明者關(guān)鍵, 孫麗, 張巖, 張崇禧, 張騰, 楊淑超, 鄭友蘭, 陳曉芳 申請(qǐng)人:山東大學(xué)威海分校