專利名稱：天仙果萃取物作為用于防止皮膚老化的藥劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天仙果萃取物及其用于防止皮膚老化的用途。
背景技術(shù)：
天仙果為?？?Moraceae)榕屬(Ficus genus)植物，別名臺(tái)灣榕、小本牛乳埔、羊奶頭、羊奶仔、山金棗、山拔紫、玉帶角等。天仙果分布在中國(guó)大陸、香港、越南及臺(tái)灣全境山麓至低海拔山區(qū)的陰濕地闊葉林內(nèi)或荒野灌木叢中，在臺(tái)灣東部地區(qū)低海拔山區(qū)也可發(fā)現(xiàn)其蹤跡。天仙果植株為常綠性灌木，全株內(nèi)含白色乳汁，葉互生具短柄，葉片形狀呈長(zhǎng)橢圓形、披針形或長(zhǎng)菱形，全緣或具有疏鋸齒，葉部型態(tài)變異很大，葉片顏色為銀色或綠色，果實(shí)呈卵形或倒卵形，果實(shí)未成熟時(shí)呈綠色，表面有白色斑點(diǎn)，果實(shí)成熟時(shí)呈紫黑色。根據(jù)甘偉松教授所著的“藥用植物學(xué)”記載，全株均可為藥用，具有袪風(fēng)活血及治療風(fēng)濕病等效用 (請(qǐng)參張同吳“臺(tái)灣保健植物的多樣性與利用研究”；2005年9月22日，臺(tái)灣地區(qū)植物資源的多樣性發(fā)展研討會(huì))。已知天仙果具有袪風(fēng)活血、強(qiáng)筋壯骨及消腫等功能，民間常以天仙果全株主治風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛、急慢性肝炎、腰扭傷、小兒發(fā)育不良、白帶、下消、月經(jīng)不順、乳汁不下、咳嗽、毒蛇咬傷及尿路感染等病癥。民間習(xí)知對(duì)于天仙果的用法干品鮮品均可，多以湯劑或燉劑煮食天仙果的根部及果實(shí)以制成天仙酒，并宣稱其具有壯陽功效。國(guó)內(nèi)針對(duì)天仙果的藥理作用的研究發(fā)現(xiàn)，臺(tái)灣天仙果具有抗人類肝癌細(xì)胞株及淋巴癌細(xì)胞株的毒殺作用等能力(許(Sheu Yff)、常(Chiang LC)、陳(Chen IS)、陳(ChenYC)、 蔡(Tsai IL)，天然藥物學(xué)會(huì)會(huì)志(Planta Med.) 2005 年 12 月；71 (12) :1165-7) 0 目前仍有待開發(fā)天仙果多方面的應(yīng)用性。人口老化是全球性的趨勢(shì)，而老化后最明顯的即是皮膚外觀的變化，因此延緩皮膚老化的相關(guān)產(chǎn)品特別受到矚目。一般來說，皮膚老化可分為兩種基本過程內(nèi)源性老化及外源性老化。內(nèi)源性老化為自然衰老的過程，又稱固有性老化，與遺傳因素、年齡有關(guān)，而外源性老化與外界刺激例如紫外線、太陽風(fēng)暴、臭氧層破壞、地心引力、抽煙、溫濕度變化、皮膚病癥、血管病變、過敏等有關(guān)。由紫外線引起的皮膚老化又稱為光老化(photoaging)，其也是引起皮膚癌的主要原因。皮膚老化的主要癥狀為失去彈性，其是由于皮膚中膠原蛋白的產(chǎn)生減少，或膠原蛋白的降解增加。膠原蛋白為纖維狀結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，其為結(jié)締組織的細(xì)胞外基質(zhì) (extracellular matrix, ECM)的主要成分。膠原蛋白的降解會(huì)導(dǎo)致皮膚外貌及功能的改變，例如產(chǎn)生皮膚表面細(xì)紋、深層皺紋、裂縫、腫塊、粗大毛孔、鱗片化、失去皮膚彈性(如眼袋)、失去皮膚緊實(shí)度、皮膚變色(如黑眼圈)、產(chǎn)生斑點(diǎn)、色素沉淀、皮膚角化、毛細(xì)管擴(kuò)張及其它組織變化。彈性蛋白酶可使皮膚有彈性。由于在自然老化過程中，彈性蛋白會(huì)被自由基或彈性蛋白酶所破壞，導(dǎo)致皮膚彈性降低。因此，化妝品中經(jīng)常會(huì)添加彈性蛋白酶抑制劑。
皮膚的細(xì)胞外基質(zhì)提供皮膚的強(qiáng)度及完整性?；|(zhì)金屬蛋白酶 (matrixmetalloproteinase, MMP)是一種可分解肽鍵結(jié)的蛋白酶，因此其可降解細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白。MMP在皮膚自我修護(hù)的正常降解及重塑部分扮演重要的角色。然而，當(dāng) MMP過度活化時(shí)，會(huì)導(dǎo)致病理狀況或使病理狀況惡化，而造成組織功能及/或構(gòu)造的喪失。 目前已知有超過25種的MMP與皮膚細(xì)胞外基質(zhì)的重塑、傷口愈合、炎癥反應(yīng)等反應(yīng)有關(guān)。其中3種MMP，即MMP-I、MMP-2及MMP-9被認(rèn)為與皮膚細(xì)胞外基質(zhì)特別相關(guān)，且在正常及病理組織重塑中扮演重要角色。MMP-1、MMP-2及MMP-9特別受到重視的原因有兩個(gè)，其一是這些MMP的底物為皮膚的重要結(jié)構(gòu)成分，其二是皮膚長(zhǎng)期暴露在會(huì)刺激這些MMP形成病理狀態(tài)的因素下，例如炎癥反應(yīng)、氧化性應(yīng)激及紫外線。因此，目前認(rèn)為選擇性抑制MMP-I、MMP_2 及MMP-9比抑制所有金屬蛋白酶在減緩皮膚老化上更有益處及有效?；? 安全性及天然性考慮，所屬領(lǐng)域中已嘗試由天然產(chǎn)物中開發(fā)抗老化制劑。例如，中國(guó)臺(tái)灣第1287997號(hào)專利揭露一種防止皮膚老化組成物，其特征為含有醫(yī)學(xué)上容許的皮膚外用基劑及或添加劑，與1種或2種以上選自以下植物的植物萃取物水丁香 (Ludwigia octovalvis)、魚針草(Anisomeles indica)、半邊蓮(Lobelia chinensis)、 風(fēng)母草(Urena lobata)、馬鞭草(Verbana officinalis)、寬絲子(Cuscuta australis)、 馬 β帝 t (Dchondra micrantha)Λ Of Τ* (Phyllanthus urinaria)Λ 胃耳只(Physalis angulata)、白花菜(Cleome gynandra)、山芥菜(Rorippa indica)、遍地錦(Hydrocotyle formosana)、傷寒草(Vernonia cinerae)、金鈕扣(Spilanthes acmella)、美人蕉(Canna indica)、馬革安藤(Ipomoeapes-caprae)、化石樹(Clerodendrum calamitosum)、錦地羅 (Drosera burmanni)、金線蓮(Anoectochilus formosanus)、南嶺堯花(Wikstroemia indica)、白葉朿Ij 豐艮(Elaeagnusoldhamii)、玉葉金花(Mussaenda parvif Iora)、臺(tái)灣馬鹿鈴(Aristolochia mollis)、黃金桂(Cudrania cochinchinensis var. gerontogea) Λ 臭茉莉(Clerodendrum philippinum)、大青(Clerodendrum cyrtophyllum)、白龍船花 (Clerodendrum paniculataum var. albifloraum)、木芒麻(Boehmeria densifIora)、牙鳥曰 (Sapium sebiferum)、三葉葡萄(Tetrastigmadentatum)、小葉葡萄(Vitis thunbergii)、 ^ ^ (Bredia οldhami) λ Pp1 ^ ζ (Staurogyneconcinnula)、^"上豐白(Selaginella doederleinii)、古月枝子(Lespedeza cuneata)、細(xì)葉水丁香(Ludwigia hyssopifolia)、 烏蔽(Sphenomeris chusana)、鐵線蔽(Adiantum flabellulatum)、目艮草(Kummerowia striata)、海州常山(Clerodendrum trichotomum)、黃荊(Vitexnegundo)、咸豊草(Bidens pilosa var. minor)、鼠曲草(Gnaphalium affine)、紫背草(Emiliasonchifolia)、含羞草(Mimosa pudica)、乳仔草(Euphorbia hirta)、車前草(Plantagoformosana)、 白 ε ■ (Plumbago zeylanica) λ IT iife 蟲公(Torenia concolor var. formosona)、大甲草(Euphorbia formo sana)、戟葉紫花地丁(Viola phillippica)、臺(tái)灣何首烏 (Polygonummultiflorum var. hyopleucum)、牛乳格(Ficus erecta var. beecheyana)、 蓖葉燈籠草(Kalanchoe spathulata)、扛香藤(Mallotus r印andus)、臺(tái)灣鉤藤 (Uncaria hirsuta)、羅氏鹽膚木(Rhus semialata var. roxburghiana)、金劍草(Rubia lanceolata)、紅花鼠尾草(Salviacoccinea)、兔仔菜(Ixeris chinensis)、刀傷草 (Ixeris laevigata var. oldhami) λ^Μ^ (Clerodendrum inerme)、才土蟲工# (Callicarpa formo sana)、銅錘玉帶草(Pratianummularia)B 三葉五力口(Acanthopanax trifoliatus)。根據(jù)現(xiàn)在的潮流，仍有需要發(fā)展天然、安全且具更佳效果的美白防皺、增進(jìn)皮膚彈性的產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種用于防止皮膚老化的組合物，其包含天仙果萃取物。本發(fā)明的另一目的是提供一種防止皮膚老化的化妝品，其包含本發(fā)明的組合物。本發(fā)明的又一目的是提供一種天仙果萃取物的用途，其用于制備防止皮膚老化的組合物。本發(fā)明在以下部分中詳細(xì)描述。本發(fā)明的其它特征、目的及優(yōu)點(diǎn)可易見于本發(fā)明的實(shí)施方式及權(quán)利要求書中。


圖1為本發(fā)明天仙果萃取物樣品及標(biāo)準(zhǔn)品樣品的HPLC分析圖譜。圖2為本發(fā)明天仙果萃取樣品的明膠/酪蛋白酶分析圖譜。
具體實(shí)施例方式在本發(fā)明之前，并沒有任何報(bào)告指出或推測(cè)天仙果具有延緩皮膚老化，特別是防皺、美白、減少細(xì)紋、增進(jìn)皮膚彈性等功效，也甚至沒有任何報(bào)告指出天仙果具有幫助皮膚創(chuàng)傷愈合的效果。在本發(fā)明中，出人意料地發(fā)現(xiàn)天仙果萃取物具有抑制細(xì)胞分泌MMP-1、 MMP-2及MMP-9及抑制彈性蛋白酶的功效。因此，本發(fā)明提供一種可用于防止皮膚老化，例如防皺、美白、減少細(xì)紋、增進(jìn)皮膚彈性及幫助傷口愈合的效果的含有天仙果萃取物。本發(fā)明另外提供一種防止皮膚老化的組合物，其包含如本發(fā)明的天仙果萃取物。 本發(fā)明還提供一種如本發(fā)明的天仙果萃取物用于制備防止皮膚老化的組合物的用途。除非本文中另外定義，否則結(jié)合本發(fā)明使用的科技術(shù)語應(yīng)具有所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員通常理解的含義。術(shù)語的含義及范疇?wèi)?yīng)為明確的；然而，若存在任何潛在含糊性，則本文所提供的定義優(yōu)先于任何詞典或外來定義。除非另外指示，否則應(yīng)了解如本揭示案所用的以下術(shù)語具有以下含義如本文所使用的術(shù)語“皮膚老化” 一詞包括皮膚外貌及功能的改變，例如產(chǎn)生皮膚表面細(xì)紋、深層皺紋、裂縫、腫塊、粗大毛孔、鱗片化、失去皮膚彈性(如眼袋)、失去皮膚緊實(shí)度、皮膚變色(如黑眼圈)、產(chǎn)生斑點(diǎn)、色素沉淀、皮膚角化、毛細(xì)管擴(kuò)張及其它組織變化。如本文所用的術(shù)語“防止”表示預(yù)防或阻止癥狀產(chǎn)生，或改善或回復(fù)已產(chǎn)生的癥狀。術(shù)語“載劑”或“化妝品中可接受的載劑”是指稀釋劑、賦形劑或類似物，其為各該行業(yè)所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。本發(fā)明的化妝品還可進(jìn)一步包含可用于防止皮膚老化的活性成分，例如維生素A 酸、維生素A醇、熊果素、玻尿酸、表皮生長(zhǎng)因子及其它天然美白成分等。術(shù)語“天仙果萃取物”表示將天仙果植株經(jīng)溶劑萃取后的萃取物。優(yōu)選地，本發(fā)明的天仙果萃取物采用臺(tái)灣產(chǎn)出的臺(tái)灣天仙果(Ficus formosana Maxim.)，將天仙果植株全株經(jīng)干燥后，使用超聲波震蕩或回流方式以溶劑萃取獲得。優(yōu)選地，本發(fā)明的天仙果萃取物是取自天仙果果實(shí)或根須狀部分。本發(fā)明所使用的溶劑優(yōu)選地為選自醇類、DMS0、乙酸乙酯、丙酮、鹵烷類溶劑或其混合物所組成的群組，更優(yōu)選地為濃度為約100%至約25%的甲醇或乙醇。更優(yōu)選地，本發(fā)明天仙果萃取物具有如圖1的HPLC圖譜。本發(fā)明天仙果萃取物的制備可使用芹菜素作為指標(biāo)成份，作為工藝中質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，本發(fā)明提供一種組合物，其包含本發(fā)明的天仙果萃取物。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，本發(fā)明的組合物包含約0. 5mg/mL至5mg/mL的天仙果萃取物。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物包含約lmg/mL至5mg/mL的天仙果萃取物。最優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物包含約1、2. 5或5mg/mL的天仙果萃取物。本發(fā)明的萃取物及組合物具有抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-1、-2及-9(MMP-1、MMP_2及 MMP-9)的活性及抑制彈性蛋白酶的活性。除非上下文另外需要，否則單數(shù)術(shù)語應(yīng)包括復(fù)數(shù)且復(fù)數(shù)術(shù)語應(yīng)包括單數(shù)。本發(fā)明是以以下的非限制性的實(shí)例探討天仙果萃取物的制備及其應(yīng)用于防止皮膚老化的用途。所述實(shí)例不應(yīng)視為過度地限制本發(fā)明。本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員可在不背離本發(fā)明的精神或范疇的情況下對(duì)本文所討論的實(shí)施例進(jìn)行修改及變化，而仍屬于本發(fā)明的范圍。實(shí)例實(shí)例1臺(tái)灣天仙果萃取物樣品的制備本實(shí)例是以產(chǎn)地為臺(tái)灣的天仙果作為原料，其中所采用的臺(tái)灣天仙果已通過“臺(tái)灣天仙果農(nóng)藥及重金屬限量標(biāo)準(zhǔn)值”。取臺(tái)灣天仙果(干材進(jìn)貨)，取其外觀為部分根須狀物，部分夾雜小于四厘米片狀物，進(jìn)行研磨以通過30孔篩。根據(jù)紅外線水分測(cè)定儀操作說明測(cè)試含水率，并控制臺(tái)灣天仙果樣品的水分含量低于10%。取上述水分含量低于10%的臺(tái)灣天仙果50克置于1升四頸平底燒瓶，加入100% 甲醇500毫升，加熱回流萃取4小時(shí)，離心及過濾，定量濾液體積(Vl)并取其中1毫升濾液進(jìn)行后續(xù)HPLC分析。再次加入100%甲醇500毫升溶解燒瓶?jī)?nèi)殘?jiān)M(jìn)行第二次加熱回流萃取3小時(shí)，離心及過濾，定量濾液體積(M)并取其中1毫升進(jìn)行HPLC分析。秤取烘干至約10毫克的浸膏樣品，加入1毫升100%甲醇，在室溫下以超聲波震蕩器震蕩30分鐘，離心及過濾，取1毫升濾液進(jìn)行HPLC分析。實(shí)例2標(biāo)準(zhǔn)品及空白溶液的制備秤取芹菜素5mg置于2mL容量瓶中，加入少許甲醇搖勻溶解后，再加入甲醇至刻度，使標(biāo)準(zhǔn)品濃度為2500 μ g/mL。隨后根據(jù)表2標(biāo)示的體積，加入甲醇連續(xù)稀釋不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品表2芹菜素標(biāo)準(zhǔn)品濃度濃度(μ g/mL) ；ppm 0 100 200 300 400 5002500 μ g/mL 標(biāo)準(zhǔn)品(mL) 0 0. 08 0. 16 0. 24 0. 32 0.4甲醇(mL)2 1.92 1.84 1. 76 1.68 1.6上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液，經(jīng)HPLC分析后，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)值，峰面積值為縱坐標(biāo)值作直線回歸分析，得到經(jīng)過原點(diǎn)的X-Y直線，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)(R2) 0. 999 1，才能使用。在本實(shí)施例中，以50 %流動(dòng)相A及50 %流動(dòng)相B作為空白溶液。實(shí)例3本發(fā)明天仙果萃取物及標(biāo)準(zhǔn)品HPLC分析測(cè)試HPLC分析設(shè)備及方法材料所有溶劑和試劑均為HPLC級(jí)(購(gòu)自默克(Merck))。天仙果指標(biāo)成分標(biāo)準(zhǔn)品(HPLC 標(biāo)定99% )芹菜素(Aplgenin)(購(gòu)自西格瑪(Sigma))。儀器美商沃特斯(WATERS)高效液相色譜系統(tǒng)(LC模塊I型(LC-Module I))。分析用天平，讀值可至0.1毫克。HPLC分析條件色譜柱為0DS3，C18柱(250 X 4. 6mm，5 μ m)(購(gòu)自瓦里安(Varian))，柱溫度為室溫，測(cè)定波長(zhǎng)254nm，進(jìn)樣體積15 μ L，流動(dòng)相速度0. SmL/min，以甲醇作為樣本溶劑，分析時(shí)間為42分鐘。進(jìn)樣前，各樣品先分別以0.45 μ m的尼龍(Nylon)濾膜過濾。進(jìn)樣后，C18柱另有保護(hù)柱過濾。 HPLC分析的流動(dòng)相制備流動(dòng)相A 0. 1 %三氟醋酸(TFA)水溶液。流動(dòng)相B: 100%甲醇梯度分析條件如表1所示表1 HPLC梯度分析條件
權(quán)利要求
1.一種用于防止皮膚老化的天仙果萃取物，其是以選自下列群組的溶劑萃取天仙果制得醇類、DMSO、乙酸乙酯、丙酮、鹵烷類溶劑及其混合物。
2.如權(quán)利要求1所述的萃取物，其中所述萃取是以超聲波震蕩或回流方式進(jìn)行。
3.如權(quán)利要求1所述的萃取物，其中所述醇類為甲醇、乙醇或正丁醇。
4.如權(quán)利要求1所述的萃取物，其中所述醇類為甲醇。
5.如權(quán)利要求3所述的萃取物，其中所述甲醇或乙醇的濃度為約100%至約25%。
6.如權(quán)利要求3所述的萃取物，其中所述甲醇或乙醇的濃度為100%、75%、70%或 50%。
7.如權(quán)利要求1所述的萃取物，其中所述天仙果是臺(tái)灣天仙果(Ficus formosanaMax im)。
8.如權(quán)利要求1所述的萃取物，其中所述天仙果為其果實(shí)或根須狀部分。
9.如權(quán)利要求1所述的萃取物，其具有如圖1所示的HPLC圖譜。
10.如權(quán)利要求1至9中任一權(quán)利要求所述的萃取物，其具有抑制MMP-I、MMP-2及/或 MMP-9的活性。
11.如權(quán)利要求1至9中任一權(quán)利要求所述的萃取物，其具有抑制彈性蛋白酶的活性。
12.如權(quán)利要求1至9中任一權(quán)利要求所述的萃取物，其中所述防止皮膚老化包括減少皮膚細(xì)紋、促進(jìn)皮膚傷口愈合、保存皮膚水分及增加皮膚彈性。
13.一種防止皮膚老化的組合物，其包含如權(quán)利要求1至12中任一權(quán)利要求所述的萃取物，以及構(gòu)成該組合物所需的載劑。
14.如權(quán)利要求13所述的組合物，其進(jìn)一步包含其它可用于防止皮膚老化的活性成分。
15.如權(quán)利要求13或14所述的組合物，其中所述防止皮膚老化包括減少皮膚細(xì)紋、促進(jìn)皮膚傷口愈合、保存皮膚水分及增加皮膚彈性。
16.如權(quán)利要求13或14所述的組合物，其中所述萃取物在所述組合物中的含量為約 0. lmg/mL 至 10mg/mLo
17.如權(quán)利要求13或14所述的組合物，其可為化妝品、保養(yǎng)品、食品、保健食品、健康食品、動(dòng)物用藥品或人類用藥品。
18.一種如權(quán)利要求1至9中任一權(quán)利要求所述的天仙果萃取物的用途，其用于制備防止皮膚老化的組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用于防止皮膚老化的組合物，其包含天仙果萃取物。本發(fā)明還提供一種包含天仙果萃取物的防止皮膚老化的化妝品。本發(fā)明還涉及天仙果萃取物用于制備防止皮膚老化的組合物的用途。
文檔編號(hào)A61K8/97GK102274288SQ20101019941
公開日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2010年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月9日
發(fā)明者呂思潔, 楊寄明, 陳嘉琪, 黃怡仁 申請(qǐng)人:臺(tái)灣糖業(yè)股份有限公司