專利名稱：含笑內(nèi)酯脂質(zhì)微球注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更確切的說它是一種含有含笑內(nèi)酯的注射用脂質(zhì)微球 (水包油乳劑)的制備及配方。
背景技術(shù)：
全球每年癌癥新發(fā)病例為1000萬(wàn)，因癌癥死亡人數(shù)為700萬(wàn)，現(xiàn)患者病例2200萬(wàn) (數(shù)據(jù)來(lái)源中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)2005年)。且呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)，今后20年新患者人數(shù)將由目前的每年1000萬(wàn)增加到1500萬(wàn)，因癌癥而死亡的人數(shù)也將由每年約700萬(wàn)增至1000萬(wàn)。而在我國(guó)，每年新發(fā)病例220萬(wàn)，因癌癥死亡人數(shù)為160-170萬(wàn)，現(xiàn)患者病例310萬(wàn)人(數(shù)據(jù)來(lái)源中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)2005年)。2006年因癌癥而死亡的人數(shù)達(dá)180萬(wàn)，已經(jīng)超越心血管疾病的死亡人數(shù)，成為我國(guó)居民的第一號(hào)“殺手”。中國(guó)平均4-5個(gè)死亡者就有1個(gè)是死于癌癥，癌癥每年給中國(guó)造成的經(jīng)濟(jì)損失逾千億元。近年來(lái)越來(lái)越多的證據(jù)顯示，癌癥的產(chǎn)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)與耐藥性的根源在于含量極少的癌癥干細(xì)胞(CSCs，Cancer Stem Cells)。例如白血病，愈后復(fù)發(fā)就是最大的難題，其根本原因在于白血病患者體內(nèi)存在LSC，這群數(shù)量極少的細(xì)胞常常處于靜止期，對(duì)放化療不敏感。盡管許多藥物能使骨髓中的血病細(xì)胞減少到“正常范圍”而達(dá)到所謂的完全緩解。實(shí)際上，LSC很難被觸動(dòng)而根除，一旦條件適合，殘留的LSC又可通過增殖與分化引發(fā)新的白血病。2009年，Lander等在Cell上報(bào)道，用途最廣泛的小分子抗癌藥物-紫杉醇，盡管可以抑制主體癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，但由于對(duì)CSCs沒有活性，導(dǎo)致CSCs在癌細(xì)胞中的比例增加，反而更容易引發(fā)新的腫瘤小球。因此針對(duì)腫瘤干細(xì)胞的藥物研究為徹底治愈癌癥提供可能。倍半萜內(nèi)酯類化合物小白菊內(nèi)酯(Parthenolide)是從小白菊中提取的化合物， 最初被用來(lái)治療皮膚感染、風(fēng)濕病以及偏頭痛。近期研究表明，小白菊內(nèi)酯可抑制前列腺癌、乳腺癌、胃癌、白血病癌、腎癌、肺癌、結(jié)腸腺癌、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤等癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，在動(dòng)物模型上小白菊內(nèi)酯還能治療紫外線引起的皮膚癌。對(duì)其作用機(jī)理研究發(fā)現(xiàn)，小白菊內(nèi)酯能抑制轉(zhuǎn)錄因子NF- κ B的激活，其活性可能主要來(lái)源于p65/NF- κ B亞基的Cys38上的巰基與小白菊內(nèi)酯發(fā)生了 Michael加成反應(yīng)，由于NF-k B是調(diào)控腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移、藥物抗性的重要基因，抑制NF-K B的激活有可能提高腫瘤對(duì)于抑瘤劑所引起的細(xì)胞凋亡的敏感性。最近，紐約羅切斯特大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Jordan，C. Τ.博士及其同事發(fā)現(xiàn)小白菊內(nèi)酯能夠在基本不損傷正常干細(xì)胞的情況下，針對(duì)性地消滅引發(fā)急性和慢性骨髓性白血病的干細(xì)胞，從而有可能根本上遏制白血病復(fù)發(fā)，小白菊內(nèi)酯這一獨(dú)特的作用機(jī)制，已引起人們的廣泛關(guān)注。含笑內(nèi)酯也屬于倍半萜內(nèi)酯類化合物，為愈創(chuàng)木烷型倍半萜內(nèi)酯類化合物，已經(jīng)有文獻(xiàn)報(bào)道[J. Nat. Prod. 1993，56，90-98 ；Bioorg. Med. Chem. Lett. 2003，11，1503-1510]。 但由于含笑內(nèi)酯水溶性、穩(wěn)定性與生物利用度均較差，這就限制了其在臨床上的應(yīng)用。因此可利用脂質(zhì)微球技術(shù)克服這一缺點(diǎn)，并可起到減少刺激性、降低毒副作用的目的。脂質(zhì)微球的制備方法是將藥物包裹于脂肪乳劑的脂質(zhì)核心部分，由于該結(jié)構(gòu)亦類似于微球，因此稱為脂質(zhì)微球。一般認(rèn)為脂質(zhì)微球是通過將藥物溶于脂肪油中，并經(jīng)磷脂乳化分散于水相后制成，是一種以脂肪油為軟基質(zhì)而被磷脂膜包封的微粒分散體系，平均粒徑在200nm左右。脂質(zhì)微球的特殊的理化特性和低毒性決定了其可以作為脂溶性藥物，特別是抗癌藥物、麻醉藥物及抗炎藥物的良好載體①脂溶性藥物的良好載體。臨床不少藥物水溶性差，必須依靠有機(jī)溶劑才能發(fā)揮作用，而有機(jī)溶劑不僅本身有一定毒性，還可能干擾藥物效果。②有效增加藥物的穩(wěn)定性。含藥脂質(zhì)微球中，有相當(dāng)一部分藥物分布在油相或油水界面膜中，避免了直接與水接觸。對(duì)于易水解或?qū)H變化敏感的藥物，這種“隔離”起到了增加穩(wěn)定性的作用。③藥物部分包裹于油相或界面膜中，避免了與體液的直至接觸，因而降低了藥物自身可能產(chǎn)生的局部及血管刺激性。另外，藥物在體內(nèi)是由油相中緩慢釋放，可避免藥物在注射用時(shí)由于初期濃度過高而引起的不良反應(yīng)。④粒徑在200nm左右的小微粒能被機(jī)體的網(wǎng)狀組織系統(tǒng)的吞噬細(xì)胞所吞噬而滯留在網(wǎng)狀組織系統(tǒng)(如肝臟、肺等)中，具有靶向性，這種特點(diǎn)對(duì)于抗腫瘤藥物提高藥效、降低毒副作用尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種含有含笑內(nèi)酯的脂質(zhì)微球注射液(水包油乳劑)及制備方法。該注射液包含含笑內(nèi)酯，油相，水和表面活性劑。油相指示一大類生理可接受性物質(zhì)，如紅花油，大豆油，玉米油，中鏈脂肪酸甘油三酯(MCT)，薏苡仁油，鴉膽子油，及其混合物。優(yōu)選為大豆油，MCT，薏苡仁油。表面活性劑可為任何表面活性劑，通常為磷脂，吐溫(Tween)，普朗尼克 (poloxamer)，油酸鈉，油酸，膽酸，去氧膽酸及其混合物。所述磷脂選自卵磷脂，豆磷脂，及其混合物。所述吐溫選自吐溫20，吐溫40，吐溫60，吐溫80，吐溫85，及其混合物。優(yōu)選為卵磷脂，豆磷脂，油酸鈉，油酸，吐溫80，普朗尼克F68，及其混合物。典型地，以制劑質(zhì)量計(jì)本發(fā)明的配方組成為
油相5-30%
含笑內(nèi)酯0. 01-5%
表面活性劑0. 1-5%
甘油0. 1-5%
其余為注射用水
優(yōu)選配方組成為
油相15-25%
含笑內(nèi)酯0. 1-2%
表面活性劑2-4%
甘油0. 5-2%
其余為注射用水
本發(fā)明也涉及含有含笑內(nèi)酯的脂質(zhì)微球注射液和水包油乳劑的制備方法。包含以
下步驟將含笑內(nèi)酯加入至含有表面活性劑的水溶性介質(zhì)中，然后與油相混合，經(jīng)過高速攪拌制備初乳；對(duì)初乳進(jìn)行高壓均質(zhì)，并采用高壓旋轉(zhuǎn)滅菌。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1處方1 注射用大豆油
IOg Ig 2g Ig Ig含笑內(nèi)酯豆磷脂甘油 Tween-80注射用水加至 IOOml制備方法1 (1)將注射用甘油、F68分散于適量注射用水中，至攪拌中加至60-70 □攪拌至全部溶解；( 注射用豆磷脂、Tween-80、含笑內(nèi)酯加入至注射用大豆油中，加至60-70 □下攪拌至豆磷脂和含笑內(nèi)酯完全溶解；⑶將油相加入至水相中，于高速切機(jī)攪拌數(shù)分，3 ； (4) 調(diào)pH至4-9，注射用水釋定容至處方量，轉(zhuǎn)移至高壓微射均質(zhì)3-7 ； (5)，封，于高壓旋轉(zhuǎn)滅菌中，滅菌。實(shí)施例2處方2 大豆油/MCT 15g含笑內(nèi)酯0.05g卵磷脂Ig甘油0. 5g油酸鈉0. 5g注射用水加至 IOOmL制備方法2 (1)將注射用甘油、油酸鈉、F68分散于適量注射用水中，至攪拌中加至60-70 □攪拌至全部溶解；(2)注射用卵磷脂、Tween-80、含笑內(nèi)酯加入至由注射用MCT、注射用大豆油組成的混合油相中，加至60-70 □下攪拌至卵磷脂和含笑內(nèi)酯完全溶解；C3)將油相加入至水相中，于高速切機(jī)攪拌數(shù)分，3 ;(4)調(diào)pH至4-9，注射用水釋定容至處方量，轉(zhuǎn)移至高壓微射均質(zhì)3-7 (5)，封，于高壓旋轉(zhuǎn)滅菌中，滅菌。實(shí)施例3處方3 注射用薏苡仁油20g含笑內(nèi)酯2g豆磷脂2. 5g甘油Ig注射用水加至 IOOml制備方法3 (1)將處方量的豆磷脂、甘油與至60-70的適量注射用水進(jìn)行混合，攪拌至全部溶解；( 注射用豆磷脂、含笑內(nèi)酯加入至注射用薏苡仁油中，加至60-70 □下攪拌至豆磷脂和含笑內(nèi)酯完全溶解；(3)將油相加入至水相中，于高速切機(jī)攪拌數(shù)分，3 ;(4)調(diào)pH至4-9， 注射用水釋定容至處方量，轉(zhuǎn)移至高壓微射均質(zhì)3-7 ； (5)，封，于高壓旋轉(zhuǎn)滅菌中，滅菌。
本發(fā)明的脂質(zhì)微球注射液、用途和方法已經(jīng)通過具體的實(shí)施例進(jìn)行了述。本領(lǐng)域技術(shù)人可以本發(fā)明的內(nèi)容適當(dāng)變?cè)l件等來(lái)實(shí)現(xiàn)相應(yīng)的其它目的，其相關(guān)變沒有離本發(fā)明的內(nèi)容，所有類似的和動(dòng)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人來(lái)說是顯而易的，被為包在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種含含笑內(nèi)酯的脂質(zhì)微球注射液的組合物。該組合物包含含笑內(nèi)酯，油相，水和表面活性劑。
2.權(quán)利要求1中的脂質(zhì)微球注射液也可以是一種供靜脈輸液用的含含笑內(nèi)酯的水包油乳劑。構(gòu)成脂質(zhì)微球注射液的組合物與水包油乳劑的組合物相同。
3.權(quán)利要求1中所述油相選自紅花油，大豆油，玉米油，中鏈脂肪酸甘油三酯(MCT)，薏苡仁油，鴉膽子油，及其混合物。優(yōu)選為大豆油，MCT，薏苡仁油。
4.權(quán)利要求1中所述表面活性劑選自磷脂，吐溫(Tween)，普朗尼克(poloxamer)F68， 油酸鈉，油酸，膽酸，去氧膽酸及其混合物。
5.權(quán)利要求4中所述磷脂選自卵磷脂，豆磷脂，或者是二者混合物。
6.權(quán)利要求4中所述吐溫選自吐溫20，吐溫40，吐溫60，吐溫80，吐溫85，或者是以上不同規(guī)格的任意比例混合物。優(yōu)選為吐溫80。
7.權(quán)利要求1中的組合物還可能含有甘油，山梨醇，甘露醇，葡萄糖，及其混合物。
8.權(quán)利要求1中的組合物還可能含有氫氧化鈉，鹽酸，及其混合物。
9.權(quán)利要求1中所述油相以制劑計(jì)用量為約5-30%。優(yōu)選為15-25%。
10.權(quán)利要求1中所述含笑內(nèi)酯以制劑計(jì)用量為約0.01-5%。優(yōu)選為0.1-2%。
11.權(quán)利要求1中所述表面活性劑以制劑計(jì)用量為約0.1%-5%。優(yōu)選為2-4%。
12.權(quán)利要求7中所述甘油以制劑計(jì)用量為約0.至約5%。優(yōu)選為0.5-2%。
13.權(quán)利要求1中所述含笑內(nèi)酯脂質(zhì)微球注射液制備方法如下將含笑內(nèi)酯加入至含有表面活性劑的水溶性介質(zhì)中，然后與油相混合，經(jīng)過高速攪拌制備初乳；對(duì)初乳進(jìn)行高壓均質(zhì)，并采用高壓旋轉(zhuǎn)滅菌。
全文摘要
本發(fā)明涉及含笑內(nèi)酯脂質(zhì)微球注射液及制備工藝，該含笑內(nèi)酯脂質(zhì)微球的主要成分及配比為油相5-30％，含笑內(nèi)酯0.01-5％，表面活性劑0.1-5％，甘油0.1-5％，其余為注射用水。粒徑范圍，＜1μm。本發(fā)明含笑內(nèi)酯脂質(zhì)微球用于癌癥治療，特別是治療急性白血病，對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病和急性粒細(xì)胞性白血病，可作為首選藥物；對(duì)淋巴肉瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤等也有明顯治療效果；也可以和其它藥物聯(lián)合使用。
文檔編號(hào)A61K9/16GK102258466SQ20101018421
公開日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2010年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月27日
發(fā)明者盧亞欣, 張泉, 翟佳黛, 陳悅 申請(qǐng)人:南開大學(xué), 天津尚德藥緣科技有限公司