專利名稱：一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法，采用有機(jī)溶劑提取，
活性炭脫色和硅膠柱分離純化等工序制備東北貫眾素的方法。
背景技術(shù)：
東北貫眾素，又名綿馬貫眾素，是一種四環(huán)間苯三酚衍生物。 英文名稱Dryocrassin ; 分子式C43H48016 ; 分子量820. 83 ;
分子結(jié)構(gòu)式



物理性質(zhì)為黃色結(jié)晶(丙酮)，熔點(diǎn)201-203 °C (也有報(bào)道207-214 °C 、 215-218°C );難溶于水，可溶于苯，乙醚，四氯化碳，戊醇，丙酮，冰醋酸等多數(shù)有機(jī)溶劑及 堿性水溶液。 東北貫眾素是綿馬貫眾抗瘧活性及抗腫瘤活性的主要有效成分，有研究證明其具 有抗日本血吸蟲作用。 綿馬貫眾為鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨(東北貫眾)Dryopteris
crassirhizomaNakai的干燥根莖及葉柄殘基。呈倒卵形，上端鈍圓或截形，下端較尖，表面
黃棕色至黑褐色，密被排列整齊的葉柄殘基及鱗片，并有彎曲的須根。具有清熱解毒、驅(qū)蟲
的功效，用于蟲積腹痛、瘡瘍。其炭品止血，用于崩漏。主要化學(xué)成分為東北貫眾素、綿馬酸
類、黃綿馬酸類以及微量白綿馬素、粗蕨素、綿馬三萜、鞣質(zhì)、揮發(fā)油、樹脂等。 目前還未見有關(guān)于東北貫眾素提取純化工藝的相關(guān)研究。吳壽全等發(fā)表了《綿馬
貫眾化學(xué)成分研究I》，提取分離得到了東北貫眾素單體，但此方法只適合實(shí)驗(yàn)室。王海寧等
優(yōu)選出適合分離綿馬貫眾中東北貫眾素的大孔樹脂為匿130，并對(duì)優(yōu)選出的大孔樹脂分離
綿馬貫眾時(shí)的工藝條件和參數(shù)進(jìn)行研究，但是東北貫眾素水溶性很差，大孔樹脂分離難度
較大，不易操作。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法， 該法能有效提取高純度產(chǎn)品，便于工業(yè)化操作。
本發(fā)明是采用以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
將原料粉碎，加入乙醇溶液和氫氧化鈣，加熱提取2-3次，合并提取液濾過調(diào)節(jié)pH5-7，回收乙醇至濃度30-50%，放置8-12小時(shí)，濾出沉淀物，氯仿溶解加活性炭加熱脫色，濾后注入硅膠柱，先用4-6柱體積甲醇洗去雜質(zhì)，再用乙酸乙酯洗脫，TLC監(jiān)測(cè)，收集洗脫液，減壓回收洗脫劑；用丙酮溶解結(jié)晶，濾出低溫干燥即得產(chǎn)品。 所述的提取條件乙醇濃縮度80_90%，用量為物料的5-7倍，氫氧化鈣和物料比1 : 1000-2 : IOOO，溫度50-75。C，提取時(shí)間1-3小時(shí)。 所述活性炭脫色條件為活性炭為767針劑活性炭，加入量為溶液體積量的1_2%，回流脫色1-2小時(shí)。 所述硅膠柱分離條件硅膠用量為沉淀物的15-20倍，4-6柱體積甲醇洗去雜質(zhì)。
所述重結(jié)晶條件丙酮加熱飽和溶解粗晶，冷卻靜置析晶，結(jié)晶2-3次。
綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn) 1)堿醇提取，試劑損耗少，低濃度乙醇結(jié)晶除雜效果好；
2)767針劑活性炭脫色效果好，硅膠柱洗脫試劑單一易回收。 下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式
下述實(shí)施例中東北貫眾素的監(jiān)測(cè)采用薄層色譜法(參照馬國(guó)祥等"薄層色譜掃描法測(cè)定7種貫眾中東北貫眾素及綿馬酸ABA的含量")
薄層色譜條件 薄層板制備取硅膠G10g，加磷酸氫二鈉-檸檬酸的緩沖液(pH二7)10ml，維生素C100mg及0. 5% CMC-Na溶液20ml，調(diào)勻，鋪在20cmX20cm的薄層板上，晾干，于50。C活化2h。 展開劑正己烷-氯仿-甲醇(30 : 15 : 1); 先將點(diǎn)上樣的板放在展開缸中飽和2h后，展開，展距為18cm，0. 3X固蘭B鹽的
50%乙醇溶液為顯色劑，多次噴霧，晾干后，于4(TC條件下顯色，保持lh顯色完全。 下述實(shí)施例中東北貫眾素的檢測(cè)采用高效液相色譜法(參照肖國(guó)君等"HPLC測(cè)定
綿馬貫眾中綿馬貫眾素的含量") 高效液相色譜條件色譜柱VP-ODS (4. 6mmX 150mm， 5 ii m); 流動(dòng)相乙腈_氯仿_異丙醇-0. 3 %磷酸-0. 1 %十二烷基硫酸鈉
(50 ! 10 ! 35 ! 10 D ; 流速1. OmL min—1 ; 檢測(cè)波長(zhǎng)286nm ; 柱溫25。C。
實(shí)施例1 : 取綿馬貫眾藥材，粉碎，取10kg投入提取罐，加入70L90X乙醇和20g氫氧化鈣攪拌加熱至50°C ，提取兩次，每次提取2小時(shí)，合并提取液濾過，鹽酸調(diào)節(jié)pH至5，減壓回收至乙醇濃度40%，放置12小時(shí)，濾出沉淀物lkg。氯仿回流溶解加入2% 767針劑活性炭脫色2小時(shí)，濾過，加入20kg硅膠中，回收氯仿，干燥后裝短粗柱，先用120L甲醇沖洗雜質(zhì)，再用乙酸乙酯洗脫流分，薄層檢測(cè)，收集流分回收至原體積的1/10，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物丙酮回流飽和溶解，冷卻靜置析晶，濾出結(jié)晶物再溶解結(jié)晶一次，低溫干燥得產(chǎn)品340g，含量98. 2%。 實(shí)施例2 : 取綿馬貫眾藥材，粉碎，取10kg投入提取罐，加入70L90X乙醇和10g氫氧化鈣攪拌加熱至75°C ，提取兩次，每次提取2小時(shí)，合并提取液濾過，鹽酸調(diào)節(jié)pH至7，減壓回收至乙醇濃度30%，放置8小時(shí)，濾出沉淀物1. lkg。氯仿回流溶解加入1% 767針劑活性炭脫色1小時(shí)，濾過，加入18kg硅膠中，回收氯仿，干燥后裝短粗柱，先用72L甲醇沖洗雜質(zhì)，再用乙酸乙酯洗脫流分，薄層檢測(cè)，收集流分回收至原體積的1/15，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物丙酮回流飽和溶解，冷卻靜置析晶，濾出結(jié)晶物再溶解結(jié)晶一次，低溫干燥得產(chǎn)品335g，含量98%。 實(shí)施例3 : 取綿馬貫眾藥材，粉碎，取10kg投入提取罐，加入50L80X乙醇和20g氫氧化鈣攪拌加熱至60°C ，提取三次，每次提取1. 5小時(shí)，合并提取液濾過，硫酸調(diào)節(jié)pH至6，減壓回收至乙醇濃度50%，放置10小時(shí)，濾出沉淀物1. lkg。氯仿回流溶解加入1. 5% 767針劑活性炭脫色2小時(shí)，濾過，加入19kg硅膠中，回收氯仿，干燥后裝短粗柱，先用100L甲醇沖洗雜質(zhì)，再用乙酸乙酯洗脫流分，薄層檢測(cè)，收集流分回收至原體積的1/8，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物丙酮回流飽和溶解，冷卻靜置析晶，濾出結(jié)晶物再溶解結(jié)晶兩次，低溫干燥得產(chǎn)品330g，含量98. 5%。
實(shí)施例4: 取綿馬貫眾藥材，粉碎，取10kg投入提取罐，加入60L80X乙醇和10g氫氧化鈣攪拌加熱至70°C ，提取三次，提取時(shí)間為3、2、 1小時(shí)，合并提取液濾過，鹽酸調(diào)節(jié)pH至5，減壓回收至乙醇濃度50%，放置10小時(shí)，濾出沉淀物1. lkg。氯仿回流溶解加入1% 767針劑活性炭脫色l小時(shí)，濾過，加入22kg硅膠中，回收氯仿，干燥后裝短粗柱，先用90L甲醇沖洗雜質(zhì)，再用乙酸乙酯洗脫流分，薄層檢測(cè)，收集流分回收至原體積的1/12，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物丙酮回流飽和溶解，冷卻靜置析晶，濾出結(jié)晶物再溶解結(jié)晶兩次，低溫干燥得產(chǎn)品325g，含量98. 6%。
權(quán)利要求
一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法，其特征在于包含以下步驟將原料粉碎，加入乙醇溶液和氫氧化鈣，加熱提取2-3次，合并提取液，濾過，調(diào)節(jié)pH5-7，回收乙醇至濃度30-50％，放置8-12小時(shí)，濾出沉淀物，氯仿溶解，加活性炭加熱脫色，濾后注入硅膠柱，先用4-6柱體積甲醇洗去雜質(zhì)，再用乙酸乙酯洗脫，TLC監(jiān)測(cè)，收集洗脫液，減壓回收洗脫劑；用丙酮溶解結(jié)晶，濾出低溫干燥即得產(chǎn)品。
2. 如權(quán)利要求l所述的提純方法，其特征在于所述的提取條件乙醇濃縮度80-90%用 量為物料的5-7倍，氫氧化鈣和物料比1 : 1000，溫度50-75t:，提取時(shí)間1-3小時(shí)。
3. 如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述活性炭脫色條件為活性炭為767 針劑活性炭，加入量為溶液體積量的1_2%，回流脫色1-2小時(shí)。
4. 如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述硅膠柱分離條件硅膠用量為沉淀 物的15-20倍，4-6柱體積甲醇洗去雜質(zhì)。
5. 如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述重結(jié)晶條件丙酮加熱飽和溶解粗 晶，冷卻靜置析晶，結(jié)晶2-3次。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法，工藝以綿馬貫眾藥材為原料，用堿醇提取，調(diào)酸，濃縮結(jié)晶，氯仿溶解，活性炭脫色，硅膠柱分離，丙酮溶解重結(jié)晶。該工藝簡(jiǎn)單可行，所得產(chǎn)品純度高，成本低，所用有機(jī)溶劑回收后可重復(fù)利用。
文檔編號(hào)A61K125/00GK101732365SQ201010103120
公開日2010年6月16日 申請(qǐng)日期2010年2月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月1日
發(fā)明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司