專(zhuān)利名稱(chēng)：藏茵陳飲片的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥飲片的制備方法，特別是涉及微生物發(fā)酵制備藏茵陳飲片的方法。
背景技術(shù)：
藏茵陳是是青藏高原罕見(jiàn)的觀賞、美容、保健、藥用草本花齊，位列藏藥八珍之一，
藏藥名蒂達(dá)，始載于藏醫(yī)藥書(shū)《四部醫(yī)典》，有清熱、解毒，清肝利膽的功效。藏醫(yī)藥將藏茵陳
列為濕生草藥類(lèi)，屬苦味藥，主治"赤巴"的各種熱病，是藏藥中最具特色的治療肝膽系統(tǒng)疾
病的良藥，藥效獨(dú)特，臨床上用于治療消化不良、膽囊炎、各型肝炎、急性骨髓炎、急性菌痢、
急性結(jié)膜炎、急性咽喉炎及燙傷，也用于風(fēng)火牙痛、熱淋等癥的治療?，F(xiàn)代藥理研究表明其
具有抗菌消炎、抗肝損傷、抗病毒等多種作用，許多治療肝炎的藏藥都以藏茵陳作為主要原
料。因此，藏茵陳類(lèi)藥物被稱(chēng)為"藏藥中的奇葩"，在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)極為走俏。 因此，研制新型藏茵陳飲片制備方法具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義，但由于植物藥中
的有效成分往往包裹在細(xì)胞壁內(nèi)，細(xì)胞壁主要由纖維素、半纖維素、木質(zhì)素等構(gòu)成，其中纖
維素是D-葡萄糖以P-l，4糖苷鍵組成的大分子多糖。中藥傳統(tǒng)的炮制工藝簡(jiǎn)單，往往不
能較徹底地破壞植物藥的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，容易造成飲片不易被機(jī)體消化、生物利用率非常低
等缺陷。通過(guò)查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，臨床上尚未出現(xiàn)通過(guò)微生物發(fā)酵法炮制藏茵陳飲片的
報(bào)道。黑曲霉(Aspergillus Niger)可以通過(guò)分泌到胞外的游離纖維素酶、半纖維素酶等
酶類(lèi)來(lái)水解纖維素及半纖維素，能將被細(xì)胞壁包裹的功能成分釋放出來(lái)，從而可以大幅度
提高藏茵陳中有效成分含量和人體對(duì)有效成分的利用效率。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于避免現(xiàn)有技術(shù)的不足提供一種藏茵陳飲片的制備方法，本發(fā)明 通過(guò)黑曲霉發(fā)酵的方法制備藏茵陳飲片，從而解決了傳統(tǒng)炮制飲片的不足之處，大大增加 了藏茵陳中有效成分的生物利用度，本飲片具有易消化、吸收快、藥效顯著等特點(diǎn)，在防治 病毒性疾病、各型感冒以及痢疾等疾病過(guò)程中市場(chǎng)前景廣闊。 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為一種藏茵陳飲片的制備方法，其主要 特點(diǎn)是包括以下步驟 (1)稱(chēng)取2-200g藏茵陳，放在紫外燈光下照射0. 2-20小時(shí)，每隔3-30min翻動(dòng)一 次； (2)培養(yǎng)基的制備 a.麥芽浸粉斜面培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基的制作均按照常規(guī)方法配制、保存； b.發(fā)酵液體培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)液按重量百分比配比為硫酸銨1. 4_5. 4% ;磷
酸二氫鉀2. 0-5.0% ;氯化f丐O. 3-1.0% ;尿素O. 3-0.9% ;硫酸鎂0. 3-0.9% ;硫酸亞鐵 5. 0*10—3-5. 0*10—;硫酸錳1.6*10—3-1.6*10—;硫酸鋅1. 4*10—3_1. 4*10—1 % ;氯化鈷
2. 0*10—3-2. 0*10—;其余蒸餾水；
c.將經(jīng)過(guò)紫外消毒的藏茵陳6克，加入到150ml步驟b的培養(yǎng)液中；
(3)麥芽浸粉斜面培養(yǎng)基培養(yǎng) 將黑曲霉接種到麥芽浸粉斜面，在3(TC恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d，待長(zhǎng)出一層均勻較 厚的黑色孢子則可； (4)黑曲霉種子培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)在500ml三角瓶中加入150ml種子培養(yǎng)基，滅菌 后，接種斜面孢子3環(huán)，在3(TC下，130r/mi n震蕩培養(yǎng)24h ;
(5)發(fā)酵液發(fā)酵培養(yǎng) 分別取出已經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)的黑曲霉種子培養(yǎng)液50ml加入到150ml發(fā)酵液中，初始 pH值為3. 5-7. 5，置于10-50。C的條件下，在90-160r/min震蕩培養(yǎng)10 100小時(shí);
(6)將發(fā)酵后的藏茵陳置于35 65t:的溫度下烘干、粉碎，過(guò)80目篩子。
所述的藏茵陳飲片的制備方法，將步驟(6)的藏茵陳粉6-8克裝入膠囊或壓制成 片劑。 本發(fā)明應(yīng)用黑曲霉菌對(duì)中藥藏茵陳進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵后降低了藏茵陳中纖維素和半 纖維素的含量，從而有利于機(jī)體對(duì)藏茵陳中有效成分的消化吸收。 本發(fā)明的有益效果本發(fā)明所采用的方法主要是通過(guò)黑曲霉產(chǎn)生的纖維素分解 酶、半纖維素分解酶破壞植物藥細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，從而可以大幅度提高藏茵陳中有效成分含量 和人體對(duì)有效成分的利用效率。高效液相色譜檢測(cè)表明，發(fā)酵后其主要有效成分齊墩果酸、 芒果苷含量分別提高18%、23%，有效成分溶出率較傳統(tǒng)飲片提高50-65%。對(duì)小鼠免疫性 肝炎的療效比較發(fā)現(xiàn)，降低sGDP方面較傳統(tǒng)藏茵陳飲片提高約25%。本發(fā)明具有操作簡(jiǎn) 單，成本低廉，資源利用率高的優(yōu)點(diǎn)，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，可實(shí)現(xiàn)中藥飲片的標(biāo)準(zhǔn)化，具有很 高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，市場(chǎng)前景廣闊。此外，本方法對(duì)于其他中藥飲片的制備同樣具有借鑒意 義。
具體實(shí)施例方式
以下對(duì)本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限 定本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1 :一種藏茵陳飲片的制備方法 (1)精密稱(chēng)取20g藏茵陳，放在紫外燈光下照射2小時(shí)，每隔30min翻動(dòng)一次。
(2)培養(yǎng)基制作 a.麥芽浸粉斜面培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基的制作均按照常規(guī)方法配制、保存；
b.發(fā)酵液體培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)液按重量百分比配比為 硫酸銨1. 4克；磷酸二氫鉀2. 0克；氯化鈣0. 3克；尿素0. 3克；硫酸鎂0. 3克；硫 酸亞鐵5. 0毫克；硫酸錳1. 6毫克；硫酸鋅1. 4毫克；氯化鈷2. 0毫克；加入蒸餾水到1000 c.將經(jīng)過(guò)紫外消毒的藏茵陳6克，加入到150ml步驟b的培養(yǎng)液中；
(3)麥芽浸粉斜面培養(yǎng)基培養(yǎng) 將黑曲霉接種到麥芽浸粉斜面，在3(TC恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d，待長(zhǎng)出一層均勻較 厚的黑色孢子則可； (4)黑曲霉種子培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)在500ml三角瓶中加入150ml種子培養(yǎng)基，滅菌后，接種斜面孢子3環(huán)，在3(TC下，130r/min震蕩培養(yǎng)24h ;
(5)發(fā)酵液發(fā)酵培養(yǎng) 分別取出已經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)的黑曲霉種子培養(yǎng)液50ml加入到150ml發(fā)酵液中，初始 pH值為3. 5-7. 5，置于10-20。C的條件下，在90-120r/min震蕩培養(yǎng)10 40小時(shí);
(6)將發(fā)酵后的藏茵陳置于35 45t:的溫度下烘干、粉碎，過(guò)80目篩子。
所述的藏茵陳飲片的制備方法，將步驟(6)的藏茵陳粉6-8克裝入膠囊或壓制成 片劑。 實(shí)施例2 :—種藏茵陳飲片的制備方法
步驟1-4與實(shí)施例1相同。
4.黑曲霉種子培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)
5.發(fā)酵液發(fā)酵培養(yǎng) 分別取出已經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)的黑曲霉種子培養(yǎng)液50ml加入到150ml發(fā)酵液中，初始
pH值為6. 5左右，置于3(TC的條件下，在130r/min震蕩培養(yǎng)36小時(shí)。 6.將發(fā)酵后的藏茵陳置于45t:的溫度下烘干、粉碎，80目過(guò)篩，定量裝入膠囊或
壓制成片劑，制成成品。 實(shí)施例3 —種藏茵陳飲片的制備方法
步驟1-4與實(shí)施例1相同。
5.發(fā)酵液發(fā)酵培養(yǎng) 分別取出已經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)的黑曲霉種子培養(yǎng)液50ml加入到150ml發(fā)酵液中，初始
pH值為6. 5左右，置于3(TC的條件下，在130r/min震蕩培養(yǎng)48小時(shí)。 6.將發(fā)酵后的藏茵陳置于55t:的溫度下烘干、粉碎，80目過(guò)篩，定量裝入膠囊或
壓制成片劑，制成成品。 上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原 則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
一種藏茵陳飲片的制備方法，其特征是包括以下步驟(1)稱(chēng)取2-200g藏茵陳，放在紫外燈光下照射0.2-20小時(shí)，每隔3-30min翻動(dòng)一次；(2)培養(yǎng)基的制備a.麥芽浸粉斜面培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基的制作均按照常規(guī)方法配制、保存；b.發(fā)酵液體培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)液按重量百分比配比為硫酸銨1.4-5.4％；磷酸二氫鉀2.0-5.0％；氯化鈣0.3-1.0％；尿素0.3-0.9％；硫酸鎂0.3-0.9％；硫酸亞鐵5.0*10-3-5.0*10-1％；硫酸錳1.6*10-3-1.6*10-1％；硫酸鋅1.4*10-3-1.4*10-1％；氯化鈷2.0*10-3-2.0*10-1％；其余蒸餾水；c.將經(jīng)過(guò)紫外消毒的藏茵陳6克，加入到150ml步驟b的培養(yǎng)液中；(3)麥芽浸粉斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)將黑曲霉接種到麥芽浸粉斜面，在30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d，待長(zhǎng)出一層均勻較厚的黑色孢子則可；(4)黑曲霉種子培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)在500ml三角瓶中加入150ml種子培養(yǎng)基，滅菌后，接種斜面孢子3環(huán)，在30℃下，130r/min震蕩培養(yǎng)24h；(5)發(fā)酵液發(fā)酵培養(yǎng)分別取出已經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)的黑曲霉種子培養(yǎng)液50ml加入到150ml發(fā)酵液中，初始pH值為3.5-7.5，置于10-50℃的條件下，在90-160r/min震蕩培養(yǎng)10～100小時(shí)；(6)將發(fā)酵后的藏茵陳置于35～65℃的溫度下烘干、粉碎，過(guò)80目篩子。
2. 如權(quán)利要求l所述的藏茵陳飲片的制備方法，其特征是將步驟(6)的藏茵陳粉6-8 克裝入膠囊或壓制成片劑。
全文摘要
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明公開(kāi)了一種藏茵陳飲片的制備方法。該方法包括以下步驟先將藏茵陳經(jīng)過(guò)紫外照射消毒，同時(shí)將黑曲霉依序經(jīng)過(guò)麥芽浸粉斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)后，將發(fā)酵物烘干、粉碎，定量裝入膠囊或制成片劑。本發(fā)明所采用的方法主要是通過(guò)黑曲霉產(chǎn)生的纖維素分解酶、半纖維素分解酶破壞植物藥細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，從而有利于藏茵陳中有效成分的消化吸收。該方法具有操作簡(jiǎn)單，成本低廉，資源利用率高的優(yōu)點(diǎn)，易于進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)，具有很高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，市場(chǎng)前景廣闊。此外，本方法對(duì)于其他中藥飲片的制備同樣具有借鑒意義。
文檔編號(hào)A61P31/12GK101785795SQ20101000532
公開(kāi)日2010年7月28日 申請(qǐng)日期2010年1月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月15日
發(fā)明者李雪虎, 梁劍平, 王曙陽(yáng), 陸錫宏, 陶蕾, 靳振召 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院近代物理研究所