專利名稱：治療皮膚損傷的藥物組合物、敷料和方法,用于制備所述敷料的中間組合物和方法,以及 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療皮膚損傷的藥物組合物，其包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽和皮膚學(xué)上 可接受的載體。此外，本發(fā)明還提供用于制備治療皮膚損傷的敷料的中間組合物以及通過凍干所 述中間組合物來制備此類敷料的方法。本發(fā)明還涉及包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽的治療皮膚損傷的敷料、以及與膠原締合 (associated with)的鈰鹽在制備根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物或者敷料中的用途。本發(fā)明的另一實(shí)施方案為通過在所述皮膚損傷上施用此類藥物組合物或者敷料 來治療皮膚損傷的方法。本發(fā)明的組合物或者敷料可局部施用于各種損傷類型，例如人或者動(dòng)物機(jī)體上的 涉及與微生物蛋白或者那些所謂的HSP(熱休克蛋白)相關(guān)的毒素釋放的皮膚損傷；涉及 燒傷皮膚毒素形成或者LPC(脂蛋白復(fù)合物)的燒傷；其中過度生成蛋白酶的慢性潰瘍性 (ulcerate)皮膚損傷；其中需要控制過度生成滲出物的難以消除的皮膚損傷；以及嚴(yán)重感 染(critically infected)或者移發(fā)(colonized)的皮膚損傷。歷史方面現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，創(chuàng)傷愈合治療基于敷料使用、基礎(chǔ)疾病控制、非活組織清創(chuàng)、體 內(nèi)平衡、充分組織灌注恢復(fù)、創(chuàng)傷點(diǎn)上的壓力限制和感染控制、從歷史觀點(diǎn)看，關(guān)于創(chuàng)傷治療方法的許多事物已經(jīng)改變，直至達(dá)到目前的觀念。在 古埃及，將創(chuàng)傷看作來自地獄的邪惡可通過其進(jìn)入人體的孔。由于這樣解釋事物，故而在損 傷上施用排泄物，希望這可以驅(qū)趕即使最壞的魔鬼^在古埃及最流行使用的藥物之一為 蜜。現(xiàn)在，其治療性能歸因于抑制微生物生長、以及具有吸濕性以將白細(xì)胞和抗體吸引至創(chuàng) 傷點(diǎn)的事實(shí)。就創(chuàng)傷敷料而言，埃及人過去常常應(yīng)用與木乃伊尸體防腐方法中所使用的技術(shù)類 似的技術(shù)。使用繃帶來覆蓋并保持在所需身體位點(diǎn)中1的藥物。埃及制備的Lynen與現(xiàn)在 使用的精細(xì)的紗布樣纖維的質(zhì)地不同，其為如用于木乃伊的較厚織物。關(guān)于損傷清創(chuàng)，描述 了用幼蟲進(jìn)行處理，所述幼蟲能產(chǎn)生蛋白水解酶，使壞死組織退化并將其液化、偽善者(Hypocrites)過去常常經(jīng)推薦用溫水、酒和醋2清洗創(chuàng)傷并使其干燥。應(yīng) 該保持創(chuàng)傷干燥以提供更好愈合條件的觀念持續(xù)至第二次世界大戰(zhàn)結(jié)束2。從那時(shí)起，關(guān)于 創(chuàng)傷愈合的基本觀念發(fā)生徹底改變。在1958年，Odland觀察到如果不去除其表面，則皰 的底部將愈合更快3’4。后來，使用家養(yǎng)的豬的損傷作為模型，Winter顯示封閉之后上皮修 復(fù)更快，因此產(chǎn)生關(guān)于創(chuàng)傷護(hù)理方法的革命5。然后到了 1963年，Hinman等人確立了在人 中進(jìn)行創(chuàng)傷封閉的有益效果6。目前，市場上可得到大量旨在不僅保持創(chuàng)傷點(diǎn)潮濕而且還具有其它作用(例如抗 微生物性能)的創(chuàng)傷愈合劑。
理論基礎(chǔ)基本創(chuàng)傷修復(fù)觀念遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出由炎性細(xì)胞上的生長因子過程觸發(fā)的線性觀念，修復(fù)表示可溶性介質(zhì)、 胞外基質(zhì)和薄壁細(xì)胞間的相互作用7。胞外基質(zhì)分子可提供信號，以通過整聯(lián)蛋白受體進(jìn)行 基因表達(dá)，并且組織細(xì)胞與基質(zhì)的相互作用可改變表型以及細(xì)胞功能7’8。組織外傷之后為可分階段分開研究的一系列事件(體內(nèi)平衡、炎癥、組織形成和 創(chuàng)傷重構(gòu))。然而，這些不是互相排斥的，允許暫時(shí)重疊。組織侵襲和隨后的血管破裂將觸發(fā)第一次序事件，這以凝固或者凝血告終。形成 的血塊有用于保持體內(nèi)平衡，此外提供用于細(xì)胞遷移的臨時(shí)基質(zhì)(provisory matrix) 0血小板粘附于間質(zhì)結(jié)締組織并且以后彼此聚集。在這種聚集過程中，它們釋放數(shù) 種介質(zhì)并表達(dá)凝血因子。該位點(diǎn)上形成的纖維蛋白凝塊和凝血酶用作供另外的血小板粘附 和聚集的巢。血小板纖維蛋白原一旦通過凝血酶轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，就有助于纖維蛋白凝塊。此時(shí)必須考慮血小板，不僅由于它們在實(shí)現(xiàn)體內(nèi)平衡中的重要作用，而且由于釋 放細(xì)胞因子和生長因子，例如血小板衍生生長因子(PDGF)和轉(zhuǎn)化生長因子□和口(TGF 口 禾口 TGF □) 0除此之外，凝血級聯(lián)本身、補(bǔ)體化合物和受損的細(xì)胞產(chǎn)生大量趨化因子，當(dāng)締合時(shí) 所述趨化因子將白細(xì)胞吸引至受損點(diǎn)。通過趨化劑的內(nèi)皮活化也刺激彈性蛋白酶和膠原酶 分子的內(nèi)皮釋放，所述分子進(jìn)而使得通過血管基膜的細(xì)胞穿透變得容易。白細(xì)胞實(shí)施對體系統(tǒng)內(nèi)發(fā)現(xiàn)的異物和細(xì)菌的清除。它們堅(jiān)持原位可延長炎癥階段 并難以正常修復(fù)。另一方面，由于其保持“清潔”，通常減少產(chǎn)生創(chuàng)傷的趨化劑。中性粒細(xì)胞 殘余物將逐漸被痂所驅(qū)逐或者被巨噬細(xì)胞或者成纖維細(xì)胞所吞噬。響應(yīng)于特定的趨化因子，例如彈性蛋白、纖連蛋白、膠原碎片(collagenfragment) 和TGF □，外周血單核細(xì)胞繼續(xù)被創(chuàng)傷募集，它們在那里被活化并顯示巨噬細(xì)胞表型。這些 細(xì)胞和血小板開始形成肉芽組織。巨噬細(xì)胞能夠?qū)M織進(jìn)行清創(chuàng)、消化病原微生物、組織碎 片和用過的中性粒細(xì)胞。巨噬細(xì)胞似乎在炎癥和修復(fù)之間的轉(zhuǎn)變中發(fā)揮根本性作用，因?yàn)?它們分泌創(chuàng)傷中開始和擴(kuò)展組織重構(gòu)所需要的成纖維細(xì)胞生長因子。侵襲之后若干小時(shí)，上皮殘余框架(epithelium residual frame)的角質(zhì)形成細(xì) 胞移動(dòng)橫穿該創(chuàng)傷。在上皮細(xì)胞中觀察到重要的表型變化，如胞間張力絲的收縮、大多數(shù)胞 間橋粒的溶解、外周胞質(zhì)肌動(dòng)蛋白長絲的形成、以及真皮和表皮之間的穩(wěn)固連接的喪失，這 使得表皮細(xì)胞表現(xiàn)出側(cè)向運(yùn)動(dòng)。直至侵襲之后兩天，在創(chuàng)傷邊緣上的上皮細(xì)胞開始遷移。在創(chuàng)傷上遷移的角 質(zhì)形成細(xì)胞不在臨時(shí)(provisory)基質(zhì)區(qū)域上任意運(yùn)動(dòng)，而是實(shí)際上從非活組織“抽出 (spare) ”活組織。這種遷移路線通過由它們膜中的表皮細(xì)胞表達(dá)的整聯(lián)蛋白來調(diào)節(jié)，例如， 角質(zhì)形成細(xì)胞不表達(dá)受體為纖維蛋白原、纖維蛋白、變性膠原或者纖連蛋白。因此，遷移表 皮細(xì)胞避免富含血塊的纖維蛋白/纖連蛋白，并且在I型膠原上遷移。最后，角質(zhì)形成細(xì)胞 遷移使得痂被丟棄。在再上皮化的同時(shí)，來自基膜的蛋白從創(chuàng)傷邊緣至中心再次出現(xiàn)。表皮細(xì)胞返回 它們的正常表型，通過半橋粒穩(wěn)固地粘附于基膜并且通過VII型膠原纖絲粘附于新皮。侵襲約四天之后，肉芽組織開始形成。由于存在許多新形成的毛細(xì)血管，所以當(dāng)將外觀，由此得名肉芽組織。簡言之，血管生成為通過四個(gè)相關(guān)的現(xiàn)象調(diào)節(jié)的過程細(xì)胞表型變化、通過趨化劑 誘導(dǎo)的遷移、促分裂原刺激和適當(dāng)?shù)陌饣|(zhì)。除血管增生之外，纖維組織形成是肉芽組織中的一種明顯要素。血小板和巨噬細(xì) 胞釋放一系列具有增生和遷移活性的細(xì)胞因子到成纖維細(xì)胞。后來，成纖維細(xì)胞自身將產(chǎn) 生細(xì)胞因子并以自分泌的方式對其進(jìn)行響應(yīng)。對于成纖維細(xì)胞遷移，必需能劈開遷移途徑的活性蛋白酶解系統(tǒng)。源自成纖維細(xì) 胞的各種酶連同來自血清的纖溶酶似乎一起發(fā)揮該作用。那些包括纖溶酶原激活物、間質(zhì) 膠原酶(基質(zhì)金屬蛋白酶1，MMP-1)、明膠酶(MMP-2)和estromelisin (MMP-3)，以及源自血 清的纖溶酶原?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是一族負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)生理事件的胞外蛋白酶，不僅調(diào)節(jié)胞外基 質(zhì)重構(gòu)，而且影響其它細(xì)胞活性，如增殖和凋亡。它們的作用通過金屬蛋白酶的組織抑制劑 (TIMP)和生長因子得到良好調(diào)控。例如，趨化因子PDGF通過成纖維細(xì)胞刺激這些酶的釋 放，而TGF誘導(dǎo)蛋白酶抑制劑的分泌，顯示出在成纖維細(xì)胞遷移期間的胞外基質(zhì)降解的詳 細(xì)控制。成纖維細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞和新形成的血管)隨著它們遷移至創(chuàng)傷點(diǎn)并鋪設(shè)(lay) 由類透明質(zhì)酸和纖連蛋白制成的新的臨時(shí)基質(zhì)，將纖維蛋白凝塊裂解。胞外基質(zhì)進(jìn)而影響 成纖維細(xì)胞的合成功能和基質(zhì)本身的再成形，該相互相用稱為動(dòng)態(tài)互換。以下階段標(biāo)記為膠原基質(zhì)的產(chǎn)生?？偨Y(jié)來說，在皮膚修復(fù)期間，以纖連蛋白、III型 膠原和之后的I型膠原的次序發(fā)生結(jié)締組織基質(zhì)的消除。I型膠原的產(chǎn)生與創(chuàng)傷抗性的增 強(qiáng)一致。在與組織的血管化并行的肉芽組織發(fā)育期間，V型膠原也將得到增加。除提供用 于新的組織抗性的結(jié)構(gòu)支撐之外，膠原作用于基質(zhì)沉浸細(xì)胞(matrix-immersed cell)，例 如改變它們細(xì)胞表型或用作趨化劑要素。在膠原基質(zhì)消除之后，成纖維細(xì)胞將其重構(gòu)(reshape)并引起創(chuàng)傷收縮。這些細(xì) 胞的表型為平滑肌細(xì)胞(稱為肌成纖維細(xì)胞)，其通過連接物連接至胞外基質(zhì)(纖連蛋白和 膠原)并彼此相連，導(dǎo)致結(jié)締組織壓迫和創(chuàng)傷收縮。拉力傳輸基本取決于成纖維細(xì)胞通過 整聯(lián)蛋白受體至膠原基質(zhì)的連接和各膠原間的交叉連接。從細(xì)胞觀點(diǎn)看，在修復(fù)第十天左右，通過成纖維細(xì)胞凋亡，隨后從富含成纖維細(xì)胞 的肉芽組織轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄬Ψ羌?xì)胞的基質(zhì)。通過另一凋亡過程，在除去血管生成刺激之后的一 到兩天發(fā)生毛細(xì)管(Capillae)復(fù)原。創(chuàng)傷重構(gòu)階段標(biāo)記為胞外基質(zhì)重構(gòu)和細(xì)胞分化或凋亡。組成和胞外基質(zhì)肉芽組織 結(jié)構(gòu)隨時(shí)間間隔和與創(chuàng)傷邊緣之間的距離而變，也就是說，在較大的創(chuàng)傷上，胞外基質(zhì)重構(gòu) 和新表皮的成熟、纖維組織形成和新生血管形成從創(chuàng)傷邊緣開始，而肉芽組織繼續(xù)朝損傷 的最中心部分移動(dòng)形成。這使得創(chuàng)傷邊緣的胞外基質(zhì)與中心的胞外基質(zhì)在定性和定量方法 上均不同。經(jīng)歷凋亡的第一類細(xì)胞是內(nèi)皮細(xì)胞，伴隨毛細(xì)血管數(shù)目減少。然后肌成纖維細(xì)胞 和巨噬細(xì)胞發(fā)生凋亡，導(dǎo)致更多非細(xì)胞性創(chuàng)傷修復(fù)。在接下來的歲月里，盡管緩慢，但胞外 基質(zhì)本身繼續(xù)改變。皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的一些影響因素
許多局部因素和全身性因素可影響組織創(chuàng)傷愈合過程，產(chǎn)生不利結(jié)果，如增生性 疤痕或疤痕疙瘩或者甚至慢性潰瘍，如腿潰瘍、壓迫性潰瘍和穿孔性足底創(chuàng)傷。眾所周知，例如由于富含皮膚附屬物，所以面部損傷將比腳上的損傷修復(fù)得更快。 低溫或者血液流動(dòng)不足也可損害(compromise)創(chuàng)傷修復(fù)過程。另外，其它局部因素如缺氧、pH異常、壞死、感染、血腫和異物可損害組織修復(fù)。缺 氧有助于組織遷移和血管生成，同時(shí)損害細(xì)胞增殖、膠原合成和抗菌。在其中修復(fù)自然進(jìn)展的創(chuàng)傷上，MMP和TIMP表達(dá)之間存在平衡；另一方面，在慢性 潰瘍性損傷(如腿潰瘍)上，存在局部蛋白酶解增加的生長證據(jù)。Hart等人13強(qiáng)調(diào)這些高 水平蛋白酶的破壞作用可為慢性潰瘍的創(chuàng)傷愈合的損害因素。蛋白酶的過度活性似乎使創(chuàng) 傷不具有可作為引起細(xì)胞遷移的初始基質(zhì)以及用于基質(zhì)儲存和保持生長因子的骨架、涉及 協(xié)調(diào)新組織制造過程的關(guān)鍵要素。高蛋白酶活性水平甚至可引起對細(xì)胞表面蛋白(如生長 因子受體和整聯(lián)蛋白受體)的損害，損害足以對進(jìn)行組織修復(fù)過程的全部細(xì)胞的活性產(chǎn)生 影響。感染是修復(fù)延遲的重要原因。雖然幾乎所有的皮膚創(chuàng)傷受到現(xiàn)存菌群(flora)污 染，但是如果要發(fā)生臨床感染的話，病原微生物的值需要達(dá)到超過100. 000細(xì)菌/每克標(biāo)記 組織。如果將細(xì)菌移殖(bacteria colonization)評價(jià)為嚴(yán)重，則其可引起比所需炎癥階 段較長的階段，并因此損害修復(fù)，如果這樣的話，則應(yīng)該利用局部殺菌劑進(jìn)行治療。按最佳創(chuàng)傷修復(fù)時(shí)機(jī)(timelines)，還應(yīng)引流任何血腫并避免易形成血腫的藥物， 如抗凝劑和抗血小板劑。異物表示供細(xì)菌粘附的合適位置，降低氧張力和創(chuàng)傷PH，所以它們 必須被。關(guān)于全身性因素，營養(yǎng)特征和生活質(zhì)量(抽煙、酒精濫用)、一些藥物(如皮質(zhì)類固 醇)的使用或者全身疾病(如糖尿病)可損害創(chuàng)傷修復(fù)過程的進(jìn)展。老年患者顯示其蛋白 合成減少、淋巴遷移(lymphocitary migration)延遲和持續(xù)炎癥階段，此外遭受營養(yǎng)不良 風(fēng)險(xiǎn)、伴發(fā)疾病和藥劑使用。慢性潰瘍(如壓迫性潰瘍(pressure ulcers)、靜脈淤滯性潰瘍(venous stasis ulcers)和糖尿病足)中可見的流體都抑制細(xì)胞(主要是成纖維細(xì)胞)的增殖。這種流體 富集于腫瘤壞死因子(TNFa )。假設(shè)所述物質(zhì)能降低這種細(xì)胞因子的水平，例如硝酸鈰可積 極調(diào)節(jié)慢性潰瘍修復(fù)。最后，除了過去所認(rèn)為的那些，目前有明確證據(jù)表明，干的創(chuàng)傷無法愈 合得如同在濕潤環(huán)境中進(jìn)行治療那樣好。濕潤環(huán)境的益處包括促進(jìn)再表皮化 (re-ephitalialization)、真皮修復(fù)和血管生成。局部藥物和封閉敷料提供有助于創(chuàng)傷修 復(fù)的濕潤環(huán)境。膠原膠原是胞外基質(zhì)的糖蛋白，由三條鏈組成，并沿其主要序列的一部分形成三股螺 旋。存在18種膠原，按照發(fā)現(xiàn)它們的日期，將它們指定為I到XVIII。對于創(chuàng)傷修復(fù)和人工誘導(dǎo)肉芽組織(植入海綿)中發(fā)現(xiàn)的膠原內(nèi)容物研究大多數(shù) 已經(jīng)檢查了 I型和III型膠原，因?yàn)檫@兩種膠原已被表征了一段時(shí)間，并且清楚確立了它們 的超分子結(jié)構(gòu)。硬螺旋膠原大分子逐漸聚集為原纖維束(fibril sheaves)，使得修復(fù)組織的拉伸強(qiáng)度和牢固性增強(qiáng)。除了作為用于新組織抗性(tissue resistance)的支撐結(jié)構(gòu)之外，膠 原可對基質(zhì)沉浸細(xì)胞具有深遠(yuǎn)影響。源自膠原的肽，例如用作體外成纖維細(xì)胞的趨化劑… 并可具有類似的體內(nèi)效果。此外，完整的膠原可以改變各種不同細(xì)胞的表型與功能19_21?？?通過用于膠原口 1 □ 1和□ 2 □ 1的整聯(lián)蛋白受體的活化來部分地測量這些效果m_M。在用于成熟修復(fù)的肉芽組織的轉(zhuǎn)變期期間，膠原重構(gòu)(collagen reshape)取決 于膠原的連續(xù)合成和膠原分解代謝兩者。創(chuàng)傷上的膠原降解由粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、表皮細(xì) 胞和成纖維細(xì)胞的各種膠原酶控制。通過稱為金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)的各種類似 抑制劑來控制這些活性，然后在發(fā)展期間和似乎在創(chuàng)傷期間對其進(jìn)行調(diào)節(jié)。細(xì)胞因子(如 TGF 口、PDGF和IL-1)以及胞外基質(zhì)本身可在膠原酶調(diào)節(jié)和TIMP體內(nèi)表達(dá)中發(fā)揮重要作 用。在第三周，創(chuàng)傷僅獲得其最終強(qiáng)度的20%，該期間纖維膠原相對快速積累，并通過 由肌成纖維細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的創(chuàng)傷收縮來系統(tǒng)重構(gòu)(systematically reshaped)。事實(shí)上，張力的 逐漸獲得與新膠原消除的相關(guān)性比其與另外的膠原再成形的相關(guān)性小，形成較厚膠原束并 轉(zhuǎn)變?yōu)榻徊娣肿舆B接物。所以，創(chuàng)傷組織不具有與非創(chuàng)傷皮膚相同的抗性。以其最大抗性 輸出，疤痕最大具有完整皮膚力量的70% M。Hart等人13表明，從膠原制備的敷料能夠吸收存在于慢性潰瘍中并能夠使得愈合 過程更困難的寬范圍的因子，如蛋白酶、自由基和鐵離子。此外，他們還報(bào)道，從膠原制備的 敷料能夠彼此粘附并保護(hù)生長因子(如PDGF)，維持其生物活性并使得環(huán)境甚至更有利于 皮膚修復(fù)。在潰瘍中，施用的膠原可用作止血?jiǎng)?、趨化?chemotactic)并作為細(xì)胞遷移的 基質(zhì)。此外，其可以被連接并使慢性潰瘍中過度存在，且在這些條件下，對組織修復(fù)過程有 害的基質(zhì)金屬蛋白酶失活。另一方面，生長因子將與創(chuàng)面(mnmd bed)保持接觸并保護(hù)免 受蛋白酶的作用。其具有生物相容性的事實(shí)是有利于使用膠原基質(zhì)的另一積極點(diǎn)。鈰鹽金屬鈰具有強(qiáng)有力的抗微生物作用并表現(xiàn)出對哺乳動(dòng)物細(xì)胞的低毒性26。Burkes & McCleskey27已表明，鈰鹽在體外對細(xì)菌和真菌有毒。在研究的39種細(xì)菌中，硝酸鈰以大 約0. 0004M的濃度抑制生長27。雖然其中鈰發(fā)揮其抑菌效果的生化水平仍然未知，但是存 在許多可能性。已報(bào)道細(xì)菌細(xì)胞壁負(fù)電荷的變化，其導(dǎo)致微生物的遷移和凝集28。鑭系元 素也對核酸產(chǎn)生響應(yīng)并產(chǎn)生不溶性復(fù)合物％。已經(jīng)表明，當(dāng)與鈰鹽接觸數(shù)周，人的燒傷較不頻繁被革蘭氏陰性菌移殖 (colonized by Gram negative bacteria)26。Fox 等人(1977)29 報(bào)道，硝酸鈰與磺胺嘧啶 銀的締合導(dǎo)致對于嚴(yán)重?zé)齻颊叩呐R床功效增強(qiáng)。觀察已經(jīng)證實(shí)局部用鈰使得燒傷常見的 T淋巴細(xì)胞衰竭恢復(fù)。這些有益效果與燒傷損傷上存在的連接至脂蛋白復(fù)合物(LPC)的鈰
有關(guān)3°。腫瘤壞死因子(TNF- □)是最強(qiáng)有力的炎性細(xì)胞因子。眾所周知細(xì)胞因子的過 度釋放對免疫功能具有有害作用。Deveci等人μ表明，用硝酸鈰(CN)治療損傷，導(dǎo)致白介 素-6增加和TNF- □減少，限制炎性反應(yīng)的程度。然后有證據(jù)表明通過炎性響應(yīng)介質(zhì)(如 白介素和TNF)的無器官(unorganized)存在，該金屬有用于治療慢性損傷14’31。在慢性潰瘍和燒傷的情況下，將硝酸鈰添加至敷料的優(yōu)勢在于抗微生物作用、免疫調(diào)節(jié)作用、通過降低TNF- □水平的抗炎作用。發(fā)明_既述本發(fā)明涉及獲得細(xì)胞增殖基質(zhì)(特別為非凍干或者凍干(敷料)組合物的形式) 及其臨床應(yīng)用，其一般對應(yīng)于對表征為皮膚完整性損失的損傷(包括不同病原學(xué)的皮膚粘 膜潰瘍)進(jìn)行的治療、用作止血?jiǎng)⒕植坑?、抗微生物劑?或免疫調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明的組合物或者敷料的重點(diǎn)是來自鑭系金屬鈰與膠原基質(zhì)的締合。發(fā)明描述本發(fā)明涉及細(xì)胞增殖基質(zhì)(特別為非凍干或者凍干(敷料)組合物的形式)的產(chǎn) 品，其包括與鈰鹽締合的牛膠原和任選的海藻酸鹽，其具有止血、創(chuàng)傷修復(fù)、抗微生物、免疫 調(diào)節(jié)性能，能夠吸收過多的滲出物，保持環(huán)境濕潤并同時(shí)防止損傷浸漬。其治療作用與處理 感染和創(chuàng)傷移生(wound colonization)有關(guān)，這歸因于其廣譜抗微生物作用。本發(fā)明的組合物或者敷料的創(chuàng)傷愈合性能來自膠原，所述膠原除了發(fā)揮在慢性潰 瘍中常見的富含膠原酶環(huán)境中保護(hù)新產(chǎn)生的膠原的作用之外，還用作結(jié)構(gòu)支撐并促進(jìn)細(xì)胞 遷移。另外，受到燒傷影響的皮膚上的毒素(如LPC(脂蛋白復(fù)合物))的存在；以及在慢性 潰瘍環(huán)境中大量產(chǎn)生的炎性細(xì)胞因子(如腫瘤壞死因子α)的存在可以維持炎性反應(yīng)，可 通過存在金屬鈰對該炎性反應(yīng)進(jìn)行調(diào)節(jié)。與創(chuàng)傷修復(fù)相結(jié)合，抗微生物和免疫調(diào)節(jié)劑作用 使得本發(fā)明的敷料成為有效的治療劑，用于燒傷和不同病原學(xué)的創(chuàng)傷，例如靜脈淤滯性潰 瘍、壓迫性潰瘍、足底皮膚潰瘍、并發(fā)性(complicated)外科創(chuàng)傷和燒傷。非凍干形式的本發(fā)明組合物具有不透明凝膠的外觀，并可被凍干為具有不同尺寸 的敷料。用于制備本發(fā)明的此類敷料的方法包括將鈰鹽(尤其硝酸鈰)溶解于皮膚學(xué)上 可接受的載體(優(yōu)選水)中，將鈰鹽溶液添加至膠原中并使其均質(zhì)化。在優(yōu)選實(shí)施方案中， 可將獲得的混合物均質(zhì)化至進(jìn)入潤膚劑(優(yōu)選丙二醇)的海藻酸鹽分散體中(homogenized to an alginate dispersion into an emollient)，直至其變成均勻物質(zhì)。然后根據(jù)所需 形式將所得物質(zhì)模塑為特定圖案并隨后進(jìn)行冷凍干燥(凍干)。通過本領(lǐng)域已知的常規(guī)方 法進(jìn)行冷凍干燥(凍干)之后，產(chǎn)品呈海綿狀，類似于纖維框架(fiber frame)。然后可通 過、輻射、環(huán)氧乙烷或者電子束滅菌系統(tǒng)將最終產(chǎn)品進(jìn)行滅菌。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及治療皮膚損傷的藥物組合物，其包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽和皮膚學(xué)上 可接受的載體。優(yōu)選地，所用的鈰鹽為硝酸鈰，尤其為六水合硝酸鈰，所用的膠原為牛I型膠原。基于組合物的總重量計(jì)，藥物組合物中鈰鹽的存在量可為0. 1 5重量％，膠原 可為凝膠形式，其量為1 95重量％。優(yōu)選地，基于組合物的總重量計(jì)，鈰鹽的存在量為 0. 4 2. 2重量％，膠原凝膠的存在量為73 75重量％。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，基于組合物的總重量計(jì)，鈰鹽的存在量為0.4重 量％，膠原凝膠的存在量為75重量％。在另一優(yōu)選實(shí)施方案中，基于組合物的總重量計(jì)，鈰鹽的存在量為2. 2重量％，膠 原凝膠的存在量為73重量％。本發(fā)明的藥物組合物可還包含懸浮劑。優(yōu)選地，該懸浮劑為海藻酸鹽，其可選自海 藻酸鈉和海藻酸鈣?；诮M合物的總重量計(jì)，懸浮劑的存在量可為0. 1 20重量％，優(yōu)選為0. 1 15重量％，尤其為10重量％。在本發(fā)明組合物中使用的皮膚學(xué)上可接受的載體優(yōu)選為水。本發(fā)明藥物組合物可還包含潤膚劑(優(yōu)選為丙二醇)，基于組合物的總重量計(jì)，其 存在量可為1 20重量％，優(yōu)選為5 15重量％，尤其為10重量％。可將本發(fā)明藥物組合物局部施用于各種損傷類型中，例如涉及與人或者動(dòng)物機(jī)體 上的微生物蛋白或者那些所謂的HSP(熱休克蛋白)相關(guān)的毒素釋放的皮膚損傷；涉及燒傷 皮膚毒素形成或者LPC的燒傷；其中過度生成蛋白酶的慢性潰瘍性皮膚損傷；其中需要控 制過度生成滲出物的難以消除的皮膚損傷；以及嚴(yán)重感染或者移生的皮膚損傷。本發(fā)明還涉及用于制備治療皮膚損傷的敷料的中間組合物，此類組合物包含在膠 原基質(zhì)上的鈰鹽和皮膚學(xué)上可接受的載體。優(yōu)選地，所用的鈰鹽為硝酸鈰，尤其為六水合硝酸鈰，所用的膠原為牛I型膠原?；诮M合物的總重量計(jì)，中間組合物中鈰鹽的存在量可為0. 001 5重量％，膠原 可為凝膠形式，其量為1 95重量％。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，基于組合物的總重量計(jì)，鈰鹽的存在量為0.014重 量％，膠原凝膠的存在量為75重量％。在另一優(yōu)選實(shí)施方案中，基于組合物的總重量計(jì)，鈰鹽的存在量為0. 075重量％， 膠原凝膠存在的量為73重量％。 本發(fā)明的中間組合物可還包含懸浮劑。優(yōu)選地，該懸浮劑為海藻酸鹽，其可選自海 藻酸鈉和海藻酸鈣?；诮M合物的總重量計(jì)，懸浮劑的存在量可為0. 1 20重量％，優(yōu)選 為0. 1 15重量％，尤其為0. 35重量％。本發(fā)明的中間組合物中使用的皮膚學(xué)上可接受的載體優(yōu)選為水。本發(fā)明的中間組合物可還包含潤膚劑(優(yōu)選為丙二醇)，基于組合物的總重量計(jì)， 其存在量可為1 20重量％，優(yōu)選5 15重量％，尤其為10重量％。本發(fā)明還涉及用于治療皮膚損傷的敷料，其包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽。優(yōu)選地，所 用的鈰鹽為硝酸鈰，尤其為六水合硝酸鈰，所用的膠原為牛I型膠原。基于敷料的總重量計(jì)，鈰鹽的存在量可為0. 1 5重量％，優(yōu)選為0. 4 2. 2重 量％。優(yōu)選地，鈰鹽的存在量為0. 4重量％或者2. 2重量％。優(yōu)選地，通過將本發(fā)明的中間組合物凍干來制備敷料。特別地，可通過Y射線、環(huán) 氧乙烷或者電子束對敷料進(jìn)行滅菌。本發(fā)明的另一實(shí)施方案涉及制備用于治療皮膚損傷的敷料的方法，其包括以下步 驟a)提供上文所述的中間組合物；和b)將步驟a)的中間組合物凍干，由此形成用于治療皮膚損傷的敷料。所述方法還包括以下步驟通過Y輻射、環(huán)氧乙烷或者電子束滅菌系統(tǒng)對步驟b) 中形成的敷料進(jìn)行滅菌。本發(fā)明還涉及與膠原締合的鈰鹽在制備本發(fā)明的藥物組合物、中間組合物或者敷 料中的用途。此外，本發(fā)明還涉及通過在所述皮膚損傷上施用如本文所公開的藥物組合物或者 敷料來治療皮膚損傷的方法。
本發(fā)明的特征在于以非凍干或者凍干(敷料)藥物組合物的形式，將促進(jìn)修復(fù)物 質(zhì)(膠原)與抗微生物物質(zhì)和免疫調(diào)節(jié)劑物質(zhì)(鈰鹽，尤其硝酸鈰)締合。本發(fā)明的另一 特征在于開發(fā)了敷料制劑，其用作具有止血、抗微生物和免疫調(diào)節(jié)性能的細(xì)胞增殖基質(zhì)，包 含與鈰鹽(尤其硝酸鈰)締合的膠原以及任選的海藻酸鹽(海藻酸鈉或者海藻酸鈣)。本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)勢本發(fā)明的藥物組合物和敷料通過膠原的生物效果并結(jié)合鈰鹽的抗微生物和免疫 調(diào)節(jié)效果來促進(jìn)組織修復(fù)，如嚴(yán)重?zé)齻颊吆湍菢釉馐苈詽兊幕颊咚@示，所述膠原 除了發(fā)揮在慢性潰瘍常見的富含膠原酶的環(huán)境中保護(hù)新產(chǎn)生的膠原作用之外，還用作結(jié)構(gòu) 支撐并促進(jìn)細(xì)胞遷移。優(yōu)選地，本發(fā)明中可使用懸浮劑。更優(yōu)選地，懸浮劑為海藻酸鹽。尤其使用海藻酸 鈉或者海藻酸鈣。海藻酸鹽(海藻酸鈉或者海藻酸鈣)的存在用于損傷濕度控制機(jī)制、吸 收過多滲出物，由此避免創(chuàng)傷邊緣浸漬和保持創(chuàng)傷中理想濕度水平。本發(fā)明的藥物組合物和敷料不粘附于創(chuàng)面，因此在新形成組織的變化期間避免外 傷，并且可修剪為創(chuàng)傷的形狀。在其應(yīng)用范圍內(nèi)，通過發(fā)揮鈰金屬的抗微生物作用，表明用 于難以愈合的創(chuàng)傷，甚至那些具有嚴(yán)重細(xì)菌移殖水平的創(chuàng)傷或者那些感染在其上發(fā)展的創(chuàng) 傷。因此其臨床應(yīng)用為燒傷、腿潰瘍(靜脈淤滯性潰瘍)、動(dòng)脈和混合潰瘍、糖尿病足、壓 迫性潰瘍外科和外傷創(chuàng)傷。與水膠體敷料相比，本發(fā)明的藥物組合物和敷料具有以下優(yōu)勢作用于蛋白和微 生物毒素或者HSP蛋白，并且除了調(diào)節(jié)蛋白酶過多的損傷之外，還表現(xiàn)抗微生物、止血的性 能。市場上存在其它含膠原的敷料，其中例如Fibracol 、Fibracol Plus 、 Promogran (所有三者均由Johnson&Johnson銷售)。此類敷料的局限在于不具有抗微生 物作用，抗微生物作用在一些臨床情況(如慢性潰瘍的情況)中可以是關(guān)鍵性的。這些種 類的潰瘍一般被細(xì)菌移殖(colonized by bacteria)，并且已知嚴(yán)重的移殖水平對傷口愈 合過程有害，甚至在沒有感染時(shí)也如此。因此，僅僅使用膠原的產(chǎn)品的應(yīng)用范圍廣泛局限于 沒有檢測到感染或嚴(yán)重細(xì)菌移殖信號的特定創(chuàng)傷修復(fù)階段，并且每當(dāng)發(fā)生這些情況時(shí)，就 應(yīng)該將其更換。本發(fā)明的藥物組合物和敷料提供與膠原締合的鈰鹽(尤其硝酸鈰)及其抗微生物 活性。市售的另一抗微生物和創(chuàng)傷修復(fù)乳膏Dermacerium (由Silvestre Labs (巴西)商 業(yè)化)中存在相同物質(zhì)。如已經(jīng)提及的，鈰鹽(尤其硝酸鈰)產(chǎn)生免疫調(diào)劑的額外性能。選擇鈰鹽(尤其硝酸鈰)作為存在于敷料中的抗微生物要素不僅歸因于其免疫調(diào) 節(jié)性能，而且歸因于以下事實(shí)目前為止，即使多年使用之后，也尚未有發(fā)展微生物抗性的 有關(guān)報(bào)道。將本發(fā)明組合物配制為敷料比乳膏形式更適當(dāng)，這是因?yàn)榉罅喜恍枰l繁更換， 因此減少成本和專業(yè)人員。下表1中描述了用于不同損傷的敷料市場表1
權(quán)利要求
1.用于治療皮膚損傷的藥物組合物，其特征在于包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽和皮膚學(xué) 上可接受的載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述鈰鹽為硝酸鈰，優(yōu)選為六水合 硝酸鈰。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或者2所述的藥物組合物，其特征在于所用的膠原為牛I型膠原。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于基于所述組合物的 總重量計(jì)，所述鈰鹽的存在量為0. 1 5重量％，優(yōu)選為0. 4 2. 2重量％，所述膠原以凝 膠形式存在，其量為1 95重量％，優(yōu)選為73 75重量％。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述鈰鹽的存在量為0.4重量％， 所述膠原凝膠的存在量為75重量％。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述鈰鹽的存在量為2.2重量％， 所述膠原凝膠的存在量為73重量％。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于它還包含懸浮劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于所述懸浮劑為海藻酸鹽，優(yōu)選選自 海藻酸鈉和海藻酸鈣。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或者8所述的藥物組合物，其特征在于基于所述組合物的總重量 計(jì)，所述懸浮劑的存在量為0. 1 20重量％，優(yōu)選為0. 1 15重量％，更優(yōu)選為10重量％。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于所述皮膚學(xué)上可接 受的載體為水。
11.根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于它還包含潤膚劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的藥物組合物，其特征在于所述潤膚劑為丙二醇。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或者12所述的藥物組合物，其特征在于基于所述組合物的總重 量計(jì)，所述潤膚劑的存在量為1 20重量％，優(yōu)選為5 15重量％，更優(yōu)選為10重量％。
14.根據(jù)權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于將它設(shè)計(jì)用于局 部施用于人或者動(dòng)物肌體中涉及與微生物蛋白或者HSP相關(guān)的毒素釋放的皮膚損傷；涉及 燒傷皮膚的毒素形成或者LPC的燒傷；其中蛋白酶過度生成的慢性潰瘍性皮膚損傷；以及 嚴(yán)重感染或者移生的皮膚損傷。
15.根據(jù)權(quán)利要求7至9中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于將它設(shè)計(jì)用于局部 施用于其中需要控制滲出物過度生成的難以消除的皮膚損傷。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至13中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于將它設(shè)計(jì)用于局 部施用于選自以下的損傷靜脈淤滯性潰瘍、壓迫性潰瘍、穿孔性足底創(chuàng)傷和復(fù)合外科創(chuàng)傷 以及燒傷。
17.用于制備治療皮膚損傷的敷料的組合物，其特征在于包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽 和皮膚學(xué)上可接受的載體。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的組合物，其特征在于所述鈰鹽為硝酸鈰，優(yōu)選為六水合硝 酸鈰。
19.根據(jù)權(quán)利要求17或者18所述的組合物，其特征在于所用的膠原為牛I型膠原。
20.根據(jù)權(quán)利要求17至19中任一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于基于所述組合物的總 重量計(jì)，所述鈰鹽的存在量為0. 001 5重量％，所述膠原以凝膠形式存在，其量為5 95重量％。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其特征在于所述鈰鹽的存在量為0.014重量％， 所述膠原凝膠的存在量為75重量％。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其特征在于所述鈰鹽的存在量為0.075重量％， 所述膠原凝膠的存在量為73重量％。
23.根據(jù)權(quán)利要求17至22中任一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于它還包含懸浮劑。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的組合物，其特征在于所述懸浮劑為海藻酸鹽，優(yōu)選選自海 藻酸鈉和海藻酸鈣。
25.根據(jù)權(quán)利要求23或者M(jìn)所述的組合物，其特征在于基于所述組合物的總重量 計(jì)，所述懸浮劑的存在量為0. 1 20重量％，優(yōu)選為0. 1 15重量％，更優(yōu)選為0. 35重量％。
26.根據(jù)權(quán)利要求17至25中任一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于所述皮膚學(xué)上可接受 的載體為水。
27.根據(jù)權(quán)利要求17至沈中任一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于它還包含潤膚劑。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的組合物，其特征在于所述潤膚劑為丙二醇。
29.根據(jù)權(quán)利要求27或者觀所述的組合物，其特征在于基于所述組合物的總重量 計(jì)，所述潤膚劑的存在量為1 20重量％，優(yōu)選為5 15重量％，更優(yōu)選為10重量％。
30.用于治療皮膚損傷的敷料，其特征在于包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽。
31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的敷料，其特征在于所述鈰鹽為硝酸鈰，優(yōu)選為六水合硝酸鋪。
32.根據(jù)權(quán)利要求30或者31所述的敷料，其特征在于所用的膠原為牛I型膠原。
33.根據(jù)權(quán)利要求30至32中任一項(xiàng)所述的敷料，其特征在于基于所述敷料的總重量 計(jì)，所述鈰鹽的存在量為0. 1 5重量％，優(yōu)選為0. 4 2. 2重量％。
34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的敷料，其特征在于所述鈰鹽的存在量為0.4重量％。
35.根據(jù)權(quán)利要求33所述的敷料，其特征在于所述鈰鹽的存在量為2.2重量％。
36.根據(jù)權(quán)利要求30至35中任一項(xiàng)所述的敷料，其特征在于通過將權(quán)利要求17至 29中任一項(xiàng)所述的組合物凍干來制備。
37.根據(jù)權(quán)利要求30至36中任一項(xiàng)所述的敷料，其特征在于通過γ輻射、環(huán)氧乙烷 或者電子束滅菌系統(tǒng)來滅菌。
38.制備用于治療皮膚損傷的敷料的方法，其特征在于包括以下步驟a)提供權(quán)利要求17至四中任一項(xiàng)所述的組合物；和b)將步驟a)的組合物凍干，從而形成權(quán)利要求30至35中任一項(xiàng)所述的敷料。
39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的方法，其特征在于還包括通過γ輻射、環(huán)氧乙烷或者電 子束滅菌系統(tǒng)對步驟b)中形成的敷料進(jìn)行滅菌的步驟。
40.與膠原締合的鈰鹽的用途，其特征在于用于制備權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述 的藥物組合物、權(quán)利要求17至四中任一項(xiàng)所述的組合物或者權(quán)利要求30至37中任一項(xiàng) 所述的敷料。
41.用于治療皮膚損傷的方法，其特征在于在所述皮膚損傷上施用權(quán)利要求1至16 中任一項(xiàng)所述的藥物組合物或者權(quán)利要求30至37中任一項(xiàng)所述的敷料。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療皮膚損傷的藥物組合物，其包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽和皮膚學(xué)上可接受的載體。此外，本發(fā)明還提供用于制備治療皮膚損傷的敷料的中間組合物、以及通過凍干所述中間組合物來制備此類敷料的方法。本發(fā)明還涉及包含在膠原基質(zhì)上的鈰鹽的治療皮膚損傷的敷料、以及與膠原締合的鈰鹽在制備根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物或者敷料中的用途。本發(fā)明的另一實(shí)施方案為通過在所述皮膚損傷上施用此類藥物組合物或者敷料來治療皮膚損傷的方法。本發(fā)明的組合物或者敷料可局部應(yīng)用于各種損傷類型中，例如人或者動(dòng)物機(jī)體上的涉及與微生物蛋白或者那些所謂的HSP(熱休克蛋白)相關(guān)的毒素釋放的皮膚損傷；涉及燒傷皮膚毒素形成或者LPC(脂蛋白復(fù)合物)的燒傷；其中蛋白酶過度生成的慢性潰瘍性皮膚損傷；其中需要控制滲出物過度生成的難以消除的皮膚損傷；以及嚴(yán)重感染或者移生的皮膚損傷。
文檔編號A61K9/00GK102105177SQ200980112850
公開日2011年6月22日 申請日期2009年2月9日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月8日
發(fā)明者路易斯·愛德華多·達(dá)·克魯斯 申請人:路易斯·愛德華多·達(dá)·克魯斯