專利名稱：：一種中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于中藥制藥領(lǐng)域，具體涉及一種中藥組合物及其制備方法。該中藥組合物具有消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓作用。
背景技術(shù)：
：黃芪最早為豆科植物膜莢黃"^^yfr"ga/"swew6m"acew(Fisch.)Bge.和蒙古黃l^4wrag"/wwew6r""a"wj(Fisch.)Bge.var.wo"g/2o//cws(Bge.)Hsiao的干燥根，是健脾益氣、固表利尿、脫毒排膿、斂瘡生肌的要藥，其主要活性成分是黃芪皂苷和多糖，黃芪皂苷具有消炎、降血壓、抗心肌缺血、中樞鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜的作用；黃芪多糖具有增強機體免疫力、提高人體抗應(yīng)激反應(yīng)能力的作用。重樓為百合禾斗云南重樓戶anipo(y-p/2少〃aSmithvar.yw"wa"e"5^(Franch.)Hand.-Mazz.和七葉一枝花尸arhpofy-p/^/aSmithvar.c/j/wew&(Franch.)Hara的干燥根莖。具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚之功效，其主要活性成分為薯蕷皂苷元，具有抗腫瘤、消炎、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、止血等作用。三七為五加科植物尸fl"ox朋tog!Twe"g(Burk.)F.H.Chen的干燥根及根莖，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、滋補強壯等功效，其主要活性成分為三七皂苷、三七素等，為貴重藥材。生品重于散瘀止血，熟品重于補血。老鸛草為牦牛兒科植物牦牛兒苗五ra^wmw印附/W、老鸛草Gemm'wmw7/or必Maxim.或野老鸛草Gemw'wwcara//"a""wL.的干燥地上部分，具有祛風(fēng)除濕、通經(jīng)絡(luò)、清熱解毒之功效，其主要活性成分為鞣質(zhì)、黃酮類化合物。鞣質(zhì)為一種具有沉淀蛋白質(zhì)特性的水溶性多元酚類化合物，不僅具有常見的收斂、抗菌消炎、止血、驅(qū)蟲、止瀉、抗多種病原蟲感染性疾病的作用，還具有抗腫瘤、抗突變、抗脂質(zhì)過氧化、抗變態(tài)反應(yīng)，抑制胃蛋白酶，預(yù)防應(yīng)激性胃腸損傷，降壓、降脂，改善肝腎功能等功用，并對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有鎮(zhèn)靜作用。發(fā)明人經(jīng)長期探索研究，將黃芪、三七、老鸛草和重樓組合，制備得到本發(fā)明中藥組合物，該組合用于消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓具有顯著的療效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種具有消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓作用的中藥組合物。本發(fā)明的另一目的是提供上述中藥組合物的制備方法。本發(fā)明的目的是通過以下措施實現(xiàn)的一種中藥組合物，其特征在于該組合物選用黃芪2-3重量份、三七1-2重量份、老鸛草0.8-1.2重量份和重樓1-2重量份。上述組合物優(yōu)選采用黃芪2.0-2.5重量份、三七1.0-1.5重量份、老鸛草l重量份-、重樓1.5-2.0重量份。上述中藥組合物的制備方法包括以下步驟a、將重樓、黃芪、三七用質(zhì)量百分比濃度為70-卯％的乙醇提?。籦、將上述醇提后所得藥渣和老鸛草進行水提；c、將重樓、黃芪、三七醇提液濃縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉；水提液濃縮成浸膏后干燥，粉碎成水提物干粉；d、將水提物干粉、醇提取物干粉混合后即得本發(fā)明組合物。上述制備方法可具體按照以下步驟制備a、將重樓、黃芪、三七用質(zhì)量百分比濃度為80%的乙醇8倍量提取2次，每次2h;b、醇提后所得藥渣和老鸛草采用10倍量水提取2次，每次lh;c、將重樓、黃芪、三七醇提液濃縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉；水提液濃縮成浸膏后干燥，粉碎成水提物干粉；d、將水提物干粉、醇提取物千粉混合后即得本發(fā)明組合物。上述組合物可加入常規(guī)輔料制成藥學(xué)上可接受的各種劑型。所述的組合物在制備消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明中藥組合物具體制備工藝流程如圖1所示。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明組合物，經(jīng)過醇提、水提等工藝條件的優(yōu)選，確定了其最佳工藝參數(shù)，找到了其有效部位，并且經(jīng)過藥效學(xué)實驗，證明了其鎮(zhèn)痛、抗炎等方面的有效部位，保證了所述的組合物在制備消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓藥物中的應(yīng)用。本工藝中針對不同的原料采用不同的制備工藝，使各原料的有效成分充分提取出來，增加了藥效，具體體現(xiàn)在以下幾個方面(一)醇提工藝研究1、正交試驗安排與結(jié)果通過預(yù)實驗確定提取因素水平，采用L9(3"正交試驗安排表，進行正交試驗并測定結(jié)果，以干膏得率、黃芪甲苷含量、重樓皂苷I含量及三七皂苷R!含量為指標(biāo)，以綜合評分為評價指標(biāo)確定最佳工藝。表l醇提正交實驗因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>2、結(jié)果分析以干膏重、黃芪甲苷含量、重樓皂苷I含量、三七皂苷R!含量為指標(biāo)，分別選取最高者作為100分，其余按公式計算得分yi'=100—最高值+》，然后對三個指標(biāo)賦與不同的權(quán)重。結(jié)合生產(chǎn)實際要求分別賦予干膏重、重樓皂苷I、三七皂苷R,權(quán)重系數(shù)分別為0.2，黃芪甲甘權(quán)重系數(shù)為0.4，由極差分析可知，各因素對該指標(biāo)的影響大小排列為D〉C〉B〉A(chǔ)，均無顯著性差異，D因素的水平優(yōu)劣排列如下3>2>1，其中1和3水平具顯著性差異，1和2，2和3水平無顯著性差異。C因素的水平優(yōu)劣排列如下2>3>1,各水平間均無顯著性差異。B因素的水平優(yōu)劣排列如下2>3>1，各水平間均無顯著性差異。A因素的水平優(yōu)劣排列如下2>1>3,各水平間均無顯著性差異。以綜合評分為指標(biāo)的工藝為A2B2C2D3，從生產(chǎn)成本耗時等方面考慮，確定最佳工藝條件為A2B2C3D2，g卩乙醇質(zhì)量百分濃度80%,重樓、黃芪和三七藥材重量的8倍量，提取2次，每次2h。(二)水提工藝研究1、正交實驗設(shè)計與結(jié)果采用L9(3"正交試驗安排表，進行正交試驗并測定結(jié)果，以所得干膏得率、氨基酸含量(相對于?；撬岬暮?為指標(biāo)，以綜合評分為評價指標(biāo)確定最佳工藝。表2正交試驗因素水平表因素水平加水倍量提取時間提取次數(shù)(A)(B)(c)18倍lh1次210倍1.5h2次312倍2h3次52、正交實驗結(jié)果優(yōu)化所得的最佳工藝A2B,C2。醇提后所得藥渣和老鸛草藥材重量的IO倍量水，提取2次，每次lh。(三)藥效實驗研究研究處方鎮(zhèn)痛、抗炎和抗凝血幾個方面的作用，驗證其與臨床主治有關(guān)的藥效學(xué)作用，并驗證新工藝制劑的有效性。1、實驗動物昆明種小鼠(中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心，雌雄各半)。2、試驗藥物本發(fā)明組合物(按照實施例1方法制備得到)(南京中山制藥有限公司，各味藥材系列提取物(南京中山制藥有限公司自制，批號、代號見表3.1);羧甲基纖維素鈉(中國醫(yī)藥集團上海化學(xué)試劑公司，批號F20020928);角叉菜膠(sigma公司，批號122kl444);氯化鈉注射液(南京小營制藥廠，批號:2004102603);阿司匹林(南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司，批號050611);芬必得(中美天津史克制藥有限公司，批號05040122);其他試劑為分析純。表3各味藥材系列提取物藥物名稱代號性狀三七醇提浸膏粉A組淺黃色粉末三七超細(xì)粉B組乳白色粉末老鸛草水提浸膏粉C組褐色粉末老鸛草醇提浸膏粉D組褐色粉末重樓+黃芪水提浸膏粉E組褐色粉末重樓+黃芪醇提藥渣水提浸膏粉F組褐色粉末3、動物模型的建立與實驗方法1)動物分組各藥效實驗根據(jù)受試藥物分組，分別為對照組(0.5y。CMC-Na)、陽性藥組(阿司匹林)、受試藥物組(本發(fā)明組合物)。動物所用藥物臨床等效劑量以mg/kg-mg/i^轉(zhuǎn)換因子換算，結(jié)合實際，人、小鼠體重分別以50kg、20g計，按體表面積折算成小鼠等效用量為1.27g/kg。2)小鼠醋酸扭體法鎮(zhèn)痛試驗取健康昆明小鼠，按體重隨機分組，根據(jù)本發(fā)明組合物臨床生藥用量，分別按組給予陽性藥(布洛芬，給藥量:100mg/kg)、空白(0.5。/。CMC-Na,給藥量為0.3ml/10g)、各味藥材系列提取物、本發(fā)明組合物(給藥量為1.27g/kg),每天給藥一次，連續(xù)給藥12天。末次給藥前禁食12小時，然后給藥45min后，腹腔注射0.6%醋酸溶液，0.2mL/只，觀察小鼠15min內(nèi)的扭體次數(shù)。3)角叉菜膠致大鼠足趾腫脹的抑制作用試驗取健康昆明小鼠，按體重隨機分組，根據(jù)本發(fā)明組合物臨床生藥用量，分別按組給予陽性藥(阿司匹林，給藥量200mg/kg)、空白(CMC-Na給藥量2.5g/kg)、各味藥材系列提取物、本發(fā)明組合物(給藥量為1.27g/kg),每天給藥一次，連續(xù)給藥12天。末次給藥前禁食12小時，給藥1小時后，在小鼠的右后足皮下注射in/。角叉菜膠0.03mL,4h后分別剪下左右足稱重，計算腫脹度。然后致炎足充分剪碎,于2mL生理鹽水中浸泡12小時，3000r/min離心5min，取上清液以備測定前列腺素2(PGE2)含量(PGE2含量以吸光度表示，并換算為單位足重的含量)。腫脹度=(致炎足重-正常足重^100%+正常足重4)二甲苯致小鼠耳腫脹的抑制作用試驗取健康昆明小鼠，按體重隨機分組，連續(xù)灌胃給藥6天，禁食12小時過夜，第7天再給藥一次，l小時后，在小鼠右耳的前后兩面均勻涂布二甲苯0.05mL，左耳不做任何處理。各組分別于致炎后60分鐘脫頸椎處死小鼠，剪下雙耳用7mm直徑打孔器分別在雙耳相同部位打下圓耳片,電子天平稱質(zhì)量。計算腫脹度及腫脹抑制率，比較給藥組與對照組差異情況，進行t檢驗。計算公式為腫脹度(11^)=右耳片質(zhì)量(mg)-左耳片質(zhì)量(mg)腫脹抑制率=(對照組腫脹度-給藥組腫脹度)+對照組腫脹度乂100%。5)毛細(xì)管法測定小鼠凝血時間試驗取健康昆明小鼠，按體重隨機分組，根據(jù)本發(fā)明組合物臨床生藥用量，分別按組給予陽性藥(阿司匹林，給藥量36mg/kg)、空白(0.5。/。CMC-Na,給藥量為0.3mL/10g)、各味藥材系列提取物、本發(fā)明組合物(給藥量為1.27g/kg),每天給藥一次，連續(xù)給藥12天。末次給藥前禁食12小時，然后給藥后50分鐘眼球取血，用毛細(xì)管法測量凝血時間。4、預(yù)試驗結(jié)果及分析1)各味藥材系列提取物的醋酸扭體鎮(zhèn)痛試驗實驗結(jié)果試驗結(jié)果以15min內(nèi)扭體反應(yīng)次數(shù)表示，統(tǒng)計學(xué)檢驗采用組間t檢驗，結(jié)果見表4。表4各味藥材系列提取物醋酸扭體鎮(zhèn)痛試驗實驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注**:PO.01;與對照組比較(t檢驗)。實驗結(jié)果表明，D組小鼠扭體反應(yīng)數(shù)與對照組比較無顯著差異(P>0.05);其余各組均與對照組比較有極顯著差異(PO.Ol)。2)各味藥材系列提取物的角叉菜膠致小鼠足趾腫脹的抑制作用試驗結(jié)果試驗結(jié)果以腫脹度(％)表示，統(tǒng)計學(xué)檢驗采用組間t檢驗，結(jié)果見表5。表5各味藥材系列提取物的角叉菜膠致小鼠足趾腫脹的抑制作用試驗結(jié)果(生藥量g/kg)Jf土sz)注*:<0.05**:P<0.01;與對照組比較(t檢驗)。試驗結(jié)果表明，B組的角叉菜膠足趾腫脹的抑制作用與對照組比較有極顯著差異(PO.Ol)，C組、D組、E組、F組的角叉菜膠足趾腫脹的抑制作用與對照組比較有顯著差異(P<0.05)，A組的角叉菜膠足趾腫脹的抑制作用與對照組比較無顯著差異。3)各味藥材系列提取物的二甲苯致小鼠耳腫脹的抑制作用試驗試驗結(jié)果以腫脹度(％)表示，統(tǒng)計學(xué)檢驗采用組間t檢驗，結(jié)果見表6。表6各味藥材系列提取物對二甲苯致小鼠耳腫脹的抑制作用試驗結(jié)果(生藥量g/kg)義土SZ)注*:P<0.05，**:P<0.01;與對照組比較(t檢驗)104.9±1.7**1011.5±3.8**1012.1±2.4**1020.1±5.1109.2±2.2**108.3±1.9**對照組——1022.3±7.60.421019.6±5.30.421010.2±2.4**0.341016.3±4.5*0.341015.9±3.7*0.51016.0±3.9*0.51015.6±5.1*對照組——10125.6±48.30.421098.6±35.20.421035.2±21.0**0.341078.2±29.5*0.3410112.3±26.70.51035.1±13.8**0.51048.8±22.4**2244cicJcJo5<doi組組組組組組ABcDEF組組組組組組ABcDEF組組組組組組ABcDEF結(jié)果表明，B組、E組和F組的耳腫脹度與對照組比較有極顯著差異(PO.Ol)，C組的耳腫脹度與對照組比較有顯著差異(PO.05),A組和D組的耳腫脹度與對照組比較無顯著差異(P>0.05)。4)各味藥材系列提取物的毛細(xì)管法測定小鼠凝血時間試驗結(jié)果實驗結(jié)果以凝血時間表示，結(jié)果見表7。表7各味藥材系列提取物毛細(xì)管法測定小鼠凝血時間試驗結(jié)果組別給藥量(生藥量動物數(shù)__'g/kg)_凝血時間s1±幼對照組——10.0.42100.42100.34100.34100.5100.51047.6±19.560.8±34.776.8±27.1*112.1±37.2**56.8±26.4143.2±40.3**101.2±37.5**注*:PO.05,**:PO.01;與對照組比較(t檢驗)結(jié)果表明，C組、E組和F組的凝血時間與對照組比較有極顯著差異(PO.Ol)，B組的凝血時間與對照組比較有顯著差異(P<0.05)，而其余各組的凝血時間與對照組比較無顯著差異(P>0.05)。5、本發(fā)明組合物藥效驗證實驗結(jié)果1)醋酸扭體法小鼠鎮(zhèn)痛試驗試驗結(jié)果以15min內(nèi)扭體反應(yīng)次數(shù)為指標(biāo)，統(tǒng)計學(xué)采用組間t檢驗，結(jié)果見表8。表8本發(fā)明組合物醋酸扭體法小鼠鎮(zhèn)痛試驗實驗結(jié)果組別給藥量(生藥量g/kg)動物數(shù)扭體反應(yīng)次數(shù)對照組1022.1±2.3布洛芬組0.11010.2±4.3**本發(fā)明組合物組4.651015.6±3.5**注:**:PO.01,與對照組比較(t檢驗)；結(jié)果表明，布洛芬、本發(fā)明組合物的小鼠扭體反應(yīng)數(shù)與對照組比較均有顯著差異(PO.Ol)。)角叉菜膠致小鼠足趾腫脹的抑制作用試驗結(jié)果實驗結(jié)果以腫脹度表示，結(jié)果見表9。表9本發(fā)明組合物對角叉菜膠致小鼠足趾腫脹的抑制作用實驗結(jié)果組組組組組組ABcDEF藥物(生藥量g/kg)動物數(shù)-角叉菜膠致炎試驗(7±5￡))足腫脹度(％)PGE2(A/g)1.125±0.1670.745±0.129"0.712±0.058**對照組一1021.4±5.1阿司匹林0.21010.1士3.4**本發(fā)明組合物組4.651011.2±1.3**注**:PO.01;與對照組比較(t檢驗)；結(jié)果表明，阿司匹林、本發(fā)明組合物的角叉菜膠足趾腫脹的抑制作用與對照組比較有極顯著差異(P<0.01)。3)毛細(xì)管法測定小鼠凝血時間試驗結(jié)果實驗結(jié)果以凝血時間表示，結(jié)果見表IO。一表10本發(fā)明組合物毛細(xì)管法測定小鼠凝血時間試驗結(jié)果藥物給藥劑量(生藥量g/kg)動物數(shù)凝血時間(s)I士SD凝血時間延長率(％)對照組—1071.3±25.2一阿司匹林組0.03610139.7±38.7**96.5本發(fā)明組合物組4.651052.4±16.5**109.3注"PO.Ol，與對照組比較(t檢驗)；藥效篩選實驗結(jié)果表明，重樓黃芪醇提物及其藥渣的水提物、三七超細(xì)粉、老鸛草水提物在抗炎、鎮(zhèn)痛、抗凝血方面均有顯著效果；三七醇提物有鎮(zhèn)痛作用；老鸛草醇提物在腳叉菜膠致炎試驗上有明顯效果。通過藥效篩選試驗，明確或驗證了黃芪、重樓、三七、老鸛草的藥用部位及藥理作用，可用于制備消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓的藥物，具有顯著療效。圖1為本發(fā)明組合物制備工藝流程圖。具體實施例方式實施例l配方-黃芪200g、三七100g、老鸛草100g、重樓150g;制備工藝1、醇提將重樓、黃芪、三七加入質(zhì)量百分比濃度為80%乙醇，用量為重樓、黃芪、三七重量的8倍量，提取2次，每次2h;2、水提醇提后所得藥渣和老鸛草采用藥渣和老鸛草重量的10倍量水提取2次，每10次lh;3、混合、干燥、粉碎將重樓、黃芪、三七醇提液濃縮成浸膏后60'C真空干燥、粉碎成120目干粉；水提液濃縮成浸膏后60'C真空干燥，粉碎成120目干粉，備用；4、制粒將水提物干粉、醇提取物干粉混合后制成顆粒，再填充膠囊。實施例2配方-黃芪250g、三七150g、老鸛草100g、重樓200g;制備方法'1、醇提將重樓、黃芪、三七加入70%乙醇6倍量提取3次，每次1.5h;2、水提醇提后所得藥渣和老鸛草采用8倍量水提取3次，每次1.5h;3、混合、干燥、粉碎將重樓、黃芪、三七醇提液濃縮成浸膏后6(TC真空干燥、粉碎成120目干粉；水提液濃縮成浸膏后60'C真空干燥，粉碎成120目干粉，備用；4、制粒將水提物干粉和醇提取物干粉混合后制成顆粒，再壓片。實施例3配方黃芪225g、三七125g、老鸛草80g、重樓175g;制備方法1、醇提將重樓、黃芪、三七加入卯％乙醇10倍量提取1次，每次lh;2、水提醇提后所得藥渣和老鸛草采用12倍量水提取1次，每次lh;3、混合、干燥、粉碎將重樓、黃芪、三七醇提液濃縮成浸膏后60'C真空干燥、粉碎成120目干粉；水提液濃縮成浸膏后6(TC真空干燥，粉碎成120目干粉，備用；4、將水提物干粉、醇提取物干粉混合后制成口服液。本發(fā)明組合物在制備消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓藥物中應(yīng)用。權(quán)利要求1、一種中藥組合物，其特征在于該組合物選用黃芪2-3重量份、三七1-2重量份、老鸛草0.8-1.2重量份和重樓1-2重量份。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于該組合物選用黃芪2.0-2.5重量份、三七1.0-1.5重量份、老鸛草1重量份和重樓1.5-2.0重量份。3、一種中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟a、將重樓、黃芪、三七用質(zhì)量百分比濃度為70-90%的乙醇提??；b、將上述醇提后所得藥渣和老鸛草進行水提；c、將重樓、黃芪、三七醇提液濃縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉水提液濃縮成浸膏后干燥，粉碎成水提物干粉；d、將水提物干粉、醇提取物干粉混合即得本發(fā)明組合物。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法具體按照以下步驟制備a、將重樓、黃芪、三七用質(zhì)量百分比濃度為80%的乙醇8倍量提取2次，每次2h;b、醇提后所得藥渣和老鸛草采用10倍量水提取2次，每次lh:c、將重樓、黃芪、三七醇提液濃縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉；水提液濃縮成浸膏后干燥，粉碎成水提物干粉；d、將水提物干粉、醇提取物干粉混合即得本發(fā)明組合物。5、權(quán)利要求1所述的組合物在制備消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種中藥組合物，該組合物選用黃芪2-3重量份、三七1-2重量份、老鸛草0.8-1.2重量份和重樓1-2重量份組成。該組合物的制備方法是將重樓、黃芪、三七用質(zhì)量百分比濃度為70-90％的乙醇提取后，將醇提后所得藥渣和老鸛草進行水提，再將重樓、黃芪、三七醇提液濃縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉，水提液濃縮成浸膏后干燥、粉碎成水提物干粉，最后將水提物干粉、醇提取物干粉混合即得。本發(fā)明組合物可用于制備消炎、鎮(zhèn)痛或抗血栓的藥物，該藥物具有顯著療效。文檔編號A61K36/896GK101642522SQ20091018453公開日2010年2月10日申請日期2009年8月28日優(yōu)先權(quán)日2009年8月28日發(fā)明者付寶慧,徐云輝,濮存海,波王,趙開軍,磊陳申請人:南京中山制藥有限公司