專利名稱：一種用于胃癌診斷的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于胃癌診斷的藥物及其制備方法，該藥物通過(guò)一個(gè)雙功 能連接劑將放射性核素間接標(biāo)記到單克隆抗體3H11 ，由于腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)特 異抗原，利用抗體和抗原的特異性結(jié)合，使標(biāo)記的抗體注入體內(nèi)后濃聚于腫瘤 部位，通過(guò)核醫(yī)學(xué)的單光子斷層顯像技術(shù)，對(duì)胃癌進(jìn)行診斷。
背景技術(shù)：
腫瘤是危害人類生命和健康的主要疾病之一，如何進(jìn)行早期診斷和治療是 生物醫(yī)學(xué)工作者長(zhǎng)期以來(lái)不懈努力追求的目標(biāo)。腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)特異抗原， 單克隆抗體具有識(shí)別抗原的特異性，因而可以利用單克隆抗體診斷疾病。由于 放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體對(duì)腫瘤具有特異性和高親和力，同時(shí)也由于抗體 工程技術(shù)的快速發(fā)展，近年來(lái)放射免疫顯像成為腫瘤診斷的一個(gè)新的方法和手 段，并在臨床上取得了引人注目的診斷效果。
中國(guó)專利97108618.4公開了一種抗人肝癌單克隆抗體HAbl8放射免疫診斷 劑，而國(guó)內(nèi)外尚未有放射性核素通過(guò)間接法標(biāo)記的用于胃癌診斷的藥物。
3H11是我國(guó)研制的抗胃癌單克隆抗體，并用99mTc、 188Re和1311標(biāo)記進(jìn)行 了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究。上述研究采用的標(biāo)記方法均為直接標(biāo)記法，由于在標(biāo) 記過(guò)程中加入了還原劑或氧化劑，因此對(duì)抗體活性產(chǎn)生相對(duì)較大的影響。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于胃癌診斷的藥物及其制備方法，該藥物通 過(guò)一個(gè)雙功能連接劑用放射性核素間接標(biāo)記單克隆抗體3H11，使標(biāo)記的抗體注 入體內(nèi)后濃聚于腫瘤部位，通過(guò)核醫(yī)學(xué)的單光子斷層顯像技術(shù)，對(duì)胃癌進(jìn)行診 斷；通過(guò)間接標(biāo)記法制備的藥物既可減小對(duì)抗體活性的影響，又可增強(qiáng)放射性 藥物的穩(wěn)定性，同時(shí)提高腫瘤對(duì)放射性藥物的攝取。
本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的 一種用于胃癌診斷的藥物，包 括抗體及放射性核素，所述抗體為單克隆抗體3H11，所述放射性核素通過(guò)一個(gè)雙功能連接劑標(biāo)記所述單克隆抗體3H11，所述放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體 3H11為無(wú)色液體針劑。
一種用于胃癌診斷的藥物的制備方法，其步驟如下-
I 、將0.9 mL濃度為5.0 mg/mL的單克隆抗體3H11溶液與5 濃度為 1.55xl(y2 mg/mL的S-HYNIC溶液加入反應(yīng)管中，在避光(C條件下進(jìn)行反應(yīng)5 小時(shí)；該反應(yīng)中S-HYNIC與單克隆抗體3H11的摩爾比為8:1;反應(yīng)完成后獲得 反應(yīng)溶液；
II 、將所述反應(yīng)溶液使用pH值為7.4、濃度為20 mM的檸檬酸緩沖液透析 處理2次，每次透析時(shí)間為8小時(shí)，所用檸檬酸緩沖液中含100 mM NaCl;將 經(jīng)過(guò)2次透析處理后的所述反應(yīng)液使用pH值為5.2、濃度為20 mM的檸檬酸緩 沖液再透析處理2次，每次透析時(shí)間為8小時(shí)，所用檸檬酸緩沖液中含100 mM NaCl，透析處理完成后，獲得偶聯(lián)物HYMC-3H11溶液；
III、 將0.2 mg濃度為3.0 mg/mL的所述偶聯(lián)物HYNIC-3H11 、 20.0 mg濃度 為100.0 mg/mL的Tricine、 20.0昭濃度為3.0 mg/mL的SnCl2和1110 MBq的 Na"mTc04依次加入反應(yīng)管中，室溫反應(yīng)30分鐘；將反應(yīng)物通過(guò)PD-10柱純化， 獲得放射化學(xué)純度大于95%的放射性藥物99mTc-HYMC-3Hll。
一種用于胃癌診斷的藥物的制備方法，其步驟如下
I 、將1.2 mL濃度為5.0 mg/mL的單克隆抗體3H11溶液和1 mL濃度為 l.OmM的EDTA溶液分別加入到超濾離心管中，在4'C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn) 的速度離心45分鐘；
n、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0 mL，第二次在4"C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
m、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0 mL，第三次在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
IV、 向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0 mL，第四次在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
V、 將超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液取出超濾離心管，在該單克隆 抗體3H11溶液中加入Na2HPO4溶液稀釋至0.5 mL，測(cè)量該溶液中單克隆抗體 3H11的濃度并保存數(shù)據(jù)，在4'C條件下保存該抗體溶液；所述Na2HPCV溶液的 pH值為7.5，濃度為0.1 M，所述Na2HP(V溶液中含0.15 mMNaCl;VI、 用DMF溶解DOTA-NHS，配制成濃度為33.45 g/L的溶液；取此溶液10 kiL分兩次加入到0.5 mL的上述經(jīng)超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液中，該混和液在避光4"C條件下反應(yīng)12小時(shí)，獲得反應(yīng)溶液；
VII、 將所述反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移到透析卡中，在1.0LNa2HPO4溶液中透析處理24小時(shí)，透析處理溫度為4。C，所述Na2HP04溶液的pH值為7.5，濃度為0.1M，所述Na2HP04溶液中含0.15 mM NaCl;
\1、將經(jīng)過(guò)一次透析處理的所述反應(yīng)溶液使用1.0LNH4OAc溶液進(jìn)行第二次透析處理，透析處理時(shí)間為18小時(shí)，透析處理溫度為4。C;在相同條件下再重復(fù)所述透析過(guò)程3次;透析處理完成后，獲得DOTA-3H11溶液;在DOTA-3H11溶液中加入NH4OAc溶液進(jìn)行濃度調(diào)節(jié)，獲得濃度為2.8 mg/mL的偶聯(lián)物D0TA-3H11溶液，所述的NH4OAc溶液的pH值為7.0、濃度為0.05 M;對(duì)該溶液中偶聯(lián)物DOTA-3H11的濃度進(jìn)行測(cè)量并保存數(shù)據(jù)，在4"C條件下保存該偶聯(lián)物溶液；
IX、將50 nL的所述偶聯(lián)物DOTA-3H11溶液和100 醋酸鈉緩沖液加入到反應(yīng)管中，所述醋酸鈉緩沖液的pH值為5.2、濃度為0.2 M，再加入5 mInCl3溶液，所述minCl3溶于0.04 M HC1溶液中；該混和液在43'C條件下反應(yīng)1小時(shí)，然后加入20 |iL EDTA，所述EDTA的pH值為5.0、濃度為6.0 mM，在室溫條件下反應(yīng)10分鐘；將反應(yīng)物通過(guò)PD-10柱純化，獲得放射化學(xué)純度大于99。/c的放射性藥物mIn-DOTA-3Hll。
一種用于胃癌診斷的藥物的制備方法，其步驟如下
I 、將1.2 mL濃度為5.0 mg/mL的單克隆抗體3H11溶液和1 mL濃度為1.0mM的EDTA溶液分別加入到超濾離心管中，在4X:條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
n、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0mL，第二次在4"C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
in、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0mL，第三次在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
IV、 向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0mL，第四次在4"C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
V、 將超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液取出超濾離心管，在該單克隆抗體3H11溶液中加入Na2HPO4溶液稀釋至0.5 mL，測(cè)量該溶液中單克隆抗體3H11的濃度并保存數(shù)據(jù)，在4"C條件下保存該抗體溶液，所述Na2HP04溶液的pH值為7.5，濃度為0.1 M，所述Na2HP04溶液中含0.15 mMNaCl;
VI、用DMF溶解DTPA衍生物，配制成濃度為33.45 g/L的溶液；取此溶液10 pL分兩次加入到0.5 mL的上述經(jīng)超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液中，該混和液在避光4"C條件下反應(yīng)12小時(shí)，獲得反應(yīng)溶液；
VD、將所述反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移到透析卡中，在L0LNa2HPO4溶液中透析處理24小時(shí)，透析處理溫度為4"C，所述Na2HP04溶液的pH值為7.5，濃度為0.1 M，所述Na2HP04溶液中含0.15 mM NaCl;
VD1、將經(jīng)過(guò)一次透析處理的所述反應(yīng)溶液使用1.OLNH4OAc溶液進(jìn)行第二次透析處理，透析處理時(shí)間為18小時(shí)，透析處理溫度為4";在相同條件下再重復(fù)所述透析過(guò)程3次。透析處理完成后，獲得DTPA-3H11溶液;在DTPA-3H11溶液中加入NH4OAc溶液進(jìn)行濃度調(diào)節(jié)，獲得濃度為2.8 mg/mL的偶聯(lián)物DTPA-3H11溶液，所述的NH4OAc溶液的pH值為7.0、濃度為0.05 M;對(duì)該溶液中偶聯(lián)物DTPA-3H11的濃度進(jìn)行測(cè)量并保存數(shù)據(jù)，在4'C條件下保存該偶聯(lián)物溶液；
IX、將50 jiL的所述偶聯(lián)物DTPA-3H11溶液和100 (iL醋酸鈉緩沖液加入到反應(yīng)管中，所述醋酸鈉緩沖液的pH值為5.2、濃度為0.2 M，再加入5 pL mIna3溶液，所述mInCl3溶于0.04 M HC1溶液中；該混和液在室溫條件下反應(yīng)30分鐘，然后加入20 EDTA，所述EDTA的pH值為5.0、濃度為6.0 mM，在室溫條件下反應(yīng)10分鐘；將反應(yīng)物通過(guò)PD-10柱純化，獲得放射化學(xué)純度大于99%的放射性藥物mIn-DTPA-3Hll。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比有如下優(yōu)點(diǎn)由于腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)特異抗原，利用抗體和抗原的特異性結(jié)合，通過(guò)抗體將放射性核素載帶到腫瘤部位，利用核醫(yī)學(xué)影像技術(shù)，對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷定位。在已有技術(shù)中，對(duì)單克隆抗體3H11的標(biāo)記方法均為直接標(biāo)記法，由于在標(biāo)記過(guò)程中加入了還原劑或氧化劑，因此對(duì)抗體活性產(chǎn)生相對(duì)較大的影響。本發(fā)明釆用間接標(biāo)記法，即在單克隆抗體和放射性核素之間引入一個(gè)雙功能連接劑。這既可減小對(duì)抗體活性的影響，又可增強(qiáng)放射性藥物的穩(wěn)定性，同時(shí)提高腫瘤對(duì)放射性藥物的攝取。
以下結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。

圖1為本發(fā)明HYNIC偶聯(lián)單抗3H11的分析圖；圖2為本發(fā)明標(biāo)記物穩(wěn)定性比較示意圖；圖3為本發(fā)明標(biāo)記物穩(wěn)定性比較的另一示意圖；圖4為本發(fā)明標(biāo)記物放射免疫活性測(cè)定示意圖；圖5為本發(fā)明4小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖；圖6為本發(fā)明24小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖；圖7為直接標(biāo)記法4小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖；圖8為直接標(biāo)記法24小時(shí)的y顯像結(jié)果圖；圖9為陰性對(duì)照4小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖；圖10為陰性對(duì)照24小時(shí)的y顯像結(jié)果圖；圖11為本發(fā)明標(biāo)記物的血液清除結(jié)果比較示意圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一
一種用于胃癌診斷的藥物，包括抗體及放射性核素，所述抗體為單克隆抗
體3H11，所述放射性核素通過(guò)一個(gè)雙功能連接劑標(biāo)記所述單克隆抗體3H11，所述放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體3H11為無(wú)色透明液體針劑。
在本發(fā)明中，所述單克隆抗體3H11包括鼠源性抗體及片斷，基因工程制備的單鏈抗體(ScFv)、雙鏈抗體(Diabody)、小型化抗體(Minibody)及嵌合抗體(Chimeric)。
在本發(fā)明中，所述放射性核素為99mTc (锝-99m)，所述雙功能連接劑為S-HYNIC(琥珀酰亞胺肼基煙酰胺，succinimidyl-hydrazinonicotinamide，簡(jiǎn)寫為S-HYNIC)，所述放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體形成的放射性藥物為99mTc-HYNIC-3Hll 。
所述單克隆抗體3H11偶聯(lián)及純化采用以下方法
將0.9 mL單克隆抗體3H11 (5.0 mg/mL)與5 S-HYNIC (溶解于無(wú)水二甲基甲酰胺中，1.55xl(T2mg/mL)在避光4。C條件下反應(yīng)5小時(shí)。S-HYNIC與抗體3H11的摩爾比為8:1。反應(yīng)完成后，于pH分別為7.4和5.2，濃度為20 mM的檸檬酸緩沖液(含100mMNaCl)中各透析2次，每次透析時(shí)間為8小時(shí)，獲得偶聯(lián)物HYNIC-3H11;參見圖1，圖1為本發(fā)明HYNIC偶聯(lián)單抗3H11在透析前后的HPLC分析圖其中，(a)為透析純化前偶聯(lián)物的UV28(to吸收曲線，(b)為
透析純化后偶聯(lián)物的UV28。nm吸收曲線，HPLC為高效液相色譜。
進(jìn)一步將獲得的偶聯(lián)物HYNIC-3H11進(jìn)行放射性核素標(biāo)記，所述單克隆抗體3H11的99mTc標(biāo)記及純化采用以下方法
將0.2 mg HYNIC-3H11(濃度為3.0 mg/mL，溶于pH值為5.2,含0.1 M NaCl的0.02 M檸檬酸緩沖溶液中)、20.0 mg Tricine(濃度為100.0 mg/mL，溶于pH值為6.0， O.IM的琥珀酸緩沖溶液中)、20.0嗎SnCl2(濃度為3.0 mg/mL，溶于0.1N HC1中)和1110 MBq (30 mCi) Na"，c04依次加入反應(yīng)管中，室溫反應(yīng)30分鐘。將反應(yīng)物通過(guò)PD-10柱(G-25 Sephadex， Pharmacia)純化，以PBS (磷酸鹽緩沖液)(pH7.5， O.IM)為淋洗液，純化后收集標(biāo)記物并測(cè)量放射化學(xué)純度。在本發(fā)明中，所述放射性藥物"mTc-HYNIC-3H11的用藥劑量為10-30mCi。對(duì)所述放射性藥物"mTc-HYNIC-3Hl 1的標(biāo)記率及純化后的放射化學(xué)純度進(jìn)
行測(cè)定的方法如下 ，
1. ITLC方法
取lpL標(biāo)記物點(diǎn)樣于ITLC-SG上，然后分別于生理鹽水、甲乙酮和水:乙醇:氨水二5:2:1 (V:V:V)混和液中上行展開10cm，其中锝膠體(99mTc02)和游離99mTc04—在三種展開體系中Rf值(比移值)均為0.0和0.9-1.0， 99mTc-(Tricine)2在三種展開體系中Rf值分別為0.9-1.0、 0.0和0.9-1.0， 99mTc-HYNIC-3Hll在三種展開體系中Rf值分別為O.O、 0.0和0.9-1.0。
2. HPLC方法
10 標(biāo)記物上樣HPLC，色譜柱為TSK G3000 WXL (7.8x300 mm，TosoHaas)，磷酸緩沖液(pH6.5， 0.02 M，含有0.9% NaCl及0.05% NaN3)為流動(dòng)相，流速1.0mL/min。99mTc-HYNIC-3Hll的保留時(shí)間為8.2min， 99mTc-(tricine)2和游離"，cOr的保留時(shí)間為12.3min。
采用所述方法進(jìn)行標(biāo)記和純化，其測(cè)定結(jié)果為99mTc-HYNIC-3Hll的標(biāo)記率大于90%，通過(guò)PD-10柱純化后放射化學(xué)純度大于95X，放射性比活度大于5000MBq/mg。
對(duì)于"，c-HYNIC-3H11的體外穩(wěn)定性測(cè)定，可以采用以下方法
a、 將直接標(biāo)記法制備的標(biāo)記物("mTc-3Hll)與間接標(biāo)記法制備的標(biāo)記物("mTc-HYNIC-3Hll)分別在室溫及37。C條件下保存于生理鹽水及小牛血清中，并于溫育后不同時(shí)間(O， 1， 2， 4， 8， 14， 24和48小時(shí))取樣測(cè)量放射化學(xué)純度。參見圖2，圖2為本發(fā)明標(biāo)記物在生理鹽水和小牛血清中的體外穩(wěn)定性比較示意圖，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示兩種標(biāo)記物均表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。
b、 兩種標(biāo)記物(2.6x10—1C)mol/mL)與不同摩爾倍數(shù)的DTPA及L-cysteine室溫孵育4h， ITLC方法測(cè)定放射化學(xué)純度。參見圖3，圖3為本發(fā)明標(biāo)記物在DTPA和L-cysteine溶液中的體外穩(wěn)定性比較示意圖，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，兩種標(biāo)記物在不同濃度的DTPA溶液中均表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。在L-cysteine溶液中，99fflTc-HYNIC-3Hll具有良好的穩(wěn)定性，而99mTo3Hll的放射化學(xué)純度隨著L-cysteine濃度的提高而下降。
對(duì)于"，c-HYNIC-3H11的放射免疫活性測(cè)定，采用以下方法99mTc-HYNIC-3Hll及99mTc-3Hll的免疫活性檢測(cè)參照Lindmo方法，即7xl07個(gè)BGC823細(xì)胞以每分鐘1000轉(zhuǎn)的速度離心5分鐘，用含有1%BSA的PBS (pH 7.4， O.OIM)洗兩遍，再用含有1XBSA的PBS倍比稀釋5個(gè)滴度；標(biāo)記物稀釋至40嗎/L，將細(xì)胞和標(biāo)記物混合，在37'C溫育2小時(shí)，測(cè)量總放射性(T)和沉淀細(xì)胞的放射性計(jì)數(shù)(B)，計(jì)算不同濃度細(xì)胞數(shù)對(duì)應(yīng)的T/B值。以T/B值對(duì)細(xì)胞濃度倒數(shù)(1/F)作圖，所得曲線的延長(zhǎng)線于y軸的截距的倒數(shù)即為標(biāo)記物保留的放射免疫活性分?jǐn)?shù)。參見圖4，圖4為本發(fā)明標(biāo)記物放射免疫活性測(cè)定結(jié)果示意圖，計(jì)算求得間接標(biāo)記法和直接標(biāo)記法制備的標(biāo)記物的放射免疫活性分?jǐn)?shù)分別為68%和41%，說(shuō)明間接標(biāo)記法制備的標(biāo)記物保持了更好的免疫活性。利用所述放射性核素標(biāo)記的抗體3H11進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法及結(jié)果如下a、荷瘤裸鼠體內(nèi)分布將16只BALB/C荷人胃癌裸鼠隨機(jī)分成2組，每組8只。兩組裸鼠分別經(jīng)尾靜脈注射100 的99mTc-HYNIC-3Hll和99mTc-3Hll( 370KBq，約含5.6 jiig的3H11抗體)。每組分別在4小時(shí)和24小時(shí)斷頸各處死4只，取主要臟器及血液測(cè)量重量和放射性計(jì)數(shù)，經(jīng)衰變校正后計(jì)算每克組織百分注射劑量率(WID/g)。表一列出99mTc-HYNIC-3Hll和99mTc-3Hll在荷瘤裸鼠體內(nèi)分布數(shù)據(jù)。注射后24小時(shí)腫瘤對(duì)99mTc-HYMC-3Hll的攝取明顯高于腫瘤對(duì)"""Tc-3H11的攝取，說(shuō)明99mTc-HYNIC-3Hll具有更好的免疫活性，對(duì)人胃癌腫瘤細(xì)胞具有良好的親和力。
表一 99mTc-HYNIC-3Hll及""Tc-3H11荷瘤裸鼠分布(if4, %ID/gtSD)
99mTc-HYNIC-3Hll 99mTc-3Hll組織--
4h 24h 4h 24h
血 34.30±3.84 16.79±1.21 29.80±5.42 8.65±2.14
心 6.54±0.11 3.32±0.13 5.37±1.52 1.61±0.20
肝 14.48±1.77 13.71±2.03 12.36±1.50 4.86±1.04
脾 9.96±1.45 9.45±2.02 7.28±2.41 2.87±0.77腎n.25±1.768.59±1,0219.37±3.00",72土2.80
胃3.60±0.372.07±1.394.84±1.17.65±0.41
腸8.06±2.693,86±0.347.26±1.892.74±0.88
肌肉0.97土0.281,46士(U40.98±0.160.83±0.08
骨3.83土0.603.25±(U93.48士0.991.52±0.21
腫瘤12-82±3.5731.23±3.34U.34土3.2815,78±1.47
b、 荷瘤裸鼠Y顯像3只BALB/C荷人胃癌裸鼠分別注射25.9 MBq的99mTc-HYNIC-3Hll、 99mTc-3Hll和"，c-IgG(陰性對(duì)照)，并于注射后4小時(shí)和24小時(shí)進(jìn)行Y顯像。參見圖5 —圖10，圖5為荷人胃癌裸鼠注射本發(fā)明99mTc-HYNIC-3Hll后4小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖，圖6為荷人胃癌裸鼠注射本發(fā)明99mTc-HYNIC-3Hll后24小時(shí)的y顯像結(jié)果圖，圖7為荷人胃癌裸鼠注射直接標(biāo)記法制備的99mTc-3Hll后4小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖，圖8為荷人胃癌裸鼠注射直接標(biāo)記法制備的99mTc-3Hll后24小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖，圖9為荷人胃癌裸鼠注射99mTc-IgG后4小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖(陰性對(duì)照)，圖10為荷人胃癌裸鼠注射99mTc-IgG后24小時(shí)的Y顯像結(jié)果圖(陰性對(duì)照)。注射后24小時(shí)，99mTc-HYN!C-3Hll和99mTc-3Hll在腫瘤部位具有較好的濃聚，腫瘤可以清晰顯像，而在陰性對(duì)照組觀察不到放射性的濃聚。說(shuō)明99mTc標(biāo)記的單克隆抗體3H11可以作為診斷藥物用于胃癌的顯像。相對(duì)于99mTc-3Hll而言，"mTc-HYNIC-3H11在腫瘤部位的濃聚更加明顯。
c、 血液清除參見圖11，圖11為本發(fā)明99mTc-HYNIC-3Hll與直接標(biāo)記法制備的99mTc-3Hll的血液清除結(jié)果比較示意圖；取18-22 g的BABL/C小鼠14只，分為2組，每組7只，兩組分別經(jīng)尾靜脈注射0.15 mL的99mTc-HYNIC-3Hll和"，c-3H11，并于注射后不同時(shí)間點(diǎn)，0.5、 1、 2、 3、 4、 5、 6、 8、 10、 12、15、 19和24小時(shí)剪尾取血，創(chuàng)面用云南白藥處理，然后在gamma-counter上測(cè)定血樣放射性計(jì)數(shù)，計(jì)算。/。ID/g，繪制血液清除曲線，并計(jì)算清除參數(shù)。99mTc-HYNIC-3Hll的丁1/201和T,分別為1.30小時(shí)和22.70小時(shí)，99mTc-3mi的T"2a和Ti鄰分別為4.0小時(shí)和37.52小時(shí)。
實(shí)施例二
本實(shí)施例是用另一種放射性核素標(biāo)記所述單克隆抗體3H11，所述放射性核素為"tln(銦-111)，所述雙功能連接劑為DOTA(l，4,7,10-四氮雜環(huán)十二垸-N'，N"，N"'，N""-四乙酸，1,4,7,10-tetraazacyclododecanetetraacetic acid)，所述放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體形成的放射性藥物為mIn-DOTA-3Hll。在本發(fā)明中，所述雙功能連接劑包括DOTA的衍生物。在本發(fā)明中，所述雙功能連接劑包括DTPA(二乙烯三胺五乙酸，diethylenetriaminepenta-acetic acid)。在本發(fā)明中，所述雙功能連接劑包括DTPA的衍生物
mIn是另一個(gè)物理特性優(yōu)良的放射性核素，適于核醫(yī)學(xué)顯像。min標(biāo)記抗體仍需通過(guò)間接標(biāo)記法，即在抗體和放射性核素之間引入雙功能連接劑， 一般為DOTA及其衍生物以及DTPA及其衍生物。以DOTA為例，闡述其制備過(guò)程。
所述單克隆抗體3H11偶聯(lián)及純化采用以下方法
將1.2 mL抗體3H11(5.0 mg/mL)和1 mL 1.0 mM乙二胺四乙酸(EDTA)分別加入到超濾離心管中(Centricon-30， IOK， Amicon)，在4'C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘，離心管中溶液約剩0.2mL。然后向離心管加入Na2HP04溶液(pH7.5， O.IM，含0.15 mMNaCl) 2.0 mL，在4'C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘，重復(fù)該過(guò)程3次。將抗體取出加Na2HP04溶液(pH 7.5，0.1 M)稀釋至0.5 mL,于紫外280 nm測(cè)量抗體濃度后4"C保存。
抗體預(yù)處理的目的為調(diào)節(jié)pH值并去除抗體溶液中的各種雜質(zhì)。與DOTA-NHS偶聯(lián)時(shí)反應(yīng)溶液的最佳pH值為7.5。加入1.0 mM EDTA的作用為絡(luò)合抗體溶液中的其它金屬離子，通過(guò)超濾離心使其去除?？贵w預(yù)處理后的收率為83%，抗體濃度為10.0mg/mL。
用無(wú)水二甲基甲酰胺(DMF)溶解1,4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-N'，N"，N"'，N""-四乙酸-N-羥基硫代琥珀酰亞胺酯(DOTA-NHS, AT-Hydroxysulfosuccinimidyl-1,4，7，10-tetraazacyclododecanetetraacetic acid)，配制濃度為33.45 g/L的溶液。取10 (xL
(0.667 jimol， 0.3345 mg)分兩次加入到0.5 mL上述3H11抗體(IO.O mg/mL，0.0333 pmol)中，避光條件下4"C反應(yīng)12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后轉(zhuǎn)移反應(yīng)溶液于透析卡(Slide陽(yáng)A-Lyzer， 10K， Pierce)中，在1.0LNa2HP04溶液(pH7.5， 0.1 M，含0.15 mMNaCl)中4'C條件下透析24小時(shí)，然后用1.0 LNH4OAc溶液(pH 7.0，0.05 M) 4"C條件下透析72小時(shí)(其中更換5次透析液)。將透析后的3H11偶聯(lián)物(DOTA-3H11)在紫外280nm測(cè)量抗體濃度，并用HPLC方法評(píng)價(jià)純度。用NH4OAc溶液(pH 7.0， 0.05 M)稀釋DOTA-3H11至2.8 mg/mL，4'C保存待用。
用mIn標(biāo)記DOTA-3H11及其純化采用以下方法取50 pL DOTA-3H11加入到100 piL醋酸鈉緩沖液(pH 5.2， 0.2 M)中，再加A5.0|iLmInCl3(20mCi，溶于0.04 M HC1溶液中)，室溫反應(yīng)20-30分鐘，然后加入20 jiL EDTA (pH 5.0， 6.0 mM)，室溫反應(yīng)10分鐘。將反應(yīng)物通過(guò)PD-IO柱(G-25 Sephadex， Pharmacia)純化，以PBS(pH7.5， 0.1 M)為淋洗液，純化后收集標(biāo)記物并測(cè)量放射化學(xué)純度。
在本發(fā)明中，所述放射性藥物min-DOTA-3H11的用藥劑量為5-15mCi。
所述放射性藥物lllIn-DOTA-3Hll的標(biāo)記率及其放射化學(xué)純度的測(cè)定采用如下方法
l.ITLC方法
將10 pL標(biāo)記物中加入20 EDTA (pH 5.0， 6.0 mM)，室溫反應(yīng)10分鐘，取lpL點(diǎn)樣于ITLC-SG上，然后在10.0 mM EDTA展開液中上行展開10 cm,其中川ln-DOTA-3H11保留在原點(diǎn)(R產(chǎn)O.O)， mIn-EDTA展至前沿(R產(chǎn)0.9-L0)。
2. HPLC方法
10 pL標(biāo)記物中加入20 nL EDTA(pH 5.0， 6.0 mM)，室溫反應(yīng)10分鐘，取20[iL上樣HPLC，色譜柱為TSKG3000WXL (7.8x300 mm， TosoHaas)，磷酸緩沖液(pH 6.5， 0.02 M，含有0.9% NaCl及0.05% NaN3)為流動(dòng)相，流速1.0mL/min。 min-DOTA-3H11的保留時(shí)間為8.2min， mIn-EDTA的保留時(shí)間為12.3min。
對(duì)于min-DOTA-3H11的體外穩(wěn)定性測(cè)定，采用以下方法標(biāo)記物mIn-DOTA-3Hll在室溫及37。C條件下保存于生理鹽水及小牛血清中，并于溫育后不同時(shí)間(O， 1， 2， 4， 8， 14， 24和48小時(shí))取樣測(cè)量放射化學(xué)純度。
對(duì)于mIn-DOTA-3Hll的放射免疫活性測(cè)定，可以采用以下方法川ln-DOTA-3H11的免疫活性檢測(cè)參照Lindmo方法，艮卩7xl07個(gè)BGC823細(xì)胞以每分鐘1000轉(zhuǎn)的速度離心5分鐘，用含有1 %BSA的PBS (pH 7.4， 0.01M)洗兩遍，再用含有1XBSA的PBS倍比稀釋5個(gè)滴度；標(biāo)記物稀釋至40 pg/L，將細(xì)胞和標(biāo)記物混合，在37'C溫育2小時(shí)，測(cè)量總放射性計(jì)數(shù)(T)和沉淀細(xì)胞的放射性計(jì)數(shù)(B)，計(jì)算不同濃度細(xì)胞數(shù)對(duì)應(yīng)的T/B值。以T/B值對(duì)細(xì)胞濃度倒數(shù)(1/F)作圖，所得曲線的延長(zhǎng)線于y軸的截距的倒數(shù)即為標(biāo)記物保留的放射免疫活性分?jǐn)?shù)。實(shí)施例三一種用于胃癌診斷的藥物的制備方法，其步驟如下
I 、將0.9 mL濃度為5.0 mg/mL的單克隆抗體3H11溶液與5 濃度為1.55xl0—2 mg/mL的S-HYNIC溶液加入反應(yīng)管中，在避光4'C條件下進(jìn)行反應(yīng)5小時(shí)；該反應(yīng)中S-HYNIC與單克隆抗體3H11的摩爾比為8:1;反應(yīng)完成后獲得反應(yīng)溶液；
II 、將所述反應(yīng)溶液使用pH值為7.4、濃度為20 mM的擰檬酸緩沖液透析處理2次，每次透析時(shí)間為8小時(shí)，所用檸檬酸緩沖液中含100 mM NaCl;將經(jīng)過(guò)2次透析處理后的所述反應(yīng)液使用pH值為5.2、濃度為20 mM的檸檬酸緩沖液再透析處理2次，每次透析時(shí)間為8小時(shí)，所用檸檬酸緩沖液中含100mMNaCl，透析處理完成后，獲得偶聯(lián)物HYMC-3H11溶液；
III、將0.2mg濃度為3.0mg/mL的所述偶聯(lián)物HYNIC-3H11、 20.0 mg濃度為100.0 mg/mL的Tricine、 20.0嗎濃度為3.0mg/mL的SnCl2和lllOMBq的Na"，c04依次加入反應(yīng)管中，室溫(20°C—25°C)反應(yīng)30分鐘；將反應(yīng)物通過(guò)PD-10柱純化，獲得放射化學(xué)純度大于95%的放射性藥物99mTc-HYNIC-3Hl 1 。
在本實(shí)施例中，所使用的單克隆抗體3H11是溶于PBS的溶液，其濃度為5.0mg/mL。
所使用的S-HYNIC溶解于無(wú)水二甲基甲酰胺試劑中，其濃度為1.55X1(T2mg/mL。
所述偶聯(lián)物HYMC-3H11溶于pH值為5.2，濃度為20mM的檸檬酸緩沖液中，該檸檬酸緩沖液中含100mMNaCl， HYNIC-3H11的濃度為3.0 mg/mL， 0.2mg表示在本方法中所使用的化學(xué)量。
所述Tricine是一種常規(guī)試劑，溶于pH值為6.0， 0.1 M的琥珀酸緩沖溶液中，其濃度為100.0 mg/mL， 20.0 mg表示在本方法中所使用的化學(xué)量。所述SnCl2是氯化亞錫，溶于0.1NHC1 (鹽酸)中，其濃度為3.0 mg/mL， 20.0嗎表示在本方法中所使用的化學(xué)量。所述Na""^Tc04是高锝酸鈉溶液，1110MBq表示在本方法中所使用的放射性活度。
所述PD-10柱是常規(guī)實(shí)驗(yàn)材料，從Pharmacia公司購(gòu)買。實(shí)施例四 一種用于胃癌診斷的藥物的制備方法，其步驟如下I 、將1.2 mL濃度為5.0 mg/mL的單克隆抗體3H11溶液和1 mL濃度為l.OmM的EDTA溶液分別加入到超濾離心管中，在4'C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
n、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0mL，第二次在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
in、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HPOt溶液2.0mL，第三次在4'C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
IV、 向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0mL，第四次在4'C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
V、 將超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液取出超濾離心管，在該單克隆抗體3H11溶液中加入Na2HPO4溶液稀釋至0.5 mL，測(cè)量該溶液中單克隆抗體3H11的濃度并保存數(shù)據(jù)，在4"C條件下保存該抗體溶液；所述Na2HP04溶液的pH值為7.5，濃度為0.1M，所述Na2HPO4溶液中含0.15mMNaCl;
VI、 用DMF溶解DOTA-NHS，配制成濃度為33.45 g/L的溶液；取此溶液10 (oL分兩次加入到0.5 mL的上述經(jīng)超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液中，該混和液在避光4。C條件下反應(yīng)12小時(shí)，獲得反應(yīng)溶液；
W、將所述反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移到透析卡中，在1.0LNa2HPO4溶液中透析處理24小時(shí)，透析處理溫度為4'C，所述Na2HP04溶液的pH值為7.5，濃度為0.1 M，所述Na2HP04溶液中含0.15 mM NaCl;
VEI、將經(jīng)過(guò)一次透析處理的所述反應(yīng)溶液使用1.OLNH4OAc溶液進(jìn)行第二次透析處理，透析處理時(shí)間為18小時(shí)，透析處理溫度為4。C;在相同條件下再重復(fù)所述透析過(guò)程3次;透析處理完成后，獲得DOTA-3H11溶液;在DOTA-3H11溶液中加入NH40Ac溶液進(jìn)行濃度調(diào)節(jié)，獲得濃度為2.8.mg/mL的偶聯(lián)物D0TA-3H11溶液，所述的NH40Ac溶液的pH值為7.0、濃度為0.05 M;對(duì)該溶液中偶聯(lián)物DOTA-3H11的濃度進(jìn)行測(cè)量并保存數(shù)據(jù)，在4"C條件下保存該偶聯(lián)物溶液；
IX、將50 ^iL的所述偶聯(lián)物DOTA-3H11溶液和100 醋酸鈉緩沖液加入到反應(yīng)管中，所述醋酸鈉緩沖液的pH值為5.2、濃度為0.2 M,再加入5 pL mInCl3溶液，所述minCl3溶于0.04 M HC1溶液中；該混和液在43t:條件下反應(yīng)1小時(shí)，然后加入20 jjL EDTA，所述EDTA的pH值為5.0、濃度為6.0 mM，在室溫條件下反應(yīng)10分鐘；將反應(yīng)物通過(guò)PD-10柱純化，獲得放射化學(xué)純度大于99°/。的放射性藥物mIn-DOTA-3Hl 1 。
在本實(shí)施例中，所使用的單克隆抗體3H11是溶于PBS溶液，其濃度為5.0
15mg/mL。所使用的EDTA是乙二胺四乙酸溶液，其pH值為5.0，濃度為6.0 mM，是常規(guī)試劑。所使用的DMF是無(wú)水二甲基甲酰胺溶液，是常規(guī)試劑。所使用的DOTA-NHS是雙功能連接劑，其中文名稱為1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-N',N",N"'，N""-四乙酸-N-羥基硫代琥珀酰亞胺酯，其英文名稱為_/V-Hy droxysulfosuccinimidy l誦1 ，4，7 ， 10-tetraazacy clododecanetetraaeetic acid ，購(gòu)于美國(guó)Macrocyclic公司。所述PD-10柱是常規(guī)實(shí)驗(yàn)材料，從Pharmacia公司購(gòu)買。所述超濾離心管是常規(guī)實(shí)驗(yàn)材料，從Amicon公司購(gòu)買。
實(shí)施例五 一種用于胃癌診斷的藥物的制備方法，其步驟如下
I 、將1.2 mL濃度為5.0 mg/mL的單克隆抗體3H11溶液和1 mL濃度為1.0mM的EDTA溶液分別加入到超濾離心管中，在4'C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
n、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0mL，第二次在4'C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
ni、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP(V溶液2.0mL，第三次在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
IV、 向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0mL，第四次在4t條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；
V、 將超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液取出超濾離心管，在該單克隆抗體3H11溶液中加入Na2HPO4溶液稀釋至0.5 mL，測(cè)量該溶液中單克隆抗體3H11的濃度并保存數(shù)據(jù)，在4"C條件下保存該抗體溶液，所述Na2HP04溶液的pH值為7.5，濃度為0.1M，所述Na2HPO4溶液中含0.15mMNaCl;
W、用DMF溶解DTPA衍生物，配制成濃度為33.45 g/L的溶液；取此溶液10 |_iL分兩次加入到0.5 mL的上述經(jīng)超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液中，該混和液在避光4'C條件下反應(yīng)12小時(shí)，獲得反應(yīng)溶液；
W、將所述反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移到透析卡中，在1.0LNa2HPO4溶液中透析處理24小時(shí)，透析處理溫度為4。C，所述Na2HPCV溶液的pH值為7.5，濃度為0.1 M，所述Na2HP04溶液中含0.15 mMNaCl;
vni、將經(jīng)過(guò)一次透析處理的所述反應(yīng)溶液使用1.0LNH4OAc溶液進(jìn)行第二
次透析處理，透析處理時(shí)間為18小時(shí)，透析處理溫度為4'C;在相同條件下再重復(fù)所述透析過(guò)程3次。透析處理完成后，獲得DTPA-3H11溶液；在DTPA-3H11溶液中加入NH4OAc溶液進(jìn)行濃度調(diào)節(jié)，獲得濃度為2.8 mg/mL的偶聯(lián)物DTPA-3H11溶液，所述的NH4OAc溶液的pH值為7.0、濃度為0.05 M;對(duì)該溶液中偶聯(lián)物DTPA-3H11的濃度進(jìn)行測(cè)量并保存數(shù)據(jù)，在4'C條件下保存該偶聯(lián)物溶液；
IX、將50 的所述偶聯(lián)物DTPA-3H11溶液和100 pL醋酸鈉緩沖液加入到反應(yīng)管中，所述醋酸鈉緩沖液的pH值為5.2、濃度為0.2 M，再加入5 pL mInCl3溶液，所述minCl3溶于0.04MHCl溶液中；該混和液在室溫條件下反應(yīng)30分鐘，然后加入20 EDTA，所述EDTA的pH值為5.0、濃度為6.0 mM，在室溫條件下反應(yīng)10分鐘；將反應(yīng)物通過(guò)PD-10柱純化，獲得放射化學(xué)純度大于99。/。的放射性藥物mIn-DTPA-3Hll。
在本實(shí)施例中，所使用的單克隆抗體3H11是溶于PBS溶液，其濃度為5.0mg/mL。所使用的EDTA是乙二胺四乙酸溶液，其pH值為5.0，濃度為6.0 mM，是常規(guī)試劑。所使用的DMF是無(wú)水二甲基甲酰胺溶液，是常規(guī)試劑。所使用的DTPA衍生物購(gòu)于美國(guó)Macrocyclic公司。所述PD-10柱是常規(guī)實(shí)驗(yàn)材料，從Pharmacia公司購(gòu)買。所述超濾離心管是常規(guī)實(shí)驗(yàn)材料，從Amicon公司購(gòu)買。
權(quán)利要求
1、一種用于胃癌診斷的藥物，包括抗體及放射性核素，其特征在于所述抗體為單克隆抗體3H11，所述放射性核素為111In，所述放射性核素111In通過(guò)一個(gè)雙功能連接劑DOTA標(biāo)記所述單克隆抗體3H11，所述放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體為111In-DOTA-3H11，所述放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體3H11為無(wú)色透明液體針劑。
2、 一種用于胃癌診斷的藥物的制備方法，其特征在于I 、將1.2 mL濃度為5.0 mg/mL的單克隆抗體3H11溶液和1 mL濃度為 1.0 mM的EDTA溶液分別加入到超濾離心管中，在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn) 的速度離心45分鐘；II、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0 mL，第二次在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；in、向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1 M的Na2HP04溶液2.0 mL，第三次在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；IV、 向所述超濾離心管中加入pH值為7.5，濃度為0.1M的Na2HPCV溶液2.0 mL，第四次在4。C條件下以每分鐘5000轉(zhuǎn)的速度離心45分鐘；V、 將超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液取出超濾離心管，在該單克隆 抗體3H11溶液中加入Na2HPO4溶液稀釋至0.5 mL，測(cè)量該溶液中單克隆抗體 3H11的濃度并保存數(shù)據(jù)，在4'C條件下保存該抗體溶液；所述Na2HP04溶液的 pH值為7.5，濃度為0.1 M，所述Na2HP04溶液中含0.15 mM NaCl;VI、 用DMF溶解DOTA-NHS，配制成濃度為33.45 g/L的溶液；取此溶液 10 ^iL分兩次加入到0.5 mL的上述經(jīng)超濾離心處理的單克隆抗體3H11溶液中， 該混和液在避光4'C條件下反應(yīng)12小時(shí)，獲得反應(yīng)溶液；VE、將所述反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移到透析卡中，在1.0LNa2HPO4溶液中透析處理24 小時(shí)，透析處理溫度為4'C，所述Na2HP04溶液的pH值為7.5，濃度為0.1 M， 所述Na2HP04溶液中含0.15 mM NaCl;VID、將經(jīng)過(guò)一次透析處理的所述反應(yīng)溶液使用1.OLNH4OAc溶液進(jìn)行第二 次透析處理，透析處理時(shí)間為18小時(shí)，透析處理溫度為4'C;在相同條件下再 重復(fù)所述透析過(guò)程3次;透析處理完成后，獲得DOTA-3H11溶液;在DOTA-3H11溶液中加入NH4OAc溶液進(jìn)行濃度調(diào)節(jié)，獲得濃度為2.8 mg/mL的偶聯(lián)物 DOTA-3H11溶液，所述的NH4OAc溶液的pH值為7.0、濃度為0.05 M;對(duì)該 溶液中偶聯(lián)物DOTA-3H11的濃度進(jìn)行測(cè)量并保存數(shù)據(jù)，在4"C條件下保存該偶 聯(lián)物溶液；IX、將50 piL的所述偶聯(lián)物DOTA-3H11溶液和100 醋酸鈉緩沖液加入 到反應(yīng)管中，所述醋酸鈉緩沖液的pH值為5.2、濃度為0.2 M，再加入5 mL mInCl3 溶液，所述minCl3溶于0.04 M HC1溶液中；該混和液在43"C條件下反應(yīng)1小 時(shí)，然后加入20 pL EDTA，所述EDTA的pH值為5.0、濃度為6.0 mM，在室 溫條件下反應(yīng)IO分鐘；將反應(yīng)物通過(guò)PD-10柱純化，獲得放射化學(xué)純度大于99% 的放射性藥物mIn-DOTA-3Hll。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于胃癌診斷的藥物及其制備方法，該藥物包括抗體及放射性核素，所述抗體為單克隆抗體3H11，所述放射性核素為¹¹¹In，所述放射性核素¹¹¹In通過(guò)一個(gè)雙功能連接劑DOTA標(biāo)記所述單克隆抗體3H11，所述放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體為¹¹¹In-DOTA-3H11，所述放射性核素標(biāo)記的單克隆抗體3H11為無(wú)色透明液體針劑。由于腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)特異抗原，利用抗體和抗原的特異性結(jié)合，通過(guò)抗體將放射性核素載帶到腫瘤部位，利用核醫(yī)學(xué)影像技術(shù)，對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷定位。本發(fā)明采用間接標(biāo)記法，即在單克隆抗體和放射性核素之間引入一個(gè)雙功能連接劑。這既可減小對(duì)抗體活性的影響，又可增強(qiáng)放射性藥物的穩(wěn)定性，同時(shí)提高腫瘤對(duì)放射性藥物的攝取。
文檔編號(hào)A61K103/20GK101670120SQ20091017673
公開日2010年3月17日 申請(qǐng)日期2006年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月27日
發(fā)明者志 楊, 凡 王, 兵 賈 申請(qǐng)人:北京大學(xué)