專利名稱：芝麻油在制備防治糖皮質激素皮膚衰老樣改變的藥物制劑中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及芝麻油在制備防治糖皮質激素皮膚衰老樣改變的藥物制劑中的 應用。
背景技術：
糖皮質激素是臨床常用的藥物，在皮膚病的治療中，糖皮質激素是十分重要 的藥物，但是，長期應用可導致局部出現(xiàn)皮膚萎縮，變薄等衰老樣病變，己有許多報道 對此進行了觀察，但至今還沒有防治良策。芝麻自古以來就被認為是健康食品，黑芝麻 可入藥。芝麻油與其他植物油相比，具有較高的穩(wěn)定性，主要原因是芝麻油中含有芝麻 素類物質，此類物質是芝麻油中的一類特殊的內源性抗氧化物質，除了具有強抗氧化性 能外，還能調節(jié)脂質代謝、降低膽固醇、保護肝臟、抑制乳腺癌、增強免疫能力。但是 否可以對糖皮質激素皮膚衰老樣改變有防治作用， 一直沒有人報道，我們在探討防治糖 皮質激素的不良反應的研究中，發(fā)現(xiàn)芝麻油對糖皮質激素造成的皮膚衰老樣改變有很好 的預防作用，應用醋酸潑尼松大鼠皮膚表皮層顯著變薄，彈力纖維減少、斷裂，皮膚羥 脯氨酸明顯含量減少，而應用醋酸潑尼松同時應用芝麻油時，大鼠皮膚可見表皮增厚， 彈力纖維面積百分比增大，皮膚衰老樣改變明顯減輕，這一發(fā)現(xiàn)，提示了芝麻油可為我 們克服糖皮質激素導致的皮膚衰老樣病變提供了了一個很好的藥物制劑，也為我們把芝 麻油開發(fā)成為護膚美容產(chǎn)品奠定了基礎
發(fā)明內容
發(fā)現(xiàn)及證明了芝麻油具有防治糖皮質激素皮膚衰老樣改變的作用。本發(fā)明提 到的芝麻油可以通過下述方法制備
方法h取成熟芝麻，170'C烘烤20分鐘至香熟，粉碎后芝麻醬按總重量85%分兩次 加水，并在8(TC水浴中保溫攪至油出，離心，取上油層，作為實驗用芝麻油。
方法2:取成熟芝麻粉碎，80'C干燥20min，取石油醚按料液比l: 12加入，靜置，超 聲45min,抽濾，減壓揮盡溶劑，即得芝麻油，作為實驗用的芝麻油。
方法3:取成熟芝麻，H(TC烘烤20分鐘至香熟，粉碎，加10倍70%乙醇浸泡24小時，
加熱回流提取2次，過濾，保留濾液。濾渣按總重量85%分兩次加水，并在8(TC水浴中保
溫攪至油出，離心，取上油層，與第一次乙醇提取的濾液混合，得實驗用的芝麻油。
本項目組通過糖皮質激素建立大鼠皮膚損害的模型，應用糖皮質激素導致大鼠出現(xiàn)
皮膚生長抑制，表皮層顯著變薄，彈力纖維減少、斷裂，皮膚羥脯氨酸明顯含量減少的
狀態(tài)，然后，按照我們前面提到的芝麻油制備方法制備出供實驗用的芝麻油，在給予糖
3皮質激素的同時，給予芝麻油進行預防，結果表明芝麻油對糖皮質激素導致的大鼠皮膚 生長延緩，表皮層顯著變薄，彈力纖維減少、斷裂，皮膚羥脯氨酸明顯含量減少等作用 要明顯的改善作用。因此，本發(fā)明提出了芝麻油可用于制備防治糖皮質激素皮膚衰老樣 改變的藥物制劑，可用于防治藥物性皮膚衰老，同時也可用于各種原因的皮膚老化，增 白美容，保護皮膚的彈性，保持皮膚柔嫩、細致和光滑。芝麻油作為防治皮膚衰老的藥 物或保健食品時，可制成臨床其他可接受的藥物制劑，如滴丸、膠囊劑、注射劑、片劑、 丸劑、沖劑、顆粒劑、皮膚外用制劑中的任何一種，供臨床應用。也可以作為糖皮質激 素藥物制劑的輔料，添加進糖皮質激素的藥物制劑中，組成新型的糖皮質激素制劑，供 臨床應用。
具體實施例方式
實施例一
1.1實驗動物與飼養(yǎng)條件
SPF級^SD大鼠24只，3月齡(由廣東醫(yī)學院實驗動物中心提供)。分籠飼養(yǎng)，每 籠八只，隔日更換墊料，自由攝水、攝食。 1.2芝麻油的制備方法
參照本專利申請?zhí)岢龅闹ヂ橛偷纳a(chǎn)方法生產(chǎn)出供實驗應用的芝麻油。
1.3實驗方法 1.4.1分組與給藥
24只SPF級雄性SD大鼠，隨機分為正常對照組(NS)、醋酸潑尼松組(GC)、芝麻油 組(GC+SO)，每組8只。每周稱體重一次，NS上午給予蒸餾水5ml.kg人cT'灌胃，GC 給予醋酸潑尼松混懸液3.5mg.5mr'.kg".d'1灌胃。芝麻油組先給予醋酸潑尼松混懸液 3.5mg.5mr1 .kg".d"灌胃3小時后，給芝麻油按5ml.kg".cT1灌胃。 1.3.2取材方法與實驗標本制備
88天后心臟取血處死大鼠，取背部正中皮膚以15%硫化鈉水溶液脫去鼠毛，清水反 復沖洗殘余硫化鈉，取0.5cmx0.5cm大小皮膚迅速放入Bouin液中固定，做組織切片進 行組織形態(tài)學觀察及定量分析。常規(guī)標本石蠟切片，切片厚度4 5pm，皮膚生長表皮細 胞采用HE染色法，彈力纖維染色采用Weigert間苯二酚-堿性品紅染色法。 1.3.3組織病理學形態(tài)觀察
主要觀察生長表皮厚度、細胞層數(shù)、基底層細胞排列分布及形態(tài)；觀察彈力纖維的 形態(tài)及數(shù)量。
1.3.4計算機圖像分析系統(tǒng)定量分析采用LdcaMPS30熒光-光學顯微鏡下攝影，應用相應計算機圖像分析軟件KSS Image Analysis(version 2.0 KSS scientific consultants，UT USA),在每張片隨禾幾選擇5個高倍鏡視 野，測量皮膚生長表皮厚度(HE染色下，垂直于生長表皮基底層至角質層的長度)及真 皮層彈力纖維面積百分比(Wdgert間苯二酚-堿性品紅染色下呈黑藍色的彈力纖維積分占 視野組織的百分比)平均值。 1.3.5單位皮膚中羥脯氨酸含量的測定
每只大鼠取約0.05g背部去毛去皮下結締組織皮膚，精密稱定并記錄其重量，按照試 劑盒說明書操作，計算皮膚中羥脯氨酸含量。 1.3.6統(tǒng)計學處理
計量資料數(shù)據(jù)結果用均數(shù)±標準差(；勤)表示，數(shù)據(jù)分析用8 8812.0軟件進行檢驗，
數(shù)據(jù)間差異性比較采用方差分析，尸<0.05,尸<0.01表示具有統(tǒng)計學意義。 2實驗結果
2.1皮膚組織形態(tài)學觀察
2丄1芝麻油對醋酸潑尼松致大鼠皮膚生長表皮的影響
GC組與NS組相比，大鼠皮膚生長表皮明顯變薄，細胞層數(shù)減少，基底細胞胞體變
小，真皮層膠原纖維厚度變薄，膠原束變長，平行于生長表皮呈條索狀排列；與GC組
相比，芝麻油組大鼠皮膚生長表皮厚度及細胞層數(shù)均增加，排列緊湊，角質層明顯，膠
原纖維規(guī)則，呈波浪狀。
2.1.2芝麻油對醋酸潑尼松致大鼠真皮彈力纖維的影響
GC組與NS組相比，大鼠真皮層彈力纖維變短、減少。芝麻油組真皮層彈力纖維與 GC組相比略有增多，且交織。
2.2大鼠生長表皮厚度、彈力纖維面積百分比的計算機圖像分析系統(tǒng)定量分析
大鼠生長表皮厚度(E.Th)、彈力纖維面積百分比(E.RPerArea)的計算機圖像分析系統(tǒng) 定量分析結果見表l。
表1醋酸潑尼松及芝麻油對大鼠生長表皮厚度和真皮彈力纖維面積百分比(5勤)
組別nE.Th(nm)E.F.Per Area(o/<0
NS843.4±9.390.656±0.0954
GC831.7±6.08**0.3%±0.124**
GC+SO842.1±9.88A0.522±0.181
注*尸<0.05， **尸<0.01 usNS; Ap〈0.05，<0.01 raGC (下同)
由表1可見，GC組與NS組比較，大鼠生長表皮厚度和彈 纖維面積百分比明顯減少(尸O.01);芝麻油組與GC組相比，大鼠生長表皮厚度增加(尸<0.05)，與正常組相
當，彈力纖維面積有增加的趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義。
2.3醋酸潑尼松及芝麻油對大鼠單位皮膚中羥脯氨酸含量的影響
醋酸潑尼松及芝麻油對大鼠單位皮膚中羥脯氨酸含量的影響結果見表2。
表2醋酸潑尼松及芝麻油對大鼠單位皮膚中羥脯氨酸的影響(；i5)
組別nHyp(mg/g)
NS 86.80±0.64
GC86.05±0,85*
GC+SO85.98±0.83*
由表2可見，GC組及芝麻油組大鼠單位皮膚中羥脯氨酸含量低于NS組(戶<0.05)。 3討論
由皮膚組織形態(tài)學結果可見，長期應用醋酸潑尼松可致大鼠皮膚生長表皮顯著變薄， 彈力纖維、膠原纖維減少，斷裂等變化，呈現(xiàn)衰老樣病變。此病變可能與糖皮質激素使 皮膚血管收縮產(chǎn)生對局部組織微循環(huán)和代謝的不良影響有關。已有報道指出，潑尼松引 起的膠原含量減少也可能與糖皮質激素受體GCF介導的在轉錄水平抑制相關基因的表達 有關。
經(jīng)過芝麻油預防服用后，鏡下兩組大鼠生長表皮厚度及細胞層數(shù)均增加，細胞排列 較緊湊，角質層明顯；膠原束明顯增多，排列較致密、規(guī)則，呈波浪狀；皮膚彈力纖維 增多，較長；而計算機圖像分析系統(tǒng)的量化分析結果亦與上述鏡下所見描述平行。提示 芝麻油能夠改善長期應用醋酸潑尼松引起的皮膚衰老樣病變。
芝麻油作為一種較為貴重的食用油，其營養(yǎng)物質豐富，在化學、生理方面與其它植 物油有著明顯的不同。芝麻油有顯著的穩(wěn)定性，這是因為芝麻油中含有脂溶性不皂化物 ——芝麻木酚素，在芝麻油中約含有1%，其主要包括芝麻素、表芝麻素、芝麻酚、芝 麻林素等。芝麻木酚素有很強的抗氧化活性，近年研究發(fā)現(xiàn)芝麻木酚素，特別是芝麻素 還具有很強的生理活性。日本學者實驗證明，芝麻木酚素在機體內有較強的抗氧化活性， 可消除有機自由基、過氧化物及羥自由基。芝麻油對家蠶壽命影響的研究[9也指出，芝麻 油可顯著延長家蠶幼蟲期和全生存期的時間，能顯著延長五齡期家蠶饑餓時間，說明芝 麻油在延緩衰老方面具有研究開發(fā)的價值。提示芝麻油中的抗氧化活性成分可對抗長期 應用醋酸潑尼松引起的皮膚衰老樣病變。
本實驗的研究結果表明，芝麻油對預防臨床上長期應用糖皮質激素所致的皮膚衰老
樣改變將會是一種很有價值的植物油。
研究表明，芝麻油可制成防治糖皮質激素皮膚衰老樣改變的藥物制劑，如滴丸、膠囊劑、注射劑、片劑、丸劑、沖劑、顆粒劑、皮膚外用制劑中的任何一種，供臨床應用。 也可以作為糖皮質激素藥物制劑的輔料，添加進糖皮質激素的藥物制劑中，組成新型的 糖皮質激素制劑，供臨床應用。芝麻油也可用于保健食品及化妝品中，發(fā)揮皮膚抗衰老 作用，增加皮膚的彈性，保持保持皮膚柔嫩、細致和光滑。
權利要求
1.芝麻油在制備防治糖皮質激素皮膚衰老樣改變的藥物制劑中的應用。
2. 如權利要求1所述的芝麻油，其特征是可以通過下述生產(chǎn)方法獲得方法l:取成熟芝麻，17(TC烘烤20分鐘至香熟，粉碎后芝麻醬按總重量 85%分兩次加水，并在80'C水浴中保溫攪至油出，離心，得芝麻油。方法2:取成熟芝麻粉碎，8(TC干燥20min，取石油醚按料液比l: 12加入， 靜置，超聲45min，抽濾，減壓揮盡溶劑，即得芝麻油。方法3:取成熟芝麻，17(TC烘烤20分鐘至香熟，粉碎，加10倍70%乙醇 浸泡24小時，加熱回流提取2次，過濾，保留濾液。濾渣按總重量85%分兩 次加水，并在80'C水浴中保溫攪至油出，離心，取上油層，與第一次乙醇提 取的濾液混合，得芝麻油。
3. 如權利要求l所述的芝麻油可制成臨床其他可接受的藥物制劑，如滴丸、 膠囊劑、注射劑、片劑、丸劑、沖劑、顆粒劑、皮膚外用制劑中的任何 一種，供臨床應用。
4. 如權利要求l所述的芝麻油可以作為糖皮質激素藥物制劑的輔料，添加進 糖皮質激素的藥物制劑中，組成新型的糖皮質激素制劑，供臨床應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及芝麻油在制備防治糖皮質激素皮膚衰老樣改變的藥物制劑中的應用，研究發(fā)現(xiàn)應用糖皮質激素導致大鼠出現(xiàn)皮膚生長抑制，表皮層顯著變薄，彈力纖維減少、斷裂，皮膚羥脯氨酸明顯含量減少，在給予糖皮質激素的同時，給予芝麻油進行預防，結果表明芝麻油對糖皮質激素導致的大鼠皮膚生長延緩，表皮層顯著變薄，彈力纖維減少、斷裂，皮膚羥脯氨酸明顯含量減少等作用要明顯的改善作用。因此，本發(fā)明提出了芝麻油可用于制備防治糖皮質激素皮膚衰老樣改變的藥物制劑，可用于防治藥物性皮膚衰老，同時也可用于各種原因的皮膚老化，增白美容，保護皮膚的彈性，保持皮膚柔嫩、細致和光滑。芝麻油作為防治皮膚衰老的藥物或保健食品時，可制成臨床其他可接受的藥物制劑，如滴丸、膠囊劑、注射劑、片劑、丸劑、沖劑、顆粒劑、皮膚外用制劑中的任何一種，供臨床應用。也可以作為糖皮質激素藥物制劑的輔料，添加進糖皮質激素的藥物制劑中，組成新型的糖皮質激素制劑，供臨床應用。
文檔編號A61K36/185GK101664424SQ200910149889
公開日2010年3月10日 申請日期2009年6月29日 優(yōu)先權日2009年6月29日
發(fā)明者怡 吳, 鐵 吳, 燎 崔, 張益嘉, 琴 李, 華 蘇, 華 趙 申請人:廣東醫(yī)學院