專(zhuān)利名稱(chēng)：一種從白樺樹(shù)皮中提取分離抗腫瘤有效部位的方法
一種從白樺樹(shù)皮中提取分離抗腫瘤有效部位的方法
一、 所屬領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種從白樺樹(shù)皮中提取分離抗腫瘤有效部位的方法，屬于天然產(chǎn)物化學(xué) 研究領(lǐng)域。
二背景技術(shù)：
白樺樹(shù)皮化學(xué)成分復(fù)雜，含三萜類(lèi)物質(zhì)(包括樺木醇、樺木酸、羽扇豆醇、白樺烯三醇)、 各種高級(jí)脂肪酸、氨基酸、糅質(zhì)、酚類(lèi)物質(zhì)、還原性物質(zhì)、多糖類(lèi)、各種微量元素等。白樺 樹(shù)皮的藥用價(jià)值早在明代就有記錄。文獻(xiàn)調(diào)研表明從白樺樹(shù)皮中提取的白樺三蔽類(lèi)粗提物對(duì) 多種腫瘤有較好的抑制作用，且具有高效低毒的良好效果，尤其是對(duì)B16黑色素瘤和S180肉 瘤的抑瘤效果最好。而更多的研究是有關(guān)樺木酸單體的抗腫瘤效果及有機(jī)合成方法，但樺木 酸單體在植物中普遍含量頗低，提取分離或者有機(jī)合成復(fù)雜，成本高，產(chǎn)量低，因而大大限 制其開(kāi)發(fā)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種工藝流程簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，生產(chǎn)效率高，目標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率高 的白樺樹(shù)皮抗腫瘤有效部位的提取分離方法。 本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)方法如下
(1) 取樺樹(shù)皮最粗粉，加入8-14倍量80%或以上濃度的乙醇，加熱回流提取2-4次，每次 30min-60min，合并提取液；
(2) 提取液減壓回收乙醇至較難濃縮，合并濃縮液，繼續(xù)于敞口容器中加熱盡可能揮盡乙醇， 加入過(guò)程中可加入水調(diào)節(jié)，至較難進(jìn)行，放涼沉淀，加入0.5-5倍量水，進(jìn)一步沉淀，過(guò) 濾或者離心取沉淀，即為提取濃縮物；
(3) 提取濃縮物用5-50倍量水調(diào)節(jié)混懸后，分別用0.5-5倍量二氯甲烷萃取3-5次，合并萃 取液；
(4) 二氯甲烷萃取液用0.2-2倍量1%-10%的NaOH/KOH溶液進(jìn)行沉淀，回收位于 下層二氯甲垸，取混懸有沉淀的上層進(jìn)行離心或者過(guò)濾，得沉淀，用水洗去殘余的二氯甲 烷和堿液；
(5) 然后用酸處理，充分研碎并攪拌均勻使體系充分反應(yīng)，使最終pH〈3，過(guò)濾或者離心，水 洗沉淀至近中性，干燥后即得產(chǎn)品，用HPLC法測(cè)定干燥產(chǎn)品中樺木酸的含量不低于20。/0。
具體實(shí)施例方式
31、 實(shí)施例l:
取白樺樹(shù)皮最粗粉200g,用2000m]90。/。的乙醇回流提取2次，每次lh，合并提取液，減壓回收乙醇得濃縮液，進(jìn)一歩蒸發(fā)乙醇，蒸發(fā)過(guò)程中加入適量水調(diào)節(jié)，濃縮液放涼后沉淀大量析出，加入約等量水進(jìn)一歩沉淀，抽濾得提取濃縮物；提取濃縮物用IO倍量水調(diào)節(jié)，用i倍量二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，然后用1/3倍量W的NaOH溶液進(jìn)行萃取沉淀，回收二氯甲烷后，取上層混懸有沉淀的水層，3000rpm下離心10min，得到沉淀，水洗殘余二氯甲烷和堿液，再用約6M鹽酸調(diào)節(jié)酸性至p^2左右，水洗沉淀至近中性，80'C烘箱中干燥至恒重，得到的產(chǎn)品稱(chēng)重為11.77g，其中樺木三萜酸類(lèi)含量為60. 74%，樺木酸含量為21. 78%。
2、 實(shí)施例2:
本實(shí)施例與實(shí)施例1所不同的是將NaOH換成KOH，結(jié)果得到產(chǎn)品11. 46g，其中樺木三萜酸類(lèi)含量為60.68%，樺木酸含量為21. 71%。
3、 實(shí)施例3:
本實(shí)施例與實(shí)施例1所不同的是將所用樺樹(shù)皮最粗粉的量提高到4kg，并分別用40L和50L的90%乙醇回流兩次，結(jié)果得到產(chǎn)品218. 96g,其中樺木三萜酸類(lèi)含量為60. 70%，樺木酸含量為21. 86%。
權(quán)利要求
1、一種從白樺樹(shù)皮中提取分離抗腫瘤有效部位的方法，具體步驟如下(1)取白樺樹(shù)皮最粗粉，加入8-14倍量80％或以上濃度的乙醇，加熱回流提取2-4次，每次30min-60min，合并提取液；(2)提取液減壓蒸餾回收乙醇至較難濃縮，合并濃縮液，繼續(xù)置于敞口容器中加熱盡可能揮盡乙醇，加熱過(guò)程中可加入水調(diào)節(jié)，至較難進(jìn)行，放涼沉淀，加入0.5-5倍量水，進(jìn)一步沉淀，過(guò)濾或者離心取沉淀，即為提取濃縮物；(3)提取濃縮物用5-50倍量水調(diào)節(jié)混懸后，用0.5-5倍量二氯甲烷萃取3-5次，合并萃取液；(4)二氯甲烷萃取液用0.2-2倍量1％-10％的NaOH/KOH溶液進(jìn)行沉淀，回收位于下層的二氯甲烷，取混懸有沉淀的上層液進(jìn)行離心或過(guò)濾，得沉淀，用水洗去沉淀中殘余的二氯甲烷和堿液；(5)然后用酸處理沉淀，充分研碎并攪拌均勻使體系充分反應(yīng)，使最終pH<3，過(guò)濾或離心，水洗沉淀至近中性，干燥后即得產(chǎn)品，用HPLC法測(cè)定干燥產(chǎn)品中樺木酸的含量不低于20％。
2、 根據(jù)權(quán)力要求1的方法，其特征在于白樺樹(shù)皮回流提取時(shí)所用的乙醇濃度大于或等于80%。
3、 根據(jù)權(quán)力要求l的方法，其特征在于該方法中所提及的過(guò)濾和離心被視為等同效果。
4、 根據(jù)權(quán)力要求l的方法，其特征在于該方法中所用的萃取劑為二氯甲烷。
5、 根據(jù)權(quán)力要求1的方法，其特征在于該方法中二氯甲烷萃取液用0. 2-2倍量1%-10%的 NaOH/KOH溶液進(jìn)行沉淀。
6、 根據(jù)權(quán)力要求l的方法，其特征在于步驟(5)中用酸處理沉淀后，溶液pH〈3。
7、 根據(jù)權(quán)力要求l的方法，其特征在于所得到的有效部位中樺木酸的含量不低于20%。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從白樺樹(shù)皮中提取分離抗腫瘤有效部位的工藝路線，步驟如下(1)將粉碎后的白樺樹(shù)皮用乙醇提取數(shù)次，合并提取液；(2)過(guò)濾或離心得濃縮物；(3)水調(diào)節(jié)后，用適量二氯甲烷萃取數(shù)次，合并萃取液；(4)用NaOH/KOH溶液進(jìn)行沉淀，過(guò)濾或離心沉淀部分，水洗沉淀；(5)加入酸溶液，攪拌調(diào)成酸性(pH＜3)，水洗沉淀至中性，干燥，即得抗腫瘤有效部位，主要物質(zhì)為樺木三萜酸類(lèi)，主要成分為樺木酸。該方法能夠用于工業(yè)生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/185GK101485703SQ20091011994
公開(kāi)日2009年7月22日 申請(qǐng)日期2009年2月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月27日
發(fā)明者夏愛(ài)華, 巖 李, 瑋 李, 念 辛, 邊學(xué)文, 鄭春巍, 陳平華 申請(qǐng)人:李 巖;陳芝芳;苗 壯