專利名稱：：精制海狗油在制備治療慢性腎功能衰竭藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及海狗油的新的制藥用途，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。確切地說，本發(fā)明涉及精制海狗油在制備治療慢性腎功能衰竭藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：海狗為海豹科動物豎琴海豹(harpseal)的俗稱，棲居于北極和大西洋的北部。由于加拿大政府采取的保護措施，海狗的數(shù)量以每年7%的速度穩(wěn)定增長。為保持海狗與魚群之間的生態(tài)平衡，經(jīng)加拿大政府批準，每年可以少量地捕殺海狗。本發(fā)明產(chǎn)品取材于新捕獵的北極海狗皮下脂肪，經(jīng)過真空蒸餾等工藝，在低溫條件下除去蛋白、碳水化合物等物質(zhì)，得到呈微黃色、透明液體狀的精煉OMEGA3海狗油。人體內(nèi)"-3/"-6脂肪酸的平衡導(dǎo)致它們的代謝物二十碳烷酸化合物的平衡，是人體維持健康的關(guān)鍵。世界衛(wèi)生組織(WHO)認為《-3/"-6脂肪酸的最佳比例位1:4，而現(xiàn)代飲食結(jié)構(gòu)導(dǎo)致w-3脂肪酸嚴重不足(居民食用油多來源于食用植物油)，統(tǒng)計資料顯示只有1:25甚至1:30，故WHO發(fā)布需要在世界范圍內(nèi)推廣應(yīng)用"-3脂肪酸。"-3脂肪酸除能作為必需脂肪酸的來源外，還有重要的藥理作用，在體內(nèi)參與前列腺素的合成，在不同的正在中代謝成不同的前列腺素、前列環(huán)素、血栓素、白三烯等二十碳垸酸化合物，對生理和免疫反應(yīng)有重要影響。能抗血小板的黏附和聚集，使血管通透性增大，舒張血管；抑制內(nèi)源性炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生；減少脂質(zhì)過氧化物、一氧化氮的合成，增強超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶的活力，減少內(nèi)皮細胞損傷和白細胞黏附，從多種環(huán)節(jié)調(diào)節(jié)機體的體液免疫和細胞免疫。目海狗油作為更優(yōu)越的w-3脂肪酸來源，越來越引起人們的重視，大量的研究試驗表明海狗油能抗凝血、抗血栓、改善循環(huán)，降低血壓，調(diào)整血脂；促進脂代謝，減輕肝臟脂變程度；有抗脂質(zhì)氧化作用；具有抗炎免疫作用；能防治糖尿病的作用。海狗油脂肪乳注射液的上市，不但能為臨床腸外營養(yǎng)增添一個新的能量補充劑，使患者獲得必需脂肪酸，同時能提高機體的免疫功能，有效地改善癥狀，減少住院天數(shù)和在ICU的天數(shù)，減低重癥病人的死亡率，改善病人的營養(yǎng)狀況，加快病人的傷口愈合。慢性腎功能不全患者動脈粥樣硬化、高血壓發(fā)生率升高，主要是由于尿毒癥時脂蛋白酶的缺乏，富含甘油三酯的脂蛋白降解減少，而帶有甘油三酯顆粒的低密度脂蛋白增多。大約1/3的透析患者有高甘油三酯血癥。對透析患者的一些研究表明，腎臟病患者載脂蛋白的異常先于脂代謝的紊亂。研究表明透析患者飲食中應(yīng)限制飽和脂肪酸和膽固醇的攝入，食用不飽和脂肪酸食物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供精制海狗油在制備治療慢性腎功能衰竭藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明另一個目的在于提供精制海狗油的制備方法。本發(fā)明精制海狗油的制備方法包括將天然原料即海狗動物脂肪切碎；在50攝氏度溫度下加熱，然后清洗；在油水分離器中離心分離，然后過濾；用多級分子蒸餾純化方法得到精制海狗油；將精制海狗油用常規(guī)手段制成軟膠囊。即將精制海狗油與加熱熔化的食用明膠置于膠囊成型機中制成軟膠囊，然后經(jīng)干燥，用75%食用酒精洗粒消毒即得每粒為0.5克精制海狗油產(chǎn)品。按GB/T17376、GB/T17377的規(guī)定進行產(chǎn)品中各成分及含量檢驗，結(jié)果表明，該精制海狗油的具體成分(以重量％計)為長鏈多碳不飽和脂肪酸(DPA、DHA、EPA)為33%;多碳不飽和脂肪酸為54.5%;多碳飽和脂肪酸為12%;維生素E為0.5%。本發(fā)明獨特地采用分子蒸餾法，在極高真空度下，依據(jù)混合物分子運動平均自由程的差別，在遠離其沸點的溫度下將其分離。該方法精制海狗油具有三大優(yōu)點；蒸餾溫度低，工作真空度高，物料受熱時間短，可將海狗油中EPADPADHA含量從21%提高到33%左右，分子蒸餾可極有效地脫除液體中的低分子物質(zhì)和去除其他雜質(zhì)，同時去除海狗油的特異腥味，物理性狀大為改善。另外，分子蒸餾是一種非常環(huán)保的物理分離技術(shù)，與傳統(tǒng)的化學(xué)分離方法相比，它節(jié)省了大量溶劑，減少了對環(huán)境的污染，而且不會帶入新的雜質(zhì)和有毒物質(zhì)，同時能保證物料的天然品質(zhì)。還可對海狗油進行多級分子蒸餾純化，首先脫氣；物料預(yù)熱，進料，蒸餾，系統(tǒng)絕壓，刮膜，進入重組分工序，最后收集輕組分即得精制海狗油。本發(fā)明海狗油是從無污染的北大西洋深海的動物脂肪提取，再經(jīng)過特殊加工精制而成，含有特殊的長鏈多碳不飽和0MEGA3脂肪酸，對慢性腎功能衰竭透析患者開拓了新的治療途徑，對于減輕患者的癥狀延長生存期均有一定意義。本發(fā)明精制海狗油的有益效果具體包括1、可減少腎微血管血栓形成、降低血粘度并抑制血小板凝集、改善微循環(huán)、使腎功能好轉(zhuǎn)。2、可改善腎動脈硬化、緩解動脈血壓升高。3、對降低血脂及減輕腎小球硬化程度有一定幫助。本發(fā)明精制海狗油富含大量的長鏈多碳不飽和脂肪酸，可補償花生四稀酸在代謝中的消耗進入細胞膜磷脂，生成前列腺素類物質(zhì)。4、可降低甘油三脂，總膽固醇和低密度脂蛋白的作用。并能促進血中高密度脂蛋白膽固醇升高，有利于糾正患者脂質(zhì)代謝紊亂和預(yù)防心血管并發(fā)癥，較快改善患者腎功能。圖1是本發(fā)明精制海狗油制成軟膠囊的工藝流程圖。具體實施方式以下通過本發(fā)明精制海狗油的具體實施例及本發(fā)明精制海狗油應(yīng)用于治療慢性腎功能衰竭的臨床試驗，對本發(fā)明作進一步說明。實施例1將加拿大紐芬蘭漁業(yè)部MYW公司提供的海狗動物脂肪切碎，在50攝氏度溫度下加熱，并反復(fù)清洗，在油水分離器中離心分離，取出油分進行過濾，在多級分子蒸餾裝置中進行純化，將得到的精制海狗油與加熱熔化的食用明膠置于膠囊成型機中制成軟膠囊，然后經(jīng)干燥，用75%食用酒精洗粒消毒即得每粒含0.5克精制海狗油的產(chǎn)品。按GB/T17376、GB/T17377的規(guī)定進行產(chǎn)品中各成分及含量檢驗，該精制海狗油的具體成分(以重量％計)為長鏈多碳不飽和脂肪酸(DPA、DHA、EPA)為33%;多碳不飽和脂肪酸為54.5%;多碳飽和脂肪酸為12%;維生素E為0.5。/。。藥理資料海狗油治療慢性腎功能衰竭臨床觀察。統(tǒng)計分析天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科，對海狗油治療慢性腎功能不全進行了臨床觀察，現(xiàn)將34例療效統(tǒng)計總結(jié)如下一、臨床資料全部患者按照CRF設(shè)計，選擇慢性腎功能不全患者共34例。其中，脫落l例(女性，腹膜透析患者。因嚴重肺感染、心肺功能衰竭死亡)。按期完成全部臨床觀察者33例，包括非透析患者21例(男性10例，女性12例)，原發(fā)疾病為慢性腎炎15例，糖尿病腎5病4例，狼瘡性腎炎2例。腹膜透析患者12例(男性4例，女性7例)，原發(fā)疾病為慢性腎炎7例，糖尿病腎病4例，狼瘡性腎炎l例。二、觀察程序與方法每位患者根據(jù)標準納入后，簽署知情同意書，建立專用觀察病歷，完成全部療程后計入療效統(tǒng)計。(一)納入標準1.年齡18—70歲，非透析患者血Cr176442vmoL/L，腹膜透析患者透析3個月以上。2.血Cr3個月內(nèi)持續(xù)穩(wěn)定，升高/降低不超過15%;3.血壓經(jīng)降壓治療，舒張壓穩(wěn)定在90mmHg以下者；如以上任何一個答案為"否"，此受試者不能參加臨床觀察。(二)排除標準1.血Cr>442mmoL/L;2.腎功能惡化進展迅速，血Cr每日升高15vmoL/L;3.尿蛋白大于5g/24hr，血清白蛋白低于25g/L;4.六個月內(nèi)有惡性高血壓，或合并心肺肝腦和造血系統(tǒng)嚴重疾病及精神病患者；5.癌癥妊娠或哺乳期婦女及對治療方案中相關(guān)藥物過敏等不適合接受本方案治療者；以上任何一個答案為"是"，此受試者不能參加臨床觀察。(三)病例的剔除和脫落不符合各納入標準而被誤納入的病例，以及符合納入標準而未曾用藥的病例，對本藥過敏者，予以剔除；依從性差、發(fā)生嚴重不良事件、發(fā)生嚴重并發(fā)癥或特殊生理變化等不宜繼續(xù)接受觀察，未按規(guī)定用藥的病例等，均為脫漏病例。統(tǒng)計分析時應(yīng)結(jié)合實際情況處理，如發(fā)生不良反應(yīng)者應(yīng)記入不良反應(yīng)的統(tǒng)計。(四)終止觀察標準觀察中發(fā)生嚴重不良反應(yīng)者，及時終止觀察。三、統(tǒng)計學(xué)方法對治療前后各療效性指標及患者中醫(yī)臨床癥狀積分做單因素方差分析，進行t檢驗，數(shù)據(jù)以均數(shù)土標準差表示(；±5)，以P〈0.05為具有顯著性差異。四、治療方案口服精制海狗油軟膠囊，每日3次，每次4粒，于早午晚餐前服用，四周為一療程。共觀察3個療程。每療程末留取血尿標本進行檢查，同時觀察記錄臨床癥狀變化情況。實驗室檢測指標為血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)、纖維蛋白原(Fb)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、白蛋白(ALb)、血紅蛋白(Hgb)、紅細胞(WBC)、內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)、腹膜肌酐清除率、24H尿蛋白定量、24H尿肌酐定量。五觀察結(jié)果1、腹膜透析患者治療前后相關(guān)指標分析實驗室指標治療前治療四周治療八周治療十二周Cr(vmoL/L)870.83±370.62869.58±350.39866.51±354.76905.66±376.45BUN(mmoL/L)23.44±3,1924,51±4.7520.97±3.9618.96±4.25AFb(g/L)4.98±0.575.98±1.03A4.81±1.305.32±1.22AST(U/L)17.89±6.2817.22±6.7417.43±5.4019.97±6.35ALT(U/L)18.39±9.8816.13±7.5416.86±6.8218.65±17.46ALb(g/L)39.71±3.8941.95±3.26A39.9±3.9535.25±4.57Hgb(g/L)114±15.3105±13.7599.25±17.18102±12.72RBC(1012/L)3.69±0.433.49±0.613.31±0.723.51±0.69尿pro定量(g/L)0.71±0.481.06±0.52^0.87±0.540.98±0.56注Ap<o.05，AAP<0.01結(jié)果顯示服藥三療程后,腹膜透析患者血BUN顯著降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異；血Cr治療前后保持平穩(wěn)，但統(tǒng)計學(xué)無差異；血Fb治療四周后曾有明顯上升，具有統(tǒng)計學(xué)差異，至八周及十二周后，又趨于下降并恢復(fù)到治療前水平；血ALb治療四周后明顯上升，具有統(tǒng)計學(xué)差異，治療八周及十二周后，趨于下降恢復(fù)到治療前水平。2、非透析患者治療前后相關(guān)指標分析實驗室指標治療前治療四周治療八周治療十二周Cr(vmoL/L)287.67±146.27298.14±150.52293.71±171.2302.95±196.34BUN(mmoH)16.88±7.3816.66±7.5315.59±7.3614.17±6.96AFb(g/L)4.07±1.144.04±1.094.45±1.334.5±1.37AST(U/L)16.5±6.5116.48±7.7316.31±6,618.03±6.16ALT(U/L)17.76±9.2817.5±9.7917.17±11.0418.26±14.57ALb(g/L)40.91±6.2843.08±6.23A41±5.939.92±7.67Hgb(g/L)109.1±22.83109.14±18.49114.9±17.18115.85±16.07RBC(10'2/L)3.54±0.753.65±0.573.48±0.583,76±0.57尿pro定量(g/L)1.3±0.0.911.44±1.251.47±1.171.43±1.28'注AP<0.05，AAP<0.01結(jié)果顯示服藥三療程后，非腹膜透析患者血BUN顯著降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異；血Cr治療前后保持平穩(wěn)，無統(tǒng)計學(xué)差異；血Fb治療前后無統(tǒng)計學(xué)差異；血ALb治療四周后明顯上升，具有統(tǒng)計學(xué)差異，治療八周及十二周后，趨于下降恢復(fù)到治療前水平。3、兩組患者治療前后內(nèi)生肌酐清除率變化比較(ml/min)項目治療前治療四周治療八周治療十二周非透析患者30.46±19.1629.12±18.2833.04±24.8532.28±24.26透析患者8.81±3.058.84±3.098.81±3.098.64±3.59腹膜清除率21±10,9120.6±13.2322.98±11.6320.25±8.9結(jié)果顯示治療后，非透析患者患者內(nèi)生肌酐清除率提升，但無統(tǒng)計學(xué)差異；腹膜透析患者內(nèi)生肌酐清除率及腹膜肌酐清除率治療前后無顯著性變化。4、兩組患者治療前后血壓變化比較(mmHg)項目收縮壓舒張壓治療前治療后治療前治療后非透析患者透析患者138.33±12.78139.58±15.44127.86±17.14"136,67±12,8586.19±16.1284.17±7.0278.1±8.14A78.75±6.78A^主AP<0.05，AAP<0.01結(jié)果顯示治療后，非透析患者患者血壓顯著下降，具有統(tǒng)計學(xué)差異；腹膜透析患者收縮壓無顯著性變化，舒張壓顯著下降，具有統(tǒng)計學(xué)差異。5、肌酐>300vmoL/L非透析患者治療前后主要指標比較實驗室指標治療前治療四周治療八周治療十二周Cr(vmoL/L)427.44±93,83435.44±114.01449.11±131.97476.89±171.8BUN(mmoL/L)20.63±5,4120.21±7.1620.22±8.4219.24±6.72Fb(g/L)4.54±1.264.01±1.325.02±1.384.86±0.95ALb(g/L)42.86±4.3744.81±5.8142.83±4.841.71±4.46Hgb(g/L)96.22±22.01100.22±14.51107.78±14.51115.33±14.4尿pro定量(g/L)1.57±0.921.73±1.131.8±1.121.42±1.08結(jié)果顯示服藥三療程后，肌酐>300vmoL/L非透析患者Hgb呈提升趨勢BUN呈下降趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)差異；Cr、FB、ALB、24H尿蛋白定量等指標無顯著變化。6、肌酐<300vmoL/L非透析患者治療前后主要指標比較實驗室指標治療前治療四周治療八周治療十二周Cr(vmoI7L)182.83±67.26195.16±66.88177.17±77.76172.5±72.85BUN(mmoL/L)14.07±7.5813.99±6.9112.11±4.0410.37±4.28Fb(g/L)3.77±0,984.07±0.914.02±1.164.2±1.61ALb(g/L)40.98±9.343.22±9.0141.03±7.9543.69±9.77Hgb(g/L)118.75±18.91115.83±18.82120.25±17.81116.27±18.01尿pro定量(g/L)1.12±0.91.24±1,331.26±1.21.43±1.06結(jié)果顯示服藥三療程后，肌酐<300vmoL/L非透析患者血Cr、BUN呈明顯下降趨勢，接近統(tǒng)計學(xué)差異界值；Hgb、FB、ALB、24H尿蛋白定量無顯著變化。87、中醫(yī)本虛證積分表治療前治療四周治療八周治療十二周總積分0.65±0.952±1.46"1.61士1.31"1.16±1.241±1.141.19±1.121.06±1.010.88±1.010.75±0.981.13±1.340.81±1.120.69±1.090.75±1.110.75±1.110.75±1.110.75±1.110.82±1.120.75±0.980.75±0.980.75±0.982±1.241.81±1.171.31±1.09"1.06±1.24"1,63±1.071.5±1.02U3±1.01A0,94土1.13"00000.19±0.590.19±0.590.13±0.490.13±0.491.06±1.441±1.140.38土0.79"0.13土0,49"0.5±1.020.31±0.740.19±0.59A0.25±0.670,13±0,510.13±0.510.13±0.510.13±0.510.19±0.590.19±0.590,19±0,590.19±0.592.13±1.341.88±1.241.81±0.931.69±1.26A1,88±1.241.88±1.131.69±1.031.63±1,181.5±1.241.69±1.261.19±1.331.19±1.233.03±2.192.65±1.892.32土1.67"2.22±1.75"0.97±1,30.86±1.290.81±1.20.81±1.20.97±1.210.97±1.210.81±10.81±122.13±8.4819.5士8.38"16.19土6.49"14.19士6.71"注AP<0.05，AAP<0.01結(jié)果顯示服藥三療程后，患者本虛證具有一定程度改善，其中神疲乏力、面色蒼黃、唇甲色淡、怕熱盜汗、夜尿頻多等氣血虛弱證，癥狀總積分改善明顯，治療前后具有顯著性差異。8、中醫(yī)標實證積分表證候治療前治療四周治療八周治療十二周定位刺痛，夜間加重0.27±0.690.73±0.980.07±0.370.13±0.51口唇紫暗、瘀斑0.27±0.690.2±0.610.13±0.510.07±0.37肌膚甲錯0.87±1.460.8±1.450.53±1.170.53±1.17胸悶脘痞U3土U40.87±1.140.6±1.07'0.53±1.04"納呆嘔惡1±1.360.93±1,140.53±1.04^0.8±1.24形體肥胖1.13±1.351.13±1.351.13±1.351.13±1.35全身倦怠1.8±1.11.6±0.971.13±1"1土1.02"頭脹肢沉2.2±1.521士1.3"0.53土1.17"0.47士1.01"神識昏蒙0000口粘、口有尿味0.84±0.650.65±1.080.65±0.650.52±0.89嘔吐頻作0.39±1.090.39±0.80,58±0,920.45±0.85皮膚瘙癢1.1±1.621,23±1.430.65±1.08A0.52±0.89A肢體抽搐0.65±1.20.45±0.850.19士0.6^0.13土0.5"大便不通1.23±1.430.13±0.72"0"0.06±0.36"小便量少0.52±0.890,13±0.50.13±0.50.13±0.5總積分13.35±7.5410±6.24"6.65±4.57"6.45±4.46"f主AP<0.05，AAP<0.01力言印力黃淡淡淡汗熱而冷冷腫多白緩乏懶汗有無蒼色色質(zhì)盜心紅數(shù)肢怕浮頻苔細疲氣自胖細色甲少胖熱足瘦細寒膝足尿胖沉神少易舌脈面唇經(jīng)舌怕手舌脈畏腰面夜舌脈結(jié)果顯示服藥三療程后，胸悶脘痞、頭脹肢沉、大便不通等癥狀總積分改善明顯，治療前后具有顯著性差異。9、生活質(zhì)量情況表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>、主AP<0.05，AAP<0.01結(jié)果分析經(jīng)對本組33例患者癥狀體征、相關(guān)實驗室指標及生活質(zhì)量臨床觀察，顯示下列結(jié)果(1)透析與非透析患者治療前后總體情況,血BUN顯著降低,具有統(tǒng)計學(xué)差異；血Cr保持平穩(wěn)，但統(tǒng)計學(xué)無差異。其中，肌酐〈300vmoL/L的非透析患者血Cr呈明顯下降趨勢，接近統(tǒng)計學(xué)差異界值。非透析患者內(nèi)生肌酐清除率具有提升趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)無差異，透析患者內(nèi)生肌酐清除率治療前后保持平穩(wěn)，無統(tǒng)計學(xué)無差異。(2)非透析患者治療后血壓顯著下降，具有統(tǒng)計學(xué)差異；腹膜透析患者收縮壓無顯著性變化，舒張壓顯著下降，具有統(tǒng)計學(xué)差異。(3)腹膜透析患者血Fb治療四周后曾有明顯上升，具有統(tǒng)計學(xué)差異，至八周及十二周后，又趨于下降并恢復(fù)到治療前水平；血ALb治療四周后明顯上升，具有統(tǒng)計學(xué)差異，治療八周及十二周后，趨于下降恢復(fù)到治療前水平。非透析患者血ALb治療四周后明顯上升，具有統(tǒng)計學(xué)差異，治療八周及十二周后，趨于下降恢復(fù)到治療前水平。(4)全部觀察病例的本虛證、標實證等臨床癥狀總積分改善明顯，治療前后具有顯著性差異。(5)全部觀察病例的生活質(zhì)量情況因病所致患者生理功能、心理/精神的不良影響減輕，心悸、頭昏和頭痛等高血壓相關(guān)表現(xiàn)明顯緩解。結(jié)果顯示服藥三療程后，慢性腎衰對患者生理功能、心理/精神的不良影響減輕，心悸、頭昏和頭痛等高血壓相關(guān)表現(xiàn)緩解較為明顯。權(quán)利要求1、精制海狗油在制備治療慢性腎功能衰竭藥物中的應(yīng)用。2、權(quán)利要求1中所述的精制海狗油的制備方法，該方法包括將天然原料即海狗動物脂肪切碎；在50攝氏度溫度下加熱，然后清洗；在油水分離器中離心分離，然后過濾；用多級分子蒸餾純化方法得到精制海狗油；或再將精制海狗油用常規(guī)手段制成軟膠囊。全文摘要本發(fā)明涉及精制海狗油在制備治療慢性腎功能衰竭藥物中的應(yīng)用。該精制海狗油的制備方法為將天然原料即海狗動物脂肪切碎；在50攝氏度溫度下加熱，然后清洗；在油水分離器中離心分離，然后過濾；用多級分子蒸餾純化方法得到精制海狗油；將精制海狗油用常規(guī)手段制成軟膠囊。文檔編號A61K35/12GK101530425SQ200910083209公開日2009年9月16日申請日期2009年4月29日優(yōu)先權(quán)日2009年4月29日發(fā)明者何謂鑒,威劉,隕劉,劉俊祥申請人:劉威;劉俊祥;何謂鑒;劉隕