專利名稱：一種舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥品的質(zhì)量控制方法，具體地說一種舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法。 現(xiàn)有技術(shù)舒筋通絡(luò)顆粒是治療頸椎病的一種新藥，它是由骨碎補(bǔ)、牛膝、川芎、天麻、黃芪、 威靈仙、地龍、葛根、乳香組成的復(fù)方制劑。具有補(bǔ)肝益腎、活血舒筋之功效，主要用于治療 頸椎病屬于肝腎陰虛、氣滯血淤證，癥見頭暈、頭痛、脹痛或刺痛，耳聾、耳鳴，頸項(xiàng)僵直，頸、 肩、背疼痛，肢體麻木，倦怠乏力，腰膝酸軟，口唇色暗，舌質(zhì)暗紅或有瘀斑。經(jīng)臨床觀察，舒 筋通絡(luò)顆粒治療頸椎病的總有效率達(dá)98. 33%。CN1515273公開了該藥物制劑的具體配方 及詳細(xì)的制備方法。其制備工藝成熟，療效確切，安全可靠，是治療頸椎病少有的中藥品種。 但目前尚未發(fā)現(xiàn)關(guān)于其產(chǎn)品質(zhì)量控制的有關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是要提供一種針對舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，以期為舒筋通 絡(luò)顆粒的工業(yè)化生產(chǎn)提供一種質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明所述的舒筋通絡(luò)顆粒由骨碎補(bǔ)、天麻、牛膝、川芍、葛根、地龍、威靈仙、黃 芪、乳香。其原料配比可選擇骨碎補(bǔ)10-18%、天麻5-12%、牛膝10_20%、川芎7_15%、葛 根 8-14%、地龍 8-14%、威靈仙 10-18%、黃芪 10-18%、乳香 4-8%。其制備方法可選擇_乳香以蒸餾法提取揮發(fā)油，收集揮發(fā)油，以環(huán)糊精包結(jié)，備用。其余骨碎補(bǔ)等 八味，以3. 5倍40-60 %乙醇提取3次，提取液合并，濃縮至適當(dāng)密度，減壓干燥，粉碎，過 100目篩，加入揮發(fā)油包結(jié)物到浸膏粉。將以上得到的浸膏粉加適量糊精，以80%乙醇為潤濕劑，制粒，干燥(60°C以下)， 分裝即得顆粒劑。本發(fā)明所提供的舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，包括定性、定量檢測。其中的定性檢測，可采用薄層色譜法，將吸附劑或支持劑在玻璃板、塑料板或鋁片 上均勻地涂鋪一薄層，將樣品和對照品點(diǎn)在同一塊薄層板上在同一條件下依次層析展開， 經(jīng)顯色或用其它方法檢出色譜斑后，對比斑點(diǎn)的位置、顏色或熒光顏色作出判斷。其質(zhì)量控制的關(guān)鍵點(diǎn)是利用高效液相色譜法對該顆粒中的柚皮苷的含量進(jìn)行定 量檢測，其具體步驟為(a)對照品溶液的制備精密稱取110°C干燥至恒重的柚皮苷對照品12mg，置IOOml 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；(b)供試品溶液的制備取本品細(xì)粉約lg，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇50ml 提取5小時(shí)，回收甲醇至干，殘?jiān)?0ml，熱水溶解并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，放冷至室溫，以三氯甲烷萃取3次(20ml、15ml、10ml)，棄去三氯甲烷層，水溶液照柱色譜法試驗(yàn)，加在已處理 好的聚酰胺柱上，以水40ml洗脫，棄去洗脫液，繼以乙醇70ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?加甲醇溶解并定容于IOml量瓶中，搖勻，以0. 45 μ m微孔濾膜濾過，即得；(c)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲 醇-水-冰乙酸=30 70 0.21為流動(dòng)相；檢測波長為283nm ；柱溫40°C，理論板數(shù)按柚 皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ；(d)測定法按照2005版中國藥典一部附錄VI D高效液相色譜法，分別吸取對照品 溶液10μ 1，供試品溶液15μ 1，注入液相色譜儀，測定；(e)每袋舒筋通絡(luò)顆粒以柚皮苷計(jì)，不得少于12. Omg0上述方法經(jīng)線性關(guān)系、精密度、重復(fù)性以及穩(wěn)定性考察均表明該方法，精確度高、 重復(fù)性好，穩(wěn)定性強(qiáng)。由此可通過對舒筋通絡(luò)顆粒中的柚皮苷含量測定來控制舒筋通絡(luò)顆 粒質(zhì)量的穩(wěn)定性。為了進(jìn)一步提高質(zhì)量檢測的嚴(yán)謹(jǐn)性和可控性，其定性檢測方法優(yōu)選以下幾種方 式利用薄層色譜法鑒別該顆粒中的川芎，其具體步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的 混合溶劑25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解后，加在中性氧化 鋁柱上，用無水乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至約1ml，制得供試品溶液；(b)對照藥材溶液制備取川芎對照藥材0. 2g，按供試品溶液制備方法處理，制得 對照藥材溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VI B薄層色譜法，吸取供試品溶液 和對照藥材溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9 1的正己烷-乙酸乙酯為展 開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng) 的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。利用薄層色譜法鑒別該顆粒中的地龍，其具體步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的 混合溶劑25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，加在中性氧化鋁 柱上，用無水乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至約1ml，制得供試品溶液；(b)對照藥材溶液制備取地龍對照藥材lg，按供試品溶液制備方法處理，制得對 照藥材溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VI B薄層色譜法，吸取供試品溶液 和對照藥材溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9 1的正己烷-乙酸乙酯為展 開劑，展開，取出，晾干，在365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng) 的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。利用薄層色譜法鑒別該藥物中的葛根，其具體步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的 混合溶劑25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解后，加在中性氧 化鋁柱上，先用無水乙醇25ml洗脫，棄去洗脫液，繼以50%乙醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸 干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，制得供試品溶液；
(b)對照品溶液制備取葛根素對照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，制得對 照品溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VI B薄層色譜法，吸取供試品 溶液和對照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水= 15 5 0.5為展開劑，展開，取出，晾干，在氨蒸汽中熏1分鐘，置365nm紫外光燈下檢視， 供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。利用薄層色譜法鑒別該藥物中的天麻，其具體步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的 混合溶劑25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解后，加在中性氧 化鋁柱上，先用無水乙醇25ml洗脫，棄去洗脫液，繼以50%乙醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸 干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，制得供試品溶液；(b)對照品溶液制備取天麻素對照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，制得對 照品溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VI B薄層色譜法，吸取供試品溶 液和對照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸= 6:2: 0. 15為展開劑，展開兩次，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，在105°C加熱至 斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。利用薄層色譜法鑒別該藥物中的黃芪，其具體步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加70%乙醇40ml。超聲處理30 分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)影痹囈篒Oml使溶解，用經(jīng)氨水飽和過的正丁醇萃取3次，每次 20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，回收正丁醇液，殘?jiān)蛹状?乙酸乙酯 為1 1的混合液5ml使溶解，加在中性氧化鋁柱上，用甲醇-乙酸乙酯為1 1的混合液 35ml洗脫，棄去洗脫液，繼以40%乙醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶 解，制得供試品溶液；(b)對照品溶液制備取黃芪甲苷對照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為 對照品溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VI B薄層色譜法，吸取供試品溶 液和對照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸為 6:2: 0. 15的混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。利用薄層色譜法鑒別該藥物中的牛膝，其具體步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，加70%乙醇40ml，加熱回流30分鐘，濾 過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，用三氯甲烷20ml振搖提取，棄去三氯甲烷層水層用水 飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇飽和的水20ml洗滌， 棄去水洗滌液，取正丁醇液適當(dāng)濃縮后，加入5g中性氧化鋁，拌勻，揮盡溶劑，置玻璃柱上， 用乙酸乙酯-乙醇為4 1的混合溶液40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使 溶解，制得供試品溶液；(b)對照藥材溶液制備取牛膝對照藥材lg，按供試品溶液制備方法處理，制得對 照藥材溶液；
(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VI B薄層色譜法，吸取供試品溶液 和對照藥材溶液各 ομ ，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇為4 1的混 合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以對二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液，在105°C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；其中對二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液的制備方法為取對二甲氨基苯甲醛 0. 25g，溶于乙酸50ml、85%磷酸溶液5g和水20ml的混合溶液中，混勻。本發(fā)明方法用于針對舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制，其專屬性強(qiáng)、定量準(zhǔn)確、操作簡 便。它有效保證了舒筋通絡(luò)顆粒質(zhì)量的穩(wěn)定性。


圖1是本發(fā)明方法中供試品的色譜圖。圖2是本發(fā)明方法中對照品的色譜圖。圖3是本發(fā)明方法中川芎鑒別薄層色譜圖。圖中的a為對照品，b為供試品。圖4是本發(fā)明方法中地龍鑒別薄層色譜圖。
圖中的a為對照品，b為供試品。圖5是本發(fā)明方法中葛根鑒別薄層色譜圖。圖中的a為對照品，b為供試品。圖6是本發(fā)明方法中天麻鑒別薄層色譜圖。圖中的a為對照品，b為供試品。圖7是本發(fā)明方法中黃芪鑒別薄層色譜圖。圖中的a為對照品，b為供試品。圖8是本發(fā)明方法中牛膝鑒別薄層色譜圖。圖中的a為對照品，b為供試品。以下結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳述。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例取中藥材骨碎補(bǔ)450g、牛膝450g、川芎360g、天麻300g、黃芪450g、威靈仙450g、 地龍360g、葛根360g和乳香360g，乳香以水蒸汽蒸餾法提取揮發(fā)油，收集揮發(fā)油，以β -環(huán) 糊精包結(jié)，備用。其余骨碎補(bǔ)等八味，用60%乙醇回流提取三次，第一次加乙醇5倍量，提取 2小時(shí)，第二、三次加乙醇3倍量，各提取1小時(shí)，濾過，合并濾液。減壓回收乙醇，濃縮成相 對密度1. 32 1. 35(50°C )，減壓干燥，粉碎，過100目篩，加入揮發(fā)油包結(jié)物及糊精矯味劑 適量，混勻，以80%乙醇為潤濕劑，制成顆粒，干燥(60°C以下)，即制成舒筋通絡(luò)顆粒(以下 簡稱本品)。分裝，每袋裝12g。藥物質(zhì)量控制方法如下1、用高效液相色譜法測定本品中的柚皮苷含量。(1)照高效液相色譜法(2005版中國藥典一部附錄VI D)測定。(2)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑醇-水-冰乙酸(30 70 0.21)為流動(dòng)相；檢測波長為283nm。柱溫40°C，理論板數(shù)按 柚皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。(3)對照品溶液的制備精密稱取在110°C干燥至恒重的柚皮苷對照品12mg，置 100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。(4)供試品溶液的制備取本品細(xì)粉約lg，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇50ml 提取5小時(shí)，回收甲醇至干，殘?jiān)?0ml熱水溶解，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，放冷至室溫，以三 氯甲烷萃取3次(20ml ,15ml, 10ml)，棄去三氯甲烷層，水溶液照柱色譜法(2005版中國藥典 一部附錄VI C)試驗(yàn)，加在已處理好的聚酰胺柱(聚酰胺3. 2g, 80-100目，柱內(nèi)徑約1. 2cm, 濕法裝柱)上，以水40ml洗脫，棄去洗脫液，繼以乙醇70ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?甲醇溶解并定容于10ml量瓶中，搖勻，以0. 45 y m微孔濾膜濾過，即得。(5)測定法分別吸取對照品溶液10iU，供試品溶液15iU，注入液相色譜儀，記錄 色譜圖，色譜圖結(jié)果見圖1和圖2。(6)測定結(jié)果每袋含柚皮苷14. 6mg，符合規(guī)定。線性關(guān)系考察精密吸取柚皮苷對照品溶液(濃度為0. 12mg/ml)6、8、10、12、14ia，分別注入色 譜儀，按照上述色譜條件進(jìn)行測定。柚皮苷對照品的進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，相應(yīng)峰面積積分值為 縱坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程。結(jié)果表明，柚皮苷在(0.72 1.68) yg范圍內(nèi)成良好線性關(guān)系。重復(fù)性考察稱取本品6份，按照上述供試品溶液的制備方法制備，分別測定其含量，平均含量 為14. 58mg, RSD為1. 62%。表明該方法重線性好。穩(wěn)定性考察取同一供試品溶液，間隔2小時(shí)，進(jìn)樣一次，共6次。測定峰面積并計(jì)算含量。RSD 為 1. 72%。平均回收率為99.5%。2、薄層色譜法鑒別本品中的藥材(1)川芎鑒別(a)供試品溶液制備取本品5g，研細(xì)，混合溶劑(乙酸乙酯甲醇=4 l)25ml, 超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，加在中性氧化鋁柱(100 200 目，5g，內(nèi)徑約15mm，干法裝柱)上，用無水乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至約1ml，制得 供試品溶液。(b)對照藥材溶液制備取川芎對照藥材0. 2g，按供試品溶液制備方法處理，制得 對照藥材溶液。(c)鑒別試驗(yàn)照薄層色譜法(2005版中國藥典一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品 溶液和對照藥材溶液各5 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9 1) 為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。(d)試驗(yàn)結(jié)果薄層色譜照片見圖3。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照藥材色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。(2)地龍鑒別(a)供試品溶液制備取本品5g，研細(xì)，混合溶劑(乙酸乙酯甲醇=4 l)25ml,超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，加在中性氧化鋁柱(100 200 目，5g，內(nèi)徑約15mm，干法裝柱)上，用無水乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至約1ml，制得 供試品溶液。(b)對照藥材溶液制備取地龍對照藥材lg，按供試品溶液制備方法處理，制得對 照藥材溶液。(c)鑒別試驗(yàn)照薄層色譜法(本品中國藥典一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶 液和對照藥材溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9 1)為 展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。(d)試驗(yàn)結(jié)果薄層色譜照片見圖4。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照藥材色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。(3)葛根鑒別(a)供試品溶液制備取本品5g，研細(xì)，混合溶劑(乙酸乙酯甲醇=4 l)25ml, 超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，加在中性氧化鋁柱(100 200 目，5g，內(nèi)徑約15mm，干法裝柱)上，先用無水乙醇25ml洗脫，棄去洗脫液，再用50 %乙醇 40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，制得供試品溶液。(b)對照品溶液制備取葛根素對照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，制得對 照品溶液。(c)鑒別試驗(yàn)照薄層色譜法(2005版中國藥典一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供 試品溶液和對照品溶液各5 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水 (15 5 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，在氨蒸汽中熏1分鐘，置紫外光燈(365nm)下 檢視。(d)試驗(yàn)結(jié)果薄層色譜照片見圖5。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照藥材色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。(4)天麻鑒別(a)供試品溶液制備取本品5g，研細(xì)，混合溶劑(乙酸乙酯甲醇=4 l)25ml, 超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，加在中性氧化鋁柱(100 200 目，5g，內(nèi)徑約15mm，干法裝柱)上，先用無水乙醇25ml洗脫，棄去洗脫液，再用50 %乙醇 40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，制得供試品溶液。(b)對照品溶液制備取天麻素對照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，制得對 照品溶液。(c)鑒別試驗(yàn)照薄層色譜法(現(xiàn)行中國藥典一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試 品溶液和對照品溶液各5 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸 (6:2: 0.15)為展開劑，展開兩次，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，在105°C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰。(d)試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果見圖6。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(5)黃芪鑒別(a)供試品溶液制備取本品5g，研細(xì)，加70%乙醇40ml。超聲處理30分鐘，濾過， 濾液蒸干，殘?jiān)影痹囈?0ml使溶解，用經(jīng)氨水飽和過的正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，回收正丁醇液，殘?jiān)蛹状?乙酸乙酯(1 l)5ml 使溶解，加在中性氧化鋁柱(100 200目，5g，內(nèi)徑約15mm，干法裝柱)上，用甲醇-乙酸乙 酯(1 l)35ml洗脫，棄去洗脫液，繼續(xù)用40%乙醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右?醇1ml使溶解，制得供試品溶液。(b)對照品溶液制備取黃芪甲苷對照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作為 對照品溶液。(c)鑒別試驗(yàn)照薄層色譜法(現(xiàn)行中國藥典一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品 溶液10 iil，對照品溶液各5 iil，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸 (6:2: 0. 15)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn) 顯色清晰。(d)試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果見圖7。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(6)牛膝鑒別(a)供試品溶液制備取本品5g，加70%乙醇40ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液 蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，用三氯甲烷20ml振搖提取，棄去三氯甲烷層水層用水飽和的 正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇飽和的水20ml洗滌，棄去水 洗滌液，取正丁醇液適當(dāng)濃縮后，加入5g中性氧化鋁，拌勻，揮盡溶劑，置玻璃柱(內(nèi)徑約 lcm)上，用乙酸乙酯-乙醇(4 1)的混合溶液40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?0. 5ml使溶解，制得供試品溶液。(b)對照藥材溶液制備取牛膝對照藥材lg，按供試品溶液制備方法處理，制得對 照藥材溶液。(c)鑒別試驗(yàn)照薄層色譜法(2005版中國藥典一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品 溶液和對照藥材溶液各10yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇(4 1) 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以對二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液(取對二甲氨基苯 甲醛0. 25g，溶于乙酸50ml、85%磷酸溶液5g和水20ml的混合溶液中，混勻，置棕色瓶中保 存)，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。(d)試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果見圖8。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng) 的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
權(quán)利要求
一種舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，包括定性、定量檢測，其特征在于所說的定量檢測是利用高效液相色譜法對該顆粒中的柚皮苷的含量進(jìn)行定量檢測，其步驟為(a)對照品溶液的制備精密稱取110℃干燥至恒重的柚皮苷對照品12mg，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；(b)供試品溶液的制備取舒筋通絡(luò)顆粒細(xì)粉約1g，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇50ml提取5小時(shí)，回收甲醇至干，殘?jiān)?0ml，熱水溶解并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，放冷至室溫，以三氯甲烷萃取3次，每次20ml、15ml、10ml，棄去三氯甲烷層，水溶液照柱色譜法試驗(yàn)，加在已處理好的聚酰胺柱上，以水40ml洗脫，棄去洗脫液，繼以乙醇70ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ萦?0ml量瓶中，搖勻，以0.45μm微孔濾膜濾過，即得；(c)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇 水 冰乙酸＝30∶70∶0.21為流動(dòng)相；檢測波長為283nm；柱溫40℃，理論板數(shù)按柚皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；(d)測定法按照2005版中國藥典一部附錄VI D高效液相色譜法，分別吸取對照品溶液10μl，供試品溶液15μl，注入液相色譜儀，測定；(e)每袋舒筋通絡(luò)顆粒以柚皮苷計(jì)，不得少于12.0mg。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于所說的定性檢測 包括利用薄層色譜法鑒別該顆粒中的川芎，其步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的混合 溶劑25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解后，加在中性氧化鋁柱 上，用無水乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至約1ml，制得供試品溶液；(b)對照藥材溶液制備取川芎對照藥材0.2g，按供試品溶液制備方法處理，制得對照 藥材溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VIB薄層色譜法，吸取供試品溶液和對 照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9 1的正己烷-乙酸乙酯為展開 劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的定性檢測包括利用薄層色譜法鑒別該顆粒中的地龍，其 步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的混合 溶劑25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，加在中性氧化鋁柱 上，用無水乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至約1ml，制得供試品溶液；(b)對照藥材溶液制備取地龍對照藥材lg，按供試品溶液制備方法處理，制得對照藥 材溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VIB薄層色譜法，吸取供試品溶液和對 照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9 1的正己烷-乙酸乙酯為展開 劑，展開，取出，晾干，在365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于所說的定性檢測 包括利用薄層色譜法鑒別該藥物中的葛根，其步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的混合 溶劑25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解后，加在中性氧化鋁柱 上，先用無水乙醇25ml洗脫，棄去洗脫液，繼以50%乙醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?加乙醇Iml使溶解，制得供試品溶液；(b)對照品溶液制備取葛根素對照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，制得對照品 溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VIB薄層色譜法，吸取供試品溶液和對 照藥材溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水=15 5 0.5 為展開劑，展開，取出，晾干，在氨蒸汽中熏1分鐘，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于所洗的定性檢測 包括利用薄層色譜法鑒別該藥物中的天麻，其步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加入乙酸乙酯甲醇=4 1的混合 溶劑25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解后，加在中性氧化鋁柱 上，先用無水乙醇25ml洗脫，棄去洗脫液，繼以50%乙醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?加乙醇Iml使溶解，制得供試品溶液；(b)對照品溶液制備取天麻素對照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，制得對照品 溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VIB薄層色譜法，吸取供試品溶液 和對照藥材溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸= 6:2: 0. 15為展開劑，展開兩次，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，在105°C加熱至 斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于所說的定性檢測 包括利用薄層色譜法鑒別該藥物中的黃芪，其步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，研細(xì)，加70%乙醇40ml。超聲處理30分 鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)影痹囈篒Oml使溶解，用經(jīng)氨水飽和過的正丁醇萃取3次，每次 20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，回收正丁醇液，殘?jiān)蛹状?乙酸乙酯 為1 1的混合液5ml使溶解，加在中性氧化鋁柱上，用甲醇-乙酸乙酯為1 1的混合液 35ml洗脫，棄去洗脫液，繼以40%乙醇40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶 解，制得供試品溶液；(b)對照品溶液制備取黃芪甲苷對照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照 品溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VIB薄層色譜法，吸取供試品溶液 和對照藥材溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸為 6:2: 0. 15的混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于所說的定性檢測 包括利用薄層色譜法鑒別該藥物中的牛膝，其步驟為(a)供試品溶液制備取舒筋通絡(luò)顆粒5g，加70%乙醇40ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，用三氯甲烷20ml振搖提取，棄去三氯甲烷層，水層用水飽 和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇飽和的水20ml洗滌，棄 去水洗滌液，取正丁醇液適當(dāng)濃縮后，加入5g中性氧化鋁，拌勻，揮盡溶劑，置玻璃柱上，用 乙酸乙酯-乙醇為4 1的混合溶液40ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶 解，制得供試品溶液；(b)對照藥材溶液制備取牛膝對照藥材lg，按供試品溶液制備方法處理，制得對照藥 材溶液；(c)鑒別試驗(yàn)按照2005版中國藥典一部附錄VIB薄層色譜法，吸取供試品溶液和對 照藥材溶液各ΙΟμΙ，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇為4 1的混合液 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以對二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液，在105°C加熱至斑 點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；其中對二甲氨基苯甲醛乙酸磷酸混合溶液的制備方法為取對二甲氨基苯甲醛 0. 25g，溶于乙酸50ml、85%磷酸溶液5g和水20ml的混合溶液中，混勻。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種舒筋通絡(luò)顆粒的質(zhì)量控制方法，包括定性、定量檢測。其質(zhì)量控制的關(guān)鍵點(diǎn)是利用高效液相色譜法對該顆粒中的柚皮苷的含量進(jìn)行定量檢測。每袋舒筋通絡(luò)顆粒以柚皮苷計(jì)，不得少于12.0mg。本發(fā)明方法精確度高、重復(fù)性好，穩(wěn)定性強(qiáng)?？捎糜跍?zhǔn)確測定舒筋通絡(luò)顆粒中的柚皮苷含量。
文檔編號(hào)A61K36/8988GK101926937SQ20091007452
公開日2010年12月29日 申請日期2009年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月23日
發(fā)明者盧樹杰, 姜海, 張綱, 甄蘭敏, 陳鐘 申請人:神威藥業(yè)有限公司