專利名稱：油包油-油包油-油包水制備微球的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種制藥技術(shù)領(lǐng)域的制劑制備方法，尤其是一種油包油-油包油-油包水(W/O/O/O)的方法。

背景技術(shù)：
微球在醫(yī)藥和其它領(lǐng)域如農(nóng)業(yè)等有著廣泛的應(yīng)用。如在醫(yī)藥領(lǐng)域有藥物緩釋微球，動(dòng)脈栓塞微球等劑型；在農(nóng)業(yè)同樣有給牲畜用藥的微球劑型。對(duì)于水溶性的藥物用諸如W/O、W/O/W、W/O/O等微球的制備方法往往載藥量不高，容易突釋。尤其是隨著基因重組技術(shù)用于治療蛋白、多肽類藥物的表達(dá)和生產(chǎn)的20多年以來，到目前為止，已有30多個(gè)蛋白多肽類藥物藥物產(chǎn)品投入臨床使用，近200個(gè)在審批和研發(fā)過程中，涌現(xiàn)出一批諸如安進(jìn)(Amgen)、基因技術(shù)(Genentech)等一批新的大型醫(yī)藥公司。相對(duì)于蛋白大分子藥物本身的快速發(fā)展，其劑型技術(shù)進(jìn)展緩慢。一方面，蛋白多肽類藥物口服不吸收、體內(nèi)半衰期短，需要注射給藥；另一方面，許多何爾蒙、細(xì)胞因子類的蛋白多肽類藥物治療周期長(zhǎng)，長(zhǎng)期而頻繁地注射成為必須，也影響患者順應(yīng)性的主要原因。緩釋蛋白多肽類藥物的劑型的研發(fā)，由于在制備微粒過程導(dǎo)致活性的損失諸如W/O/W法等。發(fā)展制備具有活性保護(hù)的蛋白微粒勢(shì)在必行。而葡聚糖和PEG是常用來蛋白藥物的凍干保護(hù)劑和分離純化蛋白的試劑。Hennink利用修飾的葡聚糖制備蛋白緩釋微球的報(bào)道，但是作者用到強(qiáng)氧化劑如過硫酸鉀、過硫酸銨等，及聚合物引發(fā)劑使葡聚糖分子發(fā)生交聯(lián)，這些難免不與蛋白發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致蛋白的失活或增加免疫原性。到目前還未見有W/O/O/O制備微球方法的報(bào)道。DNA、RNA及小干擾RNA，還有治療細(xì)胞物質(zhì)如胰島細(xì)胞及干細(xì)胞等治療物質(zhì)的微囊化，都可以通過此法提高包封率及治療效果。
經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)的檢索發(fā)現(xiàn)，[O’Donnell，P.B.，and McGinity，J.W.，Influece of processing on the stability and release prosperities ofbiodegradable microspheres containing thioridazine hydrochloride，European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics，1998，4583-94]，(O’Donnell，P.B.，and McGinity，J.W.，制備過程對(duì)鹽酸甲硫噠嗪生物可降解微球的鹽酸甲硫噠嗪的穩(wěn)定性和釋放的影響，歐洲生物藥劑和藥劑學(xué)雜志，1998，4583—94)。O’Donnell，P.B.等人在文獻(xiàn)報(bào)道了W/O/W和W/O/O復(fù)乳法制備微球，同時(shí)在文獻(xiàn)也出現(xiàn)W/O/O/O這樣的字樣，但是仔細(xì)閱讀發(fā)現(xiàn)這是編輯打錯(cuò)或筆誤導(dǎo)致的在該文中出現(xiàn)W/O/O/O，因?yàn)樵撐墨I(xiàn)只報(bào)道了這種常見W/O/W和W/O/O復(fù)乳法。該文獻(xiàn)報(bào)道了W/O/W法藥溶解在0.5ml蒸餾水中形成水相(W)。0.8g PLGA溶解在8ml的二氯甲烷中形成油相(O)。這兩個(gè)溶液混和并用乳勻機(jī)乳化，使之形成初乳，然后把初乳添加到80ml含2％聚乙烯醇的水溶液中(W)，并攪拌3小時(shí)固化微球。W/O/O復(fù)乳法藥的水溶液分散在PLGA的乙腈溶液中形成W/O的初乳，然后把形成的初乳再再0.5％的司盤80并攪拌固化微球，根本在該文獻(xiàn)沒有出現(xiàn)第三個(gè)油相。不過這兩種方法都存在所包裹的藥物容易突釋，包封率不高，且存在不完全釋放。對(duì)于文獻(xiàn)報(bào)道的W/O/O法還存在對(duì)環(huán)境的污染等缺點(diǎn)，本發(fā)明了采用幾種親水性的油可以用來制備微球，且可以克服上述缺點(diǎn)的方法(W/O/O/O)。
發(fā)明的內(nèi)容 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種油包油—油包水制備微球的方法。使其制備的微球表面光滑圓整，均勻度好，溶液規(guī)整無粘連?？梢源蟠筇岣邔?duì)水溶性好的物質(zhì)的在微球中等的包封率。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，本發(fā)明將含有水溶性物質(zhì)的水溶液添加到制備微球的材料有機(jī)溶劑中形成油包水，然后再把它添加到另一有機(jī)相形成油包油，最后把它們滴加到水相中固化，然后凍干收集微球。
本發(fā)明具體包括以下步驟 ①將水溶性的物質(zhì)或添加各種保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)形成水相； ②將微囊材料溶于有機(jī)溶劑中形成油相—1； ③將完成步驟①的溶液滴加到②的油相—1，并攪拌使之形成均勻的乳液； ④將完成步驟③的乳液滴加到另一油相(油相—2)，并攪拌使之形成微球； ⑤將完成步驟④的溶液滴加到另一油相—3中并攪拌，使微球固化并離心收集洗滌凍干得微球，所述微球含有藥物、微囊材料、藥用輔料，它們重量百分比含量為藥物為0.01-50％、微囊材料為20-80％、藥用輔料為0-10％。
所述的水溶性的物質(zhì)為水溶性的藥物指蛋白多肽類藥物、DNA、RNA、等基因物質(zhì)、抗體、疫苗、病毒和脂質(zhì)體細(xì)胞、及化學(xué)試劑如各種水溶性的染料、或熒光物質(zhì)。
所述的水溶性的物質(zhì)，其重量百分比濃度為0.02％-50％(w/w)之間；以1％-30％(w/w)為佳。
所述的藥用輔料為保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)。
所述的保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)為多糖類物質(zhì)、多羥基類化合物、小糖類物質(zhì)、氨基酸類物質(zhì)、或無機(jī)鹽類物質(zhì)。
所述的多糖類物質(zhì)為葡聚糖、海藻酸鈉、殼聚糖、淀粉、纖維素、或環(huán)糊精物質(zhì)； 所述的多羥基類化合物為聚乙二醇、聚乙烯醇、聚環(huán)氧乙烷、或聚吡咯烷酮； 所述的小糖類物質(zhì)為蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、或乳糖。
所述的無機(jī)鹽類物質(zhì)為鋅鹽、鈣鹽、銅鹽、鎂鹽、或鉬鹽。
所述的氨基酸類物質(zhì)為甘氨酸、賴氨酸、或組氨酸。
所述的保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)的重量百分比濃度為0％-50％(w/w)；以1％-20％(w/w)為佳。
所述的油相—1為二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、或它們混合物微囊材料的有機(jī)溶液。
所述的微囊材料為聚乳酸(PLA)、聚乳酸-聚羥基乙酸(PLGA)、PLA和PLGA的任意組合、硅像膠、聚四氟乙烯、聚氯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯、卡波母、透明質(zhì)酸、明膠、膠原蛋白、聚氰基丙烯酸酯、聚膦腈、聚磷酸酯、纖維蛋白原、纖維蛋白、聚乙二醇-聚乳酸(PLA-PEG)、聚乙二醇-聚羥基乙酸(PLGA-PEG)、聚羥基乙酸-聚乙二醇-聚羥基乙酸(PLGA-PEG-PLGA)、聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、聚乳酸和聚乳酸-聚羥基乙酸的任意組合、聚碳酸酯、卡波母、透明質(zhì)酸、明膠、膠原蛋白、聚乙交酯、聚乙二醇—聚己內(nèi)酯(PEG-PCL)、聚己內(nèi)酯聚—乙二醇—聚己內(nèi)酯(PCL-PEG-PCL)、或聚己內(nèi)酯(PCL)； 所述的微囊材料占整個(gè)微球的的百分含量為20—80％(w/w)，其中以50—80％(w/w)為佳； 所述的油相—2為乙醇、乙二醇、甘油、丙二醇及小分子的聚乙二醇或添加各種表面活性劑物質(zhì)，及它們的混合物；以乙二醇和甘油及丙二醇的混合物為佳； 所述的油相—3為乙醇、乙醇和丙二醇的任意比例混和物； 所述的表面活性劑為聚乙烯醇(PVA)的濃度為0.5—10％(w/w)或含0.5—10％(w/w)氯化鈉等鹽溶液、聚乙二醇(PEG)的濃度為0.5—20％(w/w)或含0.5—10％(w/w)氯化鈉等鹽溶液、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)濃度為0.5—20％(w/w)或含0.5—10％(w/w)氯化鈉等鹽溶液、泊洛沙姆(poloxmer)濃度為0.5—20％(w/w)或含0.5—10％(w/w)氯化鈉等鹽溶液、聚三梨醇的濃度為0.5—20％(w/w)或含0.5—10％(w/w)氯化鈉等鹽溶液、或乙基纖維素(EC)濃度為0.5—20％(w/w)或含0.5—10％(w/w)氯化鈉等鹽溶液； 所述微球的粒徑為0.1-500μm，以1-100μm為佳； 本發(fā)明所得到的微球，可以用于其所擔(dān)載的治療物質(zhì)的緩釋微球劑型、植入劑型或吸入劑型； 所述的吸入劑型，為載有治療物質(zhì)的多糖本身，其粒徑為1μm-5μm。
本發(fā)明先分別將水溶性的物質(zhì)或水溶性的物質(zhì)和保護(hù)水溶性活性的物質(zhì)溶解于水中形成溶液，再把它和油相—1相混形成均勻的乳液。然后將該乳液滴加到另一油相(油相—2)丙攪拌形成微球，再把微球滴加到水相中固化，固化后收集微球凍干。
本發(fā)明可以根據(jù)實(shí)際需要制備各種粒徑(1μm-500μm)的微球方法。采用本發(fā)明方法制備的微粒表面光滑圓整，溶液規(guī)整無粘連，粒徑可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)控從1μm到500μm。
本發(fā)明選擇了合適的兩個(gè)油相，可以提高水溶性的物質(zhì)的包封率，及提高水溶性的物質(zhì)的活性。可以避免這些對(duì)藥物的治療的作用影響，尤其是那些物理化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的，如生物大分子藥物蛋白藥物、多肽等。微粒的表面光滑圓整，溶液規(guī)整無粘連，粒徑可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)控從1μm到500μm，徑距分布較窄，其凍干粉劑為白色細(xì)膩，疏松，不塌陷，不粘連，再分散性良好。可以運(yùn)用到各種藥物緩釋微球的制備及疫苗的佐劑。

具體實(shí)施例方式 下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說明本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。
實(shí)施例一載有水溶性的物質(zhì)溶液PLGA微球的制備 (1)制備水溶性的物質(zhì)溶液，把水溶性的物質(zhì)直接溶解于水中或通過添加輔料使藥物溶解于水中； 本實(shí)施例中，采用的水溶性的物質(zhì)是腫瘤化療類藥物(腫瘤化療藥物選自阿霉素、環(huán)磷酰胺、更生霉素、博萊霉素、柔紅霉素、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、司莫司汀、順鉑、依托泊苷、喜樹堿及其衍生物、苯芥膽甾醇、紫杉醇及其衍生物、多西紫杉醇及其衍生物、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、它莫西芬、依托泊苷、哌泊舒凡、環(huán)磷酰胺或氟他胺及其衍生物；緩釋微球可載有上述藥物中的一種或幾種；)或抗生素類藥物(抗生素類藥物選自環(huán)孢素、左氧氟沙星、氧氟沙星、或鹽酸依匹斯??；緩釋微球可載有上述藥物中的一種或幾種)。
本實(shí)施例中，采用的保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)是葡聚糖、海藻酸鈉、殼聚糖、淀粉、纖維素、環(huán)糊精、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚環(huán)氧乙烷、聚吡咯烷酮、蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、乳糖、甘氨酸、賴氨酸、鋅鹽、鈣鹽、銅鹽、鎂鹽、鉬鹽、或組氨酸上述藥物中的一種或幾種； 本實(shí)施例中，具體配比為 (2)按照水溶性物質(zhì)的溶液和PLGA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； (3)把步驟(1)得乳液滴加到油相—2并攪拌、漩渦或超聲0.1—5分鐘形成復(fù)乳； (4)把步驟(2)的復(fù)乳滴加到200ml的乙醇中并攪拌2—4小時(shí)； (5)把步驟(3)得到的離心收集微球，并用水洗滌3—5次，凍干后得到微球。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例二載有水溶性的物質(zhì)溶液PLGA微球的制備 (1)制備水溶性的物質(zhì)溶液，把水溶性的物質(zhì)溶液直接溶解于水中或通過添加保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)溶解于水中； 本實(shí)施例中，采用的水溶性的物質(zhì)是促紅細(xì)胞生成素(EPO)、重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、疫苗、干擾素(INF)、生長(zhǎng)激素(GH)、胰島素(Insulin)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)、血小板生長(zhǎng)因子(PDGF)、內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(ECGF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、骨衍生性生長(zhǎng)因子(BDGF)、骨形成蛋白(BMP)、組織多肽抗原(TPA)、抗體(antibody)、凝血因子VIII(VIII)、IX遺傳因子、反義核苷酸(anti-RNA)、小分子RNA(RNAi)、SiRNA、基因(DNA)；緩釋微球可載有上述藥物中的一種或幾種。
本實(shí)施例中，采用的保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)是葡聚糖、海藻酸鈉、殼聚糖、淀粉、纖維素、環(huán)糊精、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚環(huán)氧乙烷、聚吡咯烷酮、蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、乳糖、甘氨酸、賴氨酸、或組氨酸上述藥物中的一種或幾種； 具體配比為 (2)按照水溶性的物質(zhì)和PLGA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例三載有水溶性的物質(zhì)溶液PLA微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例四載有水溶性的物質(zhì)溶液PLA微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例五載有水溶性的物質(zhì)溶液PGA微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PGA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例六載有水溶性的物質(zhì)溶液PGA微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PGA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例七載有水溶性的物質(zhì)溶液聚己內(nèi)酯微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和聚己內(nèi)酯的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例八載有水溶性的物質(zhì)溶液聚己內(nèi)酯微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和聚己內(nèi)酯的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例九載有水溶性的物質(zhì)溶液PLA—PEG微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLA—PEG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例十載有水溶性的物質(zhì)溶液PLA—PEG微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLA—PEG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例十一載有水溶性的物質(zhì)溶液PLGA—PEG微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLGA—PEG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例十二載有水溶性的物質(zhì)溶液PLGA—PEG微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLGA—PEG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例十三載有水溶性的物質(zhì)溶液PLA—PEG—PLA微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLA—PFG—PLA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、1∶10等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例十四載有水溶性的物質(zhì)溶液PLA—PEG—PLA微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PEG—PLA—PEG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例十五載有水溶性的物質(zhì)溶液PLGA—PEG—PLGA微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLGA—PEG—PLGA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例十六載有水溶性的物質(zhì)溶液PLGA—PFG—PLGA微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PLGA—PEG—PLGA的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例十七載有水溶性的物質(zhì)溶液PEG—PLA—PEG微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PFG—PLA—PEG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例十八載有水溶性的物質(zhì)溶液PEG—PLA—PEG微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PEG—PLA—PEG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例十九載有水溶性的物質(zhì)溶液PEG—PLGA—PEG微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PEG—PLGA—PFG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例二十載有水溶性的物質(zhì)溶液PEG—PLGA—PEG微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和PEG—PLGA—PEG的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例二十一載有水溶性的物質(zhì)溶液透明質(zhì)酸微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和透明質(zhì)酸的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例二十二載有水溶性的物質(zhì)溶液透明質(zhì)酸微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和透明質(zhì)酸的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
實(shí)施例二十三載有水溶性的物質(zhì)溶液透明質(zhì)酸微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例一相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和明膠的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液重量比為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包固體(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放。
實(shí)施例二十四載有水溶性的物質(zhì)溶液明膠微球的制備 步驟(1)與實(shí)施例二相同。
(2)按照水溶性的物質(zhì)溶液和明膠的二氯甲烷、乙腈或乙酸乙酯溶液為11、12、13、14、15、16、17、18、19、110等比例攪拌、漩渦或超聲1—5分鐘形成均勻得混懸液即油包水(W/O1)乳液； 步驟(3)、(4)、(5)與實(shí)施例一相同。
本實(shí)施例得到的微球，其具體的組分配比如下表 這種方法制備的微球可以用于需要頻繁注射給藥、長(zhǎng)期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到70％以上，突釋小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級(jí)釋放。
權(quán)利要求
1、一種油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征在于，包括以下步驟
①將水溶性的物質(zhì)或添加各種保護(hù)該水溶性物質(zhì)活性的物質(zhì)形成水相；
②將微囊材料溶于有機(jī)溶劑中形成油相—1；
③將完成步驟①的溶液滴加到②的油相—1，并攪拌使之形成均勻的乳液；
④將完成步驟③的乳液滴加到另一油相—2，并攪拌使之形成微球；
⑤將完成步驟④的溶液滴加到另一油相—3中并攪拌，使微球固化并離心收集洗滌凍干得微球，所述微球含有藥物、微囊材料、保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)，它們重量百分比含量為藥物為0.01-50％、微囊材料為20-80％、藥用輔料為0-10％。
2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的水溶性的物質(zhì)為水溶性的藥物指蛋白多肽類藥物、DNA、RNA、抗體、疫苗、病毒和脂質(zhì)體細(xì)胞或化學(xué)試劑，其重量百分比濃度為0.02％-50％。
3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的水溶性的物質(zhì)，其重量百分比濃度為1％-30％。
4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)為多糖類物質(zhì)、多羥基類化合物、小糖類物質(zhì)、氨基酸類物質(zhì)、或無機(jī)鹽類物質(zhì)，保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)的重量百分比濃度為0％-50％，其中
所述的多糖類物質(zhì)為葡聚糖、海藻酸鈉、殼聚糖、淀粉、纖維素、或環(huán)糊精物質(zhì)；
所述的多羥基類化合物為聚乙二醇、聚乙烯醇、聚環(huán)氧乙烷、或聚吡咯烷酮；
所述的小糖類物質(zhì)為蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、或乳糖；
所述的無機(jī)鹽類物質(zhì)為鋅鹽、鈣鹽、銅鹽、鎂鹽、或鉬鹽；
所述的氨基酸類物質(zhì)為甘氨酸、賴氨酸、或組氨酸。
5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的保護(hù)該水溶性物質(zhì)的物質(zhì)的重量百分比濃度為1％-20％。
6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的油相—1為二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、或它們混合物微囊材料的有機(jī)溶液。
7、根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的微囊材料為聚乳酸、聚乳酸-聚羥基乙酸、聚乳酸和聚乳酸-聚羥基乙酸的組合、硅像膠、聚四氟乙烯、聚氯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯、卡波母、透明質(zhì)酸、明膠、膠原蛋白、聚氰基丙烯酸酯、聚膦腈、聚磷酸酯、纖維蛋白原、纖維蛋白、聚乙二醇-聚乳酸、聚乙二醇-聚羥基乙酸、聚羥基乙酸-聚乙二醇-聚羥基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸、聚乙交酯、聚乙二醇—聚己內(nèi)酯、聚己內(nèi)酯聚—乙二醇—聚己內(nèi)酯、或聚己內(nèi)酯中一種。
8、根據(jù)權(quán)利要求1所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的微囊材料占整個(gè)微球的的重量百分含量為50—80％。
9、根據(jù)權(quán)利要求1所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的油相—2為乙醇、乙二醇、甘油、丙二醇及小分子的聚乙二醇或添加各種表面活性劑物質(zhì)，及它們的混合物，其中
所述的表面活性劑為聚乙烯醇的重量濃度為0.5—10％或含0.5—10％重量氯化鈉鹽溶液、聚乙二醇的重量濃度為0.5—20％或含0.5—10％重量氯化鈉鹽溶液、聚乙烯吡咯烷酮重量濃度為0.5—20％或含0.5—10％重量氯化鈉鹽溶液、泊洛沙姆重量濃度為0.5—20％或含0.5—10％重量氯化鈉鹽溶液、聚三梨醇重量濃度為0.5—20％或含0.5—10％重量氯化鈉鹽溶液、或乙基纖維素重量濃度為0.5—20％(w/w)或含0.5—10％重量氯化鈉鹽溶液。
10、根據(jù)權(quán)利要求1所述的油包油—油包油—油包水制備微球的方法，其特征是，所述的油相—3為乙醇、乙醇和丙二醇的任意比例混和物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制藥技術(shù)領(lǐng)域的油包油-油包油-油包水制備微球的方法，步驟①將水溶性的物質(zhì)或添加各種保護(hù)該水溶性物質(zhì)活性的物質(zhì)形成水相；②將微囊材料溶于有機(jī)溶劑中形成油相-1；③將步驟①的溶液滴加到②的油相-1，并攪拌使之形成均勻的乳液；④將步驟③的乳液滴加到另一油相-2，并攪拌使之形成微球；⑤將步驟④的溶液滴加到另一油相-3中并攪拌，使微球固化并離心收集洗滌凍干得微球，所述微球重量百分比為藥物為0.01-50％、微囊材料為20-80％、藥用輔料為0-10％。本發(fā)明制備的微球表面光滑圓整，均勻度好，微球規(guī)整無粘連，粒徑的大小可調(diào)，包封率高，突釋和不完全釋放小。
文檔編號(hào)A61K9/19GK101474160SQ20091004500
公開日2009年7月8日 申請(qǐng)日期2009年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月8日
發(fā)明者拓 金, 袁偉恩, 飛 吳, 睿 劉, 黃碧蘭 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué), 上海納米技術(shù)及應(yīng)用國(guó)家工程研究中心有限公司