專利名稱：用于腹主動(dòng)脈瘤治療的三唑并[4，5-d]嘧啶化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及某些P2Y12受體(也稱為P2PPZYadp或P2TAe)拮抗劑在腹主動(dòng)脈瘤治療 或預(yù)防中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腹主動(dòng)脈瘤(AAA)是與年齡和性別高度相關(guān)的動(dòng)脈粥樣硬化血栓形成性疾病的 常見(jiàn)形式(BengtssonH等(1996),Ann N Y Acad Sci 800 1-24)。AAA病理學(xué)上涉及細(xì)胞外 基質(zhì)蛋白質(zhì)水解(Michel JB(2001), Arterioscler Thromb VaseBiol 21 1389-1392)、平 滑肌細(xì)胞(SMC)消失(Michel JB(2003) ,ArteriosclerThromb Vase Biol 23:2146-2154)、 炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)以及細(xì)胞定殖和愈合的缺乏(Fontaine V等(2004)，Am J Pathol 164 2077-2087)。最近表明附壁血栓的動(dòng)態(tài)生物學(xué)，包括血管腔纖維素生成(Touat Z等 (2006)，Am J Pathol 168:1022-1030)以及近腔纖維蛋白溶解(Carrell TW 等(2006)， Vascular 14 9-16 ；Fontaine V 等(2002)，Am J Pathol 161 :1701_1710)在 AAA 發(fā)展中 起到十分重要的作用。在這一上下文中，活化的血小板聚集物和多形核白細(xì)胞(PMN)募集 反應(yīng)之間的相互作用(Sarda-Mantel L 等(2006)，Arterioscler Thromb Vasc Biol 26: 2153-2159 ；Touat等，2006)在細(xì)胞愈合的缺乏中起到重要的作用(Fontaine V等(2004)， AmJ Pathol 164 :2077_2087)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)腺苷5' -二磷酸酯(ADP)作為關(guān)鍵的血栓形成介質(zhì)在起作用。ADP-誘 導(dǎo)的血小板聚集是由位于血小板膜的P2Y12受體亞型所介導(dǎo)的。P2Y12受體(別名P2T、 Ρ2Υ.或Ρ2Τα。)是最初參與介導(dǎo)血小板活化/聚集的G-蛋白偶聯(lián)受體。這一受體的藥理 學(xué)特性已經(jīng)，例如，在 Humphries 等(1994) ,Br. J. Pharmacology, 113，1057-1063，和 Fagura 等(1998)，Br. J. Pharmacology, 124，157-164的參考文獻(xiàn)中被描述。已經(jīng)顯示這一受體的 拮抗劑相對(duì)于其它抗血栓藥提供了顯著改進(jìn)(參見(jiàn)J. Med. Chem. (1999)42,213)。國(guó)際專利申請(qǐng)WO 99/05143概括地公開了一系列具有作為P2t (別名P2Y12、PZYadp 或P2Tac)拮抗劑活性的三唑并[4，5-d]嘧啶化合物。最近，新的一類直接(非前藥)P2t受體 拮抗劑已經(jīng)被描述，它相對(duì)于其它抗血栓藥提供了顯著的改進(jìn)。國(guó)際專利申請(qǐng)WO 00/34283 公開了包括式(I )化合物的新“直接”P2t受體拮抗劑。三唑并(4，5-d)嘧啶化合物的結(jié) 晶以及非結(jié)晶形式在WO 01/92262中被公開。附圖簡(jiǎn)述附

圖1.通過(guò)化合物(A)治療對(duì)動(dòng)脈瘤擴(kuò)張的預(yù)防。在動(dòng)脈瘤誘導(dǎo)后第10天(a) 和第42天(b)外部動(dòng)脈瘤直徑的測(cè)量。在對(duì)照組的(空心正方形)和化合物(A)-治療10 天后(a)的(實(shí)心正方形)大鼠之間的外徑是類似的，但是在化合物㈧組治療42天后 (b)是顯著降低的。(c)這兩組的動(dòng)脈瘤直徑的增加在第10天時(shí)是類似的但是在第42天 時(shí)在化合物(A)治療的鼠(實(shí)心柱)中有顯著減少。實(shí)際上，在介于第10和42天之間時(shí) 沒(méi)有觀察到化合物(A)治療的小鼠動(dòng)脈瘤直徑的增加。P < 0. 001。附圖2.通過(guò)化合物(A)治療對(duì)附壁血栓發(fā)展的抑制。(a)在第42天時(shí)來(lái)自對(duì)照 組(左)和化合物(A)治療的鼠(右)的典型動(dòng)脈瘤的picro天狼星紅染色。與化合物(A)-處理的鼠相比，來(lái)自對(duì)照組的動(dòng)脈瘤的主動(dòng)脈直徑和血栓(T)面積更大。值得注意的 是在血栓中膠原的沉積(紅色染色)僅僅在化合物(A)組中觀察到。(b)介于第10和42 天之間時(shí)在這兩個(gè)組的鼠中血栓面積/壁面積都有增加，但是通過(guò)化合物(A)治療(實(shí)心 柱)在第10和42天時(shí)都有顯著減少。(c)組內(nèi)分析表明在第42天的更大動(dòng)脈瘤直徑與 更大的血栓面積相關(guān)(對(duì)照組(空心環(huán))和化合物(A)-治療的鼠(實(shí)心環(huán))分別為R2 = 0. 13和R2 = 0. 40，P < 0. 05)。(d)第42天時(shí)來(lái)自對(duì)照組(左)和化合物㈧治療的鼠 (右)的動(dòng)脈瘤附壁血栓中的⑶41的免疫染色(整聯(lián)蛋白α Iib，血小板標(biāo)記物)。L 主動(dòng) 脈腔。定量染色表明用化合物(A)治療42天，相比于在對(duì)照組中見(jiàn)到的，顯著減少了在附 壁血栓中CD41陽(yáng)性區(qū)的相對(duì)大小。原始放大倍數(shù)，X200。*，P < 0. 05 ；**，P < 0. 01。附圖3.通過(guò)化合物(A)治療對(duì)炎癥性浸潤(rùn)的抑制。(a)在第42天時(shí)來(lái)自對(duì)照組 (左)和化合物㈧治療的鼠(右)的在動(dòng)脈瘤的附壁血栓中PMN的免疫染色。在第10天 (中間格)和第42天(更低格)時(shí)附壁血栓和壁中PMN浸潤(rùn)的定量。在10和42天后，在 對(duì)照組動(dòng)脈瘤(空心柱)的附壁血栓中大部分發(fā)現(xiàn)PMN。化合物(A)-治療(實(shí)心柱)在兩 個(gè)時(shí)間都抑制PMN浸潤(rùn)入血栓中。(b)第42天時(shí)來(lái)自對(duì)照組(左)和化合物(A)治療的 鼠(右)的動(dòng)脈瘤附壁血栓中的巨噬細(xì)胞免疫染色。在第10天(中間格)和第42天(更 低格)時(shí)附壁血栓和壁中的定量巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。在附壁血栓中以及在對(duì)照組動(dòng)脈瘤壁中發(fā) 現(xiàn)巨噬細(xì)胞(空心柱)。42天后，在壁中比在血栓中存在更多巨噬細(xì)胞?；衔?A)治療 (實(shí)心柱)在兩個(gè)時(shí)間都抑制了血栓中巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)?；衔?A)治療10或者42天后 壁中巨噬細(xì)胞含量的減少?zèng)]有達(dá)到統(tǒng)計(jì)顯著性。L 主動(dòng)脈腔。原始放大倍數(shù)，X200。*,P < 0. 05 ；**，P < 0. 01。附圖4.利用化合物㈧治療減少的MMP-9表達(dá)。(a)在第42天時(shí)來(lái)自對(duì)照組 (左)和化合物(A)治療的鼠(右)的在動(dòng)脈瘤附壁血栓中的MMP-9免疫染色。在第42天 時(shí)MMP-9染色的定量表明在血栓中的被MMP-9染色所占據(jù)的相對(duì)于壁面積的面積比在對(duì)照 組動(dòng)脈瘤(空心柱)壁中的更大?；衔?A)治療在血栓和壁中都顯著減少M(fèi)MP-9陽(yáng)性面 積的大小(實(shí)心柱)。L 主動(dòng)脈腔。原始放大倍數(shù)，X200。**，P< 0.001廣，P < 0.0001。 (b)當(dāng)所有小鼠被考慮時(shí)，第42天在血栓MMP-9陽(yáng)性面積和總血栓面積大小之間有正相關(guān) 關(guān)系(對(duì)照組，空心環(huán)；化合物(A)處理組，實(shí)心環(huán))，R2 = 0. 79，P < 0. 0001)。附圖5.利用化合物(A)治療進(jìn)行附壁血栓的SMC定殖和在動(dòng)脈瘤壁中彈性薄層 的保存。(a)在第42天時(shí)來(lái)自對(duì)照組(左)和化合物㈧治療的鼠(右)的動(dòng)脈瘤的地衣 紅染色。箭頭標(biāo)明彈性薄層。定量的彈性薄層面積表明化合物(A)治療(實(shí)心柱)在第10 和42天時(shí)的有益效果。(b)在第42天時(shí)來(lái)自對(duì)照組(左)和化合物(A)治療的鼠(右) 的動(dòng)脈瘤附壁血栓中的SMC免疫染色。箭頭標(biāo)明血栓中的SMC。介于第10天和42天之間 在第10天(中間格)和第42天(更低格)在兩組中附壁血栓和壁中的SMC密度都有增加。 化合物(A)治療(實(shí)心柱)相比于對(duì)照組(空心柱)在第42天后改善了由SMC引起的血 栓定殖，然而沒(méi)有觀察到化合物(A)在壁中的效果。L 內(nèi)腔；M 介質(zhì)；A 外膜。原始放大倍 數(shù)，X 100。**，P < 0. 001。
發(fā)明概要本發(fā)明涉及式(I )化合物 上述化合物(A)按慣例命名為{lS_[la，2α，3β (IS*，2R*)，5 β ]} _3_ (7_ {[2_ (3， 其中R 為 CH2OH 或者 0 (CH2) 20Η ；R1為任選被三個(gè)鹵素原子取代的C3_4烷基；R2為苯基或者3，4-二氟苯基；或其藥學(xué)上可接受的衍生物，用于治療或預(yù)防腹主 動(dòng)脈瘤的用途。式(I )化合物藥學(xué)上可接受的衍生物包括鹽(例如藥學(xué)上可接受的無(wú)毒有機(jī)或 無(wú)機(jī)酸加成鹽，如鹽酸、溴酸、硝酸、硫酸或醋酸的鹽)、溶劑化物和鹽的溶劑化物。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是用于治療或預(yù)防腹主動(dòng)脈瘤的式(I )化合物。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是式(I )化合物用于制備治療或預(yù)防腹主動(dòng)脈瘤的藥物 的用途。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是用于腹主動(dòng)脈瘤治療或預(yù)防的方法，其中藥學(xué)或藥理學(xué) 上有效量的式(I)化合物被給予需要所述治療或預(yù)防的受試者。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是用于腹主動(dòng)脈瘤治療或預(yù)防的方法，其中式(I )化 合物被給予需要所述治療或預(yù)防的受試者。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1為正丙基、3，3，3_三氟丙基或者正丁基。在一個(gè)實(shí)施方案 中，R2為3，4-二氟苯基。在一個(gè)實(shí)施方案中，式(I )化合物為化合物(A)4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5-(丙硫基)-3Η-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧 啶-3-基)-5-(2-羥乙氧基)環(huán)戊烷-1，2-二醇。給予式(I )化合物的合適制劑在現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)公知，并且包括那些從 W000/34283、W02008/024044和W02008/024045中所獲知的劑型。化合物(I )的藥物制 劑可以，并且實(shí)際上通常，含有各種其它現(xiàn)有技術(shù)公知的成分，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、粘性調(diào) 節(jié)劑、乳化劑或緩沖劑。因此化合物(I )的藥物劑型代表性地包含介于0.05至99% w范 圍總量的式(I )化合物(重量百分比)，例如介于0.10至70% w的范圍，或者介于0.10 至50% w的范圍，所有重量百分比是基于制劑總量。式(I )化合物的合適劑量可由執(zhí)業(yè)醫(yī)師或其它本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)決定，并將取 決于病情的嚴(yán)重程度，和將要被治療的人，以及被使用的化合物。在治療和/或預(yù)防治療的 哺乳動(dòng)物尤其人類患者中的活性化合物的合適劑量包括那些給出最多Ιθμπιο /L的平均 血漿濃度的劑量，例如在整個(gè)有關(guān)病癥的治療過(guò)程中給以0. 001至ΙΟμπιοΙ/L的范圍。無(wú) 論如何，醫(yī)生或者本領(lǐng)域技術(shù)人員將能決定最適于個(gè)人的實(shí)際劑量，其可能根據(jù)將被治療 的病情、以及年齡、重量、性別和將要被治療的個(gè)體病人的反應(yīng)所變化。上面提及的劑量是 對(duì)通常病例舉例說(shuō)明。當(dāng)然，也可以有更高或更低劑量范圍被優(yōu)選的個(gè)別例子，并且所述劑 量在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。為了避免疑問(wèn)，術(shù)語(yǔ)“治療”包括治療和/或預(yù)防治療。牛物學(xué)評(píng)價(jià)血小板聚集健康雄性路易鼠(Iffa Credo，里昂，法國(guó))接受單個(gè)口服劑量的化合物㈧ (10mg/kg體重)。在給藥之前和給予化合物(A)2、10和24小時(shí)后，來(lái)自兩只鼠的新鮮靜脈 血被抽取作為樣品并且在室溫于250g離心3分鐘。富含血小板的血漿如上所述被制備得 到(Eckly等，2001)。450-μ 1血小板混懸液以IlOOrpm進(jìn)行攪拌并且通過(guò)加入5 μ M的ADP 在500 μ 1終體積中進(jìn)行活化(Sigma，SaintQuentin-Fallavier，法國(guó))。通過(guò)在雙管道凝 集計(jì)(Chrono-Log，West Havertown, PA, USA)中的比濁法于室溫下測(cè)量聚集作用。聚集程 度通過(guò)測(cè)量基線上的曲線高度最大值來(lái)評(píng)估。AAA 模型通過(guò)在鼠主動(dòng)脈中移植十二烷基硫酸鈉脫細(xì)胞化的豚鼠主動(dòng)脈(異體基質(zhì))的 部分而誘導(dǎo)得到實(shí)驗(yàn)性主動(dòng)脈瘤(Allaire Ε.等(1994)，J Vasc Surg 19:446-456)。這 一 AAA模型以異種胞外基質(zhì)的免疫炎癥損傷為特征(Allaire E等(1997)，Surgery 122 73-81 ；Allaire E 等(1996)，Transplantation 62:794-803)。簡(jiǎn)單地，對(duì) 46 只雄性路易 鼠(250g)和46只豚鼠(280g) (Iffa Credo，里昂，法國(guó))根據(jù)歐盟所形成的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物看護(hù) 原則進(jìn)行飼養(yǎng)。通過(guò)戊巴比妥的腹膜內(nèi)注射使動(dòng)物麻醉(5mg/100g體重)。對(duì)豚鼠的腎下 主動(dòng)脈(1.5cm)抽取樣品并通過(guò)十二烷基硫酸鈉處理以脫細(xì)胞化從而獲得完整細(xì)胞外基 質(zhì)的血管，用10/0尼龍間斷縫合(異種移植)將其正位移植入路易鼠的大動(dòng)脈中(Allaire 等，1997 ；Allaire等，1996)。松開后馬上在雙目顯微鏡下于原位測(cè)量移植物的最初直徑。 在24個(gè)小時(shí)后，鼠被隨機(jī)指定到兩個(gè)相同的組，用化合物(A) (10mg/kg體重每天口服兩次) 或者稀釋的化合物(A) (1%羧甲纖維素/0.1%吐溫80在水中)處理10天(D10，各組η = 9)或者6周(D42，各組η = 14)。在處死的時(shí)候，鼠被深度麻醉，移植物直徑被再次測(cè)量，并且將主動(dòng)脈分割出去并固定在4%多聚甲醛中。主動(dòng)脈樣品被埋入石蠟中并以5μπι切片。組織學(xué)和免疫組織化學(xué)分析切片用picro天狼星紅染色從而使膠原和纖維蛋白可見(jiàn)，以及用地衣紅染色從 而使彈性蛋白可見(jiàn)。使用抗人α-肌動(dòng)蛋白(1 500稀釋，Dako，Trappes，法國(guó))、抗 CD68(巨噬細(xì)胞，1 1000 稀釋，Serotec，Cergy Saint-Christophe，法國(guó))、抗鼠多形 核白細(xì)胞(1 3000 稀釋，Cedarlane, Ontario，加拿大)、抗 CD41 (integrin α lib，血小 板，1 50 稀釋，Santa Cruz Biotechnologies)和抗 MMP-9 (1 50 稀釋，Calbiochem， Darmstadt，德國(guó))作為主要抗體和peroxidase Vector ABC試劑盒用于檢測(cè)來(lái)完成免疫組 織化學(xué)分析(Vector Labs, Burlingame, CA, USA)。使用在顯微鏡目鏡中的格子對(duì)細(xì)胞進(jìn) 行計(jì)數(shù)并且在相同的載玻片中的4個(gè)對(duì)稱的區(qū)域進(jìn)行平均化。由血栓、彈性纖維、AAA壁和 MMP-9-和⑶41-正染色所表示的面積大小通過(guò)使用Histolab軟件的形態(tài)測(cè)定分析來(lái)進(jìn)行 測(cè)量(Microvisionlnstruments，Evly，法國(guó))。血栓面積在天狼星紅載玻片上進(jìn)行測(cè)定。 在內(nèi)部血栓和外部壁中的正染色所占面積通過(guò)計(jì)算機(jī)程序的顏色檢測(cè)模式進(jìn)行定量化。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表示為平均值士S. D。直徑增加百分比計(jì)算如下(收集時(shí)的直徑_移植 時(shí)的直徑)X 100/移植時(shí)的直徑。使用非參數(shù)性曼_惠特尼U檢驗(yàn)在兩組之間進(jìn)行對(duì)比 (Statview, version 4.5)。在不同組中大直徑動(dòng)脈瘤的出現(xiàn)頻率通過(guò)卡方測(cè)驗(yàn)(X2test) 進(jìn)行分析。單回歸分析被用于對(duì)不同參數(shù)間的相互關(guān)系進(jìn)行測(cè)驗(yàn)。P <0. 05被認(rèn)為是顯著 的。結(jié)果動(dòng)脈廇直徑如由在移植10 天(204. 6士71. 2%，η = 9)禾口 42 天(359. 1士 113. 3%，η = 14) 后在未處理對(duì)照鼠中觀察到的體外動(dòng)脈瘤直徑增加所表示的那樣(附圖1)，脫細(xì)胞化的胞 外基質(zhì)異種移植物發(fā)育為動(dòng)脈瘤。同未治療鼠相比，化合物(A)治療10天沒(méi)有改變體外 動(dòng)脈瘤直徑(197. 3士52. 8%，η = 9)增加；這兩組之間的平均體外動(dòng)脈瘤直徑是類似的 (2. 22士0. 56mm對(duì)2. 22士0. 70mm，分別在化合物(A)治療和對(duì)照鼠中)(附圖la，c)。然 而，治療42天后，在化合物㈧治療組中的平均體外動(dòng)脈瘤直徑明顯更低(3. 61 士 1.46mm， η = 14對(duì)5. 21+/-1. 22mm, η = 14，分別在化合物㈧治療和對(duì)照鼠中)，并且在體外直徑 中的百分比增加顯著減少(附圖lb，c)。因此如第10天和第42天之間在對(duì)照小鼠中觀察 到主動(dòng)脈直徑百分比增加而在化合物(A)組卻減少的區(qū)別(附圖Ic)所表示的那樣，化合 物(A)治療因此可以預(yù)防動(dòng)脈瘤擴(kuò)大。此外，與化合物(A)治療組相比，對(duì)照組在第42天 (直徑> 4mm)更大動(dòng)脈瘤的發(fā)生率占優(yōu)勢(shì)(X2 = 11. 6，P < 0. 001)。附壁血栓形成如之前所述(Touat等，2006)，發(fā)育自脫細(xì)胞化的胞外基質(zhì)異種移植物的實(shí)驗(yàn)性 動(dòng)脈瘤以附壁血栓的存在為特征(附圖2a)。在對(duì)照組中，第10天的血栓面積/壁面積比表 示為0. 22士0. 14并且到第42天時(shí)增加至0. 78士0. 89 (附圖2b)。在第10天和第42天，用 化合物(A)進(jìn)行的治療都顯著減少血栓/壁面積(分別為0. 07士0. 05和0. 35士0. 44)(附 圖2b)。第42天在血栓面積的這一相對(duì)減少同血栓內(nèi)⑶41陽(yáng)性面積(integrin α IIb，血小 板標(biāo)記物)顯著減少相關(guān)(化合物(A)治療和對(duì)照組鼠分別為0. 13士0. 16和0. 68士 1.36，P = O. 005)(附圖2c)。最后，當(dāng)所有的鼠被考慮時(shí)在第42天血栓面積和動(dòng)脈瘤直徑之間 有顯著關(guān)聯(lián)(R2 = 0. 25，P = O. 0003)。組內(nèi)分析表明與對(duì)照組相比化合物(A)治療顯著 減少相互關(guān)系的斜率(化合物㈧s = 0. 17，R2=O. 40 ；對(duì)照s = 0. 30，R2 = 0. 13)(附圖 2c)，這提供了化合物(A)對(duì)血小板活化的抑制將限制實(shí)驗(yàn)性AAA進(jìn)展的證據(jù)。炎癥性浸潤(rùn)動(dòng)脈瘤增長(zhǎng)同涉及多形核白細(xì)胞(PMN)和巨噬細(xì)胞的炎癥性過(guò)程相關(guān)。這兩種炎 癥細(xì)胞都存在附壁血栓和動(dòng)脈瘤壁中(附圖3)。然而，PMN大部分被發(fā)現(xiàn)在附壁血栓中，在 此它們代表主要的炎癥細(xì)胞類型。與之相反，巨噬細(xì)胞在壁中占優(yōu)勢(shì)。然而在第10天和第 42天之間PMN密度減少，巨噬細(xì)胞密度卻增加(附圖3)。在第10和42天時(shí)化合物㈧治 療顯著地抑制了 PMN和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)到附壁血栓中(附圖3)。在巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)到動(dòng)脈瘤壁 中沒(méi)有變化。在動(dòng)脈瘤和培養(yǎng)基中所保存的彈性纖維中的MMP-9表達(dá)在對(duì)照鼠的血栓和動(dòng)脈瘤壁中都檢測(cè)到了由免疫染色所顯示的MMP-9表達(dá)(附圖 4a)。第42天時(shí)，在血栓中的MMP-9陽(yáng)性面積比在壁中的MMP-9陽(yáng)性面積更大?；衔?A) 治療顯著地減少了血栓和壁中的MMP-9陽(yáng)性面積(附圖4a)。此外，當(dāng)所有的鼠被考慮時(shí)在 第42天血栓面積和血栓中MMP-9表達(dá)之間有顯著正相關(guān)性(R2 = 0. 79，P < 0. 0001)(附 圖4b)。在用化合物(A)治療的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都觀察到了培養(yǎng)基的彈性纖維的顯著保護(hù)(附 圖5a)，這反映了減少的MMP-9表達(dá)。雖然在第10天和第42天之間對(duì)照鼠中彈性纖維所占 的相對(duì)面積保持不變，但是在化合物(A)治療的鼠中，彈性纖維面積大量增加(附圖5a)。附壁血栓的VSMC定殖如在壁和血栓中的α -肌動(dòng)蛋白正染色顯示的那樣(附圖5b)，SMC定殖在脫細(xì)胞 化移植物和在壁附近發(fā)展的附壁血栓部分上。而且，從第10天至第42天不管是在壁還是 血栓中SMC密度都增加了，這提供了模型隨著時(shí)間開始自愈過(guò)程的趨勢(shì)的證據(jù)。然而與對(duì) 照組相比，化合物(A)治療10天沒(méi)有改變血栓中SMC的密度，治療42天卻顯著改善了血栓 的SMC定殖(附圖5b)。如天狼星紅染色所示(附圖2a)，這同膠原沉積相關(guān)。相反地，在 10或42天后化合物㈧治療沒(méi)有影響壁的SMC定殖(附圖5b)。結(jié)論通過(guò)化合物(A)抑制血小板活化預(yù)防AAA附壁血栓形成從而限制實(shí)驗(yàn)性AAA進(jìn) 展。如間質(zhì)細(xì)胞定殖的增強(qiáng)作用所顯示的那樣，通過(guò)阻止血小板活化和減少附壁血栓形成， 化合物(A)減少了血栓中白細(xì)胞的募集和它的并發(fā)性蛋白酶富集，導(dǎo)致壁完整性的保護(hù)和 愈合的開始。
9
權(quán)利要求
治療或預(yù)防腹主動(dòng)脈瘤的方法，其中藥學(xué)上或藥理學(xué)上有效量的式(I)化合物其中R為CH2OH或者O(CH2)2OH；R1為任選被三個(gè)鹵素原子取代的C3-4烷基；R2為苯基或者3，4-二氟苯基；或其藥學(xué)上可接受的衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其光學(xué)異構(gòu)體，被給予需要所述治療或預(yù)防的受試者。FPA00001158377500011.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中R1為正丙基、3，3，3-三氟丙基或者正丁基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中R2為3，4-二氟苯基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中式⑴化合物為{lS-[la，2a，33(1S*,2R*), 5 3]}-3-(7-{[2-(3，4_ 二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5-(丙硫基)-3H-l，2，3-三唑并[4， 5-d]嘧啶-3-基)-5-(2-羥乙氧基)環(huán)戊烷-1，2-二醇。
5.式⑴化合物 (I)其中R 為 CH20H 或者 0 (CH2) 20H ；R1為任選被三個(gè)鹵素原子取代的C3_4烷基；R2為苯基或者3，4-二氟苯基；或其藥學(xué)上可接受的衍生物，在制備治療或預(yù)防腹主動(dòng)脈瘤的藥物中的用途。
6.根據(jù)權(quán)利要習(xí)之5所述的用途，其中R1為正丙基、3，3，3-三氟丙基或者正丁基。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的用途，其中R2為3，4-二氟苯基。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中式⑴化合物為{lS-[la，2a，33(1S*,2R*), 5 3]}-3-(7-{[2-(3，4_ 二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5-(丙基硫)-3H-l，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基)-5-(2-羥乙氧基)環(huán)戊烷-1，2-二醇。
全文摘要
本發(fā)明提供作為P2T(P2Y12)受體拮抗劑的三唑并[4，5-d]嘧啶化合物。該化合物用于腹主動(dòng)脈瘤的治療或預(yù)防。
文檔編號(hào)A61P9/00GK101883565SQ200880118907
公開日2010年11月10日 申請(qǐng)日期2008年12月2日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月3日
發(fā)明者J-B·米切爾 申請(qǐng)人:阿斯利康(瑞典)有限公司