專利名稱：：1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明公開了1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛_6_基)_4_氧代_1,4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽、其制備方法、以及包含其的抗微生物藥物組合物。
背景技術(shù)：
：交叉引用本申請要求2007年4月13日遞交的韓國申請2007-36574的優(yōu)先權(quán)。喹諾酮羧酸衍生物是合成抗微生物劑，并在治療人類或動物的感染疾病中廣泛有效。目前，喹諾酮抗微生物劑例如環(huán)丙沙星、諾氟沙星和氧氟沙星被用于治療人類疾病。這些抗微生物劑對革蘭氏陰性菌非常有效。然而，問題是這些抗微生物劑對革蘭氏陽性菌顯示出中等或弱的活性。已經(jīng)進(jìn)行了多種研究來確定一些已知的喹諾酮抗微生物劑的局限性。司帕沙星是對革蘭氏陽性菌具有活性的改進(jìn)的抗微生物劑的一個代表性實(shí)例。然而，除了鏈球菌屬外，該化合物對甲氧西林抗性金黃色葡萄球菌OSto;/^/oco"^m/rew)(MRSA)顯示出弱的活性，并逐漸增加喹諾酮抗性菌株的數(shù)量。
發(fā)明內(nèi)容技術(shù)問題上述細(xì)菌菌株是眾所周知的引起呼吸感染的病原體。因此，需要改進(jìn)的喹諾酮抗微生物劑，尤其是針對這些病原體的那些。技術(shù)方案本發(fā)明的一個方面是式(I)表示的l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基4-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸±卜.H式(I)。在該方面的一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。在一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸。本發(fā)明的另一方面是式(I)表示的l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基隱2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的藥學(xué)上可接受的天冬氨酸鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式(I)。在該方面的一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。在一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸。本發(fā)明的另一方面是制備l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的方法，包括使1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基M-氧代-1，4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸與天冬氨酸在溶劑中反應(yīng)。在該方面的一些實(shí)施方式中，所述溶劑選自乙酸乙酯、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、乙腈、己烷、異丙醚和水中的至少一種。在該方面的一些實(shí)施方式中，所述溶劑選自乙酸乙酯、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、乙腈、己烷、異丙醚、水和它們的任意組合。在一些實(shí)施方式中，所述溶劑是乙醇。在該方面的一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。在該方面的一些實(shí)施方式中，制備l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的收率為至少70%。在一些實(shí)施方式中，收率為至少80%。在一些實(shí)施方式中，收率為至少85%。在一些實(shí)施方式中，收率為至少90%。在該方面的一些實(shí)施方式中，制備l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的收率為約70%至約80%之間。在一些實(shí)施方式中，收率為約75%至約85%之間。在一些實(shí)施方式中，收率為約85%至約95%之間。在一些實(shí)施方式中，收率為約90%至約99%之間。本發(fā)明的另一方面是包含1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的抗微生物藥物組合物。在該方面的一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。在一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸。在該方面的一些實(shí)施方式中，將所述組合物配制用于注射。在一些實(shí)施方式中，所述組合物包含注射制劑。本發(fā)明的另一方面是使用治療有效量的至少一種式(I)表示的1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的藥學(xué)上可接受的天冬氨酸鹽治療動物中的疾病或病癥的方法H式(I)。在該方面的一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。在一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸。本發(fā)明的另一方面是式(I)的化合物在制備用于治療動物中的疾病或病癥的藥物中的應(yīng)用。在該方面的一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。在一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸。本發(fā)明的另一方面是用于治療動物中的疾病或病癥的方法的式(I)的化合物。通過引用并入在本說明書中提到的所有出版物和專利申請都通過引用并入本文，其程度如同具體地和單獨(dú)地說明各單獨(dú)的出版物或?qū)＠暾埻ㄟ^引用并入。具體實(shí)施例方式本發(fā)明公開了1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛_6_基)_4_氧代_1,4_二氫_[1，8]萘啶_3_羧酸的天冬氨酸鹽。還公開了制備1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的方法。還公開了包含l-環(huán)丙基-6-氟代—7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的抗微生物藥物組合物。術(shù)語匯總除非另有說明，否則在本申請中(包括說明書和權(quán)利要求)使用的以下術(shù)語具有以下給定的定義。需要注意的是，除非在上下文中另有說明,否則在說明書和所附權(quán)利要求中使用的單數(shù)形式"a"、"an"和"the"包括復(fù)數(shù)個所指對象。標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)術(shù)語的定義可以在參考著作中找到，包括Carey和Sundberg，AdvancedOrganicChemistry,4thEd.，Vols.A(2000)和B(2001)，PlenumPress,NewYork,NY。除非另有說明，否則采用本領(lǐng)域內(nèi)的質(zhì)譜分析、NMR、HPLC、蛋白質(zhì)化學(xué)、生物化學(xué)、重組DNA技術(shù)和藥理學(xué)的常規(guī)方法。在本說明書中使用的以下詞和詞組通常具有以下所列的含義，除非使用它們的上下文內(nèi)容中另有說明。本文單獨(dú)或組合使用的術(shù)語"任選的"或"任選地"是指隨后描述的事件或情形可以發(fā)生或可以不發(fā)生，但是不是必須發(fā)生，并且該描述包括了事件或情形發(fā)生的情況以及其中事件或情形不發(fā)生的情況。本文使用的術(shù)語"保護(hù)基"是指在所述保護(hù)基被去除之前能阻斷一些或全部活性部分并防止這些基團(tuán)參與化學(xué)反應(yīng)的化學(xué)部分。相關(guān)的步驟和具體基團(tuán)對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是已知的，并且很容易在參考文獻(xiàn)例如Greene禾卩^Vuts，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,3rdEd.(1999)JohnWiley&Sons,NewYork,NY中找到，該文獻(xiàn)通過引用全部并入本文。當(dāng)化學(xué)基團(tuán)由它們的從左向右書寫的常規(guī)化學(xué)式表示時，它們等價地包括可通過從右向左書寫所述結(jié)構(gòu)得到的化學(xué)上相同的取代基，例如-CH20-等價于-OCH2-。術(shù)語"藥物活性成分"是指賦予或意圖賦予治療作用并且被用作藥物或被描述為用作藥物的任何活性成分。藥物活性成分可以用于治療、診斷、調(diào)節(jié)、或預(yù)防疾病狀態(tài)或其癥狀。當(dāng)處理具體疾病或癥狀時，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠選擇合適的藥物活性成分。在如下文獻(xiàn)(通過引用將其全部公開內(nèi)容并入本文)中提供了本發(fā)明范圍內(nèi)的預(yù)期的示例性藥物活性成分Lippincott等,Remington'sPharmaceuticalSciences:TheScienceandPracticeofPharmacy,20thEd"WilliamsandWilkinsPublishing,Baltimore(2000);和Lewis等,Hawley，sCondensedChemicalDictionary,14thEd.，JohnWileyPublishing,NewYork,NY(2001)。本文使用的有關(guān)制劑、組合物或成分的術(shù)語"可接受的"是指對接受治療的對象的整體健康沒有持續(xù)的有害的作用。本文單獨(dú)或組合使用的術(shù)語"藥學(xué)上可接受的"是指不消除化合物的生物活性或性質(zhì)并且相對無毒的物質(zhì)。因此，包含式(I)的化合物的藥劑遞送組合物的藥學(xué)上可接受的組分(例如鹽、載體、賦形劑或稀釋劑)應(yīng)該(l)與遞送組合物的其它成分相容以遞送藥劑；和(2)當(dāng)遞送組合物用于針對動物(例如人類)的治療應(yīng)用時，不應(yīng)該引起過度的副作用例如毒性、刺激和過敏反應(yīng)。當(dāng)它們的風(fēng)險超過藥劑提供的有益效果時，副作用為過度，艮口，該物質(zhì)可以被給藥至個體而不引起不希望的生物學(xué)作用或不以有害的方式與包含其的組合物的其它組分發(fā)生相互作用。本文使用的術(shù)語化合物的"藥學(xué)上可接受的鹽"是指鹽，其是藥學(xué)上可接受的。藥學(xué)上可接受的鹽是保留了化合物的生物學(xué)效力和性質(zhì)且不是生物學(xué)或其它方面不希望的鹽。在一些情況下，通過存在氨基和/或羧基或與其類似的基團(tuán)，式(I)的化合物能夠形成酸和/或堿的鹽。藥學(xué)上可接受的堿加成鹽可以從無機(jī)堿和有機(jī)堿制備。源自無機(jī)堿的鹽包括(僅以舉例的方式)鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽和鎂鹽。源自有機(jī)堿的鹽包括但不限于伯胺鹽、仲胺鹽和叔胺鹽，例如垸基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、環(huán)烷基胺、二(環(huán)烷基)胺、三(環(huán)烷基)胺、取代的環(huán)垸基胺、二取代的環(huán)垸基胺、三取代的環(huán)烷基胺、環(huán)烯基胺、二(環(huán)烯基)胺、三(環(huán)烯基)胺、取代的環(huán)烯基胺、二取代的環(huán)烯基胺、三取代的環(huán)烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、雜芳基胺、二雜芳基胺、三雜芳基胺、雜環(huán)胺、二雜環(huán)胺、三雜環(huán)胺、其中胺上的至少兩個取代基是不同的且選自烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、芳基、雜芳基、雜環(huán)等的混合的二-胺和三-胺。還包括其中兩個或三個取代基與氨基氮一起形成雜環(huán)或雜芳基的胺。藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可以從無機(jī)酸和有機(jī)酸制備。源自無機(jī)酸的鹽包括以下酸的鹽鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。源自有機(jī)酸的鹽包括以下酸的鹽乙酸、丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等。本文使用的術(shù)語"前藥"是指藥物或化合物，其中在體內(nèi)的代謝過程將所述藥物或化合物轉(zhuǎn)化成藥理學(xué)活性形式。本文使用的術(shù)語"藥物組合"是指將多于一種的活性成分混合或組合得到的產(chǎn)物，并且包括活性成分的固定組合和非固定組合。術(shù)語"固定組合"是指活性成分例如至少一種式(I)的化合物和助劑以單一實(shí)體或單劑量的形式同時給藥至患者。術(shù)語"非固定組合"是指活性成分例如至少一種式(I)的化合物和助劑以獨(dú)立的實(shí)體同時、一起或順序地(沒有具體間隔時間限制)給藥至患者，其中這種給藥在患者體內(nèi)提供了兩種化合物的有效水平。后者還用于雞尾酒治療，例如給藥三種或更多種的活性成分。本文使用的術(shù)語"有效量"或"治療有效量"是指當(dāng)給藥至需要這種治療的哺乳動物時，給藥的活性成分或化合物的量足以在一定程度上緩解受治療的疾病或病癥的一種或多種癥狀。結(jié)果是可以疾病的體征、癥狀或原因的減少和/或緩解，或者是生物學(xué)體系的任何其它的希望的改變。例如，對于治療應(yīng)用的"有效量"是指使得疾病在臨床上顯著降低所需的包含本文公開的化合物的組合物的量。治療有效量根據(jù)受治療的對象和疾病狀況、對象的重量和年齡、疾病狀況的嚴(yán)重程度、具體化合物、后續(xù)的給藥方案、給藥時機(jī)、給藥方式等變化，其都可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地確定。在單獨(dú)的情況下的合適的有效量可以使用例如劑量遞增研究的技術(shù)確定。術(shù)語"賦形劑"是指通常的用作藥物的稀釋劑或運(yùn)載體的藥學(xué)上非活性或惰性物質(zhì)。不同的藥物給藥形式需要不同的賦形劑，并且"藥學(xué)上可接受的賦形劑"包括"藥學(xué)上可接受的載體"。例如，片劑、錠劑、丸劑、膠囊劑等可以包含賦形劑，所述賦形劑包括粘合劑例如黃蓍膠、阿拉伯樹膠、玉米淀粉或明膠；崩解劑例如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、褐藻酸；潤滑劑例如硬脂酸鎂；甜味劑例如蔗糖、乳糖或糖精；和/或芳香劑例如薄荷油、油或鹿蹄草或櫻桃香味劑。膠囊劑可以包含另外的賦形劑例如液體載體。糖漿劑或酏劑可以包含賦形劑，所述賦形劑包括甜味劑例如蔗糖、防腐劑例如羥苯甲酯和羥苯丙酯、染料和/或芳香劑例如櫻桃或橙香味劑。本文使用的術(shù)語"提高"是指增加或延長希望作用的效力或持續(xù)時間。因此，對于提高治療劑的作用，術(shù)語"提高"是指增加或延長其它治療劑對系統(tǒng)的作用的效力或持續(xù)時間的能力。本文使用的術(shù)語"提高有效量"是指足以提高其它治療劑在希望的體系中的作用的量。本文使用的術(shù)語"調(diào)節(jié)"是指與目標(biāo)直接或間接地相互作用從而改變目標(biāo)的活性，包括(僅以舉例的方式)提高目標(biāo)的活性、抑制目標(biāo)的活性、限制目標(biāo)的活性、或擴(kuò)展目標(biāo)的活性。本文使用的術(shù)語"調(diào)節(jié)劑"是指與目標(biāo)直接或間接相互作用的分子。所述相互作用包括但不限于激動劑和拮抗劑的相互作用。本文使用的術(shù)語"聯(lián)合給藥"等是包括對單個患者給藥選定的治療劑，并意圖包括其中治療劑通過相同或不同的給藥途徑或在相同或不同的時間給藥的治療方案。本文使用的術(shù)語"藥物組合物"是指活性化合物和其它化學(xué)組分例如載體、穩(wěn)定劑、稀釋劑、分散劑、助懸劑、增稠劑和/或賦形劑的混合物。本文使用的術(shù)語"載體"、"藥學(xué)上可接受的載體"或"藥學(xué)上可接受的賦形劑"是指能促進(jìn)化合物進(jìn)入細(xì)胞或組織的相對無毒的化學(xué)化合物或試劑。它們包括任意及所有的溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。這種介質(zhì)和試劑在藥物活性物質(zhì)中的應(yīng)用是本領(lǐng)域已知的。任何常規(guī)介質(zhì)或試劑只要不是與活性成分不相容，就可以預(yù)期其在治療組合物中的應(yīng)用。也可以在組合物中加入補(bǔ)充的活性成分。術(shù)語"對象"或"患者"包括哺乳動物和非哺乳動物。哺乳動物的實(shí)例包括但不限于哺乳動物類的任何成員人類、非人類靈長類動物例如黑猩猩、和其它的猿類和猴類；農(nóng)場動物例如牛、馬、羊、山羊、豬；家畜例如兔、狗、和貓；實(shí)驗(yàn)室動物包括嚙齒類例如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳動物的實(shí)例包括但不限于鳥、魚等。在本文提供的方法和組合物的一個實(shí)施方式中，哺乳動物是人類。本文使用的術(shù)語"治療"包括至少部分地緩解、減輕或改善疾病或病癥的癥狀，至少部分地預(yù)防另外的癥狀，改善或防止癥狀的根本的代謝原因，至少部分地抑制疾病或病癥例如阻止疾病或病癥的發(fā)展、至少部分地緩解疾病或病癥、至少部分地引起疾病或病癥的消退、至少部分地緩解疾病或病癥引起的狀況、或至少部分地停止疾病或病癥的癥狀。因此，哺乳動物中的疾病的任何治療應(yīng)該提供至少部分治療或預(yù)防作用，包括以下方面中的任意方面、全部方面或其組合a)預(yù)防疾病的發(fā)作，S卩，使得疾病的臨床癥狀不發(fā)展；b)延遲疾病的發(fā)作，即，使得疾病的臨床癥狀在較遲的時間發(fā)展；C)降低疾病發(fā)作的嚴(yán)重性，即，使得疾病的臨床癥狀較不嚴(yán)重地發(fā)展；d)緩解正在發(fā)生的疾病，g卩，使得臨床癥狀消退；e)阻止正在發(fā)生的疾病，即，使得臨床癥狀消失；和域f)提高正常生理機(jī)能。當(dāng)存在于母體化合物中的酸性質(zhì)子被金屬離子例如堿金屬離子、堿土離子、或鋁離子代替或與有機(jī)堿配位時，可以以藥學(xué)上可接受的鹽的形式制備式(I)的化合物。此外，可以使用起始原料或中間體的鹽制備所公開的化合物的鹽形式。通過將化合物的游離堿形式與藥學(xué)上可接受的無機(jī)酸或有機(jī)酸反應(yīng)，可以以藥學(xué)上可接受的酸加成鹽(其是一種類型的藥學(xué)上可接受的鹽)的形式制備式(I)的化合物，所述無機(jī)酸或有機(jī)酸包括但不限于，無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、偏磷酸等；有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、己酸、環(huán)戊烷丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、Q-甲苯磺酸、酒石酸、三氟乙酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、芳基磺酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲基二環(huán)-[2.2.2]辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、4,4，-亞甲基雙-(3-羥基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、和黏康酸。或者，通過將化合物的游離酸形式與藥學(xué)上可接受的無機(jī)堿或有機(jī)堿反應(yīng)，可以以藥學(xué)上可接受的堿加成鹽(其是一種類型的藥學(xué)上可接受的鹽)的形式制備式(I)的化合物，所述無機(jī)堿或有機(jī)堿包括但不限于，有機(jī)堿例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等；和無機(jī)堿例如氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉等。應(yīng)當(dāng)理解的是所稱的藥學(xué)上可接受的鹽包括其溶劑加成形式或晶體形式，特別是溶劑化物或多晶型物。溶劑化物包含化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量量的溶劑，并且可以在結(jié)晶過程中與藥學(xué)上可接受的溶劑例如水、乙醇等形成。當(dāng)溶劑是水時形成水合物，或當(dāng)溶劑是醇時形成醇化物。式(I)的化合物的溶劑化物可以在本文所述的過程中容易地制備或形成。僅作為舉例，式(I)的化合物的水合物可以通過從水/有機(jī)溶劑混合物中再結(jié)晶而容易地制備，使用的有機(jī)溶劑包括但不限于二噁烷、四氫呋喃或甲醇。另外，本文提供的化合物可以以非溶劑化的形式以及溶劑化的形式存在。對于本發(fā)明提供的化合物和方法，通常，溶劑化的形式被認(rèn)為等價于非溶劑化的形式。式(I)的化合物包括結(jié)晶形式，也被稱為多晶型物。多晶型物包括相同元素組成的化合物的不同晶體堆積排列。多晶型物通常具有不同的X射線衍射圖案、紅外譜圖、熔點(diǎn)、密度、硬度、晶體形狀、光學(xué)和電學(xué)性質(zhì)、穩(wěn)定性和溶解性。多種因素例如再結(jié)晶溶劑、結(jié)晶速率和儲存溫度可能使單一的結(jié)晶形式占優(yōu)勢。式(I)的化合物可以以前藥的形式制備。前藥通常是藥物前體，其在向?qū)ο蠼o藥并隨后吸收之后，通過一些過程例如通過代謝途徑轉(zhuǎn)化被轉(zhuǎn)化為活性或更具活性的種類。一些前藥具有存在于前藥上的化學(xué)基團(tuán)，其使得前藥活性較差和/或賦予藥物溶解性或一些其它性質(zhì)。一旦化學(xué)基團(tuán)被從前藥清除和/或被修飾，就會產(chǎn)生活性藥物。前藥通常是有用的，這是因?yàn)樵谝恍┣闆r下，它們可能比母體藥物更容易地給藥。例如，通過口服給藥它們可以是生物有效的，而母體藥物則不是。在藥物組合物中，前藥也可以具有高于母體藥物的改進(jìn)的溶解性。前藥的非限制性實(shí)例可以是式(I)的化合物，其以酯(前藥)的形式給藥以促進(jìn)跨細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)(在細(xì)胞膜處，水溶性對遷移性是有害的)，然后，一旦進(jìn)入細(xì)胞中(其中水溶性是有益的)，其被代謝水解為活性實(shí)體羧酸。前藥的另一例子是連接到酸性基團(tuán)的短肽(聚氨基酸)，其中肽被代謝從而顯示出活性部分?？梢詫⑶八幵O(shè)計(jì)成可逆的藥物衍生物，其用作修飾劑以提高藥物向特定位點(diǎn)的組織的轉(zhuǎn)運(yùn)。目前前藥的設(shè)計(jì)已經(jīng)提高了用于靶向其中水為主要溶劑的區(qū)域的治療化合物的水溶性。例如參見Fedorak等，Am.J.Physiol.(1995)269，G210-218;McLoed等，Gastroenterol(1994)106,405-413;Hochhaus等，Biomed.Chrom,(1992)6,283-286;Larsen禾口Bundgaard,Int.J.Pharmaceutics(1987)37,87;Larsen等，Int.J.Pharmacertics(1988)47,103;Sinkula等，J.Pharm.Sci.(1975)64，181-210;Higuchi和Stella,Pro-drugsasNovelDeliverysystems,A.C.S.SymposiumSeries,Vol.14;禾卩Roche,BioreversibleCarrierinDrugDesign(1987)AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress,上述所有的文獻(xiàn)都通過引用全部并入本文。此外，式(I)的化合物的前藥衍生物可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備(更詳細(xì)的內(nèi)容參見例如Saulnier等，Bioorg.andMed.Chem.Lett.(1994)4，p.1985)。僅作為舉例，合適的前藥可以通過使非衍生化的式(I)的化合物與合適的氨基甲?；噭├绲幌抻趌，l-酰氧基垸基氯甲酸酯(l，l-acyloxyalkylcarbanochloridate)、對硝基苯基碳酸酯等反應(yīng)而制備。本文描述的化合物的前藥形式(其中前藥在體內(nèi)代謝以制備本文所述的衍生物)也包含在權(quán)利要求的范圍內(nèi)。實(shí)際上，一些本文描述的化合物可以是另一衍生物或活性化合物的前體。在另外的實(shí)施方式中，本文描述的化合物可以被同位素標(biāo)記(例如用放射性同位元素標(biāo)記)或通過其它方法標(biāo)記，所述其它方法包括但不限于使用發(fā)色團(tuán)或熒光部分、生物熒光標(biāo)記或化學(xué)熒光標(biāo)記。式(I)的化合物可以具有一個或多個手性中心，并且每個中心可以以R構(gòu)型或S構(gòu)型存在。本文所述的化合物包括所有的非對映異構(gòu)形式、對映異構(gòu)形式和差向異構(gòu)形式以及它們的合適的混合物。通過使化合物的外消旋混合物與光學(xué)活性拆分劑反應(yīng)以形成一對非對映異構(gòu)化合物，分離非對映異構(gòu)體和回收光學(xué)純的對映體，可以以單獨(dú)的立體異構(gòu)體的形式制備式(I)的化合物。盡管可以使用本文描述的化合物的共價非對映異構(gòu)衍生物進(jìn)行對映體的拆分，但是優(yōu)選可分離的復(fù)合物(complex)(例如結(jié)晶非對映異構(gòu)鹽)。非對映異構(gòu)體具有不同的物理性質(zhì)(例如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、溶解性、反應(yīng)性等)并且可以通過利用這些不同點(diǎn)容易地分離。非對映異構(gòu)體可以通過手性色譜法進(jìn)行分離，或優(yōu)選地，通過基于溶解性差異的分離/拆分技術(shù)分離。然后，將光學(xué)純的對映體與拆分劑一起通過不導(dǎo)致外消旋作用的任何可行的方法進(jìn)行回收。用于將化合物的立體異構(gòu)體從它們的外消旋混合物中拆分的技術(shù)的更詳細(xì)的描述可以在Jacques,Collet禾卩Wilen，Enantiomers，RacematersandResolutions(1981)JohnWiley&Sons,NewYork,NY中找到，該文獻(xiàn)通過引用全部并入本文。另外，本文提供的化合物和方法可以以幾何異構(gòu)體的形式存在。本文提供的化合物和方法包括所有c&、frara、s;;"、a"rt、同側(cè)(entgegen(E))和異偵lj(zusammen(Z))異構(gòu)體、以及它們的合適的混合物。在一些情況下，化合物可以以互變異構(gòu)體的形式存在。所有互變異構(gòu)體都包含在本文所描述的式中，并由本文的化合物和方法提供。在本文提供的化合物和方法的其它實(shí)施方式中，通過單個制備步驟得到的的對映體和/或非對映異構(gòu)體的混合物、組合和/或互變也可用于本文所述的應(yīng)用。在喹諾酮抗微生物劑中，l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、甲氧西林抗性菌、青霉素抗性菌和己知的喹諾酮抗性菌顯示出優(yōu)異的抗微生物活性。然而，該試劑的水溶性低(參見韓國專利第10-566346號)。通常，希望在藥物組合物中使用的活性成分在水或水溶液中在廣泛的pH值范圍內(nèi)具有高的溶解性。為了增加l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的藥物實(shí)用性，開發(fā)了具有優(yōu)異溶解性的該化合物的鹽。在韓國專利第10-566346號中公開了l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的各種鹽形式。公開的鹽形式的實(shí)例包括無機(jī)酸例如鹽酸、磷酸和硫酸；有機(jī)酸例如甲磺酸、對甲苯磺酸、乙酸、檸檬酸、馬來酸、琥珀酸、草酸、苯甲酸、酒石酸、富馬酸、扁桃酸、葡糖醛酸；以及陽離子例如鈉離子和鉀離子。在上述酸的鹽中，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的磷酸鹽和鹽酸鹽形式具有最好的溶解性。但是，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的鹽酸鹽形式會引起嚴(yán)重的纖維性腹膜炎，因此，不適合用于注射制劑。天冬氨酸(2-氨基琥珀酸)是穩(wěn)定的、天然存在的氨基酸，且沒有吸濕或腐蝕特性，因此使得其可以被安全的處理。由于天冬氨酸也易于大量獲取，因此其在大規(guī)模制備中可以容易地使用。另外，天冬氨酸己被美國食品藥品管理局(UnitedStatesFoodandDrugAdministration)批準(zhǔn)用作食品添加劑或藥物組分。天冬氨酸保護(hù)肝臟免受一些藥物毒性、幫助礦物質(zhì)吸收、并且提高DNA、RNA和免疫系統(tǒng)的功能。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，與磷酸鹽和鹽酸鹽形式相比，l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽可以具有高得多的溶解性，優(yōu)異的物理性質(zhì)例如穩(wěn)定性，且更重要地，其顯示基本上無毒性。在一些實(shí)施方式中，與鹽酸鹽形式相比，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽可以引起較不嚴(yán)重的纖維性腹膜炎。在一些實(shí)施方式中，與鹽酸鹽形式相比，l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基畫2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽可以顯示出較高的致死劑量(LD)。在一些實(shí)施方式中，與磷酸鹽形式相比，l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽可以顯示出較高的致死劑量(LD)。在本發(fā)明的一個方面中，提供了式(I)結(jié)構(gòu)表示的1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽形式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>式(I)。在進(jìn)一步或可選的實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸。在進(jìn)一步或可選的實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是L-天冬氨酸。在進(jìn)一步或可選的實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是DL-天冬氨酸或其外消旋混合物。在更進(jìn)一步或可選的實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽比l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸、或其鹽酸鹽和/或其磷酸鹽具有更好的溶解性。在一些實(shí)施方式中，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽在蒸餾水中的溶解性比鹽酸鹽的溶解性高約4至約8倍。在一些實(shí)施方式中，天冬氨酸鹽在蒸餾水中的溶解性比鹽酸鹽的溶解性高約5至約6倍。在一些實(shí)施方式中，在pH為1.2的水溶液中，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的溶解性比鹽酸鹽的溶解性高約15至約30倍。在一些實(shí)施方式中，在pH為1.2的水溶液中，天冬氨酸鹽的溶解性比鹽酸鹽的溶解性高約17至約27倍。在一些實(shí)施方式中，在pH為1.2的水溶液中，天冬氨酸鹽的溶解性比鹽酸鹽的溶解性高約25至約30倍。在一些實(shí)施方式中，在pH為6.8的水溶液中，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的溶解性比鹽酸鹽的溶解性高約50至約150倍。在一些實(shí)施方式中，在pH為6.8的水溶液中，天冬氨酸鹽的溶解性比鹽酸鹽的溶解性高約69至約130倍。在一些實(shí)施方式中，在pH為6.8的水溶液中，天冬氨酸鹽的溶解性比鹽酸鹽的溶解性高約80至約120倍。在一些實(shí)施方式中，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽在室溫下是穩(wěn)定的。在一些實(shí)施方式中，天冬氨酸鹽比鹽酸鹽形式更為穩(wěn)定。在一些實(shí)施方式中，天冬氨酸鹽比磷酸鹽形式更為穩(wěn)定。在一些實(shí)施方式中，當(dāng)intraparenteral給藥時，與其它鹽(甲磺酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽或甲酸鹽)相比，l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽具有最高的半致死劑量。在一些實(shí)施方式中，當(dāng)intraparenteral給藥時，與其它鹽(甲磺酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽或甲酸鹽)相比，l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8捧啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽具有最高的近似致死劑量。在一些實(shí)施方式中，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽可以是結(jié)晶形式。在另外的實(shí)施方式中，l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1，8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽可以是非結(jié)晶形式。在本發(fā)明的另一方面中，提供了制備式(I)的l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的方法。在一些實(shí)施方式中，制備l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的方法包括使1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-萄-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸與天冬氨酸在溶劑中反應(yīng)的步驟。該方法可以用方案1表示。方案1可以將1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8捧啶-3-羧酸溶解在惰性有機(jī)溶劑中。使用的惰性有機(jī)溶劑的體積(ml)可以是1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的重量(g)的10-20倍?；?重量當(dāng)量的1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛_6_基)_4_氧代_1，4_二氫_[1,8]萘啶_3-羧酸，加入的天冬氨酸可以是0.9-2.5重量當(dāng)量。在一些實(shí)施方式中，天冬氨酸的加入量可以為1.0-1.5重量當(dāng)量。方案1的反應(yīng)可以在30-70'C的溫度下進(jìn)行。在一些實(shí)施方式中，方案1的反應(yīng)在40-60'C的溫度下進(jìn)行。方案1的反應(yīng)可以持續(xù)10分鐘至5小時。在一些實(shí)施方式中，方案1的反應(yīng)持續(xù)30分鐘至2小時。在制備1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的一個實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸。在進(jìn)一步或可選的實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是L-天冬氨酸。在進(jìn)一步或可選的實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是DL-天冬氨酸或其外消旋混合物。在更進(jìn)一步或可選的實(shí)施方式中，所述天冬氨酸是D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。在制備1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的方法的一些實(shí)施方式中，所述溶劑選自乙酸乙酯、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、乙腈、己烷、異丙醚、水和它們的任意組合。在一些實(shí)施方式中，所述溶劑是乙醇。在本發(fā)明的另一方面中，提供了包含式(I)的l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的抗微生物藥物組合物。在一些實(shí)施方式中，所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。為了給藥，除了上述的活性成分外，制備的抗微生物藥物組合物可以包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體。藥學(xué)上可接受的載體的實(shí)例包括生理鹽水、無菌水、林格氏溶液、緩沖生理鹽水、右旋糖溶液、麥芽糖糊精溶液、甘油、乙醇和它們中兩種或多種的混合物。如果需要，組合物中也可以包含其它常規(guī)的添加劑例如抗氧化劑、緩沖劑和抑菌劑。此外，組合物可以額外包含稀釋劑、分散劑、表面活性劑、粘合劑和潤滑劑，以將其配制為可注射制劑例如水溶液劑、混懸劑和乳劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑和片齊U。另夕卜，可以使用Remington'sPharmaceuticalScience,MarkPublishingCompany,EastonPA中描述的方法，根據(jù)具體疾病和其組分配制組合物。該方面的組合物可以口服給藥或非胃腸道給藥(例如靜脈內(nèi)給藥、皮下給藥、腹膜內(nèi)給藥、或局部給藥)。本發(fā)明的組合物的劑量根據(jù)多種因素而變化，包括患者的重量、年齡、性別、健康狀況和飲食，以及給藥時間、給藥途徑、分泌率、疾病嚴(yán)重程度等。在一些實(shí)施方式中，式(I)的l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽可以以約l-100mg/kg，優(yōu)選2-20mg/kg的每日劑量每天給藥一次或多次。本發(fā)明的組合物可以單獨(dú)使用或與其它治療劑組合使用。在一些實(shí)施方式中，組合物與至少一種其它抗微生物劑組合使用。藥物組合物/制劑/給藥本文中使用的藥物組合物是指至少一種式(I)的化合物與其它化學(xué)組分例如載體、穩(wěn)定劑、稀釋劑、分散劑、助懸劑、增稠劑和/或賦形劑的混合物。藥物組合物促進(jìn)化合物對生物體的給藥。包含至少一種式(I)的化合物的藥物組合物可以通過任何本領(lǐng)域己知的常規(guī)形式或途徑以藥物組合物的形式以治療有效量給藥，所述途徑包括但不限于靜脈給藥、口服給藥、直腸給藥、氣霧劑給藥、非胃腸道給藥、眼部給藥、肺部給藥、透皮給藥、陰道給藥、耳部給藥、鼻部給藥和局部給藥。例如通過將通常在儲庫(depot)或緩釋制劑中的化合物直接注射到器官，可以將藥物組合物局部給藥而不是全身給藥。另外，可以通過在靶向給藥系統(tǒng)中(例如在包衣有器官特異性抗體的脂質(zhì)體中)給藥包含至少一種式(I)的化合物的藥物組合物。脂質(zhì)體會靶向器官并被器官選擇性地吸收。另外，包含至少一種式(I)的化合物的藥物組合物可以以快速釋放制劑的形式、延長釋放制劑的形式、或立即(intermediate)釋放制劑的形式提供。對于口服給藥，可以通過將活性化合物與本領(lǐng)域公知的藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑組合而容易地配制式(I)的化合物。該載體使得本文所述的化合物可以以片劑、散劑、丸劑、糖錠劑、膠囊劑、液體、凝膠劑、糖漿劑、酏劑、漿、混懸劑等形式配制，用于受治療患者的口服攝取。用于口服的藥物制品可以通過以下方法獲得將一種或多種固體賦形劑與本文所述的一種或多種化合物混合，任選地研磨所得的混合物，并且如果需要，在加入合適的助劑后，將混合物加工為顆粒，以獲得片劑或糖錠劑芯。具體而言，合適的賦形劑為填充劑例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纖維素制品例如玉米淀粉、小麥淀粉、大米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、微晶纖維素、羥基丙基甲基纖維素、羧基甲基纖維素鈉；或其它賦形劑例如聚乙烯基吡咯烷酮(PVP或聚維酮)或磷酸鈣)。如果需要，可以加入崩解劑例如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、聚乙烯糖錠劑芯提供有合適的包衣。為此，可以使用濃縮糖溶液，其可以任選地包含阿拉伯樹膠、滑石、聚乙烯基吡咯烷酮、卡巴普凝膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液和合適的有機(jī)溶劑或溶劑混合物?？梢詫⑷玖匣蛏丶尤氲狡瑒┗蛱清V劑包衣中以識別或表征活性化合物劑量的不同組合?？梢钥诜褂玫乃幬镏破钒ㄓ擅髂z制成的推入配合膠囊劑、以及由明膠和增塑劑例如甘油或山梨醇制成的軟的密封膠囊劑。推入配合膠囊劑可以包含活性成分與填充劑例如乳糖、粘合劑例如淀粉、和/或潤滑劑例如滑石或硬脂酸鎂、以及任選的穩(wěn)定劑的混合物。在軟膠囊劑中，活性化合物可以溶解或懸浮在合適的液體例如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇中。另外，可以加入穩(wěn)定劑。用于口服給藥的所有制劑都應(yīng)該具有適于所述給藥的劑量。對于口腔給藥或舌下給藥，組合物可以是以常規(guī)方式配制的片劑、錠劑或凝膠劑的形式。非胃腸道(parental)注射可以包括靜脈團(tuán)注或連續(xù)輸注。式(I)的藥物組合物可以是適合于非胃腸道注射的形式如在油性或水性運(yùn)載體中的無菌混懸劑、溶液劑或乳劑，并且可以包含配制劑例如助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。用于非胃腸道給藥的藥物制劑包括水溶形式的活性化合物的水溶液。另外，活性化合物的混懸劑可以制備為合適的油性注射混懸劑的形式。合適的親脂性溶劑或運(yùn)載體包括脂肪油例如芝麻油，或合成脂肪酸酯例如油酸乙酯或甘油三酸酯，或脂質(zhì)體。水性注射混懸劑可以包含增加混懸劑粘度的物質(zhì)例如羧基甲基纖維素鈉、山梨醇、或葡聚糖。任選地，混懸劑也可以包含合適的穩(wěn)定劑或增加化合物溶解性的試劑，以使得可以制備高度濃縮的溶液。或者，活性成分可以為散劑的形式，用于在使用前用合適的運(yùn)載體例如滅菌無熱原水復(fù)溶。式(I)的化合物可以局部給藥，并且可以被配制為各種可局部給藥的組合物例如溶液劑、混懸劑、乳劑、凝膠劑、糊劑、藥棒、香脂(balm)、乳膏劑或軟膏劑。這類藥物組合物可以包含增溶劑、穩(wěn)定劑、張力增強(qiáng)劑、緩沖劑和防腐劑。適合透皮給藥的式(I)的化合物的制劑可以采用透皮遞送裝置或透皮遞送貼劑，并可以是溶解和/或分散在聚合物或粘結(jié)劑中的親脂性乳劑或緩沖200的水溶液劑。該貼劑可以構(gòu)建為用于連續(xù)遞送、脈沖遞送或按需遞送藥物活性成分。更進(jìn)一步地，式(I)的化合物的透皮遞送可以通過離子遞送貼劑等方法完成。此外，透皮貼劑可以提供式(I)的化合物的控制遞送?？梢酝ㄟ^使用速率控制膜或通過將化合物包埋在聚合物基質(zhì)或凝膠中來減慢吸收速率。相反，吸收促進(jìn)劑可以用于提高吸收。吸收促進(jìn)劑或載體可以包括可吸收的藥學(xué)上可接受的溶劑，以幫助通過皮膚。例如，透皮裝置為繃帶的形式，其包括背襯元件、包含化合物并任選地具有載體的儲庫、任選的(用于以受控的和預(yù)定的速率在延長的時間內(nèi)將化合物遞送到主體的皮膚的速率控制屏障、以及將裝置固定到皮膚的工具。對于吸入給藥，式(I)的化合物可以為例如氣霧劑、噴霧或散劑的形式。使用合適的噴射劑例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲垸、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合適的氣體，可以容易地以氣霧劑噴霧的形式從壓力包裝或噴霧器中遞送包含至少一種式(I)的化合物的藥物組合物。在壓力氣霧劑的情況下，劑量單位可以通過提供用于遞送計(jì)量量的閥來確定。例如用于吸入器或吹入器的明膠膠囊劑和藥筒可以配制為含有化合物和合適的粉末基質(zhì)例如乳糖或淀粉的粉末混合物。式(I)的化合物也可以配制為直腸給藥組合物例如灌腸劑、直腸凝膠劑、直腸泡沫劑、直腸氣霧劑、栓劑、膠狀栓劑或保留灌腸劑，其包含常規(guī)的栓劑基質(zhì)例如可可脂或其它甘油酯和合成聚合物例如聚乙烯基吡咯垸酮、PEG等。在組合物的栓劑形式中，首先融化的是低熔點(diǎn)蠟例如但不限于脂肪酸甘油酯的混合物，任選其與可可脂的組合。在實(shí)施本文提供的治療方法或應(yīng)用中，本文提供的式(I)的化合物的治療有效量在藥物組合物中給藥至患有待治療的疾病或病癥的哺乳動物。優(yōu)選地，該哺乳動物是人。治療有效量可以根據(jù)疾病的嚴(yán)重度、對象的年齡和相應(yīng)的健康、使用化合物的效力以及其它因素而廣泛地變化?；衔锟梢詥为?dú)使用或與一種或多種治療劑組合作為混合物的組分使用。藥物組合物可以使用含有賦形劑和助劑的一種或多種生理上可接受的載體以常規(guī)方式進(jìn)行配制，所述載體可以有助于將活性化合物加工為可藥用的制品。適合的制劑取決于所選的給藥途徑。只要在本領(lǐng)域中合適和可了解，就可以使用任何己知的技術(shù)、載體和賦形劑。包含至少一種式(I)的化合物的藥物組合物可以以常規(guī)方式生產(chǎn)，例如但不限于通過常規(guī)的混合、溶解、造粒、制作糖錠劑、研細(xì)(levigate)、乳化、包囊、包埋或壓縮過程。藥物組合物可以包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑，以及作為活性成分的游離酸或游離堿形式或藥學(xué)上可接受的鹽的形式的至少一種本文所述的式(I)的化合物。另外，本文所述的方法和藥物組合物包括使用N-氧化物、結(jié)晶形式(也稱作多晶型物)、以及具有相同類型活性的這些化合物的活性代謝物。在一些情況下，化合物可以以互變異構(gòu)體的形式存在。所有互變異構(gòu)體都包括在本文提供的化合物的范圍內(nèi)。另外，本文所述的化合物可以以非溶劑化物的形式以及與藥學(xué)上可接受的溶劑例如水、乙醇等的溶劑化物的形式存在。這里提供的化合物的溶劑化物形式也被認(rèn)為是在本文中公開。另外，藥物組合物可以包括其它藥用或藥用試劑、載體、佐劑例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑或乳化劑、溶液促進(jìn)劑、用于調(diào)節(jié)滲透壓的鹽、和/或緩沖劑。另外，藥物組合物也可以包含其它治療上有價值的物質(zhì)。用于制備包含本文所述的化合物的組合物的方法包括將化合物與一種或多種惰性的藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體一起配制形成固體、半固體或液體。固體組合物包括但不限于散劑、片劑、可分散顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。液體組合物包括化合物溶解在其中的溶液劑、包含化合物的乳劑、或包含脂質(zhì)體的溶液劑、膠束(micelle)、或包含本文公開的化合物的納米顆粒。半固體組合物包括但不限于凝膠劑、混懸劑和乳膏劑。組合物可以為液體溶液劑或混懸劑、適于在使用前在液體中溶解或懸浮的固體形式、或?yàn)槿閯?。這些組合物也可以包含最小量的無毒的助劑物質(zhì)例如潤濕劑或乳化劑、pH緩沖劑等。本文所述的藥物組合物的概述可以在例如以下文獻(xiàn)中找到Remington,TheScienceandPracticeofPharmacy,19Ed.(1995)MackPublishingCompany,Easton，Pennsylvania.;Hoover,Remington'sPharmaceuticalScience(1975)MackPublishingCompany,Easton,Pennsylvania;Liberman禾口Lachman，PharmacerticalDosageForms(1980)MarcelDecker,NewYork,N.Y.;禾口Lippincott,Williams&Wilkins,PharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverysystems,7thEd.(1999》所有23這些文獻(xiàn)都通過引用全部并入本文。本公開的化合物在廣泛的劑量范圍內(nèi)有效。例如在成年人的治療中，在一些實(shí)施方式中，使用的劑量的實(shí)例為每天約0.01至約10000mg，每天約0.5至約1000mg，每天約1至約500mg和每天約5至約100mg。確切的劑量取決于給藥途徑、化合物的給藥形式、治療的對象、待治療對象的體重、及主治醫(yī)師的偏好和經(jīng)驗(yàn)。盡管本文己經(jīng)顯示和描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見，這些所提供的實(shí)施方式只是舉例說明。在不背離本發(fā)明的情況下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以進(jìn)行各種變化、改變和替換。應(yīng)該理解對本文描述的實(shí)施方式的各種變化可以用于實(shí)踐本發(fā)明。意圖用所附的權(quán)利要求確定本發(fā)明的范圍，并且處于這些權(quán)利要求范圍內(nèi)的方法和結(jié)構(gòu)以及它們的等價物也由此被包含在內(nèi)?？梢愿鶕?jù)與韓國專利第10-566346號中描述的方法相同的方法制備1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸。可以根據(jù)與韓國專利第10-566346號中描述的方法相同的方法制備1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的甲磺酸鹽。實(shí)施例實(shí)施例1:l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1,4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的0-天冬氨酸鹽的制備將1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-萄-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸(5.0g)加入到50。/。的乙醇(80mL)中，然后在5(TC下攪拌混合物10分鐘。加入D-天冬氨酸(2.0g)，然后將混合物在50'C下攪拌1小時。將混合物冷卻至室溫，然后通過過濾收集所得固體。將乙醇(100mL)加入到濾液中，然后將混合物攪拌30分鐘。通過過濾收集所得固體，獲得總共5.55g的目標(biāo)化合物(產(chǎn)率83%)。熔點(diǎn)200-201°C。'HNMR(D20):50.97(bs，2H),1.27(d，2H),2.00(dd,1H，J=8.8，17.6Hz)，2.77(dd,1H:J=3.3,17.0Hz)，3.53(bs，1H),3.84(dd,1H,J=3.3,8.78Hz)，4.01(s,3H),4.31-4.45(m,8H),7.46(d,1H，J=12.2Hz),8.42(s,1H)。實(shí)施例2:l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8譜啶-3-羧酸的L-天冬氨酸鹽的制備將1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸(500mg)加入到50。/。的乙醇(20mL)中，然后在50'C下攪拌混合物IO分鐘。加入L-天冬氨酸(174mg)，然后將混合物在5(TC下攪拌1小時。將混合物冷卻至室溫。將乙醇(20mL)加入到反應(yīng)混合物中，然后將混合物攪拌30分鐘。通過過濾收集所得固體，獲得550mg的目標(biāo)化合物(產(chǎn)率82%)。熔點(diǎn)205-206°C。NMR(^"DMSO):30.93(d,2H,J=3.5Hz),1.20(d,2H,J=6.8Hz)，2.24(dd,1H，J=9.2,17.3Hz)，2.59(dd，1H，J=3.3，17.2Hz),3.50(m,1H),3.59(1H,dd，J=3.1，9.1Hz)，3.91(s,3H),4.24(m，6H)，4.41(br,2H)，7,59(d，1H,J=12.4Hz)，8.41(s，1H)。實(shí)施例3:l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-1,4-二氫-[1，8]萘啶-3-羧酸的鹽酸鹽、磷酸鹽和甲酸鹽的制備3-1鹽酸鹽將乙醇(3mL)冷卻至0"C，并加入乙酰氯(1.13mL)，然后將混合物攪拌30分鐘。將1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸(800mg)加入到反應(yīng)混合物中，然后在(TC下攪拌30分鐘。加入四氫呋喃(4mL)，然后將混合物攪拌30分鐘。通過過濾收集所得固體，干燥獲得776mg的目標(biāo)化合物(產(chǎn)率89%)。熔點(diǎn)244-245。C。^NMR(G^DMSO):31.07(d，2H，J=4.7Hz)，1.21(d,2H,J=6.8Hz)，3.68(m,1H)，3.94(s,3H)，4.17(m，2H)，4.40(s,2H)，4.53(s,2H),8.03(d,1H,J=12.5Hz),8.590,1H)。3-2磷酸鹽將1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸(5.0g)加入到50。/。的乙醇(180mL)中，然后在5(TC下攪拌混合物10分鐘。加入磷酸(0.84mL)，然后將混合物在5(TC下攪拌1小時。將混合物冷卻至室溫。通過過濾收集所得固體，干燥獲得3.8g的目標(biāo)化合物(產(chǎn)率61%)。熔點(diǎn)220-222°C。HNMR(^"DMSO):51.11(d,2H,J=4.2Hz)，1.21(d,2H,J=7.6Hz)，3.71(m,1H)，3.97(s,3H)，4.18(m，4H),4.41(m，2H)，4.55(m,2H),8.06(d，1H，J=12.6Hz),8.59(s,1H)。3-3甲酸鹽將1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸(5.0g)溶解在乙醇(50mL)中，然后加入85%的甲酸(0.5mL)。將混合物在5(TC下攪拌2小時，然后再在室溫下攪拌3小時。通過過濾收集所得固體，干燥獲得4.07g目標(biāo)化合物(產(chǎn)率73%)。熔點(diǎn)198-199°C。HNMR(^"DMSO):S1.10(d，2H，J=2.4Hz)，1.25(d，2H，J=6.6Hz)，3.72(m,1H)，3.98(m，5H)，4.09(m,2H)，4.39(s,2H)，4.55(s，2H),8.04(d,1H,J=12.6Hz),8.31(s,1H),8.58(s,1H)。實(shí)施例4A:各種鹽形式的溶解性測定在室溫條件下測定了在各種溶劑條件下的母體化合物的溶解性、鹽酸鹽的溶解性、D-天冬氨酸鹽的溶解性和L-天冬氨酸鹽的溶解性。結(jié)果示于表1。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>如表1所示，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽，和1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1,4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的L-天冬氨酸鹽具有比l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-萄-4-氧代-1,4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸或其鹽酸鹽更好的溶解性。l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽、和l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的L-天冬氨酸鹽在蒸餾水中的溶解性比鹽酸鹽的溶解性可高約5-6倍，在pH為1.2時，比鹽酸鹽的溶解性高約17-27倍，和/或在pH為6.8時，比鹽酸鹽的溶解性高約69-130倍。實(shí)施例4B:各種鹽形式的溶解性測定在室溫下測定如上所述制備的1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽和l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的L-天冬氨酸鹽、以及1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的各種鹽形式在蒸餾水中的溶解性。結(jié)果如下表所示，其中溶解性被轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的游離堿的溶解性(mg/ml)。<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>如上所示，本發(fā)明的1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽和1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的L-天冬氨酸鹽顯示出最好的溶解性。實(shí)施例5:D-天冬氨酸鹽的穩(wěn)定性測定將30mg實(shí)施例1制備的l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽溶解在100ml的蒸餾水中，然后在室溫下進(jìn)行穩(wěn)定性測定。結(jié)果示于表2:表2:表2-D-天冬氮酸鹽的穩(wěn)定性時程含量(％)初始99.321周后99.162周后99.04如表2所示，在實(shí)驗(yàn)的時程內(nèi)，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽在室溫下沒有改變其純度。因此發(fā)現(xiàn)其化學(xué)穩(wěn)定性非常適于可注射制劑。實(shí)施例6:小鼠毒性實(shí)驗(yàn)在雄性ICR小鼠種確認(rèn)l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1,4-二氫-[1,8廣啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽的毒性。將雄性ICR小鼠分為六個劑量組(每組5只小鼠)，然后禁食24小時(除了水之外不給喂食)。以2000、1000、500、250、125和0(對照)mg/kg的每日劑量每日腹膜內(nèi)給藥一次(總注射體積10ml/kg)，將1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽(如實(shí)施例1制備)和其它鹽形式(包括甲磺酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽和甲酸鹽)給藥。在觀察14天后，測定半致死劑量(LD50)、近似致死劑量、和最大耐受劑量。測量了死亡率、體重變化和器官重量變化。同時進(jìn)行了尸檢和組織病29理學(xué)觀察。2000mg/kg組的所有小鼠和1000mg/kg組的2只小鼠在給藥后兩小時內(nèi)死亡。1000mg/kg組的1只小鼠在給藥后八天死亡。在一些小鼠中可以檢測到腹瀉和/或軟糞便。在一些小鼠中可以檢測到脾、睪丸或附睪的重量增加。在500mg/kg組中可以檢測到睪丸管內(nèi)腔中的未成熟精細(xì)胞。一些小鼠表現(xiàn)出在脾的附著纖維組織中炎癥細(xì)胞的浸潤(infiltmtion)，或肝中纖維組織附著區(qū)域周圍的壞死灶。毒性結(jié)果如表3所示。表3表3-小雖毒性測試<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表3所示，發(fā)現(xiàn)與其它鹽形式(包括甲磺酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽和甲酸鹽)相比，1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)_4-氧代-1，4-二氫-[1，8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽具有最高的半致死劑量和最高的近似致死劑量。因此可以推斷l(xiāng)-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽具有充分降低的毒性。實(shí)施例7:可注射制劑的制備按照如下的方法制備包含10mg/mL的活性成分的可注射制劑將lg式(I)的化合物、0.6g氯化鈉、和O.lg抗壞血酸溶解在蒸餾水中，并使得最終體積為100mL。實(shí)施例8:在比格犬中的2周重復(fù)靜脈毒性研究以每日10、5、2.5、1和0(對照)mg/kg(體重)的劑量水平對14月齡的雄性比格犬(11.8013.80kg;GaoyaoKangdaLaboratoryAnimalScience&TechnologyCo.,LTD.,China)進(jìn)行2周靜脈給藥，每日一次。監(jiān)測死亡率和體重變化、臨床體征和大體觀察(在14天內(nèi))，并監(jiān)測23種主要器官的器官重量和組織病理學(xué)。將1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽形式(實(shí)施例l)以200mg/ml的濃度均勻地懸浮在蒸餾水中，并以40、20、10和4mg/ml的濃度充分溶解。使用蒸餾水作為運(yùn)載體將實(shí)驗(yàn)物品以0.25ml/kg的劑量體積重復(fù)靜脈內(nèi)注射2周。包括運(yùn)載體對照組在內(nèi)，在所有的實(shí)驗(yàn)組內(nèi)沒有觀察到死亡率。在實(shí)驗(yàn)中觀察到的臨床癥狀為嘔吐和流涎。除了對照組外，觀察到嘔吐。在5和10mg/kg的劑量組觀察到流涎。在5和10mg/kg的劑量組零星地觀察到好動、腹瀉、注射點(diǎn)腫脹。沒有觀察到顯著的體重變化。沒有觀察到顯著的器官重量變化。實(shí)施例9:小鼠中的藥物代謝動力學(xué)使用了接收時為28-3lg體重的7周齡的雄性小鼠(ICRCD-1)。對于100mg/kg研究和10mg/kg研究中的每個，將總共72只小鼠分為18個組，9個組用于鹽酸鹽形式(實(shí)施例3),9個組用于D-天冬氨酸鹽形式(實(shí)施例1)。通過眼窩針刺在給藥后0.25、0.5、1、1.5、2、3、4和5小時取血樣。對比了在小鼠中鹽酸鹽形式(實(shí)施例3)和D-天冬氨酸鹽形式(實(shí)施例l)的藥物代謝動力學(xué)，如表4所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>收集血樣到包含肝素鈉抗凝血劑的試管中。使用WinNonlin(ver1.0,ScientificConsultingInc.,USA)計(jì)算藥物代謝動力學(xué)參數(shù)。D-天冬氨酸鹽形式(實(shí)施例1)的物代謝動力學(xué)如表6所示。表6表6-在狗中的藥物代謝動力學(xué)(5mg/kgLv.)<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>實(shí)施例12:在小鼠和大鼠中的單劑量毒性對于小鼠研究，按照以下劑量進(jìn)行D-天冬氨酸鹽形式(實(shí)施例l)的單劑量靜脈注射900、400、200、100和50mg/kg/10ml。將10ml/kg的蒸餾水用作對照。測量了死亡率、體重變化和器官重量變化。還進(jìn)行了組織病理學(xué)觀察。900和400mg/kg組中的所有小鼠都在給藥結(jié)束后死亡。200、100和50mg/kg組的小鼠沒有顯示出嚴(yán)重的毒性。沒有發(fā)現(xiàn)顯著的目標(biāo)器官。對于大鼠研究，按照以下劑量進(jìn)行D-天冬氮酸鹽形式(實(shí)施例l)的單劑量靜脈注射600、300、150、75、37.5mg/kg/5ml。將5ml/kg的蒸餾水用作對照。測量了死亡率、體重變化和器官重量變化。還進(jìn)行了組織病理學(xué)觀察。600和300mg/kg組的所有小鼠都在給藥結(jié)束后死亡。在150和75mg/kg組中可以檢測到運(yùn)動能力的損失。在150和75mg/kg組中可以觀察到微小的體重增加。在150和75mg/kg組中還可以觀察到肝和胸腺的器官重量增加。單劑量毒性的結(jié)果見表7。表7表7-在小鼠和大鼠中的IV毒性測定50。/。致死劑量(LD50)mg/kg近似致死劑量(ALD)mg/kg小鼠279,98200-400大鼠210.72150-300實(shí)施例13:靜脈團(tuán)注的毒性研究與實(shí)施例8類似地在狗和大鼠中進(jìn)行D-天冬氨酸鹽形式(實(shí)施例1)的每天一次的兩周多次劑量毒性實(shí)驗(yàn)。i.v.重復(fù)單劑量毒性的結(jié)果示于表8中。表8表8-在狗和大鼠中的IV毒性測定動物最大耐受劑量mg/kg大鼠雄性80雌性40狗雄性10實(shí)施例14:在雄性小鼠的骨髓細(xì)胞中的微核實(shí)驗(yàn)骨髓細(xì)胞遺傳學(xué)對于闡明機(jī)制以及確認(rèn)物質(zhì)致畸變活性和抗致畸變活性而言是有用的短期技術(shù)。參見RennerHW，(1990)MutatRes.244:185-6。使用小嚙齒動物的微核實(shí)驗(yàn)可以是用于實(shí)驗(yàn)新開發(fā)的試劑的基因毒性的靈敏的方法。將D-天冬氨酸鹽形式(實(shí)施例l)或環(huán)磷酰胺(CPA)用于該實(shí)驗(yàn)。對于D-天冬氨酸鹽形式(實(shí)施例1)，實(shí)驗(yàn)的靜脈內(nèi)高劑量是250mg/kg，低劑量是34200mg/kg。將70mg/kg的CPA腹膜內(nèi)給藥用作陽性對照劑量(每組使用7只雄性ICR小鼠)。在單次注射給藥24小時后，處死所有動物，評價在準(zhǔn)備的血液中的具有一個或多個核的多染性紅細(xì)胞的數(shù)量的變化，以及總白細(xì)胞變化和嗜中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的分類計(jì)數(shù)。另外，為了檢測細(xì)胞毒性的可能性，通過計(jì)數(shù)500個紅細(xì)胞計(jì)算PCE/(PCE+正染紅細(xì)胞(NCE))的比值。200或250mg/kg單次靜脈內(nèi)注射可以導(dǎo)致死亡或隨后在給藥結(jié)束后導(dǎo)致癲癇發(fā)作。對于在給藥結(jié)束后存活的小鼠，在注射后4小時內(nèi)可以檢測到運(yùn)動能力的損失。死亡率或運(yùn)動能力的損失的結(jié)果示于表9。表9表9-死亡率或運(yùn)動能力的損失<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>在CPA治療和200mg/kg注射組，在血液涂片上分類計(jì)數(shù)，檢測到血液總白細(xì)胞數(shù)量的顯著降低，以及淋巴細(xì)胞的比例的顯著增加。對于所有的D-天冬氨酸鹽形式治療的組，體重或MNPCE數(shù)量沒有顯著的改變，其中CPA治療組顯示了顯著的MNPCE增加。因此，雄性ICR的骨髓細(xì)胞的微核實(shí)驗(yàn)對于l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-1,4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的D-天冬氨酸鹽形式顯示出陰性結(jié)果。表10顯示了MNPCE的數(shù)量和PCE/(PCE+NCE)比例的變化。白細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞的變化示于表11。<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6_基)_4_氧代_1，4_二氫_[1,8捧啶_3_羧酸的天冬氨酸鹽具有優(yōu)異的物理化學(xué)性質(zhì)，包括其溶解性和穩(wěn)定性。此外，與其它鹽相比，所述天冬氨酸性鹽具有非常低的毒性，這顯示為其高得多的LD5。值。因此，其是非常有效的抗微生物劑。3權(quán)利要求1、式(I)表示的1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1，8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽式(I)。2、如權(quán)利要求1所述的天冬氨酸鹽，其中所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。3、制備如權(quán)利要求1所述的1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l,4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽的方法，其包括使1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l，8]萘啶-3-羧酸與天冬氨酸在溶劑中反應(yīng)的步驟。4、如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述溶劑是選自乙酸乙酯、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、乙腈、己烷、異丙醚和水中的至少一種。5、如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。6、抗微生物藥物組合物，其包含l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3,4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1,8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸±卜_tni。7、如權(quán)利要求6所述的組合物，其中所述天冬氨酸選自D-天冬氨酸、L-天冬氨酸、DL-天冬氨酸、或D-天冬氨酸和L-天冬氨酸的非外消旋混合物。8、如權(quán)利要求6或7所述的抗微生物藥物組合物，其中所述組合物配制用于注射。9、式(I)表示的1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-l，4-二氫-[l,8]萘啶-3-羧酸的藥學(xué)上可接受的天冬氨酸鹽10、使用治療有效量的式(I)表示的l-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2,6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1，8]萘啶-3-羧酸的至少一種藥學(xué)上可接受的天冬氨酸鹽治療動物中的疾病或病癥的方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>全文摘要本發(fā)明公開了1-環(huán)丙基-6-氟代-7-(8-甲氧基亞氨基-2，6-二氮雜-螺環(huán)[3，4]辛-6-基)-4-氧代-1，4-二氫-[1，8]萘啶-3-羧酸的天冬氨酸鹽、其制備方法、以及包含其的抗微生物藥物組合物。文檔編號A61P31/00GK101679416SQ200880011978公開日2010年3月24日申請日期2008年4月14日優(yōu)先權(quán)日2007年4月13日發(fā)明者具世光,尹壽惠,崔東洛,柳濟(jì)萬,鎮(zhèn)梁,金承煥申請人:同和藥品株式會社