專(zhuān)利名稱(chēng)：：一組防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用具有改善腦代謝的藥物與同化激素組成的藥物組合物，該藥物組合物是由腦復(fù)康與康力龍的組成制備的復(fù)方腦復(fù)康制劑，研究表明復(fù)方腦復(fù)康制劑，對(duì)老年性老年性骨質(zhì)疏松具有較好的預(yù)防及治療作用，對(duì)絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松和對(duì)腎上腺糖皮質(zhì)激素等藥物造成的骨質(zhì)疏松也有具有較好的預(yù)防及治療作用。
背景技術(shù)：
：原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥是老年人的常見(jiàn)病，從整個(gè)世界范圍來(lái)看，60歲以上老人占整個(gè)人口中的比例不斷上升，我國(guó)目前己步入老齡化杜會(huì)，因而關(guān)注老人身體健康，提高生活質(zhì)量顯得十分重要。由于骨質(zhì)疏松，老年人脊椎骨折，髖部骨折發(fā)生率在增髙，并發(fā)癥嚴(yán)重，常長(zhǎng)期臥床，失去生活能力，死亡率高達(dá)15-30%,因此防治老年骨質(zhì)疏松病不僅是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)界急待解決的問(wèn)題，也是一個(gè)社會(huì)化問(wèn)題。目前國(guó)內(nèi)夕、防治骨質(zhì)疏松癥藥物非常有限，常用的骨礦化促進(jìn)劑，如銬劑、維生素D療效有限；骨吸收捫制劑如雌激素、降鈣素、二磷酸鹽、異丙氧黃酮等雖有一定的作用，但不良反應(yīng)也多，影響臨床應(yīng)用，骨形成促進(jìn)劑如氟化物的療效一直受爭(zhēng)議，美國(guó)至今還沒(méi)有上市[2-5:。在臨床治療方面，從雌激素替代療法，至二磷羧鹽類(lèi)，降鈣素等藥物的防治已走過(guò)了幾個(gè)重要的發(fā)展階段，目前正轉(zhuǎn)入對(duì)骨形態(tài)蛋白及白細(xì)胞介素等細(xì)胞因子的治療研究，但是，至目前為止，這些用于防治骨質(zhì)疏松的藥物，均有不少副作用，有些療效一般，有些價(jià)格昂貴，目前尚沒(méi)有一種公認(rèn)的理想藥物，因此，尋找髙效低毒防治骨質(zhì)疏松的藥物仍然是藥理學(xué)工作者迫切的任務(wù)。在防治骨質(zhì)疏松的藥物中，人們研究最多的是內(nèi)分泌因素對(duì)骨的影響而忽略了神經(jīng)因素的影響，在最近幾年的研究當(dāng)中發(fā)現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)骨代謝中的重要作用，特別是下丘腦在調(diào)節(jié)骨代謝中起重要作用。右神經(jīng)遞質(zhì)方面的研究,經(jīng)過(guò)多年的研究，研究者們發(fā)現(xiàn)腦內(nèi)有多種遞質(zhì)與骨質(zhì)疏松存在關(guān)系,其牛5-羥色胺，乙酰膽堿，兒茶酚氨類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)與骨質(zhì)疏松的關(guān)系較為密切，有人發(fā)現(xiàn)老年大鼠腦內(nèi)乙酰膽堿M受體的含量與骨量的降低明顯相關(guān)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Jt:夕、有報(bào)道，中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)骨代謝的調(diào)節(jié)就目前的研究發(fā)現(xiàn)有兩條通路，都是通過(guò)下丘腦起中標(biāo)調(diào)節(jié)作用，一條是下丘腦-垂體-腺體軸，一條是瘦素-交感神經(jīng)軸，前一條軸其的作用機(jī)理和作用規(guī)律研究得比較透徹，后一條軸是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一條軸，而且對(duì)新一代的抗骨腐疏松藥物的發(fā)現(xiàn)超到了理論引導(dǎo)作月。中樞神經(jīng)系統(tǒng)通過(guò)外周通路的介導(dǎo)，対-骨的代謝起調(diào)節(jié)作用，內(nèi)分泌系統(tǒng)和外周交感神經(jīng)系統(tǒng)都有介導(dǎo)作用，當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)發(fā)生變化時(shí)，骨代謝均可發(fā)生變化。人的老化首先是腦的老化，腦老化引起一系歹J的其他組織器官的老化，因此抗腦衰老可以達(dá)到抗其他組織衰老的效果，腦在調(diào)節(jié)骨代謝中起主導(dǎo)地位，垴的老化對(duì)老年性骨質(zhì)疏松，特別是II型老年性骨質(zhì)疏松的發(fā)生起重要作用。因此抗腦衰老的藥物對(duì)抗骨質(zhì)疏松必定有一定的療效。雄激素在骨骼的生長(zhǎng)發(fā)育和維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定中有重要作用。最近幾年，由于對(duì)老年男性骨質(zhì)疏松患者致殘率、致死率認(rèn)識(shí)的提高，雄激素對(duì)骨的作用機(jī)制已逐漸成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)<現(xiàn)巳證明成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞、骨細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、巨核細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞的表面均有雄激素受體(AR)，雄激素對(duì)成骨細(xì)胞的調(diào)控是直接通過(guò)成骨細(xì)胞上的AR實(shí)現(xiàn)的，并證明睪酮(T)、雙氫睪酮(DHT)與AR具有較強(qiáng)的親和力。最近的研究證實(shí)破骨細(xì)胞中也存在ARt雄激素右骨吸收方面的作用可能與雄激素對(duì)破骨細(xì)胞前體細(xì)胞分化成破骨細(xì)胞的抑制作用有關(guān)。雄激素參與成骨細(xì)胞的一系列功能，包括骨細(xì)胞的增殖、合成與分泌各種生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子.產(chǎn)生骨基質(zhì)蛋白(骨膠原、骨鈣素、骨橋蛋白等)，同時(shí)各種局部因子在骨代謝中起調(diào)節(jié)和相互平衡的作用(雄激素在男性骨骼生長(zhǎng)發(fā)育中起著非常重要的作用。臨床研究顯示，雄激素通過(guò)刺激成骨細(xì)胞的增殖和發(fā)育，從而促進(jìn)兒童骨骼增長(zhǎng)、增粗，促進(jìn)青春期骨骼生長(zhǎng)髙崆和骨成熟，成年后，與其他骨代謝激素共同維持骨量和骨成熟。青少年期雄激素缺乏，如青春期前性腺功能不全的患者(Klinefelter綜合征)，其骨礦物質(zhì)密度(BMD)降低，峰值骨量減少，密質(zhì)骨、小梁骨的數(shù)目不均衡性減少，在成年以前進(jìn)行雄激素補(bǔ)充治療，可以達(dá)到較高M(jìn)骨密度。我們的研究己經(jīng)發(fā)現(xiàn)，一種人工合成的同化類(lèi)激素司坦唑醇，可促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，并可增加鈣鹽沉積，促進(jìn)骨合成的作用，本課題組曾證明其對(duì)潑尼松大鼠骨丟失有明顯的防治作用，l廟床資料報(bào)道該藥能提高骨質(zhì)疏松癥病人的骨密度，具有促進(jìn)骨形成和抑制骨吸收作用，對(duì)治療骨質(zhì)疏松癥有一定的療效。根據(jù)我們的研3:結(jié)果，特別是對(duì)改善腦代謝的藥物f畝復(fù)康及同化類(lèi)激素康力龍的深入研究發(fā)現(xiàn)這兩種藥物分別應(yīng)用吋，對(duì)老年性骨質(zhì)疏松可以取得一定的效果，但作用不是很好，特別是同化激素，在預(yù)防骨質(zhì)疏松方面至今還存在爭(zhēng)議，本發(fā)明提出用具有改善腦代謝的藥物與同化激素組成的藥物組合物，應(yīng)用于骨質(zhì)疏松的預(yù)防和治療，由于藥物作用于不同的環(huán)節(jié)，保證了抗骨質(zhì)疏松的藥效，同時(shí)，又可以減少同化激素帶來(lái)的許多不良反應(yīng)，該藥物組合物通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，已證明有良好的預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥的作用。也有資料顯示，成骨細(xì)胞中有雄激素受體，因此，康力龍亦有可能是通過(guò)作用成骨細(xì)胞上的雄激素受體而發(fā)揮作用。而垴復(fù)康(吡拉西坦)有抗物理因素、化學(xué)因素所致的腦功能損傷似的作用。能促進(jìn)腦內(nèi)ATP,可促進(jìn)乙酰膽堿合成并正增強(qiáng)神經(jīng)興奮的傳導(dǎo)，具有促進(jìn)腦內(nèi)代謝作用?？梢詫?duì)抗由物理因素、化學(xué)因素所致的腦功能損傷。對(duì)缺氧所致的逆行性健忘有改進(jìn)作用?？梢栽鰪?qiáng)記憶，提高學(xué)習(xí)能力[39]
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提出用"具有改善腦代謝的藥物與同化激素組成的藥物組合物"防治"骨質(zhì)疏松癥"硏究的理論和思路，我們發(fā)現(xiàn)改善腦代謝的藥物腦復(fù)康具有激活、保護(hù)和修復(fù)大腦神經(jīng)腦細(xì)胞的作用，同時(shí)，對(duì)骨形成也有較好的'足進(jìn)作用，可用于防治骨質(zhì)疏松，同時(shí)與同化激素康力龍聯(lián)合組成復(fù)方腦復(fù)康制劑，療效更好。本發(fā)明提出用具有改善腦代謝的藥物與同化激素組成的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其中改善腦代謝的藥物是指腦復(fù)康，其他同類(lèi)藥物如茴拉西坦、吡硫醇、利斯的明、多奈哌齊、石杉?jí)A甲、雙氫麥角堿、都可喜、艾地苯醌、三七總皂苷、銀杏內(nèi)酯、黃苳莖葉黃酮、巴戟天寡糖、養(yǎng)芍總苷、阿魏酸、知母皂苷、紅花等改善腦代謝的活性藥物也可以應(yīng)用于本藥物組合物在防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物中，同化激素是指康力龍，其他同化激素苯丙酸諾龍，諾龍，去氫甲睪酮，環(huán)丙酸諾龍，美替諾龍、美雄酮、乙基諾龍、羥基甲睪、甲睪酮、勃地酮、睪酮、表睪酮等藥物也可以應(yīng)用于本藥物組合物。本發(fā)明提出用具有改善腦代謝的藥物與同化激素組成的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，主要是指腦復(fù)康和康力龍組戌的組合物，腦復(fù)康與康力龍的組成比例為800:12，即腦復(fù)康在該復(fù)合物中按重量計(jì)算為800克時(shí)，康力龍?jiān)谠搹?fù)合物中按重量計(jì)算為12克。這種藥物組合物可按藥瓶學(xué)的工藝添加片劑生產(chǎn)的必要的輔料，壓制成片劑，供臨床應(yīng)用，也可按現(xiàn)代工藝制備成丸劑、顆粒劑、膠囊劑、注射劑和任何一種臨床可接受的藥物制劑，供臨床應(yīng)。本發(fā)明提出用腦復(fù)康和康力龍組成的組合物，制備成片劑時(shí)，每片含腦復(fù)康400毫克，康力龍0.51毫克。臨末應(yīng)用時(shí)每天13片。具體實(shí)施例方式實(shí)施例一1材料和方法1.1動(dòng)物來(lái)源和飼養(yǎng)SPF級(jí)3月齡SD雄性大鼠33只，實(shí)驗(yàn)時(shí)體重(213士12)g;SPF級(jí)5月齡SD雌性大鼠63只，實(shí)驗(yàn)時(shí)體重(258士i8)g。(由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)2006A015)飼養(yǎng)條件飼養(yǎng)室內(nèi)溫度保持24"28",濕度在50%60%，專(zhuān)室分籠飼養(yǎng)，每籠兩只，隔日更換墊料，自由攝水、攝食(本院動(dòng)物中心提供的標(biāo)準(zhǔn)飼料)，每周稱(chēng)體重一次。1.2藥物的制備復(fù)方司坦唑醇取腦復(fù)康21.2g+康力龍27mg溶于500ml蒸餾水中配成，4"冰箱保存，一周內(nèi)使用。鹽酸四環(huán)素稱(chēng)取四環(huán)素125g,用生理鹽水配制成2511^1^的四環(huán)素溶液50ml。鈣,素稱(chēng)取鈣黃綠素0.5g，溶于2%的Na2C03的溶液中，配成0.5%的鈣環(huán)綠素溶液。1.3動(dòng)物分組和給藥33只3月齡清潔級(jí)級(jí)SD大鼠，按體重對(duì)等原則隨機(jī)分為3組，爺組動(dòng)物數(shù)及給藥方法見(jiàn)下表，每天灌胃給藥，連續(xù)給藥卯天組別實(shí)瞼動(dòng)物數(shù)(只)給藥方案正営對(duì)照組(NC組)13皮下注射0.9%生理鹽水+蒸餾水51111/1￡8/<1灌胃D-半乳糖組(DG組)10皮下注射100mg/kg/dD"半乳糖+蒸餾水51111^8/(1灌胄復(fù)方a製康組10皮下注射100mg/kg/dD-半乳糖(SP組〉+(康力龍+腦復(fù)康)(0.541118/1￡8^+4321118/1(^(1)灌胃所有雄性大鼠處死前13、14天皮下注射25mg/kg鹽酸四環(huán)素各一次，于處死前3、4兩天皮下注射鈣黃綠素5mg/kg各一次，兩熒光標(biāo)記間隔10天。每周稱(chēng)量一次體重，自由飲水給食。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用3"/。戊巴比妥鈉(1.5ml/kg)行腹腔fe射麻醉后右心室徹底抽血處死(以減少骨髓中紅細(xì)胞，排除千擾，使骨片更易于觀察分析)。檢測(cè)指標(biāo)①左側(cè)脛骨上段制成不脫鈣骨切片、中段骨制成不脫鈣骨磨片，進(jìn)行骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)檢測(cè)。②左側(cè)股骨測(cè)定其骨羥館氨酸、骨礦物元素的含量。③右側(cè)股骨進(jìn)行骨生物力學(xué)測(cè)定。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每周稱(chēng)重一次，稱(chēng)重前一天禁食不禁水，第二天給藥前稱(chēng)重，數(shù)據(jù)錄入電腦，然后調(diào)整給藥判量并進(jìn)行給藥。2實(shí)驗(yàn)方法2.1大鼠體重的翻定從藥后的第].天開(kāi)始，用大鼠稱(chēng)每周稱(chēng)量一次各組大鼠的體重，，稱(chēng)重前先禁食禁水12小時(shí)《選取第1天、第4周、第S周和第12周大鼠的體重進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。通過(guò)大鼠體重的測(cè)定可以反映出大鼠的生長(zhǎng)情況。2.2骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)測(cè)定方法2.2.1不脫弼骨骨標(biāo)本的包埋(1)包埋前單體(甲基丙烯酸甲酯)的洗脫方法①將1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗(2L)中。②加入5WNaOH溶液500m1,充分搖勻，靜置，待溶液分層后，放出下層溶液，棄去。③重復(fù)操作"②"三次，三次的總量與單體量相當(dāng)(洗脫阻滯劑)。加入5,〕0ral蒸餾水，充分搖勻，靜置，待溶液分層后，放出下層溶液，棄去。⑤重復(fù)操作"②"三次，三次的總量與單體量相當(dāng)(洗脫NaOH)。'⑥將上述處理過(guò)的單體放入無(wú)水CaCl2(1000ml:500g)脫水2次。⑦濾紙過(guò)濾，收集濾液。-20°0保存?zhèn)溆茫诙烊〕隹从袩o(wú)冰晶漂浮無(wú)，表明無(wú)水可備用；有，則需重新脫水。(2)脛骨上段包埋前的制備過(guò)程(D暴露骨號(hào)腔將固定衩中的脛骨用仔速鋸鋸開(kāi)，暴露骨髄腔。②脫水分別通過(guò)70%乙醉2天，5'5%乙醇2天，100°/。乙醇1天，100%乙醇1天，四個(gè)脫水過(guò)程，二甲苯透明1天。③滲透先后用浸液:[、浸液]i、浸液m分別浸透2天。三種浸衩的配制方法如下浸液:甲基丙烯酸甲酯75ml，鄰苯二甲酸二丁酯25ml，磁力攪拌器上攪拌3小時(shí)。浸液II甲基丙烯酸甲酯75ml,鄰苯二甲酸二丁酯25ml，過(guò)氧化笨甲酰l.Og,磁力攪拌器上攪拌4小時(shí)。浸液n甲基丙烯酸甲酯75ml,鄰苯二甲酸二丁酯25ml，過(guò)氧化苯甲酰2.58，磁力攪拌器上攪拌6小時(shí)。(3〉包埋用新鮮配置的浸液rai:當(dāng)日配置)倒入裝有浸潤(rùn)好的骨頭塊容積約為15mi的小瓶中，倒入的包埋劑約，蓋好瓶蓋，并在瓶蓋上插一注射器針頭，室溫過(guò)夜。第二天把包埋瓶置入37-39^的水育箱中聚合約48小時(shí)，直至包埋塊形成。若為脛骨中段骨，則需在包埋前幾天預(yù)先倒入少量包埋劑于小玻璃瓶中作包埋塊底襯，變硬后為1.5cm高為宜。包埋時(shí)將脛骨中段至于瓶中央，在倒入2cm高的包埋劑。若為脛骨上段，僅需將其鋸開(kāi)面貼瓶底中央包埋，倒入約3，5c邁高的包埋劑即可。2.2.2不脫韓骨組織片的制備(1)載玻片的制備CD清洗把玻片在酸缸中浸泡24小吋，取出，先用自來(lái)水沖洗，后用單蒸水沖洗，晾干。②上膠1000m]蒸餾水中加入？g明膠，加熱使明膠溶解，將另配制的4%澄明硫酸鉻鉀溶液加入到沸騰的明膠溶液中，不斷挽拌混合液，待溶質(zhì)溶解后，停止加熱，待溶液冷卻并保持在5i)C左右即可。將載波片在501C的膠液中浸泡2分鐘，使膠體黏附均勻，取出放置于晾片板上，晾干備用(2)切片①打磨用石膏打磨機(jī)將包埋塊打磨成合適大小，并暴露切面，把切面打磨到合適位置。②切片將打磨好的塊固定在切片機(jī)上，右手慢慢切下。同時(shí)，左手用一沾有40%乙醇的軟毛刷輕輕地?fù)芟虑衅?，注意不要弄爛切下的片，然后用毛刷把片轉(zhuǎn)移到滴有一滴70%酒精的載玻片上，再滴一滴70%酒精，然后漫漫展平切片，蓋上一張薄塑料片，并用濾紙將多余的酒精吸干。一個(gè)標(biāo)本切兩種厚度的片5ym(薄片)和9jxm(厚片)薄片用于Masson-GoldnerTrichrome染色數(shù)破骨鉑胞；厚片可直接封片，測(cè)量動(dòng)態(tài)參數(shù)；或硝酸銀染色，測(cè)量靜態(tài)參數(shù)。③烤片將切好的一組片，用夾子夾穩(wěn)，放入40t:左右的鼓風(fēng)烤箱中烤4小時(shí)左右，取出備用。(3〉骨片染色5tim的薄片常采用Mas:jon-GoldnerTrichrome染色，染色后，骨質(zhì)為綠色，骨髓為紅色，用于觀察骨小梁表面的破骨細(xì)胞和測(cè)量其周長(zhǎng)。9pm的厚片可采用硝酸銀染色，染色后，骨廣為黑色，反映礦化后的骨質(zhì)，用于觀察骨量和骨結(jié)構(gòu)。(4)磨片制備磨片是將,涇骨中段先用鋸片機(jī)鋸成200,厚的骨片，鋸骨時(shí)從脛腓韌帶聯(lián)合近側(cè)端以脛骨干下端與別滑完全分離為有效骨片，可盡量減少切片所造成的誤差。共鋸三片，脛腓結(jié)合處為第一片，接下來(lái)依次為第二、三片。將制得的第二片骨片先用磨刀石在大理石面上磨成100pm的片，然后再在磨砂玻璃上磨成50jim的薄片，再進(jìn)行酒精梯度脫水70%-70%-95%-95%-100%-1(K)%,二甲苯透明后樹(shù)脂封片，測(cè)量皮質(zhì)骨的各項(xiàng)參數(shù)。2，23骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)測(cè)定(1)測(cè)量分析范圍脛骨上段測(cè)量范圍從生長(zhǎng)板往下畫(huà)出0.5mm'以跡開(kāi)初級(jí)海綿體，再?gòu)?.5皿處往下畫(huà)3mm。(2)動(dòng)、棄*態(tài)參數(shù)測(cè)量和計(jì)算本實(shí)驗(yàn)所有參數(shù)采用國(guó)際通用標(biāo)準(zhǔn)骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)術(shù)語(yǔ)命名[15_16]。用半自動(dòng)圖象數(shù)字化儀直接測(cè)出參數(shù)的中英文名稱(chēng)、符號(hào)及單位等如表2.3和表2.5所示。但這些參數(shù)還不能直接用于分析骨量、骨結(jié)構(gòu)、骨形成和骨吸收等,要通過(guò)國(guó)際通用的公式[21]對(duì)直接測(cè)得的參數(shù)計(jì)算，才能用于分析。計(jì)算參數(shù)的中英文名稱(chēng)、符號(hào)及計(jì)算公式等參見(jiàn)本實(shí)驗(yàn)第一部分25,26頁(yè)表2.4禾口表2.6,祈示。(3)參數(shù)的意義①靜態(tài)參數(shù)靜態(tài)參數(shù)用來(lái)評(píng)價(jià)藥物防治效果，描述骨量多少和骨小梁的形態(tài)結(jié)構(gòu)。骨小梁面積百分?jǐn)?shù)(％Tt.Ar)指骨小梁面積占骨組織面積的百分率/反映骨量的多少。從數(shù)學(xué)公式上推算，它等于骨小梁寬度與數(shù)量的乘積的i/10，也就是說(shuō)，骨量多少由寬度和數(shù)量二者共同決定。骨小梁寬度(Tb.Th)用于描述骨小梁結(jié)構(gòu)形態(tài)，解釋骨量變化。其變化可影響骨量，在數(shù)量一定的條件下，寬度越寬，骨量越多。骨小梁數(shù)量':Tt.N)用于描述骨小梁結(jié)構(gòu)形態(tài)，解釋骨量變化。其變ffc可影響骨量，在寬度一定的條件下，數(shù)量越多，骨量越多。骨小梁分離度(Tb.Sp)措骨小梁之間的平均距離，用來(lái)描述骨小梁結(jié)構(gòu)形態(tài)。分離度越大，骨小梁之間班〖離就越大，骨就越疏松。皮質(zhì)骨面積':Ct.Ar)反映皮質(zhì)骨骨量的多少，是中段骨組織橫截面與骨髓腔面積之差。皮質(zhì)骨面積百分?jǐn)?shù)(Ct.Ar%)反映皮質(zhì)骨在中段骨橫截面總骨組織面積中所占比例。骨髄腔面積百分?jǐn)?shù)(%Ma.Ar)反映骨髓腔在中段骨橫截面總骨組織面積中所占比例。②動(dòng)態(tài)參數(shù)動(dòng)態(tài)參數(shù)包括骨形成參數(shù)和骨吸收參數(shù)，通過(guò)動(dòng)態(tài)參數(shù)，可以了解骨表面礦化的量和速率，井解釋靜態(tài)參數(shù)變化的原因。A.骨形成參數(shù)熒光周長(zhǎng)百分率(％LJ'm)反映進(jìn)行礦化的骨周長(zhǎng)占骨表面總周長(zhǎng)的百分率，也反映成骨婦胞的數(shù)量。礦化沉積率(MAR〉指每天礦化的寬度。反映骨礦化的快慢，代表成骨細(xì)胞的活性。骨形成蜜(lUF'R/BS)'KL.Pm與MAR的乘積，代表骨表面形成的活躍程度。骨形成率〔BFR/BV)每年新形成的骨小梁面積占骨小梁總面積的百分比，代表骨形成和骨轉(zhuǎn)換的活躍程度。此參數(shù)越高，表示骨轉(zhuǎn)換也越高，是反映轉(zhuǎn)換的一個(gè)重要指標(biāo)。骨形成率〔BFR/TV)每年新形成的骨小梁面積占骨組織面積的百分比，代表每年骨小梁表面新形成骨的總量。此參數(shù)與BFR/BS、BFR/BV不同，它受兩個(gè)因素影響，一是骨量的多少，骨量越多就提供越多的新骨形成所需的骨小梁表面；二是骨形成活躍程度，骨形成越活躍，在單位長(zhǎng)度上形成的新骨就越多。所以有時(shí)雖然骨形成很活躍，但由于骨量太少，此參數(shù)也會(huì)下降。從公式推理可得出，BFR/TV等于c/。Tb.Ar與BFR/BV乘積的1/100。B.骨吸收參數(shù)單位骨小梁面積破骨細(xì)胞數(shù)(Oc.N)單位骨小梁面積上的破骨細(xì)胞數(shù)，反映與破骨細(xì)胞有關(guān)的骨吸收情況。破骨細(xì)胞周長(zhǎng)百分率((b.Pm)O破骨細(xì)胞覆蓋的骨小梁周長(zhǎng)占骨小梁表面總周長(zhǎng)的百分比，不僅反映破骨細(xì)胞數(shù)目的多少，還反映破骨細(xì)胞大小及其骨吸收的活躍程度。2..2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用f士S表示，采用SPSS14.0軟件。王態(tài)分布數(shù)據(jù)的組間比較采用單因素方差分析(ANOVA)，方差齊釆用LSD檢驗(yàn)；方差不齊則采用Tamhane'sT2檢驗(yàn)；偏態(tài)分布則用Kruskal-M'allis秩和檢驗(yàn)后，再進(jìn)一步用Conover'st檢驗(yàn)比較兩兩組間差別。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1復(fù)方腦復(fù)康對(duì)E—半乳糖大鼠體重的影響復(fù)方腦復(fù),泰對(duì)E'-半乳糖大鼠第O天、4周、8周和16周體重的影響見(jiàn)表4.1:表4.1復(fù)方腦復(fù)康對(duì)D-半乳糖大鼠體重變化的影響組別4W8W12W對(duì)照組214.6±22270.3±30319.1±39373.6±30D":卞-乳糖新.215.6±22288.6±33369.3士20林420.6±50*.復(fù)方腦復(fù)康組217.1±7.2285.6±15350.3士23A384.6土23A由表3.1的結(jié)果可見(jiàn)，與對(duì)照組比較，D-半乳糖組大鼠的體重在第三、第四周有明顯的增加，復(fù)方腿f(wàn)復(fù)康組高于對(duì)照組，說(shuō)明D-半乳糖、復(fù)方腦復(fù)康能引起大鼠體重出現(xiàn)明顯的增加。3.2復(fù)方腦復(fù)康對(duì)D-半乳糖大鼠脛骨上段松質(zhì)骨形態(tài)計(jì)量學(xué)靜態(tài)參數(shù)的影響對(duì)照組大鼠的脛骨上段松質(zhì)骨骨小梁呈現(xiàn)結(jié)構(gòu)緊密、粗細(xì)均勻、連續(xù)性好；D-半乳糖組骨小梁結(jié)構(gòu)顯得稀疏，細(xì)小，個(gè)別呈結(jié)節(jié)或鈕扣狀，出現(xiàn)大片無(wú)骨小梁骨髄區(qū)；復(fù)方腦復(fù)康組的小梁骨較l:'-半乳糖組有,折增粗，增多，連續(xù)性有所恢復(fù)。復(fù)方腦復(fù)康對(duì)D-半乳糖大鼠脛骨上段骨組織計(jì)量學(xué)中靜態(tài)參數(shù)94Tb.Ar(骨小梁面積百分?jǐn)?shù))、Tb.Th(骨小粱厚度)、Tb.N(骨小梁數(shù)量)、Tb.Sp(骨小梁分離度)的影響見(jiàn)表2.2:表2.2復(fù)方腦復(fù)康對(duì)1)-半乳糖大鼠松質(zhì)骨靜態(tài)參數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由表3.2可知與對(duì)照組比較.D-半乳糖組的骨形態(tài)計(jì)量學(xué)研究觀察到脛骨上段的靜態(tài)參數(shù)中骨小梁面積百分率(％Tb.Ar)和骨小梁數(shù)量(Tb.N)分別降低了27.6%、12.76%;骨小梁分離度(Tb.Sp)增加了2.5.5%(P<0.05);而與3)-半乳糖組比較，復(fù)方腦復(fù)康組脛骨上段的靜態(tài)參數(shù)中骨小粱面積百分率(％Tb.Ai)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁數(shù)量(Tb.N)分別增加了62.25%、37.53°/。、40.59%，骨小梁分離度(Tb.Sp)減少了26.5%。說(shuō)明復(fù)方腦復(fù)康可以有效預(yù)防E-半乳糖對(duì)大鼠松質(zhì)骨顯微結(jié)構(gòu)的破壞，3.3復(fù)方腦復(fù)康對(duì)E'-半乳糖大鼠脛骨上段松質(zhì)骨形態(tài)計(jì)量學(xué)吸收參數(shù)的影響復(fù)方腦復(fù)康對(duì)D-半乳糖大鼠脛骨上段骨組織計(jì)量學(xué)中骨吸收參數(shù)Oc.N(單位骨小梁面積破骨細(xì)胞數(shù))、％Oc.Pm(破骨細(xì)胞周長(zhǎng)百分?jǐn)?shù))的影響見(jiàn)表3.3表3.3復(fù)方腦復(fù)康對(duì)D-半乳糖大鼠松質(zhì)骨吸收參數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由表3.3可知與對(duì)照組相比，D-半乳糖組的單位骨小梁面積破骨細(xì)胞數(shù)(Oc.N)、破骨細(xì)胞周長(zhǎng)百分?jǐn)?shù)(％Oc.Pm)分別增加36.4%、55.6%(PO.Ol)。說(shuō)明D-半乳糖能明顯增加破骨細(xì)胞的數(shù)量及活性。和D-半乳糖組相比較，復(fù)方腦復(fù)康組的OcN"/。和Oc.Pm分別減少68.66%、50.79%(PO.05);提示復(fù)方腦復(fù)康能明顯減少破骨細(xì)胞的數(shù)量及活性。3.4復(fù)方腦復(fù)康組對(duì)D-半乳糖大鼠脛骨上段松質(zhì)骨形態(tài)計(jì)量學(xué)動(dòng)態(tài)參數(shù)的影響復(fù)方腦復(fù)康對(duì)D-半乳糖大鼠脛骨上段骨熒光標(biāo)記觀察可見(jiàn)，對(duì)照組大鼠松質(zhì)骨的熒光較為明亮，能夠看見(jiàn)較為清晰的綠色沉積帶，但黃色的沉積帶不明顯，雙熒光標(biāo)記并不是十分清晰；而與對(duì)照組相比，D-半乳糖組大鼠松質(zhì)骨的熒光顯得較為明亮，熒光豐富，雙熒光標(biāo)記較為清晰；而與1)-半乳糖組相比，復(fù)方腦復(fù)康組的熒光標(biāo)記同樣十分明亮，綠色和黃色的雙熒光標(biāo)記十分淸晰。復(fù)方腦復(fù)康對(duì)D-半乳糖大鼠脛骨上段骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)中動(dòng)態(tài)參數(shù)%1^!11(熒光周長(zhǎng)百分率)、MR(骨礦化沉積率)及三種骨形成率指標(biāo)BFR/ES、BFR/BV、BFR/TV的影響見(jiàn)表3.4:表3.4復(fù)方腦復(fù)康對(duì)D.半乳糖大鼠脛骨脛骨上段松質(zhì)骨動(dòng)態(tài)參數(shù)的影響組別%L.PnMARBFR/BSBFR/BVBFR/TV(%)(um/d)(um/d*100)(%/year)(%/year)對(duì)照組2.72±1.2，.74±0.94.53±2.758.站4.86.95±4.2D-半乳糖組4.60±4.040.49±0.6**4.64±7.862.7±835.8U7.87復(fù)方臟^K組3.70±2.50.88±0.541.37±40.57.15±7.1沐...與^"私逾'Af乾"**/><0.0.〖;.與￡)"-#輿薪逝比乾^1尸<0.05.由表3.4可知，與對(duì)照組相比，0-半乳糖組大鼠的。/丄.1>111(熒光周長(zhǎng)百分率)有增加的趨勢(shì)，但變化并無(wú)顯著意義(P>0.05)，而MAR(骨礦化沉積率)則下降了71.84%(PO.05),反映了D-半乳糖對(duì),弳骨上段松質(zhì)骨的作用主要表現(xiàn)為抑制骨礦化的作用；而與D-半乳糖組相比，復(fù)方腦復(fù)康組的各項(xiàng)指標(biāo)均沒(méi)有出現(xiàn)明顯的變化。4.討論與D-半乳塘組相比較，復(fù)方腦復(fù)康+D-半乳糖組可以使D-半乳糖大鼠脛骨上段的骨小梁面積百分鑾。/nTbAr)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁數(shù)量(Tb.N)分別增加了62.25%、9.96%、40.59%,以上指標(biāo)均高于正常組；使骨小梁分離度(Tb.Sp)減少了26.5%，也要低于正常組的水平；而與D--半乳糖組相比較，復(fù)方腦復(fù)康+D-半乳糖組單位骨小梁面積破骨細(xì)胞數(shù)(Oc.N)、破骨細(xì)胞周長(zhǎng)百分?jǐn)?shù)(％Oc.Pm)分別減少了55.22%、41.73。/。(P<0.05)，而且均低于正常組的水平；與D-半乳糖組相比較，復(fù)方腦復(fù)康+D-半乳糖組的脛骨上段骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)中動(dòng)態(tài)參數(shù)均沒(méi)有出現(xiàn)明顯的變化，與正常組比較也沒(méi)有顯著意義。說(shuō)明復(fù)方腦復(fù)康主要是通過(guò)抑制骨吸收來(lái)達(dá)到防治D-半乳糖大鼠的骨丟失的作用。D-半乳糖大鼠的骨丟失的原因可能與D-半乳糖影響了下丘腦-垂體-性腺軸的功能有關(guān)，而復(fù)方腦復(fù)康由腦復(fù)康和康力龍配伍而成，康力龍是一種人工合成的同化類(lèi)激素，可促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，并可培加鈣鹽沉積，促進(jìn)骨合成的作月，本課題組曾證明其對(duì)潑尼松大鼠骨丟失有明顯的防治作用，臨床資料報(bào)道該藥能提高骨質(zhì)疏松癥病人的骨密度，具有促進(jìn)骨形成和抑制骨吸收作用，對(duì)治療骨質(zhì)疏松癥有一定的療效。也有資料顯示，成骨細(xì)胞中有雄激素受體，因此，康力龍亦有可能是通過(guò)作用成骨細(xì)胞上的雄激素受體而發(fā)拝作用。而腦復(fù)康有抗物理因素、化學(xué)因素所致的腦功能損傷似的作用。能促進(jìn)腦內(nèi)ATP,可促進(jìn)乙酰膽堿合成并正增強(qiáng)祌經(jīng)興奮的傳導(dǎo)，具有促進(jìn)腦內(nèi)代謝作用?？梢詫?duì)抗由物理因素、化學(xué)因素所致的腦功能損傷。對(duì)缺氧所致的逆行性健忘有改進(jìn)作用。可以增強(qiáng)記憶，提高學(xué)習(xí)能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明復(fù)方腦復(fù)康可用于預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥。實(shí)施例二進(jìn)一歩研究還發(fā)現(xiàn)，具有改善腦代謝的藥物如茴拉西坦、吡硫醇、利斯的明、多奈哌齊、石杉?jí)A甲、雙奢i麥角堿、都可喜、艾地苯醌等，當(dāng)與康力龍配伍組成抗骨質(zhì)疏松復(fù)方制劑時(shí)，采用它們臨床應(yīng)用的劑量，即按每片的藥物含量與康力龍0.51毫克配伍，組成新的復(fù)方制劑，同樣乜可以用于預(yù)防與治療骨質(zhì)疏松。由具有改善腦代謝的藥物臨床應(yīng)用的劑量與康力龍0.51亳克配伍組成新的復(fù)方制劑，可制成片劑，膠囊劑，顆粒劑，沖劑，口服液，外用制劑，注射劑和任何可供臨床應(yīng)用的的藥物制劑。實(shí)施例三進(jìn)一歩研究還發(fā)現(xiàn)，三七總皂苷、銀杏內(nèi)酯、黃芩莖葉黃酮、巴戟天寡糖、赤芍總苷、阿魏酸、知母皂苷、紅花等改善腦代謝的活性藥物，當(dāng)采用它們臨床應(yīng)用的劑量，即每片的含量與康力龍0.51毫克配伍，組成新的復(fù)方制劑，同樣也可以用于預(yù)防與治療骨質(zhì)疏松。由具有改善腦代謝的藥物臨床應(yīng)用的劑量與康力龍0.51毫克配伍組成新的復(fù)方制劑，可制成片劑，膠囊劑，顆粒劑，沖劑，口服液，外用制劑，注射劑和任何可供臨床應(yīng)用的的藥物制劑。實(shí)施例四進(jìn)一歩研究還發(fā)現(xiàn)，苯丙酸諾龍，諾龍，去氫甲睪酮，環(huán)丙酸諾龍，美替諾龍、美雄酮、乙基諾龍、羥基甲睪、甲睪酮、勃地酮、睪酮、表睪酮可以代替康力龍，當(dāng)這些同化激素按臨床應(yīng)用劑量的四分之一或二分之一與腦復(fù)康配伍組成新的復(fù)方制劑，同樣也可以用于預(yù)防與治療骨質(zhì)疏松<=由同化激素按臨床應(yīng)用劑量的四分之一或二分之一與腦復(fù)康配伍組成新的復(fù)方制劑，可制成片劑，膠雜劑，顆粒劑，沖劑，口服液，外用制劑，注射劑和任何可供臨床應(yīng)用的的藥物制劑。權(quán)利要求1.一組防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是由具有改善腦代謝的藥物與同化激素兩種藥物配伍，加上藥劑學(xué)方面的輔料，可制成供臨床應(yīng)用片劑，膠囊劑，顆粒劑，沖劑，口服液，外用制劑，注射劑。2.如權(quán)力要求1所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是具有改善垴代謝的藥吻是指腦復(fù)康、茴拉西坦、吡硫醇、利斯的明、多奈哌齊、石杉?jí)A甲、雙氫麥角堿、都可喜、艾地苯醌，三七總皂苷、銀杏內(nèi)酯、黃芩莖葉黃酮、巴戟天寡糖、赤芍總苷、阿魏酸、知母皂苷、紅花3.如權(quán)力要求1所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是同化激素是指康力龍、.苯丙酸諾龍，諾龍，去氫甲睪酮，環(huán)丙酸諾龍，美替諾龍、美雄酮、乙基諾龍、羥基甲睪、甲睪酮、勃地酮、睪酮、表睪酮。4.如權(quán)力要求1所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是該藥物組合物是由腦復(fù)康與康力龍的組成。5.如權(quán)力要求1和4所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是腦復(fù)康與康力龍的組成比例為800:12,即腦復(fù)康在該復(fù)合物中按重量計(jì)算為800克時(shí)，康力龍?jiān)谠搹?fù)合物中按重量計(jì)算為12克。6.如攻力要求1和2所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是當(dāng)改善腦代謝的藥物與康力龍配伍組成抗骨質(zhì)疏松復(fù)方制劑時(shí)，可釆用它們臨床應(yīng)用的劑量，即按每片的藥物含量與康力龍0.51毫克配伍￡7.如嘆力要求1和3所述的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其特征是當(dāng)同化激素與腦復(fù)康配伍組成抗骨質(zhì)疏松復(fù)方制劑時(shí)，可采用同化激素臨床應(yīng)用的劑量四分之一或二分之一配伍組成。全文摘要本發(fā)明涉及用具有改善腦代謝的藥物與同化激素組成的藥物組合物，該藥物組合物是由腦復(fù)康與康力龍的組成制備的復(fù)方腦復(fù)康制劑，研究表明復(fù)方腦復(fù)康制劑，對(duì)老年性骨質(zhì)疏松具有較好的預(yù)防及治療作用，對(duì)絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松和對(duì)腎上腺糖皮質(zhì)激素等藥物造成的骨質(zhì)疏松也有具有較好的預(yù)防及治療作用。文檔編號(hào)A61K9/20GK101361974SQ20081014426公開(kāi)日2009年2月11日申請(qǐng)日期2008年7月30日優(yōu)先權(quán)日2008年7月30日發(fā)明者劉鈺瑜,鐵吳,燎崔,張新樂(lè),張益嘉,彬李,鄒麗宜申請(qǐng)人:廣東醫(yī)學(xué)院