專利名稱：：治療奶牛乳腺炎中藥透皮軟膏及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及的是一種獸用藥品，具體地說是一種治療奶牛乳腺炎的中藥透皮軟膏。(二)
背景技術：
：奶牛乳腺炎是奶牛最常發(fā).治愈最困難.危害最嚴重的疾病之一。造成治療費用增加、產(chǎn)奶量下降、母牛過早淘汰等，已嚴重阻礙了奶業(yè)的順暢發(fā)展。世界各地均把抗生素列入治療乳腺炎的首選藥物，由于長期反復使用，細菌耐藥性增多而降低療效，且藥物殘留造成廢棄奶增加。隨著社會的發(fā)展與進步，要求"無抗生素奶"的呼聲日見高漲。因此研制開發(fā)高效低毒.低殘留的防治奶牛乳腺炎的有效藥物是提高牛奶質量，增強國際竟爭力、保障人民身心健康的重要技術基石出。中藥是我國獨特的藥源，藥效確實，價廉易得，其對動物的作用是原藥材的藥用與營養(yǎng)價值的有機統(tǒng)一。目前用于防治奶牛乳房炎的中藥多通過口服、肌注或乳池灌注給藥?？诜o藥起效慢，且存在肝臟的首過效應；乳池灌注對乳房有刺激，對動物會有應激反應，操作也不方便；肌肉注射也會產(chǎn)生應激反應，而應用中藥透皮吸收制劑防治奶牛乳腺炎國內外尚未見報道。采用涂抹外用透皮吸收的給藥方式，可避免口服、肌注及乳池灌注給藥的弊端，且不影響乳的品質，特別適合集約化飼養(yǎng)條件下的疫病防治。具有高效低毒、細菌不易產(chǎn)生耐藥性、無殘留、無應激和使用方便等優(yōu)點；具有極廣闊的市場前景。(三)
發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于提供一種具有無毒、無殘留、無刺激性、無過敏反應等優(yōu)點，還不影響乳的質量的治療奶牛乳腺炎中藥透皮軟膏。本發(fā)明的目的還在于提供一種治療奶牛乳腺炎中藥透皮軟膏的制備方法。本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的本發(fā)明的治療奶牛乳腺炎中藥透皮軟膏是由重量比為蒲公英、連翹和黃芩的提取物25-45%、透皮促滲劑1—6%及藥物基質54-74%組成，所述的蒲公英、連翹、黃茶的比例為1-3:1:1?；疾∪閰^(qū)用溫水清洗干凈后，每個乳區(qū)涂抹中藥透皮軟膏10—15g,—天2次，5天為一個療程。本發(fā)明的中藥透皮軟膏是采用這樣的方法來制作的首先提取蒲公英、黃芩和連翹的有效成分，蒲公英、黃芩采用水提醇沉法提取，連翹采用蒸餾法和水提醇沉法相結合的方法提取，制成各自溶液含生藥量均為lg.mL—'，然后按蒲公英、連翹、黃茶1-3:1:l的比例混合蒲公英、黃茶與連翹的提取物；按比例稱取油相各藥物基(由硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、白凡士林、液體石蠟按(4-6):(2-3):2:5比例組成}和透皮促滲劑置水浴上加熱熔化，70-80。C水浴保溫；另取水相各藥物基質[油相藥物基質；水相藥物基質由乙醇胺、尼泊爾金乙酯、蒸餾水按(20-25):1:200比例組成]及蒲公英、連翹、黃茶提取液混溶后水浴加熱至70-80°C,將上述水相緩緩加入油相溶液中，邊加邊向一個方向攪拌，3000r.min—'攪拌乳化5min,冷凝即得。經(jīng)實驗證明本發(fā)明的透皮軟膏具有如下特點1.本發(fā)明的產(chǎn)品是由中藥提取物制成中藥制劑，具有抗生素、化學合成抗菌劑等藥物無法比擬的優(yōu)點，細菌不易產(chǎn)生耐藥性，乳中不易產(chǎn)生藥物殘留。2.本發(fā)明產(chǎn)品采用涂抹外用，藥物可以透皮吸收到達乳腺實現(xiàn)局部的治療作用，避免了其他給藥途徑的弊端，無應激，操作簡單，開辟了中藥透皮制劑治療乳牛臨床型乳腺炎的先河。3.體內外藥效學試驗的結果證明，本發(fā)明的透皮軟膏對引起奶牛乳腺炎的主要致病菌如大腸桿菌、葡萄球菌、無乳鏈球菌和停乳鏈球菌等具有較好的體外抗菌活性；對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和棉球誘發(fā)小鼠肉芽組織增生有較好的抑制作用；對臨床型乳腺炎和隱性乳腺炎的療效確實。4.急性毒性試驗的結果表明，本發(fā)明的透皮軟膏為實際無毒物質；安全性試驗結果證明，本發(fā)明的中藥透皮軟膏無致敏性、無刺激性，為較理想的外用制劑。5.以高效液相色譜法研究了本發(fā)明產(chǎn)品在奶牛血及乳中的藥動學特征，試驗結果證明經(jīng)患病乳區(qū)局部涂擦本發(fā)明產(chǎn)品后，血漿中未能檢測到軟膏中的主要成分黃芩苷和連翹苷，黃芩苷和連翹苷兩種有效成分在牛乳中的代謝過程均屬于一級吸收一室開放模型，經(jīng)藥動學參數(shù)分析表明兩種效成分在乳房局部有緩釋作用，吸收速率緩慢，吸收程度高，消除較慢，說明中藥透皮制劑可以充分發(fā)揮局部治療作用。中藥透皮軟膏的上述特點是通過下列試驗得出的1.中藥復方提取液的體外抑菌試驗采用試管二倍稀釋法研究了復方提取液對四種主要病原菌(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、無乳鏈球菌、停乳鏈球菌)臨床分離林的體外抑菌活性，結果表明中藥復方提取液對四種主要病原菌的最低抑菌濃度(MIC)值分別為7.82mg'mL—'、62.5mgml/'、7.82mg.mL—\31.25mg■mL一1,具有較好的體外抗菌活性。2.中藥復方提取液的抗炎作用試驗研究了高、中、低三個劑量中藥透皮軟膏對急、慢性炎癥的抑制作用。結果表明，中藥透皮軟膏對棉球誘發(fā)小鼠肉芽組織增生的抑制率，高、中、低三個劑量組分別為37.71%、27.41%、19.63%。對小鼠耳廓的腫脹抑制率，高、中、低三個劑量組分別為27.62%、17.33°/。、12.95%。具有良好的抗炎作用。3.中藥透皮軟膏的透皮作用研究首先制備離體鼠皮，藥物的透皮試驗采用MJ-6A藥物透皮擴散儀進行，內徑為1.8cm,接受池為6mL，試驗溫度為(35丄1)'C:，電磁攪拌速度為100rmin—'。釋放池一端用離體鼠皮覆蓋，用縫合線扎緊，使皮膚角質層朝向管內，在管內加中藥制劑3g;接受池內加6mL生理鹽水，使鼠皮與接受液面接觸，在(35±l)'C條件下，連續(xù)攪拌，分別于加樣后0.5h、lh、2h、4h取樣0.5mL,用于主要成分黃茶苷、連翹香和咖啡酸透皮量的測定。每次取樣后補加生理鹽水0.5mL,采用高效液相色鐠(HPLC)法測定加樣后不同時間接受液中咖啡酸、黃茶苷和連翹苦的含量，然后計算累計透皮量，并確定藥物透皮量與透皮促滲劑的相關性。HPLC法測定咖啡酸的體外透皮量結果表明中藥軟膏在促滲劑含量為4%時，三種主要成分的滲透效果最好，咖啡酸、黃茶香和連翹苷4小時的累計透皮量分別達到了375.21Mg、308.48)jg和60.12yg。三種主要成分滲透量不隨著透皮促滲劑含量增加而增加。4.中藥透皮軟膏對臨床型乳腺炎的治療試—瞼實驗動物選自閻家崗農(nóng)場和哈爾濱市綜合牧場兩個奶牛場的臨床型乳腺炎患病奶牛，癥狀為乳H患病區(qū)紅、腫，表面溫度升高，觸之萄文感，體積增大，泌乳量顯著減少或停止，乳汁質量異常，呈淺黃或淺紅色，乳汁稀薄或粘稠，或出現(xiàn)絮狀物。出現(xiàn)此類癥狀的?？勺鳛楸驹囼炛委煂ο?，但伴有嚴重全身感染癥狀的病牛除外。符合上述標準的共有62例病牛，108個乳區(qū)。隨機分為兩組，中藥軟膏治療組為43頭72個乳區(qū)，恩諾沙星對照組為19頭牛36個乳區(qū)。中藥軟膏治療組在用藥前用溫水清洗病牛乳區(qū)，用干毛巾擦干后，每個乳區(qū)涂抹中藥復方軟膏10—15g,—天2次，5天為一個療程。5%恩諾沙星組在擠奶后，用0.5t恩諾沙星50mL灌注乳區(qū)，上、下午各l次，5天為一個療程。病情嚴重的病例可連續(xù)用藥2個療程觀察治療效果。根據(jù)臨床癥狀和乳汁質量的改變綜合判斷藥物的療效，并計算治愈率、有效率和無效率。治愈乳區(qū)紅、肺、熱、痛消失，乳汁肉眼觀察正常和產(chǎn)奶量恢復，精神、食欲正常。有效乳區(qū)紅、熱、痛明顯減輕，乳汁絮狀物基本消失或明顯減少，產(chǎn)奶量回升。無效兩個療程后，乳腺紅、腫、熱、痛仍無明顯減輕，乳汁仍清稀或發(fā)黃，絮片仍較明顯，或在治療過程中病程未減而改用其他方法治療者。中藥軟膏用于臨床的治療效果見下表，中藥軟膏的治愈率和有效率分別為90.3%和95.8%,達到了良好的治療效果。中藥軟膏治療組在1個療程完全治愈的病例為40頭58個乳區(qū)，占治愈數(shù)的89.2%,但未治愈病例臨床癥狀明顯減輕。而恩諾沙星組病例在1個療程完全治愈的病例為16頭26個乳區(qū)，占治愈數(shù)的83.9°/。中藥軟膏的臨床療效<table>complextableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>5.中藥透皮軟膏的藥動學特征研究以4頭患臨床型乳腺炎的奶牛為試驗動物，在患病乳區(qū)局部涂擦中藥復方透皮制劑后，分別采集不同時間點的血漿和牛乳樣品，采用反相高效液相色譜法測得不同時間點血漿與牛乳中的藥物濃度，以MCPKP自動化藥動學程序分析數(shù)據(jù)。試驗結果表明，經(jīng)患病乳區(qū)局部涂擦中藥復方透皮制劑后，血漿中未能檢測到兩種有效成分。黃茶苦和連翹芬在牛乳中的藥-時數(shù)據(jù)分析結果表明，兩種有效成分在牛乳中的代謝過程屬于一級吸收一室開放模型，黃芩苷的主要藥動學參數(shù)為Tmx=4.9392h、Cm=2.8399|jg-raL—\t1/2ka=l.803h、AUC=27.32rag-L—1-h扁'、t1/2k=3.0520h、TCP=28.319h;連翹苷的主要藥動學參數(shù)為T_=3.6799h、C,MX=0.4922yg.mL—1、<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage7</formula>。在患病乳區(qū)局部涂擦中藥復方透皮制劑后，兩種有效成分在乳房局部有緩釋作用，吸收速率緩慢，吸收程度高，消除較慢，可以充分發(fā)揮在乳房局部的治療作用。6.中藥透皮軟膏的急性毒性試驗采用Karber法測得中藥復方提取液對小鼠的LD^為7332mgkg—1,中藥復方提取液LDi;。的95%可信限為6738-7980mg.kg—1,遠大于5000mg-kg:為實際無毒物質。7.中藥透皮軟膏的安全性試驗分別以白色家兔和豚鼠為試驗動物研究了中藥軟膏對皮膚的刺激性和過敏性，試驗結果可知中藥軟膏外用時，對家兔完整皮膚、破損皮膚未發(fā)現(xiàn)明顯紅斑和水胂反應，刺激平均分值小于O.5,屬于無刺激物質。中藥軟膏組豚鼠未出現(xiàn)紅斑、水肺等過敏性癥狀，致敏率為W,屬于弱致敏物。權利要求1、一種治療奶牛乳腺炎中藥透皮軟膏，其特征是它是由重量比為蒲公英、連翹和黃芩的提取物25-40％、透皮促滲劑1-6％及藥物基質54-74％組成，所述的蒲公英、連翹、黃芩的重量比為1-3∶1∶1。2、根據(jù)權利要求1所述的治療奶牛乳腺炎中藥透皮軟膏的制備方法，其特征是首先提取蒲公英、黃芩和連翹的有效成分，蒲公英、黃茶采用水提醇沉法提取，連翹采用蒸餾法和水提醇沉法相結合的方法提取，制成各自溶液含生藥量均為lg.mL-1,然后按蒲公英、連翹、黃芩1-3:1:1的比例混合蒲公英、黃茶與連翹的提取物；將油相藥物基質和透皮促滲劑置水浴上加熱熔化，70-80°C水浴保溫；另取水相各藥物基質及蒲公英、連翹、黃芩提取液混溶后水浴加熱至70-80°C，將上述水相緩緩加入油相溶液中，邊加邊向一個方向攪拌，3000rmin-1攪拌乳化5min，冷凝即得。3、根據(jù)權利2所述的治療奶牛乳腺炎中藥透皮軟膏的制備方法，其特征是所述的油相藥物基質由硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、白凡士林、液體石蠟按4-6:2-3:2:5的重量比例組成；所述的水相藥物基質由乙醇胺、尼泊爾金乙酯、蒸餾水按20-25:1:200的重量比例組成。全文摘要本發(fā)明涉及獸藥
技術領域：
，公開了一種治療奶牛乳腺炎的中藥外用透皮軟膏及其制備方法，其主要由蒲公英、黃芩、連翹的提取物(25-40％)、透皮促滲劑(1-6％)及藥物基質(74-54％)組成，制成分散均勻的油/水(O/W)型乳膏劑。采用涂抹外用透皮吸收的給藥方式治療奶牛乳腺炎，該制劑能透過皮膚在乳腺中產(chǎn)生局部治療作用，具有給藥方便、抗菌消炎效果好、無毒、無刺激性和過敏反應等優(yōu)點，即可避免口服、肌注及乳池灌注給藥的弊端，又可克服應用抗生素治療引起的殘留、細菌耐藥等不良反應。臨床治療實驗的結果表明，透皮乳膏制劑對臨床型乳腺炎和隱性乳腺炎均有良好的治療效果，不影響乳的質量。文檔編號A61K9/06GK101342243SQ20081013693公開日2009年1月14日申請日期2008年8月15日優(yōu)先權日2008年8月15日發(fā)明者劉芳萍,張秀英,李繼昌,新王申請人:東北農(nóng)業(yè)大學