專利名稱：一種預(yù)防和治療艾滋病病毒感染的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療艾滋病病毒感染的藥物組合物，屬于藥物制劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
20世紀(jì)80年代以來，獲得性免疫缺陷綜合癥(又稱艾滋病，AIDS)已經(jīng)成為 威脅人類健康的重大疾病，且發(fā)病人數(shù)呈逐年上升的趨勢。所以一位著名西方醫(yī)學(xué) 專家稱艾滋病為"世紀(jì)瘟疫"。2003年12月1日，由中國衛(wèi)生部和聯(lián)合國艾滋病中 國專題組聯(lián)合發(fā)布的《中國艾滋病防治聯(lián)合評估報(bào)告》顯示中國目前有艾滋病病毒 感染者約84萬，艾滋病病人約8萬，分布在全國各省、自治區(qū)、直轄市，遍布社會 各個階層。
目前抗艾滋病藥物是世界藥物研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)，在臨床應(yīng)用較多的主要是核苷 類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(nucleoside reverse transcriptase inhibitors, NRTI);蛋白酶抑制劑 (protease inhibitors, PI)及非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制齊lj ( non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors, NNRTI)。由于HIV復(fù)制缺乏保真性(fidelity),經(jīng)常發(fā)生突變， 致使抗HIV藥物易產(chǎn)生耐藥性。目前國際上對AIDS的藥物療法趨向聯(lián)合治療，即 雞尾酒療法，通常是一種HIV蛋白酶抑制劑加上二種核苷類逆轉(zhuǎn)率酶抑制劑，用于 治療急性或慢性的HIV感染或不同期的AIDS患者，及使用齊多夫定失效或無反應(yīng) 者。己出現(xiàn)了四聯(lián)和六聯(lián)等不同療法，替代療法，間斷療法，高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒聯(lián) 合療法等多種方法。這些藥物及方法有以下缺點(diǎn)(1)誘導(dǎo)產(chǎn)生抗藥性的HIV變異 株；(2)具短期和長期的毒副作用；(3)不能阻斷HIV的早期感染過程。由于HIV 變異快，不同地區(qū)的毒株也可能不一樣，使疫苗的研制難度很大。
自1987年齊多夫定首先被美國FDA批準(zhǔn)上市，用于治療HIV感染和AIDS,從 此抗艾滋病藥物發(fā)展非常迅速，自1995年以來，每年都有2-3個新品種問世，目前 抗AIDS藥物已成為抗病毒藥物發(fā)展史上進(jìn)展最快的一類藥物。21世紀(jì)以來，研究 人員的視線已集中到很多新的靶點(diǎn)上，如反義核苷酸藥物，融合抑制劑，各類編碼 基因拮抗劑，新受體合成阻斷劑等，它們具有藥效明顯，專一性強(qiáng)，不良反應(yīng)低等 優(yōu)點(diǎn)。新靶點(diǎn)藥物，復(fù)方制劑藥物和天然化合物已成為發(fā)展HIV藥物的重要研究方 向。
目前至少有幾十種新藥在研制中，然而不幸的是這些新藥同現(xiàn)有療法一樣，仍
然只是作用于病毒的酶-逆轉(zhuǎn)錄酶和蛋白酶，而不是病毒感染的細(xì)胞。治療艾滋病多 以西藥為主， 一般只是針對艾滋病病毒結(jié)構(gòu)的某一點(diǎn)來發(fā)揮作用，而艾滋病病毒在 體內(nèi)適應(yīng)能力強(qiáng)、變異快，導(dǎo)致用單一的西藥無法產(chǎn)生令人滿意的效果。上面所提 到的所謂雞尾酒療法實(shí)際上就是將幾種對艾滋病病毒有殺滅或抑制作用的西藥混合 使用，使艾滋病病毒無法在短期內(nèi)出現(xiàn)變異而發(fā)揮治療作用。但這種治療方法只能 在一定時間內(nèi)發(fā)揮作用，且對機(jī)體的毒副作用大，價格昂貴，難以普及。當(dāng)一些病 人停止藥物治療后，病毒載量可以反彈到比治療前更高的水平，總之，由于藥物的 毒性，持久治療的困難性，隨時間推移而出現(xiàn)的耐藥毒株，缺少治療HIV的新靶位， 以及治療中對HIV的免疫反應(yīng)降低等原因，我們必須尋找到戰(zhàn)勝這種可怕疾病的藥 物。
HIV侵犯CD4+細(xì)胞，導(dǎo)致CD4+細(xì)胞進(jìn)行性損耗，引起機(jī)會性感染而發(fā)病，進(jìn) 而死亡。根據(jù)艾滋病的發(fā)病特點(diǎn)是應(yīng)當(dāng)考慮免疫治療的。但免疫治療的候選藥物很 多，選用什么樣的免疫治療藥物以及什么樣的藥物與其他藥物相互配互組成的藥物 組合物及其適宜的劑型來預(yù)防和治療艾滋病病毒感染未見相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種預(yù)防和治療艾滋病病毒感染的藥物組合物，該藥物 組合物具有良好的協(xié)同作用，通過直腸粘膜的無創(chuàng)傷性給藥，大大提高了其使用的 安全性和有效性，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了經(jīng)皮下或肌肉注射產(chǎn)生的抗病毒治療效果，具有廣泛 的應(yīng)用和推廣前景。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案
一種預(yù)防和治療艾滋病病毒感染的藥物組合物，其特征在于所述組合物的配 互包括至少一種免疫調(diào)節(jié)劑-免疫刺激劑，至少一種粘膜吸收促進(jìn)劑，以及人血清白 蛋白和苯甲醇。
HIV侵犯CD4+細(xì)胞，導(dǎo)致CD4+細(xì)胞進(jìn)行性損耗，引起機(jī)會性感染而發(fā)病，進(jìn)而死 亡。根據(jù)艾滋病的發(fā)病特點(diǎn)是應(yīng)當(dāng)考慮免疫治療的。本發(fā)明人經(jīng)過大量的試驗(yàn)意外 的發(fā)現(xiàn)但至少一種免疫調(diào)節(jié)劑-免疫刺激劑和至少一種粘膜吸收促進(jìn)劑組成的藥物 組合物具有明顯的配互和協(xié)同作用，對艾滋病病毒感染者具有明顯的治療作用。粘 膜吸收促進(jìn)劑有利于直腸粘膜吸收，可延長藥物在直腸粘膜停留的時間，擴(kuò)開直腸 粘膜上皮的細(xì)胞間隙，促進(jìn)直腸毛細(xì)管一時性擴(kuò)張，促進(jìn)粘膜的吸收，有利于增加 藥物的生物利用度。
本發(fā)明中，所述的免疫調(diào)節(jié)劑-免疫刺激劑包括重組人白細(xì)胞介素、干擾素、胸 腺激素或Toll樣受體刺激劑；所述的粘膜吸收促進(jìn)劑為表面活性劑。
本發(fā)明中，選用重組人白細(xì)胞介素、干擾素、胸腺激素或Toll樣受體刺激劑中 的一種或幾種與粘膜吸收促進(jìn)劑——表面活性劑具有良好的配互作用和協(xié)同作用， 對艾滋病病毒感染者具有良好的治療作用。
本發(fā)明中，所述的重組人白細(xì)胞介素為重組人白細(xì)胞介素-2、重組人白細(xì)胞介
素-7或重組人白細(xì)胞介素-X;所述的干擾素為重組人干擾素0c2b或重組人干擾素0db;
所述的胸腺激素為人胸腺肽od;所述的Toll樣受體刺激劑為TLR-3刺激劑。
重組人白細(xì)胞介素-2具有增強(qiáng)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)的作用，特別是可使患者T淋巴細(xì)胞 數(shù)增加。
重組干擾素是一類廣譜的抗病毒和免疫調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)，廣泛用于抗病毒治療。 胸腺肽a l已公認(rèn)為特異性調(diào)節(jié)免疫失衡狀態(tài)，增強(qiáng)免疫力最有效的免疫分子。 其免疫學(xué)活性包括(1)增強(qiáng)機(jī)體特異T細(xì)胞免疫儲備能力。T細(xì)胞只有保證充足的 數(shù)量，才能在病毒、腫瘤入侵時產(chǎn)生特異、高效的清除作用。胸腺肽al的作用耙點(diǎn) 之一正是在T細(xì)胞的成熟過程；(2)調(diào)動特異性細(xì)胞免疫、體液免疫，增強(qiáng)巨噬細(xì) 胞功能，清除抗原(病毒、細(xì)菌、腫瘤等)，最終效應(yīng)為促進(jìn)特異性細(xì)胞免疫及體 液免疫過程，使免疫系統(tǒng)有效抑制并清除外來病原體；(3)恢復(fù)低下、受損的細(xì)胞 免疫、體液免疫功能。
Toll樣受體(Tolllike rec印tors， TLRs)家族在病原體的識別和激活天然免疫 方面發(fā)揮著非常重要的作用。激活TLRs不僅可以誘導(dǎo)天然免疫應(yīng)答，而且有利于特 異性免疫反應(yīng)的發(fā)生，因而TLRs是天然免疫與獲得性免疫之間的橋梁。TLRs如同天 然免疫的眼睛，監(jiān)視與識別各種不同的PAMPs，是機(jī)體抵抗感染性疾病的第一道屏障。 在人類有TLR-l-lO，其中TLR-3涉及抗病毒的先天性免疫機(jī)制，TLR-3的刺激劑有poly 1: C等(見Sigma試劑目錄)，有些公司在研制新的TLR-3刺激劑，如Hemispherx Bi opharma公司(AMEX: HEB)宣稱已經(jīng)正式向FDA提交關(guān)于實(shí)驗(yàn)性藥物Amp 1 i gen (r)治 療慢性疲勞綜合征("CFS")的14個問題的詳細(xì)的回答。FDA提出的問題跨越臨床和臨 床前的話題。除了局部應(yīng)用皮膚癌癥，目前尚無一種TLR型的化合物獲得FDA的同意. Poly I: poly C12U (Ampligen(r))是一種實(shí)驗(yàn)性的治療藥物，是一類RNA，以求能 夠商業(yè)化。
上述免疫刺激齊U-免疫調(diào)節(jié)劑與表面活性劑具有良好的配互作用和協(xié)同作用，對
艾滋病病毒感染者具有良好的治療作用。
上述表面活性劑包括甘膽酸鈉鹽、皂角甙、殼聚糖、甘膽酸鈉鹽、9-十二烷基 醚(BL-9) 、 L甘膽酸鹽或多乙氧基醚80中的一種或幾種。
本發(fā)明中，所述的藥物組合物還包括磷酸鹽緩沖溶液，以保證所需pH值的穩(wěn)定 性。根據(jù)不同組方配互，有的磷酸鹽緩沖溶液的pH值為5.0-7.4，有的磷酸鹽緩沖溶 液的pH值為7. 2-7. 4。
本發(fā)明中，所述的藥物組合物的劑型為水劑或栓劑。將本發(fā)明所述的藥物組合 物按照本領(lǐng)域技術(shù)人員常用的方法制備水劑或栓劑，由于腸粘膜富有淋巴組織，血 管豐富，藥物可被直腸粘膜迅速吸收，約50%首次不經(jīng)肝臟，直接進(jìn)入血液，避免活 性藥物引起的嚴(yán)重副反應(yīng)；更由于腸淋巴組織豐富，能使藥物發(fā)揮更大的治療效果。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果
(1) 本發(fā)明的藥物組合物之間具有明顯的配互和協(xié)同作用，對艾滋病病毒感染 者具有良好的治療作用；
(2) 本發(fā)明的藥物組合物有利于直腸粘膜吸收，可延長藥物在直腸粘膜停留的 時間，擴(kuò)開直腸粘膜上皮的細(xì)胞間隙，促進(jìn)直腸毛細(xì)管一時性擴(kuò)張，促進(jìn)粘膜的吸 收，有利于增加藥物的生物利用度；
(3) 本發(fā)明藥物組合物可被直腸粘膜迅速吸收，約50%首次不經(jīng)肝臟，直接進(jìn) 入血液，避免活性藥物引起的嚴(yán)重副反應(yīng)；更由于腸淋巴組織豐富，能使藥物發(fā)揮 更大的治療效果；
(4) 本發(fā)明藥物經(jīng)臨床試驗(yàn)，對艾滋病病毒感染者顯示出良好的療效，而且安 全，可靠，副作用小，患者易于接受。
具體實(shí)施例方式
以下為本發(fā)明的具體實(shí)施方式
，所述的實(shí)施例是為了進(jìn)一步描述本發(fā)明，而不 是限制本發(fā)明。
實(shí)施例l
根據(jù)肛門直腸的解剖結(jié)構(gòu)使用特制的經(jīng)肛門直腸粘膜給藥器
采用2毫升(或5ml)無菌注射器，不用針頭，取代以長約3.5厘米的尖端圓滑的 子彈頭，內(nèi)徑細(xì)小，與小號針頭內(nèi)徑相仿。
帶有長約3.5厘米的尖端圓滑的子彈頭的2毫升(或5ml)注射器(肛門直腸給藥
器)預(yù)裝l毫升藥液，直接經(jīng)肛門注入直腸，注射后，臥床10分鐘。
實(shí)施例2
組合物成分之一 每毫升含
1. 重組人白細(xì)胞介素-2 (500萬單位)
2. 殼聚糖0.5%，分子量為150kD，脫乙酰化85%以上
3. 甘膽酸鈉鹽1%
4. 人血清白蛋白2%
5. 苯甲醇O. 5%
實(shí)施例3
組合物成分之二 每毫升含
1. 重組人干擾素(IOOO萬單位)
2. 重組人白細(xì)胞介素-2 (500萬單位)
3. 皂角甙1%
4. 殼聚糖O. 5%
5. 人血清白蛋白2%
6. 苯甲醇O. 5%
7. 40mM的磷酸鹽溶液緩沖液其pH 5. 5
實(shí)施例4
組合物成分之三 每毫升含
1. 重組人白細(xì)胞介素-2 (500萬單位)
2. 1. 6毫克人胸腺肽ocl
3. 殼聚糖O. 51%
4. 甘膽酸鈉鹽1%
5. 人血清白蛋白2%
6. 苯甲醇O. 5%
7. 40mM的磷酸鹽溶液緩沖液其pH 7. 2-7. 4
實(shí)施例5
組合物成分之四 每毫升含
1. 重組人白細(xì)胞介素-2 (500萬單位)
2. 重組人干擾素ot2b或odb(1000萬單位) 3.9-十二垸基醚(BL-9)
4. 殼聚糖O. 5%
5. 人血清白蛋白2%
6. 苯甲醇O. 5%
7. 40mM的磷酸鹽溶液緩沖液其pH 7. 0
實(shí)施例6
組合物成分之五 每毫升含
1. 2毫克人胸腺肽al
2. 重組人白細(xì)胞介素-7(或X) (500萬單位)
3. 30mrao1 / L甘膽酸鹽
4. 多乙氧基醚80 1%
5. 人血清白蛋白2%
6. 苯甲醇O. 5%
7. 40mM的磷酸鹽溶液緩沖液其pH 7. 2_7. 4
實(shí)施例7
組合物成分之六 每毫升含
1. TLR-3刺激劑(Poly I :C及其衍生物)
2. 重組人干擾素a2b或alb(1000萬單位)
3. 9-十二烷基醚(BL-9) 0.5%
4. 人血清白蛋白2%
5. 苯甲醇O. 5%
6. 40mM的磷酸鹽溶液緩沖液其pH 7. 2-7. 4
實(shí)施例8
重組人干擾素或白介素的制造工藝
本制造工藝是依據(jù)[衛(wèi)藥政字(90)第37號文批準(zhǔn)]的《人用重組DNA制品質(zhì)量控制 要點(diǎn)》結(jié)合本產(chǎn)品的特點(diǎn)制定。用于制造本品的菌種系將帶有人干擾素基因或人白 介素的pBV 220質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH 5a株。用80升發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵。每次發(fā)酵前必 須進(jìn)行一次空罐滅菌。發(fā)酵用的培養(yǎng)基為改進(jìn)的LB培養(yǎng)基，用蒸餾水配制，其中不 含有任何抗生素，配制后進(jìn)行實(shí)罐滅菌。滅菌后加入氨節(jié)青霉素使其終濃度為 100ug/ml。工程菌培養(yǎng)溫度為30.0土0. rC，培養(yǎng)4-6小時，再升溫到42。C表達(dá)重組 人干擾素oc2b。時間4-6小時。用離心方法集菌，在冰浴環(huán)境超聲，破菌。離心收集 包涵體，變性，復(fù)性，經(jīng)過一系列層析后，用0.22um濾膜過濾除菌，重組人干擾素 的比活性不低于1 X 108IU/mg蛋白，重組人白介素比活性不低于1 X 107IU/mg蛋白， 方可判定合格。純度達(dá)95%以上。
實(shí)施例9
預(yù)裝式直腸給藥水劑的制作工藝
將在GMP車間生產(chǎn)的免疫調(diào)節(jié)劑/刺激劑，分析純的促進(jìn)粘膜吸收刺激劑，由GMP 車間生產(chǎn)的有SFDA批準(zhǔn)生產(chǎn)文號的人白蛋白，分析純苯甲醇，磷酸緩沖液，按上述 組方含量配互后，用自動分裝機(jī)分裝，每注射器筒預(yù)裝l毫升，然后自動安裝直腸套 管及包裝。
實(shí)施例IO
肛門直腸粘膜栓劑的制作工藝
甘油45毫升，明膠20克，蒸溜水8毫升，混合均勻，在室溫下放置3-5日，1210C 高壓，30分鐘，冷卻至560C時加免疫調(diào)節(jié)劑/刺激劑，粘膜吸收刺激劑，白蛋白，苯 甲醇，磷酸緩沖液，控制加量為1.0-1.5毫升(要計(jì)算活性蛋白質(zhì)的制定劑量/3.5毫
升)，再加0.7毫升二甲基亞(DMSO)，然后自動打壓機(jī)分裝。
實(shí)施例ll
采用上述實(shí)施例2的藥物組合物進(jìn)行臨床試驗(yàn)的初步結(jié)果如下 目的探討上述組合物通過直腸粘膜給藥治療HIV/AIDS患者的療效。 方法通過直腸粘膜給予上述實(shí)施例2的藥物組合物(內(nèi)含IL-2 400-800萬單 位)，每周一次，療程1個月。
結(jié)果7例HIV/AIDS患者參與該治療，全部為男性，年齡18-40歲，其中3例正在 接受抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療。治療1月后7例患者CD4+T細(xì)胞數(shù)無明顯改變，但4例患者病 毒載量出現(xiàn)明顯下降，下降幅度在0.4-2.01og左右。療效顯著。7例患者治療后臨床 癥狀明顯改善，體力明顯恢復(fù)，兩例患者皮疹部分消失，l例出現(xiàn)類似免疫重建綜合 征。
結(jié)論臨床試驗(yàn)顯示，上述組合物通過直腸粘膜給藥治療，對HIV/AIDS患者顯 示出良好的療效。而且安全，可靠，副作用小，患者易于接受。
本發(fā)明其他實(shí)施例的藥物組合物進(jìn)行上述臨床試驗(yàn)，具有基本相似的結(jié)果。
權(quán)利要求
1、一種預(yù)防和治療艾滋病病毒感染的藥物組合物，其特征在于所述組合物的配互包括至少一種免疫調(diào)節(jié)劑-免疫刺激劑，至少一種粘膜吸收促進(jìn)劑，及人血清白蛋白和苯甲醇。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的藥物組合物，其特征在于所述的免疫調(diào)節(jié)劑-免疫刺激劑 包括重組人白細(xì)胞介素、千擾素、胸腺激素或Toll樣受體刺激劑；所述的粘膜吸收 促進(jìn)劑為表面活性劑。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述的重組人白細(xì)胞介素為重組人白細(xì)胞介素-2、重組人白細(xì)胞介素-7或重組人白細(xì)胞介素-X;所述的干擾素為 重組人干擾素a2b或重組人干擾素oclb;所述的胸腺激素為人胸腺肽ocl;所述的Toll 樣受體刺激劑為TLR-3刺激劑。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于所述的表面活性劑包括甘膽酸鈉鹽、皂角甙、殼聚糖、甘膽酸鈉鹽、9-十二烷基醚、L甘膽酸鹽或多乙氧基醚80中 的一種或幾種。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物還包括磷酸 鹽緩沖溶液。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于所述的磷酸鹽緩沖溶液的pH值 為5. 0-7. 4或7.2-7.4。
7、 根據(jù)權(quán)利要求l-5任意一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物 的劑型為水劑或栓劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療艾滋病病毒感染的藥物組合物，該組合物的配互包括至少一種免疫調(diào)節(jié)劑-免疫刺激劑，至少一種粘膜吸收促進(jìn)劑，及人血清白蛋白和苯甲醇。其中所述的免疫調(diào)節(jié)劑-免疫刺激劑為重組人白細(xì)胞介素、干擾素、胸腺激素或Toll樣受體刺激劑；所述的粘膜吸收促進(jìn)劑為表面活性劑。本發(fā)明藥物組合物制備成水劑或栓劑，解決了免疫調(diào)節(jié)劑-免疫刺激劑經(jīng)注射給病人帶來的痛苦，通過直腸粘膜的無創(chuàng)傷性給藥，大大提高了其使用的安全性和有效性，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了經(jīng)皮下或肌肉注射帶來的治療效果，具有廣泛的應(yīng)用和推廣前景。
文檔編號A61K9/08GK101391103SQ200810135329
公開日2009年3月25日 申請日期2008年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月31日
發(fā)明者侯云德, 可 張, 張麗蘭, 張利萍 申請人:張 可;北京遠(yuǎn)策藥業(yè)有限責(zé)任公司