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一種具有抗癌活性的組合物的制作方法

文檔序號:1216359閱讀:250來源:國知局
專利名稱:一種具有抗癌活性的組合物的制作方法
技術(shù)領域
本發(fā)明涉及的是從海芒果莖皮中提取得到具有抗癌活性的組合物。
技術(shù)背景腫瘤是目前危害人民生命和健康的嚴重疾病之一,目前治療癌癥的方 法主要有手術(shù)、放療、化療、免疫治療、中醫(yī)中藥治療等多種。而化療主要依靠 化學藥物,化學合成的抗癌藥多半對人體正常細胞產(chǎn)生毒副作用,因此從天然動 植物中尋找低毒、高效的抗癌活性成分成為近年來研究的熱點之一。
海芒果為夾竹桃科海芒果屬植物(Cerberaffl朋gi7asL.),其提取物具有止痛、 抗驚厥、強心及降血壓的藥理作用,我們在前期的體外抗腫瘤實驗篩查時發(fā)現(xiàn)其 醇提物具有顯著的抗癌活性
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及的抗癌組合物對所測試的幾種腫瘤細胞均顯示了良好的 活性結(jié)果。
發(fā)明目的本發(fā)明目的是開發(fā)出具有顯著活性及低毒的抗癌藥物。
具體實施方式
海芒果莖皮4kg,陰干后粉碎,醇類溶劑進行提取。提取液經(jīng)濃 縮至無醇味后,濃縮后得到提取物A,溶劑分配法進行萃取,得到部位B、 C、 D。 其中C萃取部位(54.0g)經(jīng)體外實驗發(fā)現(xiàn)具有顯著的抗腫瘤活性,結(jié)果見表3。對 C萃取部位進行系統(tǒng)分離。利用薄層色譜法對C萃取物進行展丌條件的選擇。經(jīng) 過大量實驗發(fā)現(xiàn)氯仿-甲醇體系下,展開效果較好。利用柱色譜進行粗分離。經(jīng) 過柱色譜粗分離后共收集8個流份(I 一VI)。 Fr. II經(jīng)過薄層檢查發(fā)現(xiàn)其中有藍 色熒光斑點(254nm)為其主要成分。該流份中混有許多色素類物質(zhì),利用 S印hdaex LH-20柱色譜進行純化,從中得到無色針晶,經(jīng)丙酮重結(jié)晶后得到化合 物B。通過利用現(xiàn)代波譜技術(shù)(IR, UV,麗R)鑒定化合物B為水楊酸。Fr.III經(jīng) 過薄層檢查后發(fā)現(xiàn),其主要成分在254nm下為一暗斑,且有拖尾現(xiàn)象。經(jīng)過 S印hdaex LH-20柱色譜進行純化,從中得到白色粉末,經(jīng)過薄層檢查后發(fā)現(xiàn),該 化合物為流份Fr.III的主成分。經(jīng)過斑點反應后證實該化合物溴甲酚綠反應陽 性。甲醇重結(jié)晶后得到化合物C。通過利用現(xiàn)代波譜技術(shù)(IR, UV, MS, ID-, 2D-NMR) 鑒定化合物C為一新化合物,命名為海芒果酸A,其波譜數(shù)據(jù)見表2及結(jié)構(gòu)見表 1。 Fr. IV經(jīng)過薄層檢查后發(fā)現(xiàn),在254nm下有兩個暗斑為其主要成分。經(jīng)過薄層 條件選擇后發(fā)現(xiàn),氯仿-丙酮體系下分離效果良好。選用柱色譜分離,得到化合 物D和E。甲醇重結(jié)品后進行結(jié)構(gòu)鑒定。利用現(xiàn)代波譜技術(shù)(IR, UV, 1D-, 2D—證,MS)鑒定化合物D為一新天然產(chǎn)物,命名為海芒果酸B,化合物E為一新化合物, 命名為海芒果酸C,其波譜數(shù)據(jù)見表2及結(jié)構(gòu)見下表1。 表1化合物的結(jié)構(gòu)
海芒果酸A 海芒果酸B 海芒果酸C
表2化合物的波譜數(shù)據(jù)NO.海芒果酸A海芒果酸C海芒果酸B
SHScsH5C
13.98 (2H, s)48,13.77 (dd, 10.8Hz)53.8—138.0
2—205.23.26 (1H, m)50.97.76 (1H, s)130.3
33.98 (2H, s)48.12.90 (d, 10.8 Hz) 2.97 (d, ]0.8Hz)37,0—131.0
4—135.2—〗37.57.80 (d, 7.8Hz)129.2
7.76 (1H, brs)130.97.76 (1H, brs)129.67.41 0, 7.8Hz)129.5
6130.9—130.97.50 (d, 7.8Hz)135.1
77.79 (d, 7.8Hz)127.67.78 Cbrd, 8.0Hz)127.63.67 C2H, s)41.6
87.42 (d, 7.8Hz)128.57.44 (t, 8.0Hz)128.5—]75.1
97.41 (1H, m)133.47,41 (d, 8.0Hz)133.3一167.4
10—167.4—167.1——
11———172.1——
12—一—172.9——
r—135.2—139.0—一
2,7.76 (1H, brs)130.97.91 (1H, brs)129.1——
3,130.9—130.9——
4,7.79 (d, J=7.8Hz)127.67.80 (d,./=7.8Hz)128.6—一
5,7.42 (d, J=7.8Hz)128.57.45 0,./=7.8Hz)128.8——
6,7.41 (lH,m)133.47.56 (d, J=7.8Hz)133.0—一
7,—〗67.4—167.3—一
OH12.70 (2H,brs)—12.82 (4H,brs)—12.70 (2H,brs)—
藥理篩査組合物進行體外抗腫瘤活性篩選試驗(Hela、 KB-3-l、 NCI-H460), 結(jié)果見表3:
細胞株H印G2KB-3-1NCI-H460
部位c5.50 (嗎/ml)4.56 (嗎/ml)3.38 (嗎/ml)
權(quán)利要求
1.一種具有抗癌活性的海芒果莖皮組合物。其特征在于它是純天然產(chǎn)物,體外抗腫瘤活性顯著。
2. 利用各種柱色譜等分離手段及重結(jié)晶等純化手段對權(quán)利要求1所述的組合物進行分離 得到了 4個化合物。采用現(xiàn)代波譜技術(shù)(IR、 UV、 MS、 1D、 2D-NMR)鑒定分離所 得的化合物,分別為確定為水楊酸、海芒果酸A、海芒果酸B、海芒果酸C。其特征 是其中海芒果酸A、 B、 C為結(jié)構(gòu)新穎的苯甲酸類衍生物。
3. 權(quán)利要求1所述的組分,利用MTT法進行體外抗腫瘤實驗,所用的三種細胞株為HepG2、 KB-3-l、 NCI-H460。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是從海芒果莖皮中提取得到具有抗癌活性的組合物及其化學成分的組成。利用醇類溶劑對海芒果莖皮進行提取,得到提取物A。有機溶劑萃取后,得到萃取物B、C、D,經(jīng)過體外抗腫瘤實驗發(fā)現(xiàn),萃取物C具有顯著的抗腫瘤活性。利用各種柱色譜等分離技術(shù)及重結(jié)晶等純化手段從萃取物C中分離得到了4個化合物。采用現(xiàn)代波譜技術(shù)(IR、UV、MS、1D、2D-NMR)鑒定分離所得的化合物,分別確定為水楊酸、海芒果酸A、海芒果酸B、海芒果酸C。其特征是其中海芒果酸A、B、C為結(jié)構(gòu)新穎的苯甲酸類衍生物。
文檔編號A61K36/185GK101618054SQ20081013046
公開日2010年1月6日 申請日期2008年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月3日
發(fā)明者劉明生, 康勝利, 張俊清, 張小坡, 戴水平, 峰 陳, 娜 魏 申請人:海南醫(yī)學院
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