專利名稱：一種應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制備方法，尤其涉及一種中藥有效成分的提取純 化方法，具體涉及一種應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物的方法。
背景技術(shù)：
黃柏為蕓香科植物黃皮樹Phellodendron chinense Schneid.或黃檗 Phellodendronamurense Rupr.的干燥樹皮。前者習(xí)稱"川黃柏"，后者 習(xí)稱"關(guān)黃柏"。黃柏為常用中藥，氣微，味甚苦，嚼之有黏性，具有清 熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡，用于濕熱瀉痢，黃疸，帶下，熱淋，腳氣， 骨蒸勞熱，盜汗，遺精，瘡瘍腫毒，濕疹瘙癢。鹽黃柏滋陰降火，用于陰 虛火旺，盜汗骨蒸。
黃柏所含以鹽酸小檗堿為代表的生物堿類成分是其主要有效成分。目 前從黃柏中提取生物堿類成分的方法通常采用溫浸法、水煮法、醇提取等， 純化方法多采用醇沉法、水醇法、萃取法、大孔樹脂吸附法等；其中醇沉 法和水沉法只能達(dá)到初步純化的目的，其收膏量大，生物堿含量低。萃取 法及大孔樹脂吸附法分別單獨(dú)應(yīng)用對一些要求較高的制劑也還存在著一 些不足，比如，萃取法色素較多，提取物粘度大，使制劑顏色較深，大孔 樹脂吸附法需要反復(fù)處理，操作麻煩，重現(xiàn)性較差，并且還存在有機(jī)殘留 問題，這些直接影響了制劑的安全性和穩(wěn)定性。
中國有多篇專利是介紹黃柏提取物制備方法的，但均存在收膏率較高、含量較低、轉(zhuǎn)移率低、操作復(fù)雜等問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取 物的方法，用于解決目前黃柏提取工藝中鹽酸小檗堿轉(zhuǎn)移率低、工藝成本 高、制劑工藝穩(wěn)定性差等技術(shù)問題，本發(fā)明通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn) 本發(fā)明提供一種黃柏提取物的制備方法，該方法包括以下步驟
(1) 煎煮提取取黃柏藥材，加水進(jìn)行煎煮l-2小時(shí)，濾取藥液，藥 渣再加水煎煮0.5-l小時(shí)，濾取藥液，棄去藥渣；合并兩次藥液，將藥液 濃縮至相對密度1. 0-1. 1 (6(TC測)，冷卻至室溫得煎煮液；
(2) 粗分離將煎煮液離心分離，轉(zhuǎn)速4000-6000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10-20 分鐘，取上清液，進(jìn)行微濾膜分離，控制流速為5 10ml/min，并用蒸餾 水或純化水進(jìn)行洗濾，合并濾液，得粗提物；
(3) 精制將粗提物進(jìn)行超濾膜分離，控制流速1 5ml/min，并用蒸 餾水或純化水進(jìn)行洗濾，合并濾液，減壓濃縮，真空干燥，即得黃柏提取 物。
步驟(1)中所述水采用純化水、蒸餾水或注射用水。在本發(fā)明方法 的步驟(1)煎煮提取中， 一般都是采用純化水、蒸餾水或注射用水進(jìn)行 煎煮，這主要是為了符合臨床用藥安全的需要。其第一次煎煮的加水量為 煎煮藥材重量的8wt-18wt倍量水，第二次煎煮的加水量為煎煮藥材重量 的6wt-12wt倍量水。提取溫度一般控制在95"C，保持溶液微沸即可。步驟(2)中所使用的微濾膜規(guī)格為0. 42-0. 65micron或50000-300000 NMWC，流速為5 10ml/min，并進(jìn)行2-5次的蒸餾水或純化水洗濾，保證 鹽酸小檗堿等有效成分盡可能透過膜層。
步驟(3)中所使用的超濾膜規(guī)格為1000-30000NMWC，流速為l 5ml/min，并進(jìn)行2-5次的蒸餾水或純化水洗濾，保證鹽酸小檗堿等有效 成分盡可能透過膜層。濃縮時(shí)采用減壓濃縮，干燥采用真空干燥，溫度均 控制在50-70°C，以保證鹽酸小檗堿等有效成分的受熱分解。
膜分離(膜過濾)技術(shù)是一項(xiàng)新興的高效分離技術(shù)，已被國際公認(rèn)為 20世紀(jì)末到21世紀(jì)中期最有發(fā)展前途的一項(xiàng)重大高新生產(chǎn)技術(shù)。超濾技 術(shù)是20世紀(jì)60 70年代發(fā)展起來的一種膜分離技術(shù)，它是用多孔性半透 膜為介質(zhì)，以錯(cuò)流方式進(jìn)行過濾。超濾膜的孔徑極小，能阻攔溶液中的各 種微粒、膠體以及大分子溶質(zhì)，以達(dá)到濃縮或凈化除雜的目的。與通常的 分離方法相比，超濾具有不必經(jīng)過相的轉(zhuǎn)換、不需要添加化學(xué)試劑、濾膜 不易堵塞和耐用等優(yōu)點(diǎn)。
根據(jù)化學(xué)性質(zhì)和結(jié)構(gòu)，膜材料可以分為兩大類有機(jī)膜和無機(jī)膜。實(shí) 踐證明有機(jī)膜始終存在著不能解決膜污染、不能抗高壓和高溫等問題，所 以人們開始制造無機(jī)分離膜及其材料來彌補(bǔ)有機(jī)膜的諸多缺點(diǎn)，因此無機(jī) 膜分離設(shè)備在中藥提取分離中前景廣闊。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果基于上述技術(shù)方案，申 請人經(jīng)過試驗(yàn)證實(shí)，若采用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物，可顯著提高黃柏 提取物中有效成分的含量，提高鹽酸小檗堿的轉(zhuǎn)移率，不僅可以節(jié)約藥材 成本，更能簡化工業(yè)生產(chǎn)步驟，操作簡單，能夠提供更有利于工業(yè)生產(chǎn)地的工藝條件，并確保工藝的穩(wěn)定性和安全性，使這一傳統(tǒng)中藥盡可能發(fā)揮 其功效。本發(fā)明的特點(diǎn)為黃柏提取時(shí)，微沸即可，這樣即能保證有效成 分的提取，又能減少雜質(zhì)的溶出；能有效地除去雜質(zhì)，減少致敏成分，并 使總有效成分的含量提高。采用微濾和超濾相結(jié)合的方法，可有效去除樹 脂、鞣質(zhì)、粘液質(zhì)、色素等無效成分，同時(shí)避免使用有機(jī)試劑減少工業(yè)生 產(chǎn)污染;更重要的是避免了鹽酸小檗堿為主的活性成分在其它復(fù)雜制備工 藝中的損失，本方法可使鹽酸小檗堿轉(zhuǎn)移率達(dá)到90%以上，能最大化提 高黃柏藥材的藥用價(jià)值。
具體實(shí)施例方式
以下通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但應(yīng)理解，這些實(shí)施例只是示例 性的，本發(fā)明并不局限于此。 實(shí)施例1:
稱取黃柏200g，加12倍水2400ml微沸煎煮(95°C) 1. 5小時(shí)，過濾， 藥渣加10倍水2000ml微沸煎煮(95°C) 1.0小時(shí)，過濾，合并濾液，分 成兩份， 一份進(jìn)行膜過濾分離， 一份進(jìn)行醇沉分離。
1. 膜過濾分離取提取液，60。C減壓濃縮至比重為1. 1 (60°C)， 4500 轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心15分鐘，取上清液，過微濾膜(0.65Micron)，控制 流速10ml/min，用蒸餾水洗濾3次，每次100ml;微濾液過超濾膜(10000 NMWC)，控制流速為5ml/min，用蒸餾水洗濾3次，每次50ml，將超濾液 6(TC減壓濃縮至比重為1.2 (60°C)，真空干燥，得到黃柏提取物干粉。
2. 醇沉分離取提取液，60。C減壓濃縮至比重為1.15 (60°C)，加 95°%乙醇至含醇量為70%,攪拌均勻，靜置過夜，離心得到上清液，回收乙醇，真空干燥，得醇沉工藝制得的黃柏提取物。 3.檢測結(jié)果
3. 1鹽酸小檗堿含量和轉(zhuǎn)移率: 樣品名稱 鹽酸小檗堿含量 膜過濾工藝 8.0%
醇沉工藝 3.3%
干浸膏得率
4% 7%
3. 2膜過濾成本分析表
工藝種類時(shí)間 耗材
膜過濾工藝 過濾速度5ml/min 膜材
醇沉工藝 一般需靜置12-24hr 95%乙醇
鹽酸小檗堿轉(zhuǎn)移率 92% 67%
工藝過程 過濾、濃縮 濃縮、醇沉、濃縮
對于黃柏來說，以主要功效成分鹽酸小檗堿為考察指標(biāo)，膜過濾工藝 轉(zhuǎn)移率高，工藝過程簡單，基本可以除去大分子的淀粉、糖類、鞣質(zhì)、葉 綠素等。此外，膜過濾生產(chǎn)成本較醇沉工藝低，生產(chǎn)環(huán)境更優(yōu)，并能縮短 生產(chǎn)周期，有利于該工藝的推廣應(yīng)用。以上對比實(shí)驗(yàn)將采用本發(fā)明膜過濾 工藝和采用傳統(tǒng)工藝醇沉工藝制備黃柏提取物進(jìn)行比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果充分體 現(xiàn)了采用本發(fā)明膜過濾工藝制備黃柏提取物的高效率、低成本、低污染、 高轉(zhuǎn)移率、高純度的優(yōu)勢。
實(shí)施例2:
稱取黃柏200g，加8倍水1600ml微沸煎煮(95°C) 1小時(shí)，過濾， 藥渣加6倍水1200ml微沸煎煮(95°C) 0. 5小時(shí)，過濾，合并濾液，將 濾液6(TC減壓濃縮至比重為1.05 (60°C)， 4000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心20 分鐘，取上清液，過微濾膜(0.42 Micron),控制流速5ml/min，用蒸餾 水洗濾2次，每次100ml;微濾液過超濾膜(1000 NMWC)，控制流速為lml/min，用蒸餾水洗濾2次，每次50ml，將超濾液6(TC減壓濃縮至比重 為1.2 (60°C)，真空干燥，得到黃柏提取物干粉。 實(shí)施例3:
稱取黃柏200g，加18倍水3600ml微沸煎煮(95°C) 2小時(shí)，過濾， 藥渣加12倍水2400ml微沸煎煮(95°C) 0. 8小時(shí)，過濾，合并濾液，將 濾液6(TC減壓濃縮至比重為1. 0 (60°C)， 5000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心15分 鐘，取上清液，過微濾膜(0.5 Micron)，控制流速7ml/min，用蒸餾水 洗濾5次，每次100ml;微濾液過超濾膜(30000 NMWC)，控制流速為 3ml/min，用蒸餾水洗濾5次，每次50ml，將超濾液6(TC減壓濃縮至比重 為1.2 (6(TC)，真空干燥，得到黃柏提取物干粉。
實(shí)施例4:
稱取黃柏200g，加15倍水3000ml微沸煎煮(95°C) 1. 5小時(shí)，過濾， 藥渣加10倍水2000ml微沸煎煮(95°C) 0. 8小時(shí)，過濾，合并濾液，將 濾液6(TC減壓濃縮至比重為1. 1 (60°C)， 6000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心10分 鐘，取上清液，過微濾膜(0.5 Micron)，控制流速8ml/min，用蒸餾水 洗濾3次，每次100ml;微濾液過超濾膜(20000 NMWC)，控制流速為 3ml/min,用蒸餾水洗濾3次，每次50ml，將超濾液60。C減壓濃縮至比重 為1.2 (6CTC)，真空干燥，得到黃柏提取物干粉。
權(quán)利要求
1、一種應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物的方法，該方法包括以下步驟(1)煎煮提取取黃柏藥材，加水進(jìn)行煎煮1-2小時(shí)，濾取藥液，藥渣再加水煎煮0.5-1小時(shí)，濾取藥液，棄去藥渣；合并兩次藥液，將藥液濃縮至相對密度1.0-1.1，冷卻至室溫得煎煮液；(2)粗分離將煎煮液離心分離，轉(zhuǎn)速4000-6000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10-20分鐘，取上清液，進(jìn)行微濾膜分離，控制流速為5～10ml/min，并用蒸餾水或純化水進(jìn)行洗濾，合并濾液，得粗提物；(3)精制將粗提物進(jìn)行超濾膜分離，控制流速1～5ml/min，并用蒸餾水或純化水進(jìn)行洗濾，合并濾液，減壓濃縮，真空干燥，即得黃柏提取物。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物的方法， 其特征在于，步驟(1)中所述水采用純化水、蒸餾水或注射用水。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物的方 法，其特征在于，在步驟(1)中，第一次煎煮的加水量為煎煮藥材重量 的8wt-18wt倍量水，第二次煎煮的加水量為煎煮藥材重量的6wt-12wt 倍量水。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃桕提取物的方法， 其特征在于，步驟(2)中所使用的微濾膜規(guī)格為0.42—0.65micron或 50000-300000麗C，流速為5 10ml/min。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物的方法，其特征在于，步驟(3)中所使用的超濾膜規(guī)格為1000-30000NMWC，流速 為1 5ml/miru
6、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物的方法， 其特征在于，在步驟(2)中，微濾膜分離中洗濾次數(shù)為2-5次；在步驟(3)中，超濾膜分離中洗濾次數(shù)為2-5次。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種應(yīng)用膜過濾技術(shù)制備黃柏提取物的方法，該方法包括先將黃柏加水煎煮提取，減壓濃縮離心，用微濾膜除去大部分雜質(zhì)，再用超濾膜進(jìn)一步精制。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法既能保證黃柏有效成分的提取，又能減少雜質(zhì)的溶出；能有效地除去雜質(zhì)，減少致敏成分，并使總有效成分的含量提高。因而該方法能克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，操作簡單，被分離物回收率高，又能夠提供更有利于工業(yè)生產(chǎn)的工藝條件。
文檔編號(hào)A61K36/185GK101530495SQ20081004305
公開日2009年9月16日 申請日期2008年1月22日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月22日
發(fā)明者潔 丁, 劉志遠(yuǎn), 英 唐, 茜 王, 路鈞鑭 申請人:上海中藥制藥技術(shù)有限公司