專利名稱：：用于血液替代品和其他治療用途的優(yōu)化的氟碳乳劑的制作方法用于血液替代品和其他治療用途的優(yōu)化的氟碳乳劑應(yīng)用領(lǐng)域本發(fā)明涉及氟碳和全氟碳乳劑，它們被最優(yōu)化配制為血液攜氧體用于人類患者并且預(yù)防暴露于同源或異源輸血以及其他治療用途。更具體地說，本發(fā)明涉及具有連續(xù)水相和非連續(xù)氟碳相的氟碳乳劑配方，該配方顯示出最佳的穩(wěn)定性及最小的器官滯留，因此避免了不希望的副作用。
背景技術(shù)：
：血液是一種在非細(xì)胞的、連續(xù)的血漿相中的膠體顆粒(例如紅細(xì)胞和白細(xì)胞、蛋白質(zhì)等)的復(fù)雜分散相。血液分散相的組分提供了大部分的生物學(xué)功能，包括將氧運(yùn)送至組織、止血、宿主防御、營(yíng)養(yǎng)素和激素的運(yùn)輸以及代謝廢物的排除。雖然血液所有的功能都非常重要，但是血液的精髓作用還是氧的傳送。缺氧或缺血會(huì)快速導(dǎo)致細(xì)胞、組織和器官不可逆的退化。當(dāng)前，人血是急性和慢性貧血癥患者的選擇試劑。但是，捐贈(zèng)的血液不是沒有風(fēng)險(xiǎn)的。捐贈(zèng)的血液可能被很多病原體污染，例如人免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎或蛋白感染素，它們導(dǎo)致不同程度的克-雅二氏病。同種異源輸血也可能導(dǎo)致免疫抑制，它與日益增長(zhǎng)的癌癥復(fù)發(fā)和外科手術(shù)患者事故或術(shù)后感染有關(guān)。Blumberg等，^2^(《血液》)，66Supp.1，274a(1966);Maetani等，j肌S歸，203,275(1986)。雖然公眾對(duì)風(fēng)險(xiǎn)的感知集中于感染的風(fēng)險(xiǎn)，但是筆誤導(dǎo)致的錯(cuò)誤輸血是有關(guān)輸血的嚴(yán)重發(fā)病率和死亡率最常見的原因。報(bào)告的將紅細(xì)胞給予與計(jì)劃受血者之外的人士的發(fā)生率是19,000分之l;然而，在一項(xiàng)輸血錯(cuò)誤的前瞻性研究中發(fā)現(xiàn)的實(shí)際發(fā)生率是400單位中1例。美國(guó)血庫協(xié)會(huì)，輸血的非感染性嚴(yán)重危害,協(xié)會(huì)公報(bào)，01-4(2001)。在血液儲(chǔ)存過程中，血液內(nèi)發(fā)生的生化和形態(tài)學(xué)的改變，這導(dǎo)致紅細(xì)胞不可逆的損害和降低的輸血后存活率。這一所謂的"貯存損害，，引起2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)的耗竭，導(dǎo)致血紅蛋白更低效率的傳送氧直到自然地充滿，這個(gè)過程需要幾個(gè)小時(shí)。Valeri等，"輸注枸櫞酸葡萄糖儲(chǔ)存的人血紅細(xì)胞之后體內(nèi)紅細(xì)胞三磷酸腺苷、2，3-二磷酸甘油、鉀離子和鈉離子濃度的恢復(fù)。"J丄abClinMed.,73:722-33(1969)。儲(chǔ)存的血液也包含生物活性物質(zhì)，例如細(xì)胞活素類，其被視為引起非溶血性發(fā)熱輸血反應(yīng)的一個(gè)主要原因。在疾病傳染和筆誤保持為輸血的嚴(yán)重問題的同時(shí)，捐贈(zèng)血液的可獲得性已成為近期國(guó)際上重要的憂慮。血液短缺的憂慮可能部分受到最近的指導(dǎo)原則的驅(qū)動(dòng)阻止在歐洲住過很長(zhǎng)時(shí)間的捐血者的捐血，這是由于食用被感染牛肉而感染不同的克-雅二氏病(vCJD)的潛在風(fēng)險(xiǎn)。此外，捐血者庫的減少(由于人口老年化和更多捐血限制)和很多老年患者大手術(shù)中對(duì)血液要求的增加，導(dǎo)致頻繁的地區(qū)性短缺，引起選擇性外科手術(shù)取消或延誤。捐贈(zèng)的血液，當(dāng)使用時(shí)，通常時(shí)間較長(zhǎng)并且必須為每一位患者進(jìn)行血型和交叉配型，這一過程會(huì)導(dǎo)致危險(xiǎn)的輸血延誤。血液還必須冷藏并具有約42天的貯存期限，使其在很多危急情況下無法獲得，例如在一些偏遠(yuǎn)地區(qū)的創(chuàng)傷情況下。J&存血的短缺是一個(gè)重要的全球性問題，很多情況下血液儲(chǔ)存只能保證數(shù)天，使得應(yīng)對(duì)災(zāi)難非常困難。尋找替代血液的氧運(yùn)輸作用的治療劑一直是全世界的高度優(yōu)先的事項(xiàng)。目標(biāo)是找到捐贈(zèng)血的一種替代品，它無病原體、穩(wěn)定、可長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存、可支付得起、并且是一種萬能供血產(chǎn)品，它在需要的任何時(shí)間和地點(diǎn)都可以立即使用。目前，血液代用品中采用了兩種不同的方法，純化的血紅蛋白衍生物和含氟化合物乳劑。1.純化的基于血紅蛋白的氧傳送生產(chǎn)以血紅蛋白為基礎(chǔ)的氧載體已經(jīng)進(jìn)行了一段時(shí)間的努力。血紅蛋白是一個(gè)約64,000道爾頓的四聚體蛋白質(zhì)，它將氧傳送至全身。血紅蛋白由4個(gè)亞單位的多肽鏈組成，每個(gè)約140個(gè)氨基酸。每個(gè)鏈具有16,100道爾頓的分子量并攜帶一個(gè)四吡咯含鐵的輔基，血紅素，它可以結(jié)合一個(gè)氧分子。人類有幾種不同類型的血紅蛋白，所有類型都包含4個(gè)亞單位。人類紅蛋白亞型中的不同限于珠蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)(氨基酸序列)。血液運(yùn)送在紅細(xì)胞內(nèi)與血紅蛋白結(jié)合的氧，紅細(xì)胞將氧分散到全身的組織。所以，血紅蛋白結(jié)合和釋放氧的能力使其成為血液替代品的一個(gè)吸引人的主題。但是，血紅蛋白是一種內(nèi)在不穩(wěn)定的分子。在其紅細(xì)胞環(huán)境之外，血紅蛋白分子迅速地分解成由一個(gè)a和一個(gè)&亞單元組成的二聚體，它們通過循環(huán)由腎迅速去除。因此，合適的無基質(zhì)血紅蛋白分子的開發(fā)依賴于一種穩(wěn)定的、輸注時(shí)不會(huì)分解成二聚物的血紅蛋白功能性四聚物的開發(fā)。血紅蛋白在紅細(xì)胞外環(huán)境的另一個(gè)問題是由于它具有較高的氧親和力(由于其正常變構(gòu)效應(yīng)體的缺乏，2，3-二磷酸甘油通常存在于紅細(xì)胞內(nèi))和高濃度下引起腎小管阻塞因此造成腎衰竭的潛在可能性。因此，為了成為無細(xì)胞狀態(tài)或溶液中有效的氧栽體，血紅蛋白必須進(jìn)行化學(xué)改性以避免分解和氧親和力的問題。第二個(gè)目標(biāo)是以成本有效的方式生產(chǎn)高產(chǎn)量的產(chǎn)品。為了解決這些問題已經(jīng)嘗試了幾種新方法，包括化學(xué)結(jié)合血紅蛋白的蛋白質(zhì)亞單位來一起防止分解(例如，將磷酸吡噴醛與血紅蛋白分子相結(jié)合或其他各種交聯(lián)策略)和重組體血紅蛋白的生產(chǎn)?；瘜W(xué)上改變血紅蛋白產(chǎn)生的問題包括確保血紅蛋白原材料的充足供應(yīng)，該材料例如處于供應(yīng)短缺的人全血。使用從其他哺乳動(dòng)物中獲得的血紅蛋白，例如來自牛的血紅蛋白，由于牛海綿狀腦炎病毒和其他病原體而令人擔(dān)憂。重組體血紅蛋白是另一個(gè)選擇。重組體血紅蛋白的問題是它的低產(chǎn)率和因此造成的高生產(chǎn)成本。還有純度方面的憂慮，因?yàn)閮?nèi)毒素污染通常是大腸桿菌產(chǎn)品存在的問題。人造血紅蛋白的另外一個(gè)問題是它與其他游離氣體的結(jié)合。游離血紅蛋白易于結(jié)合一氧化氮。這種結(jié)合在體內(nèi)是否具有臨床意義還是未知的，盡管與一氧化氮的結(jié)合被視為血紅蛋白輸注后常見的高血壓的原因。仍然有待確定無基質(zhì)血紅蛋白對(duì)血流量無局部自身調(diào)節(jié)有何7種作用，以及與血紅蛋白相關(guān)的高血壓是否具有病理性后果。當(dāng)前，在大型動(dòng)物或臨床研究中使用這些化合物來闡釋此種現(xiàn)象的重要性幾乎沒有可供使用的數(shù)據(jù)。2.氟碳乳劑含氟化合物是包含氟原子的分子。術(shù)語含氟化合物或氟碳化合物是與術(shù)語全氟碳化合物("PFC，，)相對(duì)比，全氟碳化合物是化學(xué)上惰性的合成分子，主要由碳原子和氟原子組成(即沒有氫原子)。液態(tài)的PFC和氟碳化合物通常是澄清、無色以及實(shí)際上無味的，并且具有物理性溶解大量的多種氣體的固有能力，該氣體包括氧氣、二氧化碳和氮?dú)?。由于PFC是疏水性的，它們不易與水混合所以必須用表面活性劑(例如磷脂)乳化來產(chǎn)生一個(gè)基于水的PFC乳劑用于靜脈使用。通過在高切力(例如均化)條件下混合PFC、表面活性劑和水性緩沖液，在水性介質(zhì)中形成微小的亞微米尺寸的液滴。PFC液滴被表面活性劑的單分子層包圍，其中表面活性劑分子的疏水的脂質(zhì)端將自身定向于含PFC的核心，同時(shí)親水的含磷酸鹽的極性頭部基團(tuán)形成液滴的外表面，它們暴露于水性環(huán)境中。PFC和氟碳化合物并不以與血紅蛋白相同的方式將氧運(yùn)送到組織。氧高度可溶于氟碳化合物中，靜脈輸注之后這些氟碳化合物出現(xiàn)在血液的血漿相中。因此含氟化合物對(duì)運(yùn)送氧的主要貢獻(xiàn)是由于它們能夠增加血漿室攜帶的氧氣。雖然，即使在高吸入氧濃度分?jǐn)?shù)(FK)2)下氟碳化合物攜帶的氧氣的絕對(duì)值相對(duì)較小，但是非常高百分?jǐn)?shù)的被傳輸?shù)难鯕忉尫诺浇M織，導(dǎo)致從氟碳相提取氧氣，通常超過卯％。PFC乳劑通過增加血漿室中攜帶的溶解氧而增加血液中的總氧含量，其量與氧分壓(P02)呈線性比例。在高水平的P02(患者吸入高濃度氧氣)時(shí)，PFC乳劑中的氧要比紅細(xì)胞(RBC)中與血紅蛋白結(jié)合的氧更易于供組織使用。這是因?yàn)閬碜訮FC乳劑中的氧線性地負(fù)載和卸載，而在紅細(xì)胞中的氧按照S型氧合血紅蛋白分解曲線化學(xué)地結(jié)合和釋放。在組織的正常環(huán)境下從血紅蛋白中提取氧氣是在20-25%范圍內(nèi)，并且總體低于當(dāng)氟碳化合物在循環(huán)中向組織傳送氟碳溶解的氧氣時(shí)。血紅蛋白在大氣氧水平時(shí)幾乎是飽和的，其氧含量不能通過增加吸入氧濃度而被顯著提高。PFC乳劑的提取率約為60%，相比之下血紅蛋白在環(huán)境條件下的提取率約為20-50%。當(dāng)吸入高濃度的氧時(shí)，從PFC乳劑中提取氧達(dá)到卯％或更多。所以，當(dāng)氟碳化合物或PFC乳劑存在于血液中時(shí)，該氟碳化合物或PFC乳劑總是首先釋放其氧負(fù)載，從而保留與血紅蛋白結(jié)合的氧。很多體內(nèi)和體外研究支持PFC乳劑具有增加氧傳送以及維持或改進(jìn)外科手術(shù)過程中系統(tǒng)和組織的氧合作用的效力。自二十世紀(jì)六十年代初期以來，就進(jìn)行了很多不同的研究努力試圖研發(fā)一種穩(wěn)定的氟碳乳劑用于血管內(nèi)的氧治療。第一個(gè)商業(yè)化開發(fā)的可注射的氟碳乳劑產(chǎn)品是大約30年前由綠十字林式會(huì)社(日本，大阪)生產(chǎn)的FLUOSOL，它是一種20。/。重量/容積(w/v)的PFC乳劑，包括14%w/v全氟萘烷和6%w/v全氟三丙胺，主要由一種合成的泊洛沙姆，普流尼克(Pluronic)F-68和少量蛋黃磷脂乳化。該第一代產(chǎn)品的局限性包括莖乳劑(stememulsion)需要冷凍保存，使用前需要將乳劑融化然后與兩種附加溶液混合。混合后較短的產(chǎn)品穩(wěn)定性(8小時(shí))和明顯的副反應(yīng)(例如嚴(yán)重的替代途徑補(bǔ)體激活)都是FLUOSOL嚴(yán)重的問題，這主要由合成的普流尼克表面活性劑引起。FLUOSOL在嚴(yán)重貧血癥和活動(dòng)性出血Jehovah'sWitness人患者中進(jìn)行了廣泛的試驗(yàn)，清楚地證明了其運(yùn)送氧的能力。Tremper等，"用一種全氟化合物氧運(yùn)輸液體Fluosol-DA對(duì)嚴(yán)重貧血癥患者進(jìn)行手術(shù)前的治療。，，；NEnglJMed307:277-83(1982);Gould等，"Fluosol-DA在急性貧血中作為一種紅細(xì)胞代用品。"NEnglJMed314:1653-6(1986)。但是，F(xiàn)LUOSOL沒有為這種大容量"血液代用品，，適應(yīng)癥得到FDA的批準(zhǔn)，因?yàn)樵谶@些出血和嚴(yán)重貧血且由于宗教信仰拒絕輸血的患者中，暫時(shí)的氧合利益不能顯著地改善死亡率結(jié)果。后來對(duì)開發(fā)FLUOSOL所做的努力主要集中于將其作為冠狀動(dòng)脈氣嚢血管成形術(shù)(PTCA)過程中的附加物，即在延長(zhǎng)球嚢擴(kuò)張的過程中作為一種能夠通過PTCA導(dǎo)管灌注的攜氧低粘度液體來為末端心肌供氧。FLUOSOL在PTCA中的療效通過減輕心肌缺血、在球嚢擴(kuò)張過程中維持心室功能(改善心輸出量)以及減少室壁運(yùn)動(dòng)偽差(即減少的ST段抬高以及改善的左心室射血分?jǐn)?shù))得到證實(shí)。Bell等人，"在冠狀動(dòng)脈氣嚢血管成形術(shù)中冠狀動(dòng)脈內(nèi)輸注Fluosol-DA20%能夠防止左心室舒張期功能障礙嗎？"JAmerCollCardiol16:959-66(1990);Cowley等，"在不穩(wěn)定和高風(fēng)險(xiǎn)患者冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)中輸注全氟化合物。"循環(huán)(Circulation)81(SuppIV):IV畫27誦34(1990)。這些數(shù)據(jù)是FLUOSOL在美國(guó)市場(chǎng)上允許銷售的基礎(chǔ)，F(xiàn)DA于1989年12月給予批準(zhǔn)。迄今為止，F(xiàn)LUOSOL是唯--個(gè)被FDA批準(zhǔn)的合成的氧治療劑。二十世紀(jì)八十年代后期和二十世紀(jì)九十年代初期的其他臨床試驗(yàn)是將FLUOSOL用于癌癥患者的初級(jí)放射的添加物。這些研究包括患有早期頭頸惡性腫瘤、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、肺癌和多形性惡性膠質(zhì)瘤的患者。二十世紀(jì)九十年代初期，F(xiàn)LUOSOL在430位患有急性心肌梗塞患者中進(jìn)行了大規(guī)模多中心臨床研究試驗(yàn)(TAMI-9),來評(píng)價(jià)在用血栓溶解劑(組織型纖溶酶原激活物)治療后FLUOSOL作為一種附加再灌注治療藥物的安全性和有效性。在FLUOSOL治療組中觀察到較低的平均梗塞面積和較少的復(fù)發(fā)性缺血的趨勢(shì)。不幸的是在總體射血分?jǐn)?shù)、局部室壁活動(dòng)或左心室射血分?jǐn)?shù)上并沒有發(fā)現(xiàn)顯著改善。由于FLUOSOL的大容量給藥(15mL/kg)，觀察到短暫的充血性心力衰竭和肺水腫的趨勢(shì)，這可能減弱FLUOSOL治療的氧合治療效益。盡管做了各種努力開發(fā)第二種適應(yīng)癥，綠十字還是于1994年初停止生產(chǎn)FLUOSOL，主要由于在PTCA市場(chǎng)的銷售不好(自從自體灌注導(dǎo)管進(jìn)入市場(chǎng)，現(xiàn)在在球嚢擴(kuò)張過程中允許血液通過導(dǎo)管內(nèi)腔進(jìn)行灌注)。此外，有資料顯示延長(zhǎng)的球嚢擴(kuò)張時(shí)間與PTCA之后冠狀動(dòng)脈再狹窄率降低沒有關(guān)系。盡管如此，F(xiàn)LUOSOL得到FDA的批準(zhǔn)代表了氧療法發(fā)展中的一個(gè)非常重要的里程碑。這個(gè)批準(zhǔn)證明了基于PFC的乳劑作為臨時(shí)的血管內(nèi)氧載體對(duì)于改善患者局部缺血組織的缺氧狀況10是安全和有效的。最近十至十五年中，商業(yè)研究努力帶來了第二代氟碳乳劑的開發(fā)，與第一代稀釋的配方相比具有改善的產(chǎn)品特性。這些成果最成功之處集中在更多樣的直鏈氟碳化合物(而不是環(huán)狀氟碳分子)，它們具有略高的氧溶解性。第二代氟碳乳劑的另外一點(diǎn)改進(jìn)是使用卵磷脂(即蛋黃磷脂(EYP))作為表面活性劑。EYP多年來被用來生產(chǎn)腸外產(chǎn)品例如英脫利匹特(INTRALIPID)(即對(duì)于不能攝食的患者靜脈輸注的基于甘油三酯的脂肪乳劑)，它比以前使用的合成的基于普流尼克(Pluronic)的表面活性劑具有更好的生物相容性。致力于生產(chǎn)基于氟碳的氧載體的另一個(gè)開發(fā)已經(jīng)在俄羅斯進(jìn)行了很多年，但是在英文文獻(xiàn)關(guān)于此產(chǎn)品可獲得的信息很少。PERFTORAN,最初由理論和實(shí)驗(yàn)生物物理學(xué)研究所(InstituteofTheoreticalandExperimentalBiophysics)(俄羅斯，Puschino)開發(fā)，它是一種20%w/v乳劑，包含14%w/v的全氟萘烷和6%w/v的全氟代-n-甲基環(huán)己基哌咬，它是用一種類似于普流尼克(Pluronic)F-68的合成的泊洛沙姆(Proxanol)進(jìn)行乳化。PERFTORAN乳劑的平均粒度小于0.2nm。可是乳劑必須被冷凍儲(chǔ)存(可達(dá)3年)，融化后只可以冷藏儲(chǔ)存兩周。Perftoran已經(jīng)在超過500位患者中進(jìn)行了評(píng)估，用于各種不同的臨床和醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥中，包括戰(zhàn)場(chǎng)中遭受外傷失血的士兵。Vorobyev等，"全氟碳乳劑Perftoran—具有氣體運(yùn)輸作用的血漿代用品。"ArtifCellsBloodSubstImmobBiotech24:453(1996)。在俄羅斯，PERFTORAN于1999年得到批準(zhǔn)用于人體。PERFTORAN聲明的適應(yīng)癥為，它被用作"一種血液代用品制劑，它在休克、失血、多發(fā)性外傷、大面積皮膚燒傷、外觀死亡情形以器官移植等情況下具有氣體運(yùn)輸功能。"在臨床上它也被用于心肺分流術(shù)、治療四肢局部缺血的區(qū)域性灌注和嚴(yán)重的酒精中毒。但是值得注意的是，在俄羅斯以外沒有進(jìn)行過關(guān)于PERFTORAN的任何研究，據(jù)報(bào)道是由于他們不能按照cGMP指南生產(chǎn)產(chǎn)品。人造血液國(guó)際7〉司(SyntheticBloodInternational,Inc.,SBI)才艮據(jù)LelandClarkJr的早期先驅(qū)工作，已經(jīng)對(duì)PFC進(jìn)行了多年研究。該公司最初的焦點(diǎn)是研發(fā)用于糖尿病患者的一種可植入的葡萄糖生物傳感器，并且利用PFC進(jìn)行液體通氣(Fluorovent)。僅在過去的幾年中，SBI明顯地基于一種定制合成的Cn)F2。專有PFC分子配制了一種濃縮的60%w/vPFC乳劑。此化合物宣稱具有有利于制造體內(nèi)使用的生物相容的PFC乳劑的物理性質(zhì)。但是，他們專有的化合物可能很難以極高純度水平合成，并且因?yàn)樾枰ㄖ坪铣伤杂锌赡苁股a(chǎn)很昂貴。還有，組織滯留時(shí)間可能會(huì)比其他更常使用的PFC(例如全氟萘烷或全氟溴烷)要長(zhǎng)。2003年2月，SBI宣布他們提交了OXYCYTE的新藥審查申請(qǐng)，并于2003年4月接到了FDA的批準(zhǔn)開始劑量遞增I期研究。在二十世紀(jì)九十年代初期，Hemagen/PFC(圣路易斯，MO)在試圖開發(fā)OXYFLUOR作為一種濃縮的乳劑時(shí)，嘗試使用了一種定制合成的含氟化合物，全氟二氯辛烷(CsFwCl2;PFDCO)。KaufmanRJ.，"基于全氟碳的乳劑作為紅細(xì)胞代用品的臨床開發(fā)。"血液代用品療效的生理學(xué)基礎(chǔ)。波士頓Birkhauser,52-75(1996)。Hemagen/PFC嘗試了一種新的方法，該方法是為了減小OXYFLUOR乳劑的粒度并因此增加產(chǎn)品的穩(wěn)定性而通過向乳劑中添加油。得到的OXYFLUOR乳劑是一個(gè)3-相配方，它基于將PFDCO與甘油三酯(紅花油)和EYP組合來作為唯一的表面活性劑(78%w/v(40%v/v)氟碳乳劑)。OXYFLUOR乳劑的平均粒度為0.22-0.25pm，實(shí)際上包含兩類不同的顆粒即較小的油滴(甘油三酯)和較大的包含PFC的微滴。結(jié)果，在人體使用中的副反應(yīng)更加明顯，由于這些較大的乳劑顆粒觸發(fā)的急性期反應(yīng)引起了嚴(yán)重的發(fā)熱反應(yīng)和流行性感冒樣癥狀。KaufmanR.，"40%v/v的HM351乳劑(OxyfluorTM)在健康人志愿者中的1期臨床試驗(yàn)結(jié)果。"ArtifCellsBloodSubstImmobBiotech;22:A112(1994)。Hemagen正在研究一種適應(yīng)癥以改善分流術(shù)后常出現(xiàn)的認(rèn)識(shí)功能障礙，據(jù)推測(cè)是由于在心肺分流術(shù)中產(chǎn)生的氣體微栓部分引起的局部腦缺血。啟動(dòng)了心肺分流術(shù)中早期的2a期安全性研究，但是所有的患者必須預(yù)先接受地塞米松治療來抑制急性副反應(yīng)。這最終導(dǎo)致了這些臨床研究的終止，并且研發(fā)最終停止。盡管上面說明了不同的氟碳乳劑的問題，取決于具體PFC和表面活性劑的選擇，有可能生產(chǎn)適合人類體內(nèi)使用的具有特別小的顆粒(中間粒徑小于0.2pm)的水包氟碳化合物乳劑，它們可以長(zhǎng)時(shí)間保持穩(wěn)定并且是生物相容的。但是，選擇具有適當(dāng)?shù)奈锢砗突瘜W(xué)性質(zhì)的具體氟碳化合物、合適的濃度和數(shù)量以及合適的表面活性劑，是決定一個(gè)氟碳乳劑在體內(nèi)的安全度(即生物相容性)和氟碳化合物分子如何迅速從體內(nèi)排除的關(guān)鍵。氟碳化合物(包含其他氟碳化合物或部分氟化的污染氟碳化合物的性狀例如分子量、脂溶性以及蒸汽壓，都是直接影響氟碳化合物在體內(nèi)的行為的主要因素。此外，這些氟碳化合物的性質(zhì)以及選擇與氟碳化合物一起使用且具有正確的化學(xué)和物理性質(zhì)的表面活性劑，最終決定了最后的氟碳乳劑配方的內(nèi)在穩(wěn)定性和貯存期限。靜脈內(nèi)給藥的氟碳乳劑的藥代動(dòng)力學(xué)靜脈內(nèi)給藥的氟碳乳劑的藥代動(dòng)力學(xué)可以由圖1中的四個(gè)區(qū)來說明。乳劑微滴通過網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的循環(huán)單核細(xì)胞或組織駐留型巨噬細(xì)胞的吞噬作用從循環(huán)中清除。循環(huán)單核細(xì)胞通過肺循環(huán)并在循環(huán)中吞噬乳劑微滴，之后移至肺泡腔，在那里含氟化合物通過血/氣界面被轉(zhuǎn)移，并在呼氣時(shí)被排除。顯示這一過程的速率常數(shù)k,。的值非常小，表明很少氟碳化合物通過此途徑被移除。主要的血液移除機(jī)制包括微滴被RES細(xì)胞攝取和吞噬。發(fā)現(xiàn)約80%或更多的給藥量在從血液移出后存在于RES器官中，主要是肝和脾。全氟碳在化學(xué)上和生物學(xué)上是惰性的，因此觀測(cè)不到全氟化合物的代謝作用。被吞噬后，細(xì)胞內(nèi)的含氟化合物通過與循環(huán)脂質(zhì)栽體(即乳糜微粒類和脂蛋白類)結(jié)合從RES細(xì)胞(k24)中被移除。此時(shí)含氟化合物能夠在呼氣時(shí)排除(k40)、分配至脂肪組織(k43)或回到RES(k42)。最終的移除取決于增加和減少第4區(qū)的速度常數(shù)的大小。定速步驟k24由含氟化合物傳質(zhì)到脂質(zhì)載體所控制，這一過程關(guān)鍵地取決于含氟化合物的脂溶性。R.E.Moore和L.C.Clark在R.Frey等，"運(yùn)輸氧的膠體血液代用品德國(guó)慕尼黑第五屆國(guó)際全氟化合物血液代用品研討會(huì)(5"Int.SvmD.OnPerfluorochemicalBloodSubstitutes,Munich),，，第50頁(l982)。在3區(qū)(脂肪組織)的含氟化合物的濃度同樣取決于該含氟化合物的親脂性質(zhì)。由于脂肪灌注不良，與循環(huán)豐富的RES相比移除要緩慢。再分布進(jìn)脂肪導(dǎo)致全身移除速率(k40)的下降。對(duì)于一種典型的含氟化合物(例如，全氟溴辛烷(perfluorooctylbromide))這些速率常數(shù)具有下面的量值，以hr"為單位kl0-0.000，kl2-0.04，k24-0.006,k420.002，k34-0.002，k40-0.07。含氟化合物的性質(zhì)對(duì)于觀測(cè)到的藥代動(dòng)力學(xué)有極深的影響。如所討論的，k24主要取決于含氟化合物的親油性。確實(shí)已經(jīng)觀察到氟碳乳劑FLUSOSOL的兩種含氟組分的k24的明顯差異，F(xiàn)LUSOSOL是一種被美國(guó)食品和藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)的用于氣嚢血管成形術(shù)中向組織運(yùn)送氧的氟碳乳劑(日本大阪，綠十字林式會(huì)社)。對(duì)于全氟萘烷和全氟三丙胺的RES消除速度常數(shù)(k24)分別等于0.10和0.011天"，全身清除遠(yuǎn)遠(yuǎn)比全氟溴辛烷緩慢。含氟化合物的血管內(nèi)持久性同樣是其生物相容性的一個(gè)重要因素，因?yàn)樗c設(shè)計(jì)用作"血液代用品"的乳劑產(chǎn)品的療效直接成比例。k12的值(被RES攝取的顆粒)關(guān)鍵地取決于含氟化合物的總劑量、乳劑微粒大小以及可能與促進(jìn)RES識(shí)別微滴或選擇性給與乳劑微滴"隱形"特性的特異調(diào)理素或異常調(diào)理素結(jié)合。在包含兩相分散相組分的含氟乳劑中，由于通過連續(xù)相時(shí)更多水溶性組分的分子擴(kuò)散，在不同大小的微滴之間觀察到含氟化合物組分的明顯分隔。這導(dǎo)致了以下的現(xiàn)象更多水溶性的含氟化合物濃集在較大微滴中，而較小的微滴聚集于較慢擴(kuò)散的不溶組分中。由于不同大小的微滴具有不同的含氟化合物量值，有可能想象這樣一個(gè)情景從血液中移除的個(gè)別速度常數(shù)多少有些不同，尤其是當(dāng)較大微滴被RES選擇性地移除時(shí)。在移除過程中含氟化合物親油性的重要性的更多直接證據(jù)來自O(shè)braztsov等的工作，他提出了全氟化合物的兩步移除機(jī)制。根據(jù)這個(gè)模型，第一步是全氟化合物通過RES細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)到達(dá)血流的分子擴(kuò)散。這個(gè)過程發(fā)生在幾分鐘到幾小時(shí)的時(shí)間間隔內(nèi)。第二步(定速步驟)包括含氟化合物通過脂質(zhì)栽體從RES器官到肺的傳質(zhì)過程，這個(gè)過程關(guān)鍵地取決于PFC的親油性。在一個(gè)巧妙的試驗(yàn)中，Obraztsov發(fā)現(xiàn)了全氟碳化合物的器官滯留時(shí)間可以通過在PFC乳劑靜脈注射給藥后靜脈注射一種脂質(zhì)乳劑而顯著降低。因此該脂質(zhì)乳劑能夠在血液中提供脂質(zhì)槽來從器官中移除PFC并且運(yùn)送至肺。Obratzsov，V.V等，J.FluorineChem.54，376(1991)。氟碳乳劑的穩(wěn)定性設(shè)計(jì)用于氧運(yùn)輸?shù)膩單⒘：閯┦菬崃W(xué)不穩(wěn)定的。不可逆微滴粗化的最初機(jī)理是奧斯特瓦爾德(Ostwald)熟化。J.G.Reiss,膠體表面(ColloidsSurfaces),84，33(1994)。奧斯特瓦爾德熟化是由于開爾文(Kelvin)效應(yīng)而發(fā)生，其中不同大小的微滴之間表面張力的微小差異就導(dǎo)致隨著時(shí)間較大微滴的增長(zhǎng)以及較小微滴的變小。微滴間傳質(zhì)發(fā)生在通過連續(xù)相時(shí)分散相的分子擴(kuò)散。奧斯特瓦爾德熟化不但出現(xiàn)在乳劑被制造之后的儲(chǔ)存過程中，還出現(xiàn)在制造過程中。為了消除通過奧斯特瓦爾德熟化造成的乳劑粗化，Haguchi和Misra提出了添加高分子量的第二種分散相組分，該組分在連續(xù)相中更加不溶。Higuchi等，J.Pharm.Sci,51，459(1962)。在這種情況下，出現(xiàn)了不同微滴之間兩種分散相組分的明顯分配，具有較低水溶性的組分濃集于較小的微滴中。在兩種組分相系統(tǒng)的奧斯特瓦爾德熟化過程中，當(dāng)不同大小微滴之間由于毛細(xì)管效應(yīng)造成的化學(xué)勢(shì)的不同被兩種組分的分配造成的化學(xué)勢(shì)的不同平衡時(shí)，就建立了平衡狀態(tài)(類似于汽/液平衡的拉烏爾定律)。含氟乳劑最初的微滴大小和分布、微滴穩(wěn)定性以及最終觀察到的很多副反應(yīng)，主要取決于奧斯特瓦爾德熟化的減少。因此氟碳乳劑的物理穩(wěn)定性主要取決于分散的氟碳相的性質(zhì)。通過分子擴(kuò)散的微滴增長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)最通常地以Lifshitz-Slezov-Wagner("LSW")理論的術(shù)語說明。LSW理論涉及對(duì)于單一組分分散相，平均半徑的立方隨著時(shí)間以速率6線性增長(zhǎng)。cb=d/dt(a)3=8yVCaD/9RT其中a是半徑，Y是界面張力，V是分子體積，Ca是水溶解度，D是擴(kuò)散系數(shù)，R是摩爾氣體常數(shù)，以及T是絕對(duì)溫度。對(duì)氟碳乳劑穩(wěn)定性尤為重要的是水溶解度項(xiàng)，它是主要取決于氟碳化合物分子量的一個(gè)參數(shù)。一般而言，具有較高分子量的氟碳化合物顯示出降低的水溶解度，以及因此更高的乳劑穩(wěn)定性。但是，目的為可注射用氧栽體的氟碳乳劑(即血液代用品)還必須是生物相容的。尤為重要的是氟碳化合物在RES器官內(nèi)的半衰期。雖然較高分子量的氟碳化合物顯示出較高的乳劑穩(wěn)定性，但是它們同樣在RES中保留極其長(zhǎng)的時(shí)間。奧斯特瓦爾德熟化可以通過加入較大分子量和較小水溶性的次級(jí)含氟化合物或在氟碳化合物/水界面顯著降低界面張力的一種氟化的表面活性劑而降低。遺憾的是，向一個(gè)配方中添加具有更小水溶性的次級(jí)氟碳化合物會(huì)導(dǎo)致器官保留的增加，這是一種非常嚴(yán)重的副作用，因?yàn)楹衔镌谘h(huán)脂質(zhì)栽體中的溶解性同樣被降低。氟化的表面活性劑已經(jīng)被證實(shí)具有嚴(yán)重的毒性問題，這使它們作為乳劑穩(wěn)定劑有很大風(fēng)險(xiǎn)。為了克服乳劑穩(wěn)定性/器官保留的兩難局面，次級(jí)氟碳化合物必須選擇那些能夠提供所需的乳劑穩(wěn)定性/器官滯留特性，是生物相容的且具有較短的器官滯留時(shí)間，并且加入盡可能少的量就能獲得所需的穩(wěn)定性功效。為了實(shí)現(xiàn)這些，所選的含氟化合物應(yīng)是親脂的(例如全氟溴癸烷(perfluorodecylbromide))。非親脂化合物(例如全氟三丙胺和氟代正曱基環(huán)己基哌啶)排泄過于緩慢，并且不能有效地穩(wěn)定含氟乳劑。一些代表性的主要和次要氟碳化合物包括在下面的清單中。1.主要氟碳化合物主要氟碳化合物針對(duì)其較短的器官滯留時(shí)間和生物相容性來選擇。總的來說，在器官中的半衰期優(yōu)選小于約4周，更加優(yōu)選小于約2或3周，并且最優(yōu)選7天或更少。分子量約為460至550道爾頓。這種可能的主要氟碳化合物包括二(F-烷基)乙烯，如C4F9CH=CHC4F9("F-44E")、i-CF3CF9CH=CHC6F13("F-B6E")和環(huán)狀氟碳化合物，如doF^(F-萘烷，全氟萘烷或FDC);F-金剛胺(FA);全氟茚滿；F-甲基金剛胺(FMA);F-1，3-二曱基金剛胺(FDMA);全氟代-2，2，4，4-四曱基戊烷；F-二或F-三曱基二環(huán)[3,3，1壬烷(壬烷)；C7.12全氟化的胺類，如F-三丙胺、F-4-曱基八氬會(huì)噪(FMOQ)、F-n-甲基-十氫異喹啉(FMIQ)、F-n-曱基十氫喹啉(FHQ)、F-n-環(huán)己基吡咯烷(FCHP)以及F-2-丁基四氬吹喃(FC-75或RM101)。其他主要氟碳化合物的實(shí)例包括溴化全氟碳化合物，如全氟溴辛烷(CsFnBr，USAN全氟溴烷)、1-溴十五氟庚烷(C7F^Br)、1-溴十三氟己烷(C6F,3Br，也被稱為全氟溴己烷或PFHB)。其他溴化氟碳化合物如在Long的美國(guó)專利號(hào)為3,975,512和4,987,154以及美國(guó)專利號(hào)為5,628,930和5，635，538中公開，其全部?jī)?nèi)容通過引用并入本文。同時(shí)考慮的是具有其他非氟取代基的氟碳化合物，如1-氯十七氟辛烷(CsFnCl，也被稱為全氟氯辛烷或PFOC1);全氟辛基氫化物，以及具有不同碳原子數(shù)的類似化合物。根據(jù)本發(fā)明考慮的其他首要氟碳化合物包括全氟烷基化的醚類、鹵代醚類(尤其是溴化醚類)或聚醚類，如(CF3)2CFO(CF2CF2)2OCF(CF3)2;(C4F9)20。此外，可以使用氟碳-碳?xì)浠衔铮?，具有以下通式的化合物CnF2n+1-Cn，H2n，+1;、CnF2n+1OCn,H2n，+1或CnF2n+1CH=CHCn，H2n，+1，其中n與n，相同或不同，并且為大約1至大約IO(只要化合物在室溫下為液體)。例如這種化合物包含CsFnC2Hs和C6F13CH-CHC6H13。其他可能用作主要氟碳化合物的氟碳化合物包括全氟胺類，具有下列通式的末端取代的直鏈脂肪族全氟碳化合物CnF2n+1R，其中n為6-8的整數(shù)，R包括選自Br、Cl、I、CH3的親脂部分，或者2或3個(gè)碳原子的飽和或不飽和烴，具有下列通式的二(F-烷基)乙烯類CnF2n+1-CH=CH-Cn，F(xiàn)2n+1，其中n與n，的和等于6-10，以及具有下列通式的全氟醚類CnF2n+1-0-Cn，F(xiàn)2n，+1，其中n與n，的和等于6-9。此外，選自下列一般組的氟碳化合物可以適合用作主要氟碳化合物全氟環(huán)烷類或全氟烷基-環(huán)烷類，全氟烷基飽和的雜環(huán)化合物，或全氟叔胺類。一般請(qǐng)見Schweighart，美國(guó)專利號(hào)4，866，096，其全部?jī)?nèi)容通過引用并入本文。值得注意的是酯類、硫醚類以及其他不同改性的混合氟碳-碳?xì)浠衔?，包括異?gòu)體，也被包括在適合用于本發(fā)明的主要氟碳化合物的廣泛定義中。其他合適的氟碳化合物混和物也^L考慮在內(nèi)。在此沒有列出的但是具有本公開所說明的特性因此具有治療應(yīng)用的其他氟碳化合物也被考慮在內(nèi)。這種氟碳化合物可以商購到或者可以特別制備。本領(lǐng)域的技術(shù)人員知道，有很多本領(lǐng)域熟知的制備氟碳化合物的方法。例如，見Schweighart,美國(guó)專利號(hào)4，895，876，其全部?jī)?nèi)容通過引用并入本文。2.次要氟碳化合物次要氟碳化合物可以是一種脂肪族氟碳化合物，它被一個(gè)或多個(gè)親脂部分取代并且比主要氟碳化合物具有更大的分子量。該親脂可能在氟碳化合物分子末端被取代。優(yōu)選地，該次要氟碳化合物的分子量大于約540道爾頓。該次要氟碳化合物分子量的上限通常與器官滯留時(shí)間以及被主要氟碳化合物溶解的能力相關(guān)。最優(yōu)選的次要氟碳化合物具有高于約1S0。C的沸點(diǎn)和小于約lxlO力mol/L的水溶解度。當(dāng)然，本領(lǐng)域的技術(shù)人員知道，被不同親油基團(tuán)取代的許多氟碳化合物可以適合用作本發(fā)明的次要氟碳化合物。這種氟碳化合物包括酯類、疏醚類以及不同的氟碳-碳?xì)浠衔铮ó悩?gòu)體。滿足前述標(biāo)準(zhǔn)的兩種或多種氟碳化合物的混合物也被考慮在適合用作本發(fā)明的次要氟碳化合物的氟碳化合物材料的廣泛定義中。沒有在此列出但是具有本公開所說明的性質(zhì)因此可以用于治療應(yīng)用的氟碳化合物也被考慮在內(nèi)。親脂部分可任選地選自Br、Cl、I、CH3，或者2或3個(gè)碳原子的18飽和或不飽和烴。因此，優(yōu)選的次要氟碳化合物可以選自用下列通式表示的末端取代的氟碳卣化合物CnF2n+1X或CnF^X2，其中n為8或更高，優(yōu)選10-12，X為選自Br、Cl或I的囟化物；用下列通式表示的l-烷基-全氟碳或二烷基全氟碳化合物CnF2n+1-(CH2)n，CH3，其中n為8或更高，優(yōu)選10-12，n，為0畫2;用下列通式表示的l-烯基-全氟碳化合物CnF2n+1-Cn，H(2nM"其中n為10或更大，優(yōu)選10-12，n，為2或3;或者具有下列通式的溴化的直鏈或支鏈全氟醚類或聚醚類Br-(CnF2n+1-0-Cn，F(xiàn)2n,+1)，其中n和n，各自至少是2，并且n與n，之和大于或等于8。最優(yōu)選地，本發(fā)明的次要氟碳化合物選自下組，其構(gòu)成為直鏈或支鏈的溴化的全氟化的烷基醚類、全氟溴癸烷(d。FnBr)、全氟溴十二烷(CuF2sBr)、l-全氟癸基乙烯(d。F^CI^CH2)和1-全氟癸基乙烷(C1()F21CH2CH3),特別優(yōu)選全氟溴癸烷。對(duì)具體的次要氟碳化合物必須提出的問題是，次要氟碳化合物提供的增加的穩(wěn)定性是否勝過其延長(zhǎng)器官滯留時(shí)間以及半衰期、毒性、生物相容性和其他并發(fā)癥等潛在問題。全氟溴辛烷("PFOB")的化學(xué)式為C8F17Br。其結(jié)構(gòu)為CF3(CF2)6CF2Br，化學(xué)文摘服務(wù)社(CAS)號(hào)為423-55-2。PFOB其他的物理參數(shù)包括沸點(diǎn)760mmHg時(shí)143°C蒸汽壓37。C時(shí)10.5mmHg熔點(diǎn)4°CPFDB的化學(xué)式為C1()F21Br。其結(jié)構(gòu)為CF3(CF2)8CF2Br。CAS號(hào)為307-43-7。其他的物理參數(shù)包括沸點(diǎn)760mmHg時(shí)180。C蒸汽壓37°C時(shí)1.5mmHg熔點(diǎn)55°C已經(jīng)發(fā)現(xiàn)向全氟溴辛烷("PFOB")或全氟萘烷("FDC")的乳劑中添加全氟溴癸烷("PFDB，，)會(huì)帶來非常好的室溫穩(wěn)定性。由于其親脂特性，PFDB在RES中的半衰期只有23天，被認(rèn)為是靜脈內(nèi)注射應(yīng)用可接受的值。還發(fā)現(xiàn)添加PFDB帶來狹窄的粒度分布和更少的大顆粒。向PFOB乳劑中添加PFDB，出現(xiàn)不同大小的^b滴之間的兩種組分顯著分隔，這是分子擴(kuò)散的結(jié)果，因此不溶組分變?yōu)闈饪s在較小微滴中，而高溶解度組分濃縮在較大微滴中。根據(jù)拉烏爾定律，不同大小的微滴之間的兩種組分的分隔導(dǎo)致了較小微滴的溶解性降低。這補(bǔ)償了由于毛細(xì)血管壓不同而引起的化學(xué)勢(shì)不同(即開爾文效應(yīng))。當(dāng)濃度平衡了毛細(xì)管效應(yīng)時(shí)，微滴的增長(zhǎng)終止。對(duì)于一個(gè)兩種組分的分散相的乳劑增長(zhǎng)率cbab由下列方程式給出6ab=l/[(Oa/6a)+(0>美)1其中，Oa和①b為氟碳化合物a和b各自的體積分?jǐn)?shù)。6a和6b為上述方程式中氟碳化合物a和b各自的乳劑增長(zhǎng)率。當(dāng)PFDB已被證實(shí)是一個(gè)理想的次要氟碳化合物候選物時(shí)，PFDB應(yīng)以一定的量與適當(dāng)濃度的合適的主要氟碳化合物(如PFOB)進(jìn)行配制，以便不會(huì)引起器官保留和半衰期等并發(fā)癥，但是仍然提供適當(dāng)?shù)娜閯┓€(wěn)定性。此外，因?yàn)橄Ｍ颊咴诒M可能短的時(shí)間間隔內(nèi)重復(fù)使用任何氟碳乳劑，因此需要使用最小量的PFDB來允許重復(fù)給藥。它應(yīng)與適量的主要氟碳化合物組合。PFDB以過高的濃度存在于乳劑中的另一個(gè)復(fù)雜因素是由于PFDB的高熔點(diǎn)(55。C)導(dǎo)致在乳劑中形成結(jié)晶形態(tài)的高危險(xiǎn)性。PFDB在乳劑中的結(jié)晶可能引起嚴(yán)重的安全性和毒性問題。還有一個(gè)嚴(yán)重的生產(chǎn)憂慮是高濃度的PFDB在生產(chǎn)過程中遇到冷區(qū)時(shí)很容易結(jié)晶。這是配制乳劑中考慮的一個(gè)重要因素，尤其是在大規(guī)模生產(chǎn)中，因?yàn)镻FDB是乳劑穩(wěn)定劑，如果它在生產(chǎn)過程中結(jié)晶，這不但出現(xiàn)生物相容性/毒性問題，還有其結(jié)晶作用會(huì)使得有更少的PFDB可用來穩(wěn)定乳劑，并且使最終乳劑滿足產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的可能性變得更小。PFDB以太高濃度存在時(shí)的另外一個(gè)復(fù)雜因素是使微粒過小的危險(xiǎn)，它會(huì)導(dǎo)致氟碳顆粒從毛細(xì)血管床中滲漏到組織的細(xì)胞間隙中，引起嚴(yán)重的滯留問題。因此，生產(chǎn)一種可用于人體體內(nèi)的氟碳乳劑需要平衡很多關(guān)鍵因素。設(shè)計(jì)用于人體內(nèi)氧傳送的氟碳乳劑應(yīng)至少具備以下屬性1.可接受的器官半衰期一氟碳乳劑組分的器官半衰期應(yīng)盡可能短，優(yōu)選少于4周；2.可接受的儲(chǔ)存穩(wěn)定性一氟碳乳劑在5°C條件下應(yīng)具有至少6個(gè)月的儲(chǔ)存期，優(yōu)選18個(gè)月的儲(chǔ)存期。在儲(chǔ)存過程中，氟碳乳劑的物理特性和生物相容性不應(yīng)該改變。由于增加的便利性、更多的潛在應(yīng)用和降低的成本，優(yōu)選室溫儲(chǔ)存；3.可接受的體內(nèi)穩(wěn)定性一在靜脈給藥時(shí)，該乳劑不應(yīng)出現(xiàn)相改變、沉淀、凝聚、聚結(jié)或其他具有不利的物理化學(xué)或生物化學(xué)性質(zhì)的聚集現(xiàn)象；4.優(yōu)異的生物相容性一氟碳乳劑應(yīng)引起最小的副反應(yīng)并且無毒性作用；5.可接受的或最佳的粒度和分布一由于乳劑粒度和分布，乳劑的粒度在毒性、儲(chǔ)存期限、副反應(yīng)和生物分布中都起著非常重要的作用，所以應(yīng)在可接受的范圍內(nèi)；6，最終滅菌一該乳劑的物理性質(zhì)應(yīng)能夠進(jìn)行最終的滅菌；7.可接受的血液半衰期一該乳劑應(yīng)具有符合預(yù)期目的的可接受的血液半衰期；8.可接受的粘度一全血/氟碳乳劑混合物的粘度非常重要，因?yàn)榻M織的氧合和灌注與粘度負(fù)相關(guān)；9.低的游離氟化物值—該氟碳化合物應(yīng)表現(xiàn)出優(yōu)異的化學(xué)穩(wěn)定性；10.表面活性劑安全性一該表面活性劑應(yīng)該是生物相容的并且無毒的；11.可接受的氟碳含量一氟碳化合物的生物相容性和毒性關(guān)鍵性地取決于總氟碳含量，并且必須在患者可接受的容量下有效，并且應(yīng)該被配制用于重復(fù)給藥；12.制造一該氟碳乳劑應(yīng)具有容易生產(chǎn)并且在在規(guī)模放大的基礎(chǔ)上生產(chǎn)一致性產(chǎn)品的物理性質(zhì)。用于該配方的氟碳化合物應(yīng)該容易生產(chǎn)并具有優(yōu)異的純度；以及13.重復(fù)的劑量一氟碳乳劑應(yīng)能夠在盡可能短的時(shí)間間隔內(nèi)重復(fù)使用以用于患者的重復(fù)給藥。發(fā)明概述本發(fā)明是在配制穩(wěn)定的并且理想地適合人體體內(nèi)使用以避免用血并且用于其他治療用途的氟碳乳劑的過程中作為大量實(shí)驗(yàn)、分析和仔細(xì)平衡多種因素的結(jié)果而配制成的一種氟碳乳劑。優(yōu)選的實(shí)施方案構(gòu)成了優(yōu)于先有技術(shù)的氟碳乳劑，其被配制為保持乳劑穩(wěn)定性而同時(shí)實(shí)現(xiàn)了最小的器官滯留時(shí)間。如上所述，分子擴(kuò)散或奧斯特瓦爾德熟化已被證明是氟碳乳劑初始顆粒大小的關(guān)鍵性決定因素。雖然用全氟溴辛烷作為分散的氟碳相可以實(shí)現(xiàn)短期內(nèi)大約0.2|nm的微滴大小，對(duì)于具有某種濃度的PFOB和PFDB混和物在很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)可以獲得堅(jiān)持很長(zhǎng)時(shí)間的小于0.15-0.20pm的微滴大小。在連續(xù)水相中幾乎不溶卻溶于PFOB的PFDB通過在多元分散系內(nèi)減少小微滴的溶解度來起到抑制分子擴(kuò)散的作用。對(duì)于在某種濃度下的PFOB，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)PFDB是一種非常有效的顆粒增長(zhǎng)阻滯劑。PFDB是直鏈的、更高分子量的PFOB類似物，結(jié)構(gòu)的不同在于PFDB具有兩個(gè)額外的碳原子和四個(gè)額外的氟原子。PFOB和PFDB的熔點(diǎn)分別是4。C和55°C，以及37°C時(shí)的蒸汽壓分別是10.5和1.5mmHg。此處的數(shù)據(jù)出人意料地證明PFDB對(duì)于穩(wěn)定具體濃度下的PFOB乳劑(與更高濃度的PFOB/PFDB乳劑相比)是很有效的，并且通過使用少量的PFDB(總?cè)閯┑?—3%w/v)添加到55-60%w/vPFOB乳劑中，與更高濃度的PFDB的混合物(例如90%/10%w/vPFOB/PFDB乳劑、60%/30%w/vPFOB/PFDB乳劑和60%/10%w/vPF0B/PFDB乳劑)得到同樣的乳劑穩(wěn)定作用，而在這些更濃縮的乳劑中沒有經(jīng)歷顯著的問題，例如更長(zhǎng)的器官滯留時(shí)間、形成PFDB結(jié)晶、更大的乳劑顆粒、患者副作用、生產(chǎn)問題和不能重復(fù)給藥等。通過向某種濃度的PFOB添加少量的PFDB來阻滯顆粒大小的生長(zhǎng)是引人注目且意想不到的，并且此處的數(shù)據(jù)證明如果數(shù)量與效果，以及生物相容性與穩(wěn)定性等方面達(dá)到最佳的平衡，在濃度大約為1°/。-3%w/vPFDB，大約55%-60%w/vPFOB，高達(dá)大約59-62%w/v的總氟碳相，用適量的蛋黃磷脂乳化，就會(huì)產(chǎn)生一種有效的氟碳乳劑，它理想地適合用于人類體內(nèi)的氧輸送。優(yōu)選58%w/vPFOB和2%w/vPFDB的配方，但是其他配方，例如1%、2%和3%w/vPFBD添加至55%，56%,57%,58%,59%，和60%w/vPFOB，所有可能的組合，例如55%-60%w/vPFOB/3%w/vPFDB,55-60%w/vPFOB/2%w/vPFDB和55—60%w/vPFOB/1%w/vPFDB都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。添加更多的PFDB，高達(dá)10%w/vPFDB及更高，只會(huì)對(duì)乳劑穩(wěn)定性提供很小的額外利益，但是產(chǎn)生非常大的問題，如生物相容性、器官滯留時(shí)間和生產(chǎn)問題。向PFOB乳劑中添加很少量的PFDB不僅會(huì)延遲乳劑中的顆粒生長(zhǎng)速率，還會(huì)在乳劑生產(chǎn)之后最初形成很小的顆粒。在乳劑形成時(shí)產(chǎn)生更小的顆粒會(huì)導(dǎo)致內(nèi)部微滴接觸數(shù)目的減少，這會(huì)通過集結(jié)減慢顆粒生長(zhǎng)并且加強(qiáng)EYP表面層，使得接觸微滴的表面的融合更加困難。更小的顆粒通過減緩氟碳顆粒的沉降現(xiàn)象來減少內(nèi)部微滴接觸，因此微滴被最大程度地分開。但是，如果顆粒做得太小，就有氟碳顆粒從毛細(xì)血管床滲漏到組織間的細(xì)胞間質(zhì)的很大的風(fēng)險(xiǎn)。因此在制造顆粒大小來減少內(nèi)部微滴接觸、但是又不能太小以致引起滲漏問題之間的必須達(dá)成一種平衡。沉降的速率按照斯托克斯定律(StokesLaw)給出(Ross和Morrison,膠體系統(tǒng)和界面(ColloidalSystemsandInterfaces),Wiley-Interscience，紐約，第69-125頁(1988):V=2r2(p^^k9ti其中r-微滴半徑p。-油的密度pw=水的密度"=粘度全氟溴烷的密度是1.9g/L，所以密度項(xiàng)(p。-Pw)促進(jìn)將集中在容器的底部的顆粒快速沉降。沉降速率，V，通過減小微滴半徑而減小，這發(fā)生在PFDB添加到全氟溴烷時(shí)。通過增加PFOB與PFDB的比例并且由于PFDB溶于PFOB的事實(shí)，更多的PFDB被此處說明的配方中的PFOB帶走，因此患者的組織內(nèi)保留的PFDB更少。另外，添加少量的PFDB(l-3%w/v)來穩(wěn)定PFOB乳劑會(huì)導(dǎo)致顯著的財(cái)力節(jié)約，這是因?yàn)楦叱杀镜腜FDB，更高的全氟碳化合物的產(chǎn)率，比更濃縮的PFDB需要更少的EYP以及延長(zhǎng)的貯存期限。由于較少量的EYP導(dǎo)致乳劑中更少的水解產(chǎn)物如過量的游離脂肪酸和溶血卵磷脂化合物，因此EYP量值的減少也會(huì)帶來更高的相容性。本申請(qǐng)所說明的氟碳乳劑可以用于預(yù)防手術(shù)中暴露于異源輸血及患者需要血液的其他情況。盡管不限于以下內(nèi)容，本發(fā)明的氟碳乳劑的一些其他療法包括，用于術(shù)后器官功能(腸、肝、心臟、腦、腎)，鐮狀細(xì)胞性貧血的治療，器官保護(hù)，器官移植，化療治療的促進(jìn)，放療治療的促進(jìn)，一氧化碳中毒的治療，"減壓病，，的治療，外傷性腦損傷和中風(fēng)的治療。盡管配制用于人類，本發(fā)明的氟碳乳劑可以用于任何哺乳動(dòng)物、鳥、爬行動(dòng)物或魚。本發(fā)明涉及但不限于1)一種用于人類患者體內(nèi)氧輸送的儲(chǔ)存穩(wěn)定的氟碳乳劑，包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相包含氟碳化合物全氟溴辛烷和全氟溴癸烷，其中該全氟溴辛烷在該氟碳乳劑中存在的量為總?cè)閯┑拇蠹s57-60%w/v并且該全氟溴癸烷在該乳劑中存在的量為總?cè)閯┑拇蠹s2-3%w/v，并且，該乳劑進(jìn)一步包含一種乳化劑，其存在的量大約為3.5%-4%w/v。2)第l段所述的乳劑，進(jìn)一步包含d，a-生育酚。3)第l段所述的乳劑，其中該d，a-生育酚存在的量為大約1%w/v。4)第1、2和3段所述的氟碳乳劑，進(jìn)一步包含NaCl、NaH2P04和EDTA。5)第l和3段所述的氟碳乳劑，其中所述PFOB的存在量為57-59%w/v以及PFDB存在的量為2%w/v。6)第1、2和3段所述的氟碳乳劑，其中所述PFOB存在的量為58%w/v以及PFDB存在的量為2%w/v。7)第l段所述的氟碳乳劑，其中該乳化劑是蛋黃礴脂，存在的量為大約3.6%w/v并且進(jìn)一步包含NaCl、NaH2PO,H20、NaHP047H20。8)第l-4段所述的氟碳乳劑，其中該氟碳乳劑進(jìn)一步包含d，a-生育酚和EDTA。9)第1、2、3、6和7段所述的氟碳乳劑，其中d，a-生育酚存在的量為0.0025w/v或更少并且EDTA存在的量為0.02w/v。10)向人體和其他哺乳動(dòng)物的組織輸送氧的氟碳乳劑，包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相由全氟溴辛烷和全氟溴癸烷組成，其中該全氟溴辛烷在該氟碳乳劑中存在的量大約為總?cè)閯┑?7-60%w/v并且該全氟溴癸烷在該乳劑中存在的量大約為總?cè)閯┑?一3%w/v。11)第10段所述的氟碳乳劑，進(jìn)一步包含由蛋黃磷脂組成的乳化劑，其存在的量為大約3.5%-4%w/v。12)第IO段所述的氟碳乳劑，其中該乳劑通過選自下組的一種表面活性劑進(jìn)行穩(wěn)定氟化的表面活性劑和基于卵磷脂的表面活性劑。13)第10、11和12段所述的氟碳乳劑，其中該不連續(xù)相包含大約58—59%w/vPFOB和大約2-3%w/vPFDB。14)第10、11和12段所述的氟碳乳劑，其中該不連續(xù)相包含大約58%w/vPFOB和2%w/vPFDB。2515)第10和14段所述的氟碳乳劑，其中在該乳劑的形成過程中，形成了中間粒徑為0.18jwn或更小的氟碳顆粒。16)用于向人體和其他哺乳動(dòng)物的組織輸送氧的氟碳乳劑，包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相由全氟溴辛烷和全氟溴癸烷組成，其中該全氟溴辛烷在該氟碳乳劑中存在的量大約為總?cè)閯┑?8%w/v并且該全氟溴癸烷在該乳劑中存在的量大約為總?cè)閯┑?%w/v。17)第16段所述的氟碳乳劑，進(jìn)一步包含卵磷脂，其量大約為3-4%w/v。18)第17段所述的氟碳乳劑，其中該卵磷脂是蛋黃磷脂并且存在的量為3.6%w/v。19)第16和18段所述的氟碳乳劑，進(jìn)一步包含抗氧化劑。20)第19段所述的氟碳乳劑，其中該抗氧化劑是d，a-生育酚。21)在人類體內(nèi)使用的氟碳化合物，包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相包括氟碳化合物全氟溴辛烷和全氟溴癸烷，其中該全氟溴辛烷在該氟碳乳劑中存在的量大約為總?cè)閯┑?8%w/v并且該全氟溴癸烷在該乳劑中存在的量大約為總?cè)閯┑?%w/v,并且，該乳劑進(jìn)一步包含一種乳化劑，其存在的量大約為3.6%w/v。22)第21段所述的乳劑，其中該乳化劑是蛋黃磷脂。23)第21和22段所述的乳劑，進(jìn)一步包含d，a-生育酚，量為大約1%w/v。24)第21和23段所述的氟碳乳劑，其中該乳化劑存在的量大約為3.6%w/v并且進(jìn)一步包含NaCl、NaH2P04.H20、NaHP04.7H20。25)第21、22和24段所述的氟碳乳劑，其中該氟碳乳劑進(jìn)一步包含d，a-生育酚和EDTA。26)第23段所述的氟碳乳劑，其中d,a-生育酚存在的量為0.0025w/v或更少以及EDTA存在的量為0.02w/v。27)全氟溴辛烷和全氟溴癸烷在生產(chǎn)向患者輸送氧的醫(yī)藥中的用途，其中該全氟溴辛烷和全氟溴癸烷在水性連續(xù)相內(nèi)形成不連續(xù)相以形成乳劑，其中該全氟溴辛烷存在的量為乳劑總量的57-60。/。w/v以及該全氟溴癸烷的量為乳劑總量的l-3%w/v，進(jìn)一步包含乳化劑。28)第27段的用途，進(jìn)一步包含蛋黃磷脂作為該乳化劑。29)第27和28段的用途，進(jìn)一步包含NaCl、NaH2P04'H20、NaHP047H20。30)第27-29段的用途，其中該全氟溴辛烷存在的量為乳劑總量的58-59%w/v并且該全氟溴癸烷存在的量為乳劑總量的1-3%w/v。31)第27和28段所述的用途，其中該全氟溴辛烷存在的量為總?cè)閯┑?8%w/v以及該全氟溴癸烷存在的量為乳劑總量的2%w/v。32)全氟溴辛烷和全氟溴癸烷在生產(chǎn)向患者體內(nèi)輸送氧的醫(yī)藥中的用途，其中該全氟溴辛烷和全氟溴癸烷在水性連續(xù)相內(nèi)形成不連續(xù)相以形成乳劑，其中該全氟溴辛烷存在的量為乳劑總量的58。/。w/v以及該全氟溴癸烷的量為乳劑總量的2%w/v，進(jìn)一步包含由蛋黃磷脂組成的一種乳化劑，量為總?cè)閯┑?.6%w/v。33)權(quán)利要求32所述的用途，進(jìn)一步包含NaCl、NaH2P04'H20和NaHP047H20。34)—種生產(chǎn)用于體內(nèi)氧輸送的包含全氟溴辛烷和全氟溴癸烷且具有長(zhǎng)時(shí)間的大小穩(wěn)定性特性的氟碳乳劑的方法，包括以下步驟a)在第一罐內(nèi)向熱水內(nèi)制備鈉鹽的水溶液并且噴入氮?dú)?；b)向第二罐內(nèi)加入全氟溴辛烷和全氟溴癸烷并且噴入氮?dú)?；c)向第三罐內(nèi)加入乳化劑并且將第一罐內(nèi)的內(nèi)容物加入到第三罐內(nèi)；d)向第三罐內(nèi)加入全氟溴辛烷和全氟溴癸烷并且混合這些內(nèi)容物以使全氟溴辛烷和全氟溴癸烷乳化；e)將第三罐內(nèi)的內(nèi)容物引向一個(gè)或多個(gè)均質(zhì)罐內(nèi)。35)第34段所述的生產(chǎn)方法，其中第一罐內(nèi)的水溶液是在65至80。C的溫度范圍內(nèi)制備的。36)第34和35段所述的生產(chǎn)方法，其中該水溶液在噴入氮?dú)膺^程中溫度被調(diào)節(jié)至55至65。C。37)第34-36段所述的生產(chǎn)方法，其中添加到第一罐內(nèi)的鈉鹽包括磷酸二氫鈉一水合物、氯化鈉和乙二胺四乙酸鈣二鈉。38)第34段所述的生產(chǎn)方法，其中全氟溴辛烷和全氟溴癸烷是在15-25°C下保持在該第二罐內(nèi)。39)第37和38段所述的生產(chǎn)方法，其中該全氟溴辛烷和全氟溴癸烷(氟碳化合物溶液)在噴入氮?dú)獾倪^程中是保持在真空狀態(tài)下。40)第34段所述的生產(chǎn)方法，其中該乳化劑是蛋黃磷脂。41)第34段所述的方法，其中d-a-生育酚與該乳化劑一起加入到該第三罐內(nèi)。42)第34段所述的方法，其中d-a-生育酚與蛋黃磷脂一起加入到該第三罐內(nèi)。43)第34-40段所述的方法，其中該第一罐內(nèi)的內(nèi)容物是通過管線內(nèi)過濾器殼體加入該第三罐內(nèi)并且通過分散混合器進(jìn)行再循環(huán)。44)第43段所述的方法，其中該管線內(nèi)過濾器殼體具有大約0.45pm的篩網(wǎng)。45)第43-44段所迷的方法，其中該第一罐內(nèi)的內(nèi)容物被加入該第三罐之后，將這些內(nèi)容物用攪拌器混合。46)第34段和43-44段所述的方法，其中該氟碳溶液被加入到該分散混合器的頭部同時(shí)將該第一罐內(nèi)的內(nèi)容物再循環(huán)。47)第46段所述的方法，其中該氟碳溶液直到流速達(dá)到至少150Lmin時(shí)才被加入到該分散混合器內(nèi)。48)第40-42段所述方法，其中該第一罐的內(nèi)容物在高速、高剪切混合器下加入到該第三罐內(nèi)以此將該氟碳溶液乳化。49)第48段所述的方法，其中該氟碳溶液被乳化之后，該混合物通過該分散混合器進(jìn)行再循環(huán)。50)第49段所述的方法，其中該混合物以大約1600-1750L的質(zhì)量流量以240-300L/min進(jìn)行再循環(huán)。51)第34段所述的方法，其中第三罐內(nèi)的內(nèi)容物通過管線內(nèi)過濾器被引導(dǎo)向所述均質(zhì)器罐。52)—種用于在人類和其他哺乳動(dòng)物體內(nèi)氧合作用的氟碳乳劑，包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相是由58。/。w/v全氟溴辛烷和2%w/v全氟溴癸烷組成，進(jìn)一步包含由蛋黃磷脂組成的乳化劑。53)—種用于在人類體內(nèi)氧合作用以及避免暴露于異源或同源血液的氟碳乳劑，包含連續(xù)相和不連續(xù)氟碳相，該氟碳相包括大約95-96%w/w的全氟淡辛烷和大約3-4%w/w的全氟溴癸烷，進(jìn)一步包含由蛋黃磷脂組成的一種乳化劑。54)用于向人類和其他哺乳動(dòng)物的組織輸送氧以及避免暴露于異源或同源血液的氟碳乳劑，包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相是由全氟溴辛烷和全氟溴癸烷組成，其中該全氟溴辛烷在該氟碳乳劑中存在的量大約為總?cè)閯┑?7-60%w/v并且該全氟溴癸烷在該乳劑中存在的量大約為總?cè)閯┑膌-3%w/v。55)第54段所述的氟碳乳劑，進(jìn)一步包含由蛋黃磷脂組成的一種乳化劑，其存在的量大約為3.5%-4%w/v。56)第54和55段所述的氟碳乳劑，其中該乳劑用選自以下的一表面活性劑進(jìn)行穩(wěn)定氟化的表面活性劑和基于卵磷脂的表面活性劑。57)第54段所述的氟碳乳劑，其中該不連續(xù)相包括大約58-59%w/vPFOB和大約2-3%w/vPFDB。58)第54段所述的氟碳乳劑，其中該不連續(xù)相包括大約58%w/vPFOB和2%w/vPFDB。59)第54段所述的氟碳乳劑，其中在該乳劑形成時(shí)，形成了中間粒度為0.18nm或更小的氟碳顆粒。附圖簡(jiǎn)要說明圖l是靜脈給藥的氟碳化合物排泄的四組分藥代動(dòng)力學(xué)模型；圖2是顯示根據(jù)本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方案生產(chǎn)乳劑的方法步驟的流程圖3展示了W作為時(shí)間函數(shù)的Lifshitz-Slezov-Wagner圖，它是針對(duì)卯％w/vPFOB、90%w/vPFOB/1%w/vPFDB以及90%w/vPFOB/10%w/vPFDB的乳劑；圖4示出大鼠在靜脈輸注了60/30%w/vPFOB/PFDB氟碳乳劑和6%EYP(2.7gPFC/kg)之后PFOB和PFDB在血管內(nèi)的保留時(shí)間；圖5示出從PFOB/PFDB乳劑獲得的沉降場(chǎng)流動(dòng)分離法分?jǐn)?shù)圖(SdFFFfractogram)，顯示了接近空隙的磷脂小囊泡的分?jǐn)?shù)和大約0.15pm的磷脂單分子層穩(wěn)定的乳劑微滴的分?jǐn)?shù)；圖6示出一個(gè)沉降場(chǎng)流動(dòng)分離法研究，展示了作為微滴大小的函數(shù)出現(xiàn)的分隔。右邊的軸(在圖表上用圏給出)代表了在單一大小的微滴部分PFDB的摩爾分?jǐn)?shù)，由氣相色鐠法確定。發(fā)現(xiàn)PFOB和PFDB分別在大和小液滴內(nèi)被濃縮；圖7示出實(shí)例V直接在靜脈輸注了劑量為2.7gPFC/kg之后24小時(shí)后在體外大鼠血液中的乳劑粒度分布。插表顯示了隨著時(shí)間的粒度分布變化。一旦進(jìn)入血管腔隙，較大的微滴選擇性地被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除；圖8是在單一大小的乳劑微滴中PFDB的摩爾分?jǐn)?shù)圖，是體外大鼠血液對(duì)1/d，在靜脈輸注了2.7gPFC/kg的60/30%w/vPFOB/PFDB和6%EYP乳劑之后獲得的。標(biāo)繪的數(shù)據(jù)包括注射前的乳劑，以及24hr之后的樣品。更不易溶解的含氟化合物組分PFDB的摩爾分?jǐn)?shù)在給藥之后增加；以及圖9示出避免任何異源和PAD輸血的受試者的百分比，(表A)意欲治療的人群(N—92)，(表B)治療方案定義的失血^20mL/kg的目標(biāo)人群(N二330)以及(表C)臨床受益組(析因分析)，即手術(shù)失血》10mL/kg的患者(N-424)。(各組間*口<0.05)。優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)說明本發(fā)明的氟碳乳劑包括兩個(gè)相連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相。滲透劑、緩沖液和螯合劑可以包括在該連續(xù)相中來保持滲透性和pH值從而促進(jìn)其生理學(xué)可接受性。使用乳化劑通過在不連續(xù)相和連續(xù)相之間的界面處形成一個(gè)層來幫助氟碳乳滴的形成和穩(wěn)定。該乳化劑可以包30含一個(gè)單個(gè)化合物或者多個(gè)化合物例如在多種表面活性劑的情況下。如此處所使用，表述"重量/體積"或者"w/v"指的是每100立方厘米或者毫升乳劑體積的克數(shù)。表述"重量/重量，，用于并理解為指的是加至給定重量的不同組分的重量分?jǐn)?shù)。本發(fā)明針對(duì)由氟碳化合物的一種混合物組成的一種氟碳乳劑，該氟碳化合物的混合物是高度穩(wěn)定的且具有極好的生物相容性和有效性。本發(fā)明提供了一種氟碳乳劑，其中不連續(xù)相是由PFOB和PFDB的一種混合物組成。與先有技術(shù)的乳劑不同，本發(fā)明中的氟碳乳劑在貯藏時(shí)顯示出最小的顆粒增長(zhǎng)并且使用最少量的PFDB來防止顆粒增長(zhǎng)并且避免了明顯的器官滯留和半衰期延長(zhǎng)等問題。本發(fā)明的乳劑可以按照以下過程進(jìn)行生產(chǎn)。在水罐(l號(hào)罐)中通過將預(yù)先稱重的量值的美國(guó)藥典(USP)—水合磷酸二氫鈉、美國(guó)藥典氯化鈉和乙二胺四乙酸4丐二鈉在65至80°C下加入到所需量的注射用熱水(WFI)中來制備水溶液。在該水溶液中噴入氮?dú)獠囟日{(diào)節(jié)為55至65。C(+/-5。C)。在PFC罐中加入需要量的PFC組分(PFOB和PFDB)并保持在20+/-5°。然后在PFC液體中噴入氮?dú)庖匀〈芙獾难鯕?，然后置于真空下給液體脫氣。脫氣以后，該P(yáng)FC液體在真空下加熱至60oC(+/-50C)。將需要量的蛋黃磷脂和美國(guó)藥典d-a-生育酚加入到一個(gè)預(yù)混合罐(2號(hào)罐)中并用氮?dú)獯祾?。在氮?dú)鈮毫ο?，將l號(hào)罐中的水溶液通過一個(gè)管線內(nèi)的0.45卞m的過濾器殼體轉(zhuǎn)移到該預(yù)混合罐(2號(hào)罐)中，然后通過一個(gè)分散混合器進(jìn)行再循環(huán)。該預(yù)混合罐中的內(nèi)容物用一個(gè)攪拌器混合。在流速達(dá)到不低于150L/min后，在水溶液再循環(huán)時(shí)將PFC溶液加入到該分散混合器的頭部。通過將PFC加入到表面活性劑(EYP)和水性鹽分散相且同時(shí)使用一種高速和高剪切力的混合器來乳化PFC。這產(chǎn)生了最佳的PFC顆粒的表面活性劑包覆。在預(yù)混合期間持續(xù)向罐中吹掃氮?dú)狻Ｔ诩尤隤FC并且在水相中乳化之后，該混合物通過分散混合器在80+/-20L/min下進(jìn)行1670+/-70L質(zhì)量流量的再循環(huán)。預(yù)混合完成以后，將以上制備的乳劑通過一個(gè)管線內(nèi)10pm過濾器從2號(hào)罐循環(huán)至兩個(gè)均質(zhì)罐H1和H2中，通過一個(gè)熱交換器，并在60+/-5。C下返回2號(hào)罐，總質(zhì)量流量為1170+/-5-kg。然后首先在60+/-3°C下進(jìn)行均質(zhì)化，然后在控制的壓力下在11+/-3°C下達(dá)到最佳均質(zhì)化作用。在均質(zhì)的最后一步中，乳劑通過該均質(zhì)機(jī)轉(zhuǎn)移到3號(hào)罐中而不是返回2號(hào)罐。均質(zhì)化作用的這一最后步驟被說明為"分別的通過"，確保轉(zhuǎn)移到灌裝罐的所有產(chǎn)品都已經(jīng)通過均質(zhì)機(jī)。在1號(hào)罐中(11+/-5。C)在注射用水中制備美國(guó)藥典七水合磷酸氫二鈉、美國(guó)藥典一水合磷酸二氫鈉和美國(guó)藥典氯化鈉的通氮?dú)獾木彌_溶液，并通過0.45pm的過濾器轉(zhuǎn)移至含有均質(zhì)乳劑的3號(hào)罐中。該乳劑在通過灌裝回路之前以10+/-1L/min的流速攪拌至少5分鐘。灌裝溫度控制在11+/-3。C。該乳劑或者直接在灌裝之前通過一個(gè)10ftm過濾器殼體或者循環(huán)返回3號(hào)罐。該乳劑在層流罩(100級(jí))中灌裝到100-mL瓶中(美國(guó)藥典I類玻璃)并用28-mm預(yù)先洗凈的預(yù)硅化處理的灰色丁基橡膠塞塞住。在用塞子塞住之前，在每個(gè)瓶子的頂部空間用氮?dú)獯祾摺Ｔ谌玫钠孔由霞由?8-mm的鋁漆三件套外封蓋并手工壓蓋。然后該產(chǎn)品在蒸汽超壓高壓釜中通過注入潔凈空氣/潔凈蒸汽的混合物來進(jìn)行最終蒸汽滅菌、進(jìn)行檢查、并且滅菌后在2至8。C下i^藏。對(duì)從灌裝工藝開始和結(jié)束時(shí)抽取的樣品進(jìn)行分析是否符合終產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)例I含有4%w/v蛋黃砩脂的90%w/v的PFOB乳劑(90/4%w/v)的制備根據(jù)Long氏方法(美國(guó)專利號(hào)4,987,154，其全文通過引用并入本文)通過高壓均質(zhì)法制備含有90gPFOB，4g蛋黃磷脂(EYP)和生理學(xué)水平的鹽及緩沖液的一種對(duì)照乳劑以獲得一個(gè)90%w/v的PFOB乳劑。然后在90%w/v的PFOB乳劑中加入次要氟碳化合物全氟溴癸烷(PFDB)，其量值為含有1%、2%、5%和10%(w/w)的全氟溴癸烷來32產(chǎn)生一種PFOB乳劑和四種PFOB/PFDB乳劑。將采用實(shí)例I的步驟制備的四種PFOB/PFDB乳劑在40。C下用粒度分析儀進(jìn)行三個(gè)月的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)。表I是用粒度分析儀測(cè)定的一種PFOB和四種PFOB/PFDB氟碳乳劑隨時(shí)間變化的粒度的穩(wěn)定性。這些乳劑中包括一個(gè)對(duì)照，其中100%的氟碳相都是全氟溴辛烷，以及本發(fā)明的乳劑，其中氟碳相是90%至99%w/w的全氟渙辛烷，1%至10%w/w的全氟溴癸烷作為一種穩(wěn)定劑。在表I中，"EYP"指的是蛋黃磷脂，"全氟溴烷"指的是全氟溴辛烷，"PFDB"指的是全氟溴癸烷，以及"S，，指的是顆粒生長(zhǎng)速率，單位是nm3/1110。圖3展示了對(duì)于其中三種乳劑的W為時(shí)間函數(shù)的典型的Lifshitz-Slezov-Wagner圖，90%w/vPFOB乳刑、90%w/vPFOB/1%w/vPFDB乳劑以及90%w/vPFOB/10%w/vPFDB乳劑。因?yàn)楦鶕?jù)Lifshits-Slezov-Wagner理論預(yù)測(cè)d3對(duì)時(shí)間的曲線將產(chǎn)生一條直線，所以為縱坐標(biāo)選擇了立方項(xiàng)。事實(shí)上，對(duì)于氟碳乳劑普遍地觀察到這種線性相關(guān)性。表I含有添加的全氟溴癸烷和4%EYP的％%w/vPFOB乳劑中全氟溴癸烷的穩(wěn)定效應(yīng)，T=40。C<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>(括號(hào)中的是粒度分布的標(biāo)準(zhǔn)偏差)上述結(jié)果表明較高濃度的PFDB比較低濃度的PFDB對(duì)90%w/v的PFOB乳劑的穩(wěn)定作用更有效。證明90%w/vPFOB/10%w/wPFDB的氟碳乳劑在三個(gè)月期間中對(duì)于最小的粒度是最穩(wěn)定的。實(shí)例II一種60%w/v的PFOB乳劑的穩(wěn)定性(全氟溴辛烷/全氟溴癸烷)根據(jù)Long氏過程(美國(guó)專利號(hào)4，987，154)和實(shí)例I所教導(dǎo)的內(nèi)容制備了一種乳劑，但不是90%w/v的PFOB乳劑，而是制備一種60%w/v的PFOB乳劑和用10%w/v的PFDB穩(wěn)定的一個(gè)第二60%w/v的PFOB乳劑。表II對(duì)不含有PFDB的60%w/v的全氟溴烷乳劑和含有10%w/v的PFDB的60%w/v的全氟溴烷乳劑在40。C下進(jìn)行為期三個(gè)月的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)中粒度的增加進(jìn)行了比較。用粒度分析儀進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)。表II表明了加入10%w/v的PFDB的60%w/v的PFOB乳劑在三個(gè)月期間顆粒增長(zhǎng)的縮減。表H一種60%w/v的氟碳乳劑的穩(wěn)定性_(全氟溴辛烷/全氟溴癸烷)<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>結(jié)果表明，與60%w/v的PFOB乳劑相比，加有10%w/v的PFDB的60%w/v的PFOB乳劑在三個(gè)月期間顆粒增長(zhǎng)顯著縮減。實(shí)例III在兩組分的分散相乳劑(60。/。PFOBw/v/3(T/oPFDBw/v)中的氟碳化合物在血管內(nèi)持續(xù)性的差異圖4代表了將PFOB和PFDB均除去的典型數(shù)據(jù)。圖4示出對(duì)于用6%w/v的EYP進(jìn)4亍穩(wěn)定的比例為60/30(V。w/v)的PFOB/PFDB中PFOB和PFDB在大鼠的血管內(nèi)持續(xù)性所獲得的沉降場(chǎng)流動(dòng)分離法分?jǐn)?shù)圖曲線。一般而言，PFDB去除的速度常數(shù)比PFOB的速度常數(shù)低20-30%。具有圖4所示數(shù)據(jù)的乳劑組合物含有一個(gè)用6%w/v的EYP穩(wěn)定的比例為60/30%(w/v)的PFOB/PFDB。在這種情況下，PFDB去除的速度常數(shù)比PFOB的速度常數(shù)高20%?？梢约俣ㄔ诮o藥后的最初幾個(gè)小時(shí)，從血液中的清除是由kl2控制(見圖1)。因此循環(huán)的乳劑微滴中的含氟化合物組分應(yīng)該保持完整。那么，為什么兩個(gè)分散相組分會(huì)具有不同的速度常數(shù)？為了回答這一問題，靜脈給藥乳滴的組成可以釆用沉降場(chǎng)流動(dòng)分離法(SdFFF)聯(lián)合氣相色語法來檢測(cè)，從而確定微滴的性質(zhì)。圖5表明了用6%w/v的EYP穩(wěn)定的PFOB/PFDB比例為60/30(。/。W/V)的沉降場(chǎng)流動(dòng)分離法分布分?jǐn)?shù)圖曲線。數(shù)據(jù)表示為質(zhì)量加權(quán)的檢測(cè)器響應(yīng)對(duì)比乳滴直徑。在尖銳的空體積峰旁邊出現(xiàn)的肩部是由于存在磷脂小嚢泡，這些磷脂小嚢泡中僅含有少量溶解的含氟化合物。較大尺寸(后流出)峰可歸因于含氟化合物乳劑微滴，它們被一個(gè)接觸面吸附的磷脂單層所穩(wěn)定。這類微滴的濃度已經(jīng)通過氣相色諳法在單分散分?jǐn)?shù)中被確定。實(shí)例IV一種60/30%w/v的PFOB/PFDB乳劑中組分的分散相的分離。圖6展示了分散相組分的分離，這發(fā)生在用6%的EYP穩(wěn)定的PFOB/PFDB的比例為60/30%w/v的不同單一大小液滴部分(fraction)之間。圖6中標(biāo)示出的是采用氣相色謙法測(cè)定不同單一大小液滴的沉降場(chǎng)流動(dòng)分離法分布分?jǐn)?shù)圖(標(biāo)繪在左側(cè)坐標(biāo)軸上)和PFDB的摩爾分?jǐn)?shù)(整體Xpfdb=0.291)。整體組成是在聚結(jié)介導(dǎo)過程中跨越整個(gè)粒度分布所預(yù)期的組成，因?yàn)橥ㄟ^這種機(jī)理不會(huì)發(fā)生組分分離。沒有對(duì)這些數(shù)據(jù)進(jìn)行散射校正。因此，這種分布趨于過高估計(jì)了使光線強(qiáng)烈散射的大液滴。這導(dǎo)致分布向更大的中間直徑偏移。盡管中間直徑為0.15大約在0.13處觀察到液滴中最大含氟化合物含量。在左側(cè)遠(yuǎn)端(小粒徑)的兩個(gè)組分點(diǎn)看起來超出了粒度分布范圍，但是仍然含有大約10%和20%的峰值含氟化合物濃度(即很清楚它們位于分布的末尾)。很清楚，這些小液滴在緩慢擴(kuò)散的PFDB組分中被顯著地被濃縮(達(dá)5%或者更高)，而大液滴在PFOB中濃縮到高達(dá)5%。觀察到分離程度比僅含有10%w/wPFDB的PFOB/PFDB乳劑要低。這一點(diǎn)是預(yù)期的，因?yàn)轭A(yù)測(cè)到隨著增加次要含氟化合物濃度，乳劑會(huì)對(duì)奧斯特瓦爾德熟化更穩(wěn)定。實(shí)例V含氟化合物乳劑在體外血液中粒度分布改變的沉降場(chǎng)流動(dòng)分離法研究圖7是靜脈注射劑量為2.7gPFC/kg的用6%w/vEYP穩(wěn)定PFOB/PFDB的比例為60/30%(w/v)的在大鼠體外血液中觀察到的粒度分布曲線。相比于對(duì)照，注射以后體外乳劑的液滴大小略有增加(0.19pm對(duì)比0.15pm)。這可能反映血清蛋白的某種程度的調(diào)理作用、增加液滴的絮凝作用、或者替代地血漿中某些顆粒的干擾，這些顆粒具有0.15pm至lj^n的粒度。24小時(shí)以后，4艮大部分的大液滴被優(yōu)先移除。圖7中的插表示出在最初時(shí)間眾數(shù)直徑很少見到變化。但是，在3和6小時(shí)之后，見到了小于0.2pm的液滴群的顯著增加。與此同時(shí)，見到了大于0.5ftm的液滴群的減少。所有這些結(jié)果結(jié)合在一起表明巨噬細(xì)胞選擇性地移走分布中的大顆粒。因?yàn)樾☆w粒富集更多PFDB，因此預(yù)期富含PFDB的顆粒的濃度能夠隨著時(shí)間增加。圖8相對(duì)于對(duì)照(即注射之前)示出24小時(shí)樣品的Xpfdb對(duì)1/d的曲線。這些點(diǎn)是如以前一樣獲得，通過采集液滴分布中單一大小的部分并用氣相色譜法分析其含氟化合物的含量。與對(duì)照相比體外樣品的Xpfdb增力口，表明在PFDB組分中循環(huán)液滴確實(shí)被濃縮，為多達(dá)12%。這比對(duì)照中觀察到的5%的值有顯著增加。實(shí)例VI根據(jù)本申請(qǐng)所教導(dǎo)的內(nèi)容制備PFOB/PFDB氟碳乳劑，配制成58%w/vPFOB和2%w/vPFDB的在連續(xù)水相中的氟碳不連續(xù)相。它的組分有C8F17Br(PFOB)58%w/vC10F21Br(PFDB)2%w/v蛋黃磷脂3.6%w/vd，a-生育酚1.0018%w/vNaCl0.36%w/vNaH2P04H200.069%w/vNa2HP04.7H200.474%w/vEDTA0.02%w/v37這種58%/2%w/v的PFOB/PFDB乳劑具有300至310mOsm/kg的滲透壓，pH值為7.0至7.2并且粘度大約為4厘泊(剪切力為1/秒)。按照實(shí)例VI制備的乳劑表明與其他乳劑例如60/10%w/v的PFOB/PFDB乳劑同樣穩(wěn)定或者更加穩(wěn)定，或者大約與90/10%w/v的PFOB/PFDB乳劑同樣穩(wěn)定但是不具有該乳劑的負(fù)面副作用。通過使用比60/10%w/v的PFOB/PFDB乳劑少500%的PFDB，實(shí)例VI的乳劑避免了過量PFDB的更長(zhǎng)的半衰期和器官滯留問題。與90/10%w/v的PFOB/PFDB乳劑相比，實(shí)例VI的乳劑幾乎少用了50%的PFOB和500%的PFDB,仍然證明其與90/10%w/v的乳劑具有同樣有效的氧輸送(見下面的實(shí)例)。實(shí)例VI的乳劑的副作用，例如與大氟碳顆粒有關(guān)的流感樣副作用，與90/10%w/v的PFOB/PFDB乳劑相比更不顯著。非臨床研究結(jié)果表明流感樣副作用是由于細(xì)胞因子類、前列腺素類、促凝血素和/或內(nèi)過氧化物產(chǎn)物的短效釋放，這是對(duì)在更濃縮的乳劑中由更大量氟碳化合物產(chǎn)生的較大氟碳顆粒對(duì)吞噬細(xì)胞的乳劑-顆粒-誘導(dǎo)的刺激作用的反應(yīng)。表III含有PFDB的氟碳乳劑的穩(wěn)定性(全氟溴辛烷/全氟溴癸烷)<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>*數(shù)據(jù)來自GMP批，其中根據(jù)ICH指導(dǎo)原則在1，3，6個(gè)月測(cè)定粒度(所有情況下，來自粒度分析儀HoribaCAPA-700)。58%/2%w/v的PFOB/PFDB乳劑的第六個(gè)月的粒度為0.22pm。表III的結(jié)果表明實(shí)例VI的乳劑比其他列出的乳劑具有更大的隨時(shí)間的穩(wěn)定性(顆粒增長(zhǎng)速率SxlOOO為0.80jLim,單位為nm3/mo)。60%w/v的PFOB乳劑和90%w/v的PFOB乳劑具有很高的S值，分別為16.9和44.4pm。在兩種乳劑中加入PFDB表明有助于使乳劑穩(wěn)定，對(duì)于60%w/vPFOB/10%w/vPFDB和90%w/vPFOB/10%w/vPFDB，S值分別為2.3和3.9。實(shí)例VI的58%w/vPFOB/2%w/vPFDB的S值為0.80，表明與其他乳劑相比，有了很大改善并且是沒有預(yù)料到的。實(shí)例VI的乳劑應(yīng)以無菌方式靜脈給藥。它理想地用一種有可以掰開的橡膠塞和鋁蓋的110-mL的單次使用瓶提供。該乳劑應(yīng)該在2。C-8°C下冷藏保存并且不能冷凍。使用前應(yīng)該將乳劑達(dá)到室溫并且輕輕地反復(fù)倒轉(zhuǎn)大約1分鐘(至少30次)，以確保乳劑外觀完全均勻。根據(jù)個(gè)體和用途不同劑量有所不同，但是一般為1-3ml/kg或者1-4ml/kg。實(shí)例VH按照實(shí)例VI所教導(dǎo)的內(nèi)容制備的氟碳乳劑的長(zhǎng)期和加速試驗(yàn)。為了測(cè)定按照實(shí)例VI所教導(dǎo)的內(nèi)容制備的乳劑的長(zhǎng)期貯存期限，在24個(gè)月期間確定的時(shí)間點(diǎn)用HoribaCAPA-700粒度分析儀產(chǎn)生24個(gè)月窗口的確定時(shí)間點(diǎn)的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，并用可商購的穩(wěn)定性軟件系統(tǒng)(SCIENTEKTM，Tustin，加利福尼亞)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。制備乳劑，然后在長(zhǎng)期條件下(5。C)貯存高達(dá)24個(gè)月并在加速貯存條件下(25。C)放置高達(dá)6個(gè)月。對(duì)于按照實(shí)例VI制備的乳劑進(jìn)行了加速試驗(yàn)(6個(gè)月)和長(zhǎng)期試驗(yàn)(24個(gè)月)的測(cè)定。表IV.對(duì)于實(shí)例VI的乳劑的長(zhǎng)期和加速穩(wěn)定性的乳劑微滴大小和結(jié)<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>批次來自一個(gè)HoribaCAPA-700粒度分析儀結(jié)果表明實(shí)例VI的乳劑直至24個(gè)月都具有非常好的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。用SCIENTEK穩(wěn)定性軟件系統(tǒng)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)回歸分析并產(chǎn)生一個(gè)單側(cè)95%置信預(yù)測(cè)的有效期(按照1998年FDA指導(dǎo)原則草案)，考慮到穩(wěn)定性問題例如游離脂肪酸、外觀、pH和蛋黃磷脂含量、滲透壓和溶血磷脂酰膽堿，推薦其有效期為29個(gè)月。實(shí)例VIH根據(jù)本發(fā)明所教導(dǎo)的內(nèi)容制備PFOB/PFDB氟碳乳劑，在連續(xù)水相中配制成58%w/vPFOB和2%w/vPFDB的氟碳相。它的組分有58%Wv2%w/v3.6%w/v0.36%w/v0.069%w/vC8F17Br(PFOB)C10F21Br(PFDB)蛋黃磷脂NaClNaH2P04.H20Na2HP047H200.474%w/v對(duì)實(shí)例VI的氟碳乳劑做出了變化，不包含d,a-生育酚和EDTA。這種58%/2%w/vPFOB/PFDB乳劑具有的滲透壓為300至310mOsm/kg，pH值為7.0至7.2并且粘度大約為4厘泊(剪切力為1/秒)。實(shí)例IX單次靜脈注射實(shí)例VI的乳劑后全氟溴烷和全氟溴癸烷在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和組織分布本研究被設(shè)計(jì)為用于評(píng)價(jià)年齡為7-9周、體重為190-267克的雌雄SpragueDaley大鼠在不同時(shí)間間隔內(nèi)單次靜脈注射劑量為1.8和3.6gPFC/kg的實(shí)例VI的乳劑后，PFOB和PFDB的藥代動(dòng)力學(xué)和組織分布。對(duì)于藥代動(dòng)力學(xué)，160只大鼠分成20組(N-4只大鼠/性另，J/劑量/時(shí)間間隔)，而對(duì)于組織分布，156只大鼠分成26組(11=3只大鼠/性別/劑量/時(shí)間間隔)。藥代動(dòng)力學(xué)血樣采集時(shí)間間隔為0.083、0.5、1、3、6、12、36、48、72和96小時(shí)。組織分布采樣時(shí)間間隔為給藥前、24小時(shí)、1、2、4、8、13、17、21、26、39、52和72周。藥代動(dòng)力學(xué)給藥以后，沒有觀察到大鼠出現(xiàn)不良臨床表現(xiàn)。雌雄大鼠單劑量靜脈注射1.8gPFC/kg或者3.6gPFC/kg后測(cè)得的6個(gè)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見下表。雌性和雄性大鼠給予1.8gPFC/kg后PFOB的平均末端半衰期大約為73小時(shí)，與動(dòng)物給予3.6gPFC/kg后的平均末端半衰期181小時(shí)相比。與之比較，PFDB的末端半衰期要高幾個(gè)數(shù)量級(jí)大約為25,130小時(shí)(雄性，1.8gPFC/kg)，大約為4800小時(shí)(雌性，1.8gPFC/kg)，大約為12,550小時(shí)(雄性3.6gPFC/kg)和大約為7,600小時(shí)(雌性，3.6gPFC/kg)。兩種性別和兩種劑量PFOB的分布體積(Vd)是從大約為1200至2200g/kg。與此相比，兩種性別和兩種劑量PFDB的分布體積范圍是從大約為1,650,000至6，130，000g/kg。因此PFDB的Vd比PFOB的Vd大約高3個(gè)數(shù)量級(jí)。表V.單次靜脈注射后雄性和雌性SpragueDawley大鼠血液中PFOB的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)PFOB(1.8gPFC/kg)PFOB(3.6gPFC/kg)參數(shù)雄性雌性雄性雌性<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>組織分布26組(N-3只大鼠/性另ij/組)。在實(shí)施安樂死之前，記錄體重。在指定時(shí)間(見下面)，用METOFANE⑧麻醉大鼠并通過腹動(dòng)脈放血。用含有EDTA的注射器采集血液并轉(zhuǎn)移到密封的塑料容器中在-20。C儲(chǔ)存直到進(jìn)行分析測(cè)定。產(chǎn)生的數(shù)據(jù)包括在測(cè)定的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)中。每只大鼠采集下列組織并且置于密封容器中在-20。C冷凍保存。在冷凍之前，處理血樣和組織樣品用于分析。用經(jīng)過Oread驗(yàn)證的頂空氣相色譜法對(duì)血樣和組織樣品中的PFOB和PFDB進(jìn)行定量測(cè)定。本方法在肝臟樣品中進(jìn)行了驗(yàn)證，然后在全部其他組織、血液和血清中進(jìn)行了交叉驗(yàn)證。采集并進(jìn)行分析的組織包括有心臟、肺、腹部脂肪、脾臟、肝臟、腸系膜淋巴結(jié)、腎臟、腎上腺、睪丸、卵巢、子宮、全腦、眼睛、骨骼肌、股骨骨髓和胃腸道。測(cè)定了兩種性別12個(gè)時(shí)間點(diǎn)的組織中PFOB和PFDB的濃度。對(duì)于雄性動(dòng)物，包括血液在內(nèi)共360個(gè)個(gè)體結(jié)果。對(duì)于雌性動(dòng)物額外增加了24個(gè)結(jié)果。在雄性中，對(duì)于接受1.8gPFC/kg的總劑量的動(dòng)物在24小時(shí)后在肝臟中發(fā)現(xiàn)大約59%的PFOB劑量。脾臟中總劑量的百分比<1%。雄性動(dòng)物接受3.6gPFC/kg的劑量后這一數(shù)值增加至大約69%。在雌性中，對(duì)于接受1.8gPFC/kg的總劑量的動(dòng)物，24小時(shí)后在脾臟中發(fā)現(xiàn)大約4%的PFOB劑量并且24小時(shí)后在肝臟中發(fā)現(xiàn)大約63%的PFOB劑量。在接受3.6gPFC/kg的雌性中，發(fā)現(xiàn)肝臟中總劑量的百分比大約為53%而脾臟中<1%。在雄性大鼠中，分別在脾臟和肝臟中發(fā)現(xiàn)大約占總劑量15%和85%的PFDB(1.8gPFC/kg)。在接受3.6gPFC/kg的雄性大鼠中，在脾臟和肝臟中發(fā)現(xiàn)的PFDB的總劑量的百分比分別約為11%和69%。在雌性中，在脾臟和肝臟中發(fā)現(xiàn)的PFDB百分比分別為PFDB的總劑量的約14%和86%。當(dāng)PFC的總劑量增加為3.6g/kg時(shí)，脾臟中大約含有總劑量的8%而肝臟中大約含有總劑量的62%。在給藥1.8gPFC/kg的雄性大鼠中，24小時(shí)的PFOB的絕對(duì)濃度除了眼睛和骨骼肌以外在所有組織中都高于100pg/g。對(duì)于給藥3.6gPFC/kg的雄性大鼠，所有組織中PFOB的濃度都高于100pg/g。平均起來PFOB的絕對(duì)濃度高于眼睛中平均定量的上限。在給藥1.8gPFC/kg的雌性大鼠中，除了血液、眼睛和骨骼肌以外所有組織中PFOB的濃度都高于100ng/g。在給藥3.6gPFC/kg的雌性大鼠中，24小時(shí)的所有組織中PFOB的濃度都高于100pg/g。此外，對(duì)于所有四個(gè)組在肝臟和骨髓中的濃度都高于10mg/g。兩種性別和兩種劑量的所有組織在24小時(shí)PFDB的絕對(duì)濃度都高于lftg/g。給藥1.8gPFC/kg的雄性大鼠在24小時(shí)的脾臟和肝臟中PFDB的濃度高于1mg/g。給藥3.6gPFC/kg的雄性大鼠在24小時(shí)的脾臟、肝臟和骨髓中PFDB的濃度高于1mg/g。給藥3.6gPFC/kg劑量組的雌性大鼠在淋巴結(jié)、脾臟、肝臟和骨髓中PFDB的濃度高于1mg/g。藥代動(dòng)力學(xué)和組織分布的研究都清楚地證明了因?yàn)镻FDB的半衰期和在各種組織和器官中滯留的時(shí)間比PFOB長(zhǎng)很多，所以希望限制PFOB/PFDB乳劑中PFDB的量。因此任何PFOB/PFDB乳劑的配方都應(yīng)該避免PFDB的量超過絕對(duì)需要的量。實(shí)例X實(shí)例VI的PFOB/PFDB乳劑在健康人志愿者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)在健康人體內(nèi)用根據(jù)實(shí)例VI制備的氟碳乳劑進(jìn)行兩個(gè)隨機(jī)、對(duì)照、雙盲、平行組的一期臨床研究。健康人志愿者單劑量靜脈注射1.2或者1.8gPFC/kg的實(shí)例VI氟碳乳劑后，分析血液和呼氣樣品中的PFOB和PFDB來測(cè)定其藥代動(dòng)力學(xué)。血樣釆集直至給藥后336個(gè)小時(shí)。兩組研究中對(duì)PFC血藥濃度-時(shí)間曲線的試驗(yàn)表明初始峰濃度(Cmax)不依賴于各個(gè)每kg劑量組中受試者的絕對(duì)劑量(體重乘以各自的每kg劑量)，提示PFC的分布空間是一個(gè)體重(最可能的是血容量)的固定百分比。PFOB和PFDB的處置具有劑量依賴性。在前2-4小時(shí)存在一個(gè)初始分布相，接下來是一個(gè)緩慢的初始消除相。血液中PFC最初的Michaelis-Menten衰減可能是由于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)血液中PFC的吸收達(dá)到飽和，而緩慢的末端消除相則表明PFC在身體組織(最可能的是脂肪組織)中延長(zhǎng)了存留時(shí)間。在前12小時(shí)過程中的平均初始PFOB消除半衰期(tv^2h)對(duì)于1.2gPFC/kg劑量比1.8gPFC/kg劑量要短。本實(shí)例中PFOB和PFDB的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表VII和表VIII。表VII.對(duì)于PFOB和PFDB的消除半衰期值乳劑的劑量參數(shù)1.2gPFC/kg1.8gPFC/kgPFOBC隨(mg/L)AUC(0-336)(mgh/L)t'/2.12h*PFDBC曙(mg/L)AUC(0-336)(mgh/L)t■/z.12h13,650±1,61010,1707±41,7326.55±2.06540±1256,637±3,09813.7±3.6卞22,688±2,993284,837±52,34810.5±2.1978±49916,344±3,19118.7±3.5^*給藥后前12個(gè)小時(shí)的初始消除半衰期。+N=3,因?yàn)?名受試者的值無法報(bào)告(r2〈0.95)。*N=7，因?yàn)?名受試者的值無法報(bào)告(r2〈0.95)。表VIII.對(duì)于PFOB和PFDB的消除半衰期值乳劑的劑量參數(shù)1.2gPFC/kgL.8gPFC/kgPFOBC隨(mg/L)AUC(0-336)(mgh/L)t'/2.12h*PFDBC隨(mg/L)AUC(0-336)(mgh/L)12,574±1,90079,200±26,8695.41±1.71卞670±4204,628±1,9497.35，13.6t21,813±3,728238,842±75,7937.66±1.021884±19611,161±4，04412.6±4.it*給藥后前12個(gè)小時(shí)的初始消除半衰期。=5，因?yàn)槠渌?名受試者的值無法報(bào)告(r20.95)。*個(gè)別的可報(bào)告的值(一<0.95)。實(shí)例XI實(shí)例VI的氟碳配方在經(jīng)受非心臟外科手術(shù)的人類受試者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)給經(jīng)受全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)或脊柱外科手術(shù)或包括恥骨后前列腺根治切除術(shù)、根治性子宮切除術(shù)、膀胱切除術(shù)和復(fù)合手術(shù)在內(nèi)的多種泌尿外科和婦科手術(shù)的受試者給予實(shí)例VI的氟碳乳劑后測(cè)定PFOB和PFDB的藥代動(dòng)力學(xué)。在一項(xiàng)研究中受試者接受0.9gPFC/kg或者1.8gPFC/kg的實(shí)例VI的氟碳配方，而在第二項(xiàng)研究中受試者接受1.8gPFC/kg的實(shí)例VI的氟碳配方。對(duì)PFOB和PFDB的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的總結(jié)見表IX。PFOB的全血藥濃度大約比PFDB的全血藥濃度高30倍，與它們給藥配方(58%w/vPFOB:2%w/vPFDB)中的相應(yīng)比例一致。對(duì)于PFOB和PFDB的Cmax的平均值與劑量的增加成合理比例的增加。盡管1.8gPFC/kg的AUCoo的平均值比0.9gPFC/kg的AUCoo的平均值超出2倍，但是這種大的差異排除了任何有關(guān)PFOB或PFDB的藥代動(dòng)力學(xué)呈非線性的結(jié)論。兩種化合物的平均消除半衰期(t'》范圍都是大約2.4小時(shí)至大約5.6小時(shí)。這些數(shù)值低于在健康志愿者中獲得的數(shù)值，因?yàn)槭聦?shí)上這些受試者發(fā)生外科出血，PFC從循環(huán)中流失。表IX.經(jīng)受非心臟外科手術(shù)的受試者給予實(shí)例VI的配方后PFC的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)乳劑的劑量0.9gPFC/kg1.8gPFC/kg參數(shù)n平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差D平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差PFOBC隨(mg/L)367,685±2,4196017,460±6，252AUCM(h'mg/L)2313,265±8，6173557,351±38,489T'/2(h)232.36±3.06353.77±2.69CL(mL/h/kg)2396.5士59.13542.2±24.5PFDBC隨(mg/L)36284±92.760620±158AUCTO(h,mg/L)27736±483302,949±2,166TV2(h)272.73±1.32305.56±4.81CL(mL/h/kg)2758.4±36.63035.7±37.0PFDB=全氟溴癸烷；11=能夠提供足夠分析數(shù)據(jù)的受試者數(shù)C,f最大全血濃度；AUCU全血濃度-時(shí)間曲線下到無限遠(yuǎn)處的面積;t,/尸消除半衰期；CI^全血清除率。實(shí)例XII實(shí)例VI的配方在經(jīng)受心臟外科手術(shù)的受試者中的藥代動(dòng)力學(xué)給經(jīng)受冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)或伴有低體溫心肺分流術(shù)的冠狀動(dòng)脈旁路移植手術(shù)的受試者給予實(shí)例VI的氟碳配方后測(cè)定PFOB和PFDB的藥代動(dòng)力學(xué)。在第1和第2組中，在分流術(shù)后但在開始冷卻之前，直接從分流充氧器中對(duì)受試者給予實(shí)例VI的氟碳乳劑(2.7gPFC/kg)。在第4組中，在主動(dòng)脈插管之前或者在分流術(shù)后，但在開始冷卻之前，直接從分流充氧器中給受試者給予2.7gPFC/kg的氟碳乳劑。對(duì)PFOB和PFDB的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的總結(jié)見表X。表X.經(jīng)受伴有低體溫心肺分流術(shù)的冠狀動(dòng)脈旁路移植手術(shù)的受試者給予實(shí)例VI的2.7gPFC/kg乳劑后PFC的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)參數(shù)n平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差PFOBCmax(mg/Li)3630,305±7,189AUCoc(h'mg/L)34300,233±107,860t'/2(h)347.65±2.71CL(mL/h/kg)349.88±3.66PFDBCmax(mg/L)361,031±190AUCoo(h'mg/L)3316,234±7,873T'a(h)3310.8±4.46CL(mL/h/kg)336.75±3.0211=能夠提供足夠分析數(shù)據(jù)的受試者數(shù)Cma^最大全血濃度；AUCoo-全血濃度-時(shí)間曲線下到無限遠(yuǎn)處的面積;t,/尸消除半衰期；CI^全血清除率。全氟溴烷的全血藥濃度大約比PFDB的全血藥濃度高大約30倍，與它們給藥配方(58%w/vPFOB:2%w/vPFDB)中的相應(yīng)比例一致。在主動(dòng)脈插管之前或者在心肺分流術(shù)開始之后給予實(shí)例VI的氟碳乳劑所產(chǎn)生的PFOB和PFDB的全血藥濃度和藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)均具有可比性。實(shí)例XIII與標(biāo)準(zhǔn)輸血慣例(對(duì)照)相比，實(shí)例VI的2.7gPFC/kg的58%PFOB/2%PFDB的氟碳乳劑結(jié)合急性等容血液稀釋在選擇性的非心臟外科手術(shù)操作中伴有中度至大量失血中減少或者避免輸儲(chǔ)備血的有效性的一個(gè)多中心、單盲、隨機(jī)、對(duì)照、平行組研究本研究的主要目的是評(píng)價(jià)與標(biāo)準(zhǔn)輸血慣例相比(護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)/SOC對(duì)照)，用實(shí)例VI的58%PFOB/2%PFDBw/v氟碳乳劑作為臨時(shí)的氧載體來增加急性等容血液稀釋是否能夠減少給患者輸儲(chǔ)備血，即給經(jīng)受伴有中度至大量失血(^20mL/kg)的選擇性非心臟外科手術(shù)受試者輸入同種異源紅細(xì)胞和/或術(shù)前自體捐血(PAD)單位。試驗(yàn)設(shè)計(jì)這是一項(xiàng)在34個(gè)臨床試驗(yàn)基地進(jìn)行的第3期、單盲、隨機(jī)、平行組、對(duì)照、多中心研究。本研究中對(duì)總數(shù)為492名預(yù)計(jì)失血在20至70mL/kg之間的經(jīng)受大型非心臟外科手術(shù)的患者進(jìn)行了登記。額外的關(guān)鍵選擇標(biāo)準(zhǔn)包括手術(shù)前血紅蛋白濃度[Hb在12至15g/dL之間；年齡在18至80歲之間；體重在50至125kg之間；美國(guó)麻醉學(xué)家學(xué)會(huì)(ASA)體格狀態(tài)在I-III之間；并且估計(jì)血容量足夠在手術(shù)前的急性等容血液稀釋("ANH")中抽取2個(gè)單位的自體血液。手術(shù)操作包括主要的大型癌癥手術(shù)(例如，盆腔廓清術(shù)、腹內(nèi)腫瘤去除術(shù)、骨盆和骨端的肌肉骨骼腫瘤切除術(shù)、主要的頭和頸切除術(shù)、肝臟切除術(shù)和脊髓腫瘤切除術(shù))，兩側(cè)和修改臀部關(guān)節(jié)成形術(shù)，骨盆骨折切開復(fù)位內(nèi)固定術(shù)，和主要的血管外科手術(shù)。在本研究中不允許血液回收。手術(shù)前受試者被隨機(jī)分在兩個(gè)研究組中的一個(gè)中，研究組l(急性等容血液稀釋(ANH)加實(shí)例VI的氟碳配方)或者研究組2，對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)輸血慣例(soc)。對(duì)于手術(shù)中的每一輸血指征(即一個(gè)方案確定Hbl的或幾個(gè)方案確定的手術(shù)中生理學(xué)指征之一種)，給患者輸入術(shù)前自體捐血單位(如果有的話)血液和同種異源血液。這些指征包括心動(dòng)過速(心率2100次每分鐘心跳或者2135%的麻醉后誘導(dǎo)值)，低血壓(平均主動(dòng)脈壓》60毫米汞柱或者》65%的麻醉后誘導(dǎo)值)，Pv02^38毫米汞柱(如果使用了肺動(dòng)脈導(dǎo)管)，或者ST-段壓低(>0.1mV)或者ST-段抬高(>0.2mV)oA.^/",裙i(SOC):給對(duì)照組按照標(biāo)準(zhǔn)血液輸注方案中確定的標(biāo)準(zhǔn)輸血慣例進(jìn)行處理。當(dāng)出現(xiàn)各手術(shù)中血紅蛋白輸血指征為8,0±0.5g/dL49和/或當(dāng)出現(xiàn)至少一種生理學(xué)指征時(shí)，給患者輸入術(shù)前自體捐血單位(如果有的話)，然后輸入同種異源紅細(xì)胞。在手術(shù)期間使吸入氧氣分?jǐn)?shù)(FI02)保持在40。/0(FiO尸0.4)(在普通外科手術(shù)中典型用到的水平)。B.《辦K/處凝^浙村治^逸在進(jìn)行外科切口之前，給患者進(jìn)行急性等容血液稀釋使血紅蛋白為8.0±0.5g/dL且FiO尸l.O，然后立即靜脈注射劑量為1.8gPFC/kg的實(shí)例VI的氟碳乳劑(3mL/kg)。當(dāng)手術(shù)中血紅蛋白達(dá)到6.5士0.5g/dL時(shí)，再給予劑量為0.9gPFC/kg的實(shí)例VI的氟碳乳劑(1.5mL/kg)。當(dāng)血紅蛋白低于5.5±0.5g/dL或者當(dāng)滿足上述任何的生理學(xué)指征(如上所述)時(shí)，給患者輸入急性等容血液稀釋單位和術(shù)前自體捐血血液(如果有的話)，然后輸入同種異源血液。在手術(shù)后輸入全部的急性等容血液稀釋血。在兩組中，目標(biāo)為手術(shù)后血紅蛋白28.5士0.5g/dL，維持至手術(shù)后(POD)3天，并且根據(jù)方案要求直到出院。血紅蛋白輸血指征的范圍(±0.5g/dL)不適用于個(gè)別患者，但是能夠使研究中心根據(jù)當(dāng)?shù)氐臉?biāo)準(zhǔn)調(diào)整輸血決定(對(duì)兩組進(jìn)行同樣的調(diào)整)。有效性評(píng)價(jià)主要的有效性終點(diǎn)是在急性研究期間(皮膚切開后24小時(shí))輸入的同種異源和/或術(shù)前自體捐血單位的數(shù)量。次要終點(diǎn)包括(1)在急性研究期間避免輸入同種異源紅細(xì)胞的受試者的百分比；(2)在急性研究期間避免輸入同種異源紅細(xì)胞和術(shù)前自體捐血單位的受試者的百分比；和(3)從到達(dá)恢復(fù)室直至出院(DD)的時(shí)間或到手術(shù)后21天的時(shí)間。主要有效性群體被定義為有治療意圖的群體，包括所有隨機(jī)的受試者。方案中定義的次要有效性群體包括預(yù)期失血^20mL/kg的所有隨機(jī)受試者。潛采在篩選和基點(diǎn)中，兩組患者的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)是相似的，所進(jìn)行的外科手術(shù)類型也是相似的。在進(jìn)行治療或手術(shù)前，由于他們自己的要求或者因?yàn)榕R床條件不允許在此時(shí)進(jìn)行手術(shù)，總計(jì)14名受治療患者和10名對(duì)照患者退出研究。在術(shù)前急性等容血液稀釋中，抽出1，618ml血液(標(biāo)準(zhǔn)偏差-558mL，范圍450-3,374mL)，并被1，312ml(標(biāo)準(zhǔn)偏差-680mL，范圍100-3,500mL)的膠體以及2，418ml(標(biāo)準(zhǔn)偏差=1627mL，范圍100-10,000mL)的類晶體輸液來代替。在急性等容血液稀釋后血紅蛋白為8.1±0.5g/dL。在227名接受氟碳乳劑治療的患者中，50名患者僅接受初始劑量為1.8gPFC/kg的實(shí)例VI的氟碳乳劑并且再也沒有達(dá)到需要再次給藥的血紅蛋白指征，而177名患者接受了全部2.7gPFC/kg的劑量。在有治療意圖的群體(N-492)中，實(shí)現(xiàn)了主要終點(diǎn)(在24小時(shí)內(nèi)減少了輸入同種異源/術(shù)前自體捐血單位的數(shù)量)接受氟碳乳劑組比對(duì)照組需要更少輸血(分別為1.5對(duì)2.1單位)，代表26%的縮減率(表XI，盡管在手術(shù)中失血較高[2.7±2.7L對(duì)2.3±2.0L;/<0.05)。然而，在方案中確定的目標(biāo)群體中(失血k20mL/kg;N-330或67。/。的隨機(jī)受試者)，手術(shù)后第1天氟碳乳劑治療組的平均縮減率更高(>40%)(表XII)。在出院時(shí)，與對(duì)照組相比這種差異仍然很顯著(在手術(shù)后第21天/出院時(shí)，平均差為3.4對(duì)4.9單位；中位差為2對(duì)4單位；/7<0.001)?？傮w上，在手術(shù)后第21天/出院時(shí)，給予氟碳乳劑治療的受試者需要696單位，而對(duì)照組需要846單位，代表凈節(jié)約了150單位的同種異源血液。表XI.有治療意圖的群體輸入的同種異源血紅蛋白和/或術(shù)前自體捐<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>*用經(jīng)過自然對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換的協(xié)方差分析對(duì)平均值進(jìn)行調(diào)整t用分級(jí)線性模型進(jìn)行計(jì)算，與平均級(jí)進(jìn)行比較*手術(shù)后第21天或者出院日，無論那天發(fā)生得更早表XII.目標(biāo)群體(失血^20mL/kg)輸入的同種異源血紅蛋白和/或術(shù)前自體捐血單位數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>*用經(jīng)過自然對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換的協(xié)方差分析對(duì)平均值進(jìn)行調(diào)整t用分級(jí)線性模型進(jìn)行計(jì)算，與平均級(jí)進(jìn)行比較*手術(shù)后第21天或者出院日，無論那天發(fā)生得更早就有治療意圖的群體避免輸血而言(圖9，A組)，在急性研究期間(24小時(shí))，氟碳乳劑治療組比對(duì)照組多出大約21%的患者避免了同種異源輸血和術(shù)前自體捐血&0,05)。在方案確定的目標(biāo)群體中，從手術(shù)后第1天至手術(shù)后第21天/出院的所有時(shí)間點(diǎn)，顯著地更大的受試者百分比(p<0.05)(幾乎是兩倍)(圖9，B組)避免了輸血。為了確定從氟碳乳劑治療受益的所有受試者而進(jìn)行的一項(xiàng)析因分析表明當(dāng)外科手術(shù)失血是210mL/kg(N-424;全部受試者的86%)時(shí)，給予氟碳乳劑治療的受試者與對(duì)照相比輸血明顯減少(圖9，C組)。實(shí)例XIV根據(jù)不良事件("AE，，)報(bào)告(包括體格檢查)、感染發(fā)病率、生命征象(心率、血壓和體溫)以及臨床實(shí)驗(yàn)室值(血液學(xué)、凝固和血液化學(xué))，對(duì)實(shí)例VI的氟碳乳劑的安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)。手術(shù)后3個(gè)月對(duì)患者的安全性進(jìn)行電話隨訪。在本研究期間，使用了一個(gè)獨(dú)立的安全監(jiān)控委員會(huì)(DSMB)對(duì)實(shí)驗(yàn)室和安全性數(shù)據(jù)進(jìn)行定期審查?？梢灶A(yù)料到本研究中會(huì)有不良事件("AE，，)和嚴(yán)重不良事件("SAE，，)的報(bào)告，因?yàn)檫@些患者都經(jīng)受了伴有大量失血的大手術(shù)。表XIII顯示了不良事件和嚴(yán)重不良事件?？傮w上講，氟碳乳劑治療組的所有不良事件的發(fā)病率(86%)均與對(duì)照組(81%)相似，盡管氟碳乳劑治療組在"整體"、"心血管系統(tǒng)"(高血壓)和"消化系統(tǒng)，，(腸梗阻)分類中的不良事件的報(bào)告更多。高血壓主要發(fā)生在手術(shù)之后，并且可能與再輸入等容血液稀釋血有關(guān)。腸梗阻病例的臨床后果較小，而且在析因分析中也沒有發(fā)現(xiàn)能夠?qū)⑦@些事件與給予實(shí)例VI的氟碳乳劑聯(lián)系起來的一般模型或病理生理學(xué)機(jī)理。表XIII.給予氟碳乳劑后3個(gè)月的不良事件和嚴(yán)重不良事件(按照身體系統(tǒng)的COSTART列表)不良事件治療組對(duì)照組(N=227)*(N-241)*任何不良事件t195(86%)195(81%)整體114(50%)110(46%)心血管系統(tǒng)90(40%)73(30%)消化系統(tǒng)101(450/0)84(35%)血液和淋巴系統(tǒng)72(32%)68(28%)代謝和營(yíng)養(yǎng)障礙101(45%)91(38%)泌尿生殖系統(tǒng)51(23%)62(26%)任何嚴(yán)重不良事件:l:72(32%)51(21%)整體32(14%)25(10%)心血管系統(tǒng)16(7%)12(5%)消化系統(tǒng)16(7%)5(2%)代謝和營(yíng)養(yǎng)障礙7(3%)5(2%)肌肉骨骼系統(tǒng)4(2%)3(1%)泌尿生殖系統(tǒng)9(4%)5(2%)死亡率10(4%)5(2%)*治療組的隨機(jī)受試者(經(jīng)受手術(shù)，并且如果在治療組也接受了第一劑量的氟碳乳劑)。卞治療組或?qū)φ战M受試者報(bào)告的不良事件均>5%。$治療組或?qū)φ战M受試者報(bào)告的嚴(yán)重不良事件均>1%。兩組間嚴(yán)重不良事件的總發(fā)生率差異顯著(氟碳乳劑組為32%對(duì)對(duì)照組21%;/;=0.03)。但是，僅是"消化系統(tǒng)"類別是統(tǒng)計(jì)性地不同于對(duì)照組，如上所述，主要是因?yàn)槭中g(shù)后腸梗阻發(fā)病率較高。氟碳乳劑治療組報(bào)告了四例腸梗阻嚴(yán)重不良事件(而對(duì)照組沒有)一例發(fā)生在直腸切斷術(shù)后，兩例發(fā)生在大型婦科腫瘤切除術(shù)后，還有一例發(fā)生在根治性膀胱切除術(shù)后。在這類患者群體中報(bào)告出如此低的腸梗阻發(fā)病率出人意料，因?yàn)榻^大多數(shù)患者經(jīng)受的都是腹腔骨盆手術(shù)，這表明在某種程度上報(bào)告不全，特別是在對(duì)照組。兩組手術(shù)后死亡的發(fā)生率、性質(zhì)和時(shí)間進(jìn)程與對(duì)經(jīng)受惡性腫瘤廣泛非心臟手術(shù)操作患者的發(fā)表文獻(xiàn)報(bào)道一致，并且沒有觀察到氟碳乳劑對(duì)此產(chǎn)生的任何影響。兩組發(fā)生的全部感染性并發(fā)癥的總和相似，均為32%,支持了早期臨床發(fā)現(xiàn)，即氟碳乳劑不會(huì)使免疫功能受損。如上所述，氟碳乳劑治療組進(jìn)行中度的手術(shù)前等容血液稀釋(抽出平均大約30%的血容量并同時(shí)用膠體和/或類晶體溶液代替)。但是，有證據(jù)表明在這種特殊實(shí)例的血量正常條件下不一定能進(jìn)行等容血液稀釋。分析表明在大約70%的接受氟碳乳劑治療的受試者中，輸入的液體容量不能滿足在等容血液稀釋中取出的血容量。某些患者，補(bǔ)液不足會(huì)引起血流灌注不足，這在手術(shù)剩余期間不能被充分地糾正。因此，可能會(huì)使某些接受氟碳乳劑治療的受試者誘發(fā)嚴(yán)重的手術(shù)后病癥，例如與局部缺血有關(guān)的不良反應(yīng)。其他受試者，在等容血液稀釋中補(bǔ)液過量會(huì)伴有某些更加典型的循環(huán)負(fù)荷過量的并發(fā)癥。這些分析證實(shí)了監(jiān)督本研究的獨(dú)立的數(shù)據(jù)安全監(jiān)控委員會(huì)("DSMB")的結(jié)論，即在某些集中的不良事件中某些組出現(xiàn)不平衡，表明某些患者可能出現(xiàn)血容量減少。但是，DSMB推斷這在臨床上不具有連貫性或顯著性，并推薦對(duì)普通外科群體進(jìn)行進(jìn)一步的研究來確認(rèn)實(shí)例VI的氟碳乳劑的有效性并進(jìn)一步評(píng)價(jià)其安全性。兩組的死亡率相似(4%對(duì)2%),研究54者認(rèn)為所有死亡都與受試藥物無關(guān)。相反，認(rèn)為死亡與自身腫瘤發(fā)展、敗血癥、多器官衰竭和心肺并發(fā)癥有關(guān)。觀察到手術(shù)后幾天發(fā)生短暫的血小板計(jì)數(shù)下降，這根據(jù)以前的臨床數(shù)據(jù)可以預(yù)測(cè)。因?yàn)閮山M輸入的血小板數(shù)和出血事件的發(fā)病率相似，所以看起來這種手術(shù)后血小板計(jì)數(shù)的適度下降基本不具有臨床相關(guān)性。這與早期對(duì)志愿者的研究一致，證明PFC乳劑對(duì)血小板功能和出血時(shí)間沒有影響。實(shí)例XIII和XIV的數(shù)據(jù)的結(jié)論這項(xiàng)普通外科研究成功地證明了輸入實(shí)例VI的氟碳乳劑以后，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上能夠顯著地減少或者避免經(jīng)受多種主要的全身性手術(shù)操作的受試者中同種異源血液和手術(shù)前自體血液的輸血。總體上，認(rèn)為兩組手術(shù)后死亡的概況和發(fā)生率是可以接受的而且并不突出的。盡管氟碳乳劑治療組的嚴(yán)重不良事件發(fā)生率較高，但是觀察到的事件沒有超出研究者對(duì)這個(gè)年紀(jì)較大的外科群體的預(yù)料，而且與給予氟碳乳劑無關(guān)。同時(shí)，這項(xiàng)特殊研究的單盲屬性可能會(huì)在某種程度上造成對(duì)照組報(bào)告的事件過少，而使氟碳乳劑治療組有報(bào)告過多的傾向。實(shí)例XV對(duì)經(jīng)受心肺分流術(shù)下主要冠狀動(dòng)脈旁路移植手術(shù)患者，一項(xiàng)評(píng)價(jià)實(shí)例VI的2.7gPFC/kg氟碳乳劑對(duì)增進(jìn)手術(shù)中自體捐血和避免同種異源紅細(xì)胞輸血的有效性的第3期、單盲、隨機(jī)、平行組、多中心、對(duì)照研究主要研究目的是評(píng)價(jià)實(shí)例VI的氟碳乳劑作為臨時(shí)性氧栽體，在經(jīng)受CABG手術(shù)患者的心肺分流術(shù)"CPB"之前，通過允許更廣泛的采集自體血液來避免同種異源血液輸血的有效性。試驗(yàn)設(shè)計(jì)這是在38個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)基地進(jìn)行的一項(xiàng)3期、單盲、隨機(jī)、平行組、多中心、對(duì)照研究。年齡在18至80歲之間，已經(jīng)排定了初步的、非緊急的低體溫或正常體溫心肺分流術(shù)下的冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(不包括瓣膜手術(shù))的心臟外科患者，在手術(shù)前隨機(jī)分成兩組氟碳乳劑治療組(急性等容血液稀釋加手術(shù)中自體捐血[IADj)或者對(duì)照組(僅急性等容血液稀釋)。附加的關(guān)鍵選擇標(biāo)準(zhǔn)包括手術(shù)前篩選血紅蛋白[Hb]^U和Sl4g/dL;體重在50至125kg之間；而且美國(guó)麻醉學(xué)家學(xué)會(huì)(ASA)體格狀態(tài)分類為2或3，或者對(duì)于不穩(wěn)定心絞痛的ASA體格狀態(tài)分類為4。本研究預(yù)期要登記600名受試者(每個(gè)研究組300人)。在38個(gè)臨床研究基地，本研究一共登記了411名受試者(治療組205人和對(duì)照組206人)。在分流術(shù)開始前，麻醉師進(jìn)行急性等容血液稀釋，目標(biāo)是使分流術(shù)初期的[Hbj達(dá)到8g/dL;在氟碳乳劑組和對(duì)照組受試者進(jìn)行相同程度的急性等容血液稀釋。在氟碳乳劑治療組，灌注師在分流術(shù)開始前實(shí)施IAD(—種在心肺分流術(shù)開始時(shí)從患者體內(nèi)采集自體血液的技術(shù))，目標(biāo)是使分流術(shù)中的[Hb](6g/dL)比對(duì)照組受試者更低，并且保存多佘的自體血液。在急性等容血液稀釋和自體采血中收集的血液，要同時(shí)輸入適當(dāng)量的基于淀粉的膠體、白蛋白和/或類晶體來代替，從而保證血量正常。將兩組的正常體溫下(35至37。C)的初始分流流速(BFR)設(shè)置為2.2至2.4L/min/m2，用充氧器(即100%02)來使動(dòng)脈血的含氧量保持最高。在低體溫分流術(shù)中(溫度范圍為28至34。C)，BFR降為1.8至2.0L/min/m2。兩組都允許手術(shù)中自體血液再利用(ABS)。兩組中，當(dāng)達(dá)到方案確定的血紅蛋白或生理學(xué)指征時(shí)，給受試者輸血。但是手術(shù)中，當(dāng)血紅蛋白210g/dL時(shí)，不是必須進(jìn)行與生理學(xué)指征相應(yīng)的輸血。根據(jù)臨床需要來改變分流流速(BFR),但不能為了試圖糾正方案確定的生理學(xué)輸血指征而增加分流流速。這些包括在低體溫心肺分流術(shù)中PvO2《30mmHg(在血量正常的心肺分流術(shù)中《35mmHg)、Sv02《65。/o以及ST-段壓低(20.1mV)或者ST-段抬高(20.2mV)。處^r^浙治^f遂在實(shí)施分流術(shù)之前立即給氟碳乳劑治療組患者首次靜脈注射("IV")實(shí)例VI的氟碳乳劑(1.8gPFC/kg;3.0mL/kg)。在實(shí)施心肺分流術(shù)初期采集自體血液時(shí)立即靜脈注射第二劑量的實(shí)例VI的氟碳乳劑(0.9gPFC/kg;1.5mL/kg)。在根據(jù)方案確定的血紅蛋白指征(即心肺分流術(shù)中為5.5g/dL和心肺分流術(shù)剛結(jié)束后為7.0g/dL)和/或當(dāng)出現(xiàn)任何生理學(xué)指征(如上所述)而進(jìn)行同種異源血紅蛋白輸血前，給患者輸入急性等容血液稀釋血和自體血液(和術(shù)前自體捐血單位，如果有的話)。對(duì),裙逸在心肺分流術(shù)初期，當(dāng)最后的等容血液稀釋血被抽出以后，給受試者靜脈輸入與第一劑量輸注容量配對(duì)的平衡電解質(zhì)溶液(3mL/kg)，接著額外1.5mL/kg。在根據(jù)各手術(shù)中血紅蛋白輸血指征(即心肺分流術(shù)中為7.0g/dL和心肺分流術(shù)剛結(jié)束后為8.0g/dL)和/或當(dāng)出現(xiàn)任何生理學(xué)指征(如上所述)時(shí)而進(jìn)行同種異源血紅蛋白輸血前，給患者輸入急性等容血液稀釋單位(和術(shù)前自體捐血單位，如果有的話)。在分流術(shù)剛結(jié)束的期間，兩組都給予自體血液來維持血液動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性。當(dāng)達(dá)到血紅蛋白或生理學(xué)指征時(shí)輸入自體血液，之后輸入同種異源紅細(xì)胞。除非有禁忌，否則在離開手術(shù)室前將全部可以得到的等容血液稀釋單位和自體血液都輸回給受試者。在手術(shù)后(直至手術(shù)后第7天或出院日，無論那天發(fā)生得更早)，輸入同種異源紅細(xì)胞來維持血紅蛋白〉8.0g/dL，或者如果觀察到常規(guī)介入不能逆轉(zhuǎn)的生理學(xué)指征(僅術(shù)后24小時(shí)觀察Pv02和SvO"時(shí)，也可以更早輸入同種異源紅細(xì)胞。有效性評(píng)價(jià)茅,《主要的有效性終點(diǎn)是在直至手術(shù)后7天或出院日(DD)，無論那天發(fā)生得更早，氟碳乳劑治療組與對(duì)照組相比避免同種異源紅細(xì)胞輸血的受試者的比例。次要有效性終點(diǎn)是在直至手術(shù)后7天或出院日(無論那天發(fā)生得更早)輸入的同種異源紅細(xì)胞的單位數(shù)。安全性評(píng)價(jià)茅,.有,在不良事件、生命體征、臨床實(shí)驗(yàn)室值和體格檢查的基礎(chǔ)57上對(duì)安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)。在急性研究期間也對(duì)機(jī)械通氣持續(xù)時(shí)間、在重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)的時(shí)間、住院時(shí)間、因術(shù)后出血而再次手術(shù)以及術(shù)后心肌梗死(MI)的發(fā)生率、中風(fēng)和腎衰竭等也進(jìn)行了評(píng)價(jià)。在手術(shù)后3個(gè)月對(duì)安全性進(jìn)行電話隨訪來評(píng)價(jià)任何不良事件。本研究中使用了一個(gè)獨(dú)立的安全監(jiān)控委員會(huì)(DSMB)對(duì)安全性數(shù)據(jù)進(jìn)行定期審查。潛^,因?yàn)闀和?duì)患者進(jìn)行登記，本研究中用所有可以得到的398名受試者(氟碳乳劑治療組的200名患者和對(duì)照組的198名患者)的數(shù)據(jù)進(jìn)行了一項(xiàng)臨時(shí)的安全性分析，來對(duì)氟碳乳劑治療組和對(duì)照組中腦血管意外(CVA)和術(shù)后出血事件的發(fā)病率不平衡的病因?qū)W進(jìn)行評(píng)價(jià)。剩余13名受試者(氟碳乳劑組5名和對(duì)照組8名)在研究前退出并且沒有接受方案指定的治療。正如對(duì)這種患者群體的預(yù)測(cè)那樣，在本研究中登記的所有受試者都報(bào)告了不良事件(AE)。按照方案指定的分析表明兩組間不良事件或嚴(yán)重不良事件的總發(fā)生率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上沒有顯著差異。嚴(yán)重不良事件(總體上占34.4%;在氟碳乳劑治療組中占38.5%;在對(duì)照組中占30.3%)和死亡(總體上占1.5。/。;在氟碳乳劑治療組中占2.5%;在對(duì)照組中占0.5%)的發(fā)生率基本上都在對(duì)有心肺分流術(shù)的冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)術(shù)后3個(gè)月的報(bào)導(dǎo)的范圍之內(nèi)，盡管對(duì)照組的死亡率格外低，僅為0.5。/。(參見表IX)。最近一篇關(guān)于大量經(jīng)受有心肺分流術(shù)的冠狀動(dòng)脈旁路移植手術(shù)的患者的文獻(xiàn)才艮道的死亡率為4.5%。KleinM，Mahoney等人，"在常規(guī)開放心臟外科手術(shù)中血液制品的用途離心泵的影響"，人造器官(ArtificialOrgans)25(4):300-305(2001)。包括到出院日為止的廣泛的實(shí)驗(yàn)室研究在內(nèi)的其他方案確定的安全性結(jié)果的分析表明基本上沒有醫(yī)學(xué)上嚴(yán)重的不良反應(yīng)。本質(zhì)上，本研究中報(bào)告的術(shù)后發(fā)病率的性質(zhì)和時(shí)間進(jìn)程與經(jīng)受冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)群體的歷史數(shù)據(jù)一致。58表XIV.給藥后3個(gè)月的不良事件和嚴(yán)重不良事件(根據(jù)身體系統(tǒng)的COSTART列^)_<table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table>*治療組的隨機(jī)受試者(經(jīng)受手術(shù)并且如果是氟碳乳劑組也接受第一劑量藥物)。卞氧(O^gewd組或?qū)φ战M受試者報(bào)告的不良事件均>10%。本氧(a^^ewd組或?qū)φ战M受試者報(bào)告的嚴(yán)重不良事件均>1%。嚴(yán)重的神經(jīng)學(xué)和出血并發(fā)癥的總發(fā)病率在文獻(xiàn)報(bào)道的正常范圍之內(nèi)；但是，對(duì)照組的發(fā)病率格外低。典型地，大約2%至6%的冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)患者會(huì)產(chǎn)生局部或全面的不良神經(jīng)學(xué)結(jié)果，而且大約2%的冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)患者因?yàn)樾厍怀鲅枰俅问中g(shù)。氟碳乳劑組的神經(jīng)學(xué)和出血事件發(fā)病率比預(yù)期要高的原因是廣泛析因探索分析和假設(shè)生成的主題。程序變化因素似乎增加了引發(fā)神經(jīng)學(xué)事件的風(fēng)險(xiǎn)。隨機(jī)分到氟碳乳劑治療組的受試者進(jìn)行了急性等容血液稀釋(平均為9.5%血容量除去)并且有時(shí)非?？焖俚赝ㄟ^IAD來額外釆血(平均為18.4%血容量)。總自體釆血量(ANH加IAD)是引發(fā)嚴(yán)重神經(jīng)學(xué)并發(fā)癥的一個(gè)重要風(fēng)險(xiǎn)因素用這種組合采血程序從有嚴(yán)重神經(jīng)學(xué)事件報(bào)道比沒有嚴(yán)重神經(jīng)學(xué)事件報(bào)道的患者體內(nèi)多抽出平均330ml的自體血液。氟碳乳劑治療組受試者更常使用血管升壓類藥物(來支持灌注壓)表明在即將實(shí)施分流術(shù)時(shí)他們可能會(huì)發(fā)生低血壓(也就是快速抽取大量血液后續(xù)發(fā)的，可能是由于缺乏充分補(bǔ)液而引起)，并且有助于支持在IAD期間發(fā)生的血流灌注不足/含氧量低偶發(fā)事件將導(dǎo)致氧債的這種假說，這種作用將持續(xù)幾個(gè)小時(shí)并且可能加重手術(shù)后發(fā)病率。表XV.抽出的急性等容血液稀釋(ANH)和自體捐血(IAD)容量(單位為mL或者血容量的百分比)_抽出的急性等容血液稀釋和/或自體捐血<table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>*對(duì)照組中有兩名受試者進(jìn)行了自體捐血。如果對(duì)照組受試者因?yàn)槟撤N原因不能繼續(xù)進(jìn)行急性等容血液稀釋而且剩余的"急性等容血液稀釋血"需要被抽出，本方案允許對(duì)照組進(jìn)行自體捐血。在氟碳乳劑治療組，采集自體血液和將自體血液輸回的時(shí)間間隔以及所用羥乙基淀粉的量是引起出血并發(fā)癥的重要的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。假設(shè)稀釋性凝血障礙是由于采集了大量的自體血液和使用了大量的羥乙基淀粉以及在手術(shù)最后輸入了具有高肝素濃度的自體血液而引起的，這些加重了肝素化和心肺分流術(shù)(CPB)引起的止血機(jī)能障礙。在對(duì)照組，程序變化因素也會(huì)對(duì)嚴(yán)重神經(jīng)學(xué)和出血并發(fā)癥的明顯的低發(fā)病率起作用。適度的急性等容血液稀釋(目標(biāo)為分流術(shù)初期血紅蛋白=8.0g/dL)和在操作中給予100%的氧氣可以改善患者的結(jié)果前者通過減少血容量和改善微血管流速來實(shí)現(xiàn)，而后者通過增加有效氧氣量和組織提取的改善程度來實(shí)現(xiàn)。此外，在分流術(shù)后期可以輸入新鮮的自體血液，它們沒有受到分流循環(huán)的有害影響。幾個(gè)其他因素也可以困惑本研究的安全性，特別是缺乏研究基地的患者管理的重要操作方面的標(biāo)準(zhǔn)化，也缺乏預(yù)先確定的實(shí)驗(yàn)室和臨床參數(shù)來使不良事件的報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)化。更重要的是，本研究結(jié)果表明給予實(shí)例VI的氟碳乳劑本身并不能增加神經(jīng)學(xué)或出血事件的風(fēng)險(xiǎn)。此外，體外實(shí)驗(yàn)室研究表明實(shí)例VI的氟碳乳劑和血液、膠體或其他心肺分流術(shù)中使用的常規(guī)試劑和藥物(例如肝素)沒有明顯的物理或化學(xué)相互作用或不相容性；而且，對(duì)這些混合物的剪切粘度的測(cè)量也不受影響。同樣，對(duì)與止血作用和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)有關(guān)的藥理學(xué)和毒理學(xué)研究的詳細(xì)的回顧性調(diào)查沒有發(fā)現(xiàn)在不同模型下的氟碳乳劑的影響。實(shí)例XVI進(jìn)行普通外科手術(shù)的人類患者的臨床研究。在第一項(xiàng)研究中對(duì)進(jìn)行矯形外科手術(shù)受試者(N447)進(jìn)行登記，在第二項(xiàng)研究中對(duì)進(jìn)行泌尿生殖器外科手術(shù)受試者(N-99)進(jìn)行登記。因?yàn)檫@些研究大概相同，所以下面提供了組合的總結(jié)。目的/研究設(shè)計(jì)這些隨機(jī)、多中心、對(duì)照、單盲、平行組研究的目的是評(píng)價(jià)矯形手術(shù)(髖關(guān)節(jié)置換術(shù)或脊柱手術(shù))或泌尿生殖器外科手61術(shù)(根治性前列腺切除術(shù)，根治性子宮切除術(shù)，或膀胱切除術(shù))的患者在急性等容血液稀釋后單劑量靜脈注射實(shí)例的VI氟碳乳劑(0.9或者1.8gPFC/kg)加上吸入氧氣分?jǐn)?shù)(Fi02)為l,O相對(duì)于血液加上吸入氧氣分?jǐn)?shù)(Fi02)=0.4或膠體加上吸入氧氣分?jǐn)?shù)(Fi02)=1.0的安全性和有效性。在這些研究中隨機(jī)采用了總數(shù)為246名的受試者(109名進(jìn)行氟碳乳劑治療而137名進(jìn)行膠體或血液治療對(duì)照組l)。有效性終點(diǎn)包括逆轉(zhuǎn)生理學(xué)輸血指征和逆轉(zhuǎn)時(shí)間。根據(jù)手術(shù)后28天的不良事件、臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)(血液學(xué)、血液化學(xué)和凝固)和生命體征來進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。安全性結(jié)果這些研究中1.8gPFC/kg(66。/。)組和血液對(duì)照組(68%)以及膠體對(duì)照組(61%)的總不良事件的發(fā)生率具有可比性；接受0.9gPFC/kg(50%)受試者的不良事件發(fā)生率比其他所有組都低。大體上，在所研究的外科手術(shù)群體中不良事件的嚴(yán)重程度和術(shù)后發(fā)病率的典型性為輕度至中度。沒有患者因?yàn)椴涣际录顺鲅芯?。兩?xiàng)研究中沒有受試者在研究期間或在研究30天之內(nèi)死亡。氟碳乳劑組和對(duì)照組的發(fā)病率或報(bào)告的嚴(yán)重不良事件的類型在臨床上沒有明顯差異，而且與所有其他治療組相比，膠體對(duì)照組的發(fā)病率最高(18%，13名受試者)，(0.9gPFC/kg，1.8gPFC/kg氟碳乳劑組和血液對(duì)照組分別為5%[n=2，11%[n=8，和9%[n=6j)。研究者判斷所有的嚴(yán)重不良事件都與受試藥物無關(guān)。異常實(shí)驗(yàn)室值與手術(shù)和血液稀釋操作有關(guān)而與受試藥物無關(guān)。在兩項(xiàng)研究中，在第2天至第3天氟碳組和對(duì)照組都出現(xiàn)短暫的血小板計(jì)數(shù)減少。兩項(xiàng)研究中血小板計(jì)數(shù)的最低點(diǎn)都出現(xiàn)在第2天，而且兩組間差異很小。在第28天，經(jīng)過一個(gè)相當(dāng)大的過度補(bǔ)償后，即一種預(yù)料中的對(duì)手術(shù)的急性期反應(yīng)，所有治療組的血小板計(jì)數(shù)都回復(fù)到近基線水平。在生命體征或體格檢查中沒有記錄到有臨床意義的改變。有效性結(jié)果在兩項(xiàng)研究中，發(fā)現(xiàn)劑量為1.8gPFC/kg的實(shí)例VI的氟碳乳劑比血液對(duì)照能夠使更高比例的受試者實(shí)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)輸血指征(在第一項(xiàng)和第二項(xiàng)研究中分別為97%對(duì)60%和69%對(duì)37%)。此外，接受1.8gPFC/kg氟碳乳劑的受試者的逆轉(zhuǎn)時(shí)間(也就是從開始進(jìn)行第一個(gè)輸血指征治療到開始進(jìn)行第二個(gè)輸血指征輸血或手術(shù)結(jié)束的時(shí)間)比血液和膠體對(duì)照組長(zhǎng)很多(在第一項(xiàng)和第二項(xiàng)研究中分別為60對(duì)30分鐘和28對(duì)15分鐘)。0.9gPFC/kg氟碳乳劑組的逆轉(zhuǎn)時(shí)間也比膠體對(duì)照組長(zhǎng)很多。還發(fā)現(xiàn)1.8gPFC/kg的氟碳乳劑在第一次輸血中糾正Pl()2指征的作用比血液對(duì)照更加有效(僅在第二項(xiàng)研究中分別為87%對(duì)14%的受試者)。此外，在1.8gPFC/kg的氟碳乳劑組僅有2名受試者(60/0)以吸入氧氣分?jǐn)?shù)Fi02作為第二次輸血指征，而在血液對(duì)照組有13名受試者(43%)以Fi02作為第二次輸血指征。這表明在進(jìn)行第一次輸血指征治療以后大多數(shù)情況下實(shí)例VI的氟碳乳劑具有維持FK)2水平的作用。實(shí)例VI的氟碳乳劑增加吸入氧氣分?jǐn)?shù)(Fi02)、逆轉(zhuǎn)生理學(xué)輸血指征和延遲給藥后續(xù)發(fā)指征的能力表明實(shí)例VI的氟碳乳劑具有氧傳送的特性。結(jié)論在伴有血液稀釋的中度失血的手術(shù)中單劑量輸入1.8gPFC/kg的實(shí)例VI乳劑及吸入氧氣分?jǐn)?shù)(Fi02)為1.0，在逆轉(zhuǎn)時(shí)間和實(shí)現(xiàn)輸血指征逆轉(zhuǎn)的患者比例方面在統(tǒng)計(jì)學(xué)上優(yōu)于血液加上吸入氧氣分?jǐn)?shù)Fi02=0.4(僅第二項(xiàng)研究)或膠體加上吸入氧氣分?jǐn)?shù)(Fi02)=0.4。0.9gPFC/kg的實(shí)例VI氟碳乳劑加上吸入氧氣分?jǐn)?shù)(Fi02)=1.0在這些有效性測(cè)量方面在統(tǒng)計(jì)學(xué)上與血液加上吸入氧氣分?jǐn)?shù)(Fi02)=0.4的治療相似。本研究中沒有發(fā)現(xiàn)對(duì)給予同種異源血液所需的次要終點(diǎn)有好處。在這種手術(shù)環(huán)境中使用的實(shí)例VI氟碳乳劑(0.9和1.8gPFC/kg)表現(xiàn)出可以接受的安全性概況，僅1.8gPFC/kg氟碳乳劑組出現(xiàn)一個(gè)血小板計(jì)數(shù)略有減少。權(quán)利要求1.一種用于人類患者體內(nèi)氧輸送的儲(chǔ)存穩(wěn)定的氟碳乳劑，其包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相包括氟碳化合物全氟溴辛烷和全氟溴癸烷，其中該全氟溴辛烷在該氟碳乳劑中存在的量為總?cè)閯┑拇蠹s57-60％w/v并且該全氟溴癸烷在該乳劑中存在的量為總?cè)閯┑拇蠹s2-3％w/v，并且，該乳劑進(jìn)一步包含由蛋黃磷脂組成的乳化劑，其存在的量為大約3％-4％w/v。2.如權(quán)利要求1所述的乳劑，其進(jìn)一步包含d，a-生育酚。3.如權(quán)利要求1所述的乳劑，其中該d，a-生育酚存在的量為大約1%w/v。4.如權(quán)利要求2所述的氟碳乳劑，其進(jìn)一步包含NaCl、NaH2P04和EDTA。5.如權(quán)利要求1所述的氟碳乳劑，其中該全氟溴辛烷存在的量為57-59%w/v并且該全氟溴癸烷存在的量為2%w/v。6.如權(quán)利要求1所述的氟碳乳劑，其中該全氟溴辛烷存在的量為58%w/v并且該全氟渙癸烷存在的量為2%w/v。7.如權(quán)利要求1所述的氟碳乳劑，其中該蛋黃磷脂存在的量為大約3.6%w/v并且進(jìn)一步包含NaCl、NaH2PO,H20、NaHP04.7H20。8.如權(quán)利要求1所述的氟碳乳劑，其中該氟碳乳劑進(jìn)一步包含d，a-生育酚和EDTA。9.如權(quán)利要求8所述的氟碳乳劑，其中d，a-生育酚存在的量為0.0025w/v并且EDTA存在的量為0.02w/v。10.用于向人類和其他哺乳動(dòng)物的組織輸送氧的氟碳乳劑，其包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相由全氟溴辛炕和全氟溴癸烷組成，其中該全氟溴辛烷在該氟碳乳劑中存在的量為總?cè)閯┑拇蠹s57-60%w/v并且該全氟溴癸烷在該乳劑中存在的量為總?cè)閯┑拇蠹s1—3%w/v。11.如權(quán)利要求IO所述的氟碳乳劑，其進(jìn)一步包含由蛋黃磷脂組成的乳化劑，其存在的量為大約3.5%-4%w/v。12.如權(quán)利要求IO所述的氟碳乳劑，其中該乳劑是通過表面活性劑來穩(wěn)定的。13.如權(quán)利要求10所述的氟碳乳劑，其中該不連續(xù)相由大約58—59%w/v的PFOB和大約2-3%w/v的PFDB組成。14.如權(quán)利要求10所述的氟碳乳劑，其中該不連續(xù)相由大約58%w/v的PFOB和2%w/v的PFDB組成。15.如權(quán)利要求IO所述的氟碳乳劑，其中在該乳劑形成時(shí)，形成了中間粒徑為0.18nm的氟碳顆粒。16.用于向人類和其他哺乳動(dòng)物的組織輸送氧的氟碳乳劑，其包含連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相，其中該不連續(xù)氟碳相由全氟溴辛烷和全氟溴癸烷組成，其中該全氟溴辛烷在該氟碳乳劑中存在的量為總?cè)閯┑拇蠹s58%w/v并且該全氟溴癸烷在該乳劑中存在的量為總?cè)閯┑拇蠹s2%w/v。17.如權(quán)利要求16所述的氟碳乳劑，其進(jìn)一步包含卵磷脂，其量為大約3-4%w/v。18.如權(quán)利要求17所述的氟碳乳劑，其中該卵磷脂是蛋黃磷脂并且存在的量為3.6%w/v。19.如權(quán)利要求16所述的氟碳乳劑，其進(jìn)一步包含螯合劑。20.如權(quán)利要求19所述的氟碳乳劑，其中該螯合劑是d，a-生育酚。全文摘要本發(fā)明是涉及具有連續(xù)水相和不連續(xù)氟碳相的穩(wěn)定的氟碳乳劑，該氟碳相包含兩種氟碳化合物并出人意料地證實(shí)全氟溴癸烷在穩(wěn)定某種濃度的全氟溴辛烷乳劑時(shí)比更加高度濃縮的全氟溴辛烷/全氟溴癸烷乳劑有效，且沒有在更高濃縮的乳劑中經(jīng)歷的問題，例如更長(zhǎng)的器官滯留時(shí)間、形成PFDB結(jié)晶、更大的乳劑顆粒、生產(chǎn)問題和不能重復(fù)給藥，這些都是更高濃度的全氟溴癸烷內(nèi)在的問題所致。文檔編號(hào)A61K9/107GK101448485SQ200780018623公開日2009年6月3日申請(qǐng)日期2007年5月22日優(yōu)先權(quán)日2006年5月22日發(fā)明者戴維·克萊恩,杰弗里·維爾斯,辛迪·約翰遜申請(qǐng)人:聯(lián)合制藥公司