專利名稱：：腸道α-葡萄糖苷酶抑制劑及其分離方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及從印度藥用植物木蝴蝶(Oo砂/i/m/"&c^2)中分離出來的a-葡萄糖苷酶抑制劑。具體而言，本發(fā)明涉及木蝴蝶的己烷和丙酮部分，其中所述己垸部分包含a-葡萄糖苷酶活性化合物木蝴蝶素A、白楊素和黃岑素，所述丙酮部分包含化合物木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯(oroxylosidemethylester)。本發(fā)明還涉及從上述木蝴蝶的己烷和丙酮部分中分離ot-葡萄糖苷酶抑制活性化合物的方法。本發(fā)明還涉及這些有效的腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑作為活性成分的用途，其可在藥物、食品、健康食品和專門保健食品中用作抗高血糖劑從而預防和治療餐后高血糖癥、糖尿病中的高血糖癥及相關(guān)病癥、肥胖癥以及需要控制高血糖和抑制a-葡萄糖苷酶活性的病癥。
背景技術(shù)：
：糖尿病、肥胖癥和高脂血癥在世界范圍人口中的發(fā)病頻率很高并且在繼續(xù)增加。全球經(jīng)濟的繁榮以及西方習慣和生活方式的采用正使得這些疾病流行全球。在一般人群中，糖尿病是最嚴重的慢性疾病之一，其隨著肥胖和年齡的增多而發(fā)生。雖然有用于治療糖尿病綜合癥所開發(fā)的藥物，但是今天在對糖尿病病人的治療中最有挑戰(zhàn)的目標仍然是使血糖水平盡可能地接近正常。另外，餐后高血糖癥或高胰島素血癥是發(fā)生糖尿病大血管并發(fā)癥的獨立危險因素?？刂七@種糖類代謝作用依賴性疾病，特別是餐后高血糖癥的適當方法是減緩糖類的消化，從而阻礙對由于消化糖類所釋放的葡萄糖的吸收。完成該任務最可行和合理的方式是限制糖類水解酶的活性，更具體而言，是限制腸道ct-葡萄糖苷酶的活性。腸道a-葡萄糖苷酶對于糖類消化并由此對于葡萄糖吸收起著重要的作用。因此，對腸道a-葡萄糖苷酶的抑制為控制餐后高血糖負擔提供了潛在和有效的機會。已知諸如阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖的藥物主要通過干擾糖類消化酶(X-葡萄糖苷酶來降低餐后高血糖癥，并由此延遲葡萄糖的吸收(MoorardianADandThurmanJE，Drugs57，19-29,1999)，目前這些藥物正在臨床上作為藥物用于糖尿病和肥胖癥患者。此外，腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑還被提倡用于控制體重，預防體重增加、減輕體重以及治療和預防肥胖癥及相關(guān)病癥(RosnerHarvey，美國專利2004122054)。雖然上述a-葡萄糖苷酶抑制劑正用于臨床實踐，但是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)由于產(chǎn)生諸如在結(jié)腸中腹痛、腸胃氣脹、腹瀉等副作用，其應用受到限制(Uchida,R,Nasu,Aet.alChem..Pharm.Bull47，187-193，1999)。由于這些限制，業(yè)己感到急需從天然來源，特別是獲自藥用植物的植物化學品中尋找療法，并建立植物化學品庫(pool)，因為越來越多的患者在未來將對目前的用藥法產(chǎn)生耐受性。對天然來源的篩選已經(jīng)帶領(lǐng)人類發(fā)現(xiàn)了很多臨床上適用的藥物，這些藥物不僅對治療而且對預防上述疾病起到主要作用。因此，糖尿病、肥胖癥和相關(guān)心血管病癥的流行以及耐藥性的日益增加的臨床重要性已給科學界帶來額外的負擔，因而迫切需要鑒別新型天然來源的大量具有活性的化合物并將其開發(fā)為藥物。根據(jù)以上所述，我們研究了腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑以控制餐后高血糖癥、糖尿病中的高血糖病癥，以及在預防和治療肥胖癥和相關(guān)病癥中預防體重增加、便于減輕體重和控制體重，由此首次鑒別了木蝴蝶，其含有大產(chǎn)量有效的哺乳動物腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑。在印度的傳統(tǒng)醫(yī)學實踐中，木蝴蝶已被提倡用于數(shù)種疾病。在印度民間醫(yī)藥中，粉狀莖皮用于治療痢疾、腹瀉、咽喉痛、咳嗽和骨折(Kausik,PandDhamanA.K,ThemedicinalplantsandcrudedrugsofIndia,2000,398)。本發(fā)明涉及對包含有效的腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑的混合物進行鑒別，以及從木蝴蝶的活性提取物中分離有效的腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑分子，所述抑制劑在預防和治療中可以獲得應用，用于控制餐后高血糖癥、糖尿病綜合癥中的高血糖病癥、控制體重和減輕體重以及其它肥胖并發(fā)癥，并且進一步應用于a-葡萄糖苷酶抑制劑對于預防和治療本說明書中未提及的疾病起到重要作用的病癥。在本發(fā)明中，我們鑒別了含有有效的腸道oc-葡萄糖苷酶抑制劑的印度藥用植物木蝴蝶。木蝴蝶的干燥莖皮的己垸提取物包含95%的三種主要鑒定為木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素的活性成分；木蝴蝶的干燥莖皮的丙酮提取物包含五種主要活性成分，其除了包含木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素之外，還包含兩種產(chǎn)量大的化合物，即新型腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯和甲氧基白楊素。這些混合物和分子可以獲得預防和治療的應用，用于控制餐后高血糖癥、糖尿病中的高血糖病癥、肥胖癥以及需要抑制a-葡萄糖苷酶的病癥和疾病。應用、給藥和制劑這些腸道ot-葡萄糖苷酶抑制劑可以通過任何合適的在藥物實踐中流行的常規(guī)方法得以應用或給藥，用于控制餐后高血糖癥、治療糖尿病中的高血糖病癥、控制和減少體重以及其它在肥胖癥及需要抑制a-葡萄糖苷酶的病癥中的危險因素，以預防和治療本發(fā)明中未提及的疾病。對于人類、動物和或獸醫(yī)的應用，根據(jù)具體情況，可以優(yōu)選在每次正餐或加餐之前大約半小時口服腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑混合物或分子，從而抑制(x-葡萄糖苷酶作用于其基質(zhì)糖類，增強作用機制并因此獲得更好的治療作用。本發(fā)明的腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑混合物或者存在于混合物中的化合物可以與任何適合人類應用的藥學上可接受的添加劑、載體、賦形劑、配餐劑(foodpreparations)等進行配制。應該選擇材料使得它們不干擾混合物或分子的效力和性質(zhì)，但是優(yōu)選能夠增加或改善活性的材料，可以通過常規(guī)技術(shù)和從處方集(fommlary)獲得的技能確定材料。有效劑量可以通過常規(guī)技術(shù)的技能確定有效劑量水平和給藥持續(xù)時間，從而使得所考慮疾病的治療參數(shù)受到調(diào)控。正如本發(fā)明的實施例中所述，給藥的實際速率、用量和時間隨病情和嚴重程度而變化，且與濃度和持續(xù)時間無關(guān)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的主要目的是提供一種活性提取物，該活性提取物具有有效的腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑的性質(zhì)。本發(fā)明的另一個目的是提供獲自潛在提取物，即己烷提取物和丙酮提取物的活性成分作為腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑。本發(fā)明的又一目的是提供一種從木蝴蝶的活性己烷/丙酮提取物中分離有效成分木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯作為腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑的方法。本發(fā)明的另一目的是賦予從植物木蝴蝶的丙酮提取物或己烷提取物中分離出來的化合物木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯作為腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑的新活性。本發(fā)明的又一目的是提供木蝴蝶的己垸和/或丙酮提取物以及從這些提取物中分離出來的化合物作為腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑在治療上的應用，用于控制餐后高血糖癥、糖尿病中升高的葡萄糖水平以及肥胖癥的體重控制。本發(fā)明的另一目的是提供獲自木蝴蝶的活性提取物和分子作為a-葡萄糖苷酶抑制劑，用于治療用途以預防和治療涉及抑制(x-葡萄糖苷酶的疾病。發(fā)明概述因此，本發(fā)明提供了植物木蝴蝶的a葡萄糖苷酶抑制活性部分。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述a葡萄糖苷酶抑制活性成分選自植物木蝴蝶的己烷和丙酮提取物。在另一實施方案中，植物木蝴蝶的己烷提取物包含活性化合物木蝴蝶素A、白楊素和黃^素，以及未鑒定的化合物，比例為大約60:10:25:5.0(重量％)。在另一實施方案中，丙酮提取物包含活性化合物木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素、木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯以及未鑒定的化合物，比例為大約6.7:8.3:50:16.7:13.3:5.0(重量％)。在另一實施方案中，木蝴蝶的己垸/丙酮提取物的體外(x-葡萄糖苷酶抑制活性IC50為84至125微克/毫升。在另一實施方案中，植物木蝴蝶的己烷部分表現(xiàn)出的體外(x-葡萄糖苷酶抑制活性IC5o為大約85微克/毫升。在另一實施方案中，植物木蝴蝶的丙酮部分表現(xiàn)出的體外a-葡萄糖苷酶抑制活性IC5。為大約124微克/毫升。本發(fā)明進一步提供了一種從植物木蝴蝶的己烷和/或丙酮提取物中分離a葡萄糖苷酶抑制活性化合物的方法，該方法包括用汽油脫脂木蝴蝶的干燥莖皮，然后用己烷和/或丙酮進行提取，過濾所得的己烷或丙酮提取液以獲得殘余物，接著在色譜柱中用含1-5%甲醇的氯仿洗脫所得殘余物，從而得到所需的a葡萄糖苷酶抑制活性化合物木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。在本發(fā)明的一個具體實施方案中，從植物木蝴蝶的己烷提取物中分離a葡萄糖苷酶抑制活性化合物，其包括下列步驟a)用汽油脫脂木蝴蝶的干燥莖皮，然后用己烷進行提取，濃縮和過濾所得的己烷提取液以獲得殘余物，b)在色譜柱中用約含1%甲醇的氯仿對在步驟0)中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得木蝴蝶素A及殘余物，c)用含2%甲醇的氯仿對在步驟0^中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得白楊素，且d)用含3%甲醇的氯仿對剩余的殘余物進一步進行洗脫，從而獲得黃岑素。在另一具體實施方案中，從植物木蝴蝶的丙酮提取物中分離a葡萄糖苷酶抑制活性化合物，其包括下列步驟a)用汽油脫脂木蝴蝶的干燥莖皮，然后分別用己烷和丙酮接連提取，蒸發(fā)所得的丙酮提取液以獲得褐色的殘余物，b)在色譜柱中用約含1%甲醇的氯仿對在步驟問中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得木蝴蝶素A及殘余物，c)用含2n/。甲醇的氯仿對在步驟(b)中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得白楊素和殘余物，d)用含3Q/。甲醇的氯仿對在步驟(c)中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得黃岑素，e)用含4Q/。甲醇的氯仿對在步驟(d)中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得甲氧基白楊素，且f)用含5%甲醇的氯仿對剩余的殘余物進行洗脫，從而獲得木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。在另一具體實施方案中，用己烷提取干燥莖皮所得木蝴蝶素A的產(chǎn)率為大約60%。在另一具體實施方案中，用己烷提取干燥莖皮所得白楊素的產(chǎn)率為大約10%。在另一具體實施方案中，用己垸提取干燥莖皮所得甲氧基白楊素的產(chǎn)率為大約13.3%。在另一具體實施方案中，用己烷提取干燥莖皮所得木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的產(chǎn)率為大約16.7%。在另一具體實施方案中，所得cx-葡萄糖苷酶抑制活性化合物的純度為大約95%。在另一具體實施方案中，木蝴蝶素A的體外a-葡萄糖苷酶抑制活性ICso為25.90微克/毫升。在另一具體實施方案中，白楊素的體外a-葡萄糖苷酶抑制活性IC50為57.59微克/毫升。在另一具體實施方案中，黃岑素的體外(x-葡萄糖苷酶抑制活性IC50為38.71微克/毫升。在另一具體實施方案中，甲氧基白楊素的體外(x-葡萄糖苷酶抑制活性ICso為95.39.71微克/毫升。在另一具體實施方案中，木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的體外ot-葡萄糖苷酶抑制活性ICso為97.31微克/毫升。本發(fā)明進一步提供了一種藥物組合物，該藥物組合物包含木蝴蝶的己烷和/或丙酮部分或者選自木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素、木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯或其混合物的a葡萄糖苷酶抑制活性化合物，以及任選地含有藥學上可接受的載體、輔助劑和/或稀釋劑。a葡萄糖苷酶抑制化合物在受試者中的用途，包括將木蝴蝶本身的己烷和/或丙酮提取物或者自上述提取物中分離出來的選自木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素或木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的活性化合物，任選地連同藥學上可接受的載體、輔助劑和/或稀釋劑一起給藥，用于治療餐后高血糖癥、高血糖癥、糖尿病、肥胖癥以及需要控制高血糖的病癥。本發(fā)明進一步提供了(X葡萄糖苷酶抑制化合物在受試者中的用途，該主題包括將木蝴蝶本身的己烷和/或丙酮提取物或者自上述提取物中分離出來的選自木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素或木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的活性化合物，任選地連同藥學上可接受的載體、輔助劑和/或稀釋劑一起給藥，用于治療餐后高血糖癥、高血糖、糖尿病、肥胖癥以及需要控制高血糖的病癥。本發(fā)明涉及通過給予受試者腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑的藥物組合物來提供腸道(x-葡萄糖苷酶抑制的方法，所述藥物組合物加入選自丙酮提取物或己烷提取物或提取物本身。本發(fā)明涉及從木蝴蝶中分離出來的木蝴蝶素A和白楊素首次作為腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑的新活性。通過隨附的本發(fā)明，其中圖1表示木蝴蝶素A[5,7-二羥基-6-甲氧基-2-苯基-色烯-4-酮]的化學式。圖2表示白楊素[5,7-二羥基-2-苯基-色烯-4-酮]的化學式。圖3表示黃岑素[5,6，7-三羥基-2-苯基-色烯-4-酮]的化學式。圖4表示甲氧基白楊素[5-羥基-7-甲氧基-2-苯基-色烯-4-酮]的化學式。圖5表示木蝴蝶素八-葡萄糖醛酸甲酯[3,4,5-三羥基-6-(6-甲氧基-4-氧代-2-苯基-4-H-色烯-7-基氧(yoloxy》四氫吡喃-2-羧酸甲酯]的化學式。發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明的目的，本發(fā)明鑒別了一種新來源，即含有大量腸道a-葡萄糖苷酶抑制有效成分的木蝴蝶干燥莖皮。本發(fā)明進一步鑒別了富含腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑的木蝴蝶莖的丙酮提取物和己烷提取物。本發(fā)明進一步證明了上述提取物的用途，所述提取物作為腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑可被施用或給藥，用于控制餐后高血糖癥、糖尿病中的高血糖癥以及相關(guān)的病癥。本發(fā)明進一步證明了上述腸道(X-葡萄糖苷酶抑制劑用以控制肥胖癥中體重增加和便于減輕體重的用途。本發(fā)明從木蝴蝶的己烷提取物中鑒別了大產(chǎn)量(1.0%)混合物，并鑒別到該有效的腸道(X-葡萄糖苷酶抑制混合物包含大約95%分離為木蝴蝶素A(60y。的產(chǎn)率)、白楊素(10%的產(chǎn)率)和黃岑素(25%的產(chǎn)率)的活性成分。此外，本發(fā)明還鑒別了其它的提取物，即丙酮提取物(1.5%的產(chǎn)率)，其含有有效的腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑，并包含木蝴蝶素A(6.7y。的產(chǎn)率)、白楊素(8.3%的產(chǎn)率)、黃岑素(50%的產(chǎn)率)，以及一種新天然出現(xiàn)的鑒定為木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑(13.3M的產(chǎn)率)和另一種鑒定為7-甲氧基白楊素的腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑(16.7。/。的產(chǎn)率)，其首次從木蝴蝶中分離出來。此外本發(fā)明證明了這些a-葡萄糖苷酶抑制劑在病癥方面的用途，其中所述酶的抑制對疾病過程的預防和治療起重要的作用，且不限于本發(fā)明所述的病癥。此外，根據(jù)本發(fā)明的目的，本發(fā)明證明了木蝴蝶素A、白楊素和黃岑素為具有腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑性能的己烷提取物中的主要活性分子。本發(fā)明進一步證明了木蝴蝶素A是比白楊素和黃零素優(yōu)異的腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑，并證明了木蝴蝶素A作為腸道(x-葡萄糖苷酶抑制劑是己烷提取物中的主要活性成分。根據(jù)本發(fā)明的目的，本發(fā)明再一次證明了木蝴蝶的干燥莖皮的丙酮提取物呈現(xiàn)出腸道a-葡萄糖苷酶抑制活性。本發(fā)明證明了在丙酮提取物中存在的木蝴蝶素A、白楊素、黃零素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯作為主要的活性分子呈現(xiàn)出腸道(x-葡萄糖苷酶抑制性質(zhì)。本發(fā)明還首次證明了木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯是木蝴蝶的丙酮提取物中新天然出現(xiàn)的化合物。本發(fā)明的一個特征是，首次從木蝴蝶的丙酮提取物中分離出化合物甲氧基白楊素。本發(fā)明的另一特征是，木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯具有腸道a-葡萄糖苷酶抑制潛力(potential)。本發(fā)明的另一特征是，化合物甲氧基白楊素具有腸道ot-葡萄糖苷酶抑制性質(zhì)。本發(fā)明的另一特征是，木蝴蝶素A、白楊素和黃零素也具有腸道a-葡萄糖苷酶抑制性質(zhì)。本發(fā)明提供了從木蝴蝶中分離木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素或木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯作為腸道a-葡萄糖苷酶抑制劑的方法，所述方法包括以下(l)的步驟。a)用己烷提取木蝴蝶的干燥莖皮，b)過濾提取液以使固體分離出來，c)用含1%甲醇的氯仿對殘余物進行第一次洗脫從而得到木蝴蝶素A，禾口d)用含2%甲醇的氯仿對殘余物(步驟c)進行第二次洗脫從而得到白楊素，和e)用含3%甲醇的氯仿對殘余物(步驟d)進行第三次洗脫從而得到黃岑素。本發(fā)明的進一步目的涉及從木蝴蝶的己垸提取物中分離這三種化合物，即木蝴蝶素A、白楊素和黃岑素。此外，所有這些從木蝴蝶中分離出來的化合物首次表現(xiàn)出腸道(X-葡萄糖苷酶抑制作用。另外，本發(fā)明涉及用丙酮提取木蝴蝶的干燥莖皮，以及分離化合物木蝴蝶素A、白楊素和黃歲素，化合物甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的方法，所述方法包括如下步驟a)對提取物進行處理從而得到殘余物，b)用含1%甲醇的氯仿對殘余物進行第一次洗脫從而得到木蝴蝶素A，和c)用含2%甲醇的氯仿對殘余物(步驟b)進行第二次洗脫從而得到白楊素，禾口d)用含3%甲醇的氯仿對殘余物(步驟C)進行第三次洗脫從而得到黃零素，e)用含4Q/。甲醇的氯仿對殘余物(步驟d)進行第四次洗脫從而得到甲氧基白楊素，f)用含5%甲醇的氯仿對殘余物(步驟e)進行第五次洗脫從而得到木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。本發(fā)明的進一步目的涉及從丙酮提取物中分離這五種化合物，即木蝴蝶素A、白楊素和黃零素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯，并首次顯示出腸道(x-葡萄糖苷酶抑制作用。本發(fā)明進一步涉及從木蝴蝶中分離全新來源的化合物甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。此外，本發(fā)明的另一目的涉及從木蝴蝶中分離第五種化合物即木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯(其為7-0-(3-D吡喃葡萄糖醛酸苷衍生物)為全新化合物。此外，所有這些從木蝴蝶中分離出來的化合物首次表現(xiàn)出腸道(X-葡萄糖苷酶抑制作用。本發(fā)明還將新活性賦予上述提取物，用于控制餐后高血糖癥、糖尿病中的高血糖病癥，并預防和治療涉及抑制(x-葡萄糖苷酶的治療活性的糖尿病和肥胖癥的原因和病程。本發(fā)明進一歩為上述a-葡萄糖苷酶抑制劑在病癥中的應用開辟了途徑，其中抑制a-葡萄糖苷酶對于預防和治療涉及抑制a-葡萄糖苷酶的疾病具有有益作用。本發(fā)明還首次從新來源即木蝴蝶中以大產(chǎn)量分離了黃岑素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。本發(fā)明的另一特征在于，獲自木蝴蝶的木蝴蝶素A具有下述光譜化學和物理性質(zhì)，熔點231-232。C。IR(KBr)vmax3435,2825,1622,1016cm-1。&NMR(200MHz,CDC13+MeOH-d4)(S)7.82-7.86(2H,m，H畫2',6'),7.42-7.56(3H，m，H-3'，4'，5'),6.62(1H,s,H-8),6.58(1H,s，H國3),3.96(3H，s，Ar-OMe)。13C麗R(50固z,DMSOd6)5163.37(C-2),104.46(C-3)，182.31(C-4),152.64(C-5),130.80(C-6),157.62(C-7),94.49(C-8),152.79(C-9),104.71(C-10),131.60(C-l'),126.42(C-2'),129.20(C-3'),132.06(C-4'),60.06(OMe)。EIMS:284100)。在本發(fā)明的另一具體實施方案中，獲自木蝴蝶的白楊素具有下述光譜化學和物理性質(zhì)，熔點285-286°C。IR(KBr)vmax3450,2925,1626,1024cm"。&麗R(400MHz,CDC13+MeOH-d4)(S)7.82-7.92(2H，m,H-2',6'),7.44-7.58(3H，m,H-3',4',5'),6.64(1H,s,H-8),6.44(1H,s,H-3):6.24(1H,s,H-6)。13CNMR(50MHz,DMSOd6)S163.0(C-2),105.0(C-3),181.6(C隱4),161.5(C-5),99.0(C-6)，164.3(C-7),94.0(C-8),157.3(C-9),104.0(C-IO)，138.7(C-l'),126.1(C誦2')，128.8(C-3')，131.6(C-4'),128.8(C-5'),126.1(C隱6')。EIMS:Nf254。在本發(fā)明的另一具體實施方案中，獲自木蝴蝶的黃岑素具有下述光譜化學和物理性質(zhì)，熔點223-226°C。IR(KBr)vmax3450,2920,1622,1024cm"。NMR(400MHz,CDC13+CDC13)(5)7.82-7.98(2H,m，H-2',6')，7.44-7.60(3H,m，H隱3',4',5'),6.62(1H，s，H-8),6.58(1H,s,H畫3)。13C畫R(50MHz,DMSOd6)5162.9(C-2)，104.5(C-3),182.1(C-4),147.0(C畫5),129.3(C畫6),153.7(C陽7)，94.0(C-8)，149.9(C-9)，104.3(C-10),131.0(C-r),126.2(C國2'),129.0(C畫3'),131.7(C-4'),129.0(C-5'),126.2(C-6)。EIMS:270(M+,100)。在本發(fā)明的另一具體實施方案中，獲自木蝴蝶的甲氧基白楊素具有下述光譜化學和物理性質(zhì)，熔點164。C。(KBr)vmax3450,2925,1654,1621，1016cm"。&雨R(200MHz,CDC13)(5)13.0(1H,s,OH-5),7.82-7.96(2H，m,H-2',6'):7.44-7.60(3H，m，H-3',4',5'),6.62(1H,s,H誦8)，6.60(1H，s,H-3),6.58(1H，s,H-6),3.96(3H,s,OMe)。13CNMR(300MHz,CDC13)(S)164.08(C-2)，105.04(C-3),182.88(C-4),164.08(C隱5)，93.97(C誦6),153.31(C-7),93.97(C誦8),153.31(C-9),105.50(C-10),130.96(C-l'),126.24(C-2'),128.88(C-3'),131.26(C-4'),128.88(C畫5')，126.24(C匿6')，60.63(Ar-OMe)。EIMS:192(M+，100)。在本發(fā)明的另一具體實施方案中，獲自木蝴蝶的木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯具有下述光譜化學和物理性質(zhì)，熔點201。C。UVwx(MeOH)345,285nm。IR(KBr)vmax3395，29241735(酯-CK))，1618(-C=0),1461,1359，1224,1076cm隱1。&麗R(200MHz,DMSO-d6)(5)12.78(1H,s，OH-5),7.90-8.0(2H，m,H畫2'，6')，67.48-7.60(3H,m,H-3',4'，5')，6.84(1H，s，H畫8),6.80(1H,s,H-3),3.4-5.50(m，糖質(zhì)子)，3.78(3H,s,OMe),3.82(3H,s,Ar-OMe)。13C畫R(300MHz,DMSO-d6)⑨163.72(C-2),104.95(C-3),182.37(C-4),152.52(C-5)，132.04CC-6),156.08(C-7),94.07(C-8),152.17(C-9),106.12(C-IO)，130.59(C畫r)，126.35(C-2',6'),129.03(C-3'，5'),132.06(C-4'),99.49(C-1"),75.60(C-2")，75.25(C-3"),72.77(C畫4"),71.18(C-5"),168,96(C-6"),60.21(Ar-OMe)，51.81(OMe)。EIMS:475100)。具體實施例方式以下實施例以舉例說明的方式給出，因而不應該將其解釋為限制本發(fā)明的范圍。實施例1實驗方案分離木蝴蝶素A、白楊素和黃岑素的方法。首先在索氏提取器中用汽油脫脂干燥的粉狀莖皮(200克)。對己垸提取液進行過濾后得到嫩黃色粉狀固體。用裝有60厘米高硅膠(60-120目)的3.5厘米直徑的色譜柱對固體(2克)進行色譜分析。用含1%甲醇的氯仿連續(xù)洗脫色譜柱從而得到木蝴蝶素A。木蝴蝶素A的產(chǎn)量為大約1.2克。用含2%甲醇的氯仿進一步洗脫色譜柱從而得到白楊素。白楊素的產(chǎn)量為大約0.2克。用含3%甲醇的氯仿進一歩洗脫色譜柱從而得到黃岑素。黃岑素的產(chǎn)量為大約0.5克。在諸如木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素和未鑒定化合物的己垸部分中，三個活性化合物與未鑒定化合物的比例為下述比例60:10:25:5.0。分離甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的方法用己垸和丙酮連續(xù)提取干燥的粉狀莖皮(200克)。通過蒸發(fā)丙酮提取液得到褐色的殘余物(3克)。用裝有60厘米高硅膠(60-120目)的3.5厘米直徑的色譜柱對殘余物進行色譜分析。除了木蝴蝶素A、白楊素和黃岑素之外，按如下方法分離出另兩種化合物，即甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。用含1%甲醇的氯仿連續(xù)洗脫色譜柱從而得到木蝴蝶素A。木蝴蝶素A的產(chǎn)量為大約0.2克。用含2%甲醇的氯仿進一步洗脫色譜柱從而得到白楊素。白楊素的產(chǎn)量為大約0.25克。用含3%甲醇的氯仿進一步洗脫色譜柱從而得到黃岑素。黃岑素的產(chǎn)量為大約1.5克。用含4%甲醇的氯仿連續(xù)洗脫色譜柱從而得到甲氧基白楊素。甲氧基白楊素的產(chǎn)量為大約0.5克。用含5%甲醇的氯仿進一步洗脫色譜柱從而得到木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的產(chǎn)量為大約0.4克。所有上述化合物的分離純度為95%。在諸如木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素、木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯和未鑒定化合物的丙酮部分中，五種活性化合物與未鑒定化合物的比例為下述比例6.7:8.3:50:16.7:13.3:5.0。所有上述化合物的石化(petrochemical)和物理性質(zhì)如先前所述。實施例2:測定腸道Ot-葡萄糖苷酶抑制活性對生理鹽水中的鼠腸道丙酮粉末(sigmachemicals,USA)(其比例為100:l(重量/體積))進行適當?shù)爻暦鬯?。將?5°C以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘后獲得的上清液處理成哺乳動物腸道a-葡萄糖苷酶的粗來源。將由提取物或者分子(在DMSO中5毫克/毫升)制得的10微升試樣在100微升的100mM磷酸鹽緩沖液(pH6.8)中用50微升的粗酶培養(yǎng)5分鐘。然后加入50微升的基質(zhì)(5mM，在緩沖液中制得的對-硝基苯ot-D-吡喃葡萄糖苷)。培養(yǎng)5分鐘后，用分光光度法在405nm下讀取釋放的對-硝基苯酚。為了對照和空白讀數(shù)，在試樣處加入10微升的DMSO且在基質(zhì)處加入50微升緩沖液。為了補償來自有色化合物的干擾，制備單獨的空白樣品，并由此評價分光光度讀數(shù)，百分抑制率的計算公式如下G試樣的吸光度)::100、對照品的吸光度jx且通過對試樣濃度進行系列稀釋而獲得的數(shù)據(jù)應用合適的回歸分析來計算試樣的50。/。抑制濃度(IC50)。每個試樣和其它對照品均為一式三份。表l化合物的腸道Ol-葡萄糖苷酶抑制活性<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>權(quán)利要求1、植物木蝴蝶的α葡萄糖苷酶抑制活性部分。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的(x葡萄糖苷酶抑制活性部分，所述活性部分選自植物木蝴蝶的己烷或丙酮提取物。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的a葡萄糖苷酶抑制活性部分，其中植物木蝴蝶的己垸提取物包含活性化合物木蝴蝶素A、白楊素和黃岑素，以及未鑒定的化合物，比例為大約60:10:25:5.0(重量％)。4、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的a葡萄糖苷酶抑制活性部分，其中丙酮提取物包含活性化合物木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素、木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯以及未鑒定的化合物，比例為大約6.7:8.3:50:16.7:13.3:5.0淳量％)。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性部分，其中木蝴蝶的己烷/丙酮提取物的體外a-葡糖苷酶的抑制活性IC5G為84至125微克/毫升。6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性部分，其中植物木蝴蝶的己垸部分表現(xiàn)出的體外a-葡糖苷酶抑制活性ICso為大約85微克/毫升。7、根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性部分，其中植物木蝴蝶的丙酮提取物表現(xiàn)出的體外(x-葡糖苷酶抑制活性IQ。為大約124微克/毫升。8、一種從植物木蝴蝶的己烷和/或丙酮提取物中分離a葡萄糖苷酶抑制活性化合物的方法，所述方法包括用汽油脫脂木蝴蝶的干燥莖皮，然后用己烷和/或丙酮進行提取，過濾所得的己烷或丙酮提取液以獲得殘余物，接著在色譜柱中用含1-5%甲醇的氯仿洗脫所得殘余物，從而得到所需的a葡萄糖苷酶抑制活性化合物木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中從植物木蝴蝶的己烷提取物中分離(X葡萄糖苷酶抑制活性化合物的方法包括下列步驟a)用汽油脫脂木蝴蝶的干燥莖皮，然后用己垸進行提取，濃縮和過濾所得的己烷提取液以獲得殘余物，b)在色譜柱中用約含1。/。甲醇的氯仿對在步驟(a)中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得木蝴蝶素A及殘余物，c)用含2y。甲醇的氯仿對在步驟(b)中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得白楊素，且d)用含3%甲醇的氯仿對剩余的殘余物進一步進行洗脫，從而獲得黃岑素。10、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中從植物木蝴蝶的丙酮提取物中分離a葡萄糖苷酶抑制活性化合物的方法包括下列步驟.-a)用汽油脫脂木蝴蝶的干燥莖皮，然后分別用己垸和丙酮連續(xù)提取，蒸發(fā)所得的丙酮提取液以獲得褐色的殘余物，b)在色譜柱中用約含1。/。甲醇的氯仿對在步驟(a)中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得木蝴蝶素A及殘余物，c)用含2M甲醇的氯仿對在步驟(b)中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得白楊素和殘余物d)用含3%甲醇的氯仿對在步驟(。中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得黃岑素e)用含4%甲醇的氯仿對在步驟("中得到的殘余物進行洗脫，從而獲得甲氧基白楊素，且f)用含5%甲醇的氯仿對剩余的殘余物進行洗脫，從而獲得木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。11、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中用己垸提取干燥莖皮所得木蝴蝶素A的產(chǎn)率為大約60%。12、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中用己烷提取干燥莖皮所得白楊素的產(chǎn)率為大約10%。權(quán)利要求書第3/4頁13、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中用己垸提取干燥莖皮所得甲氧基白楊素的產(chǎn)率為大約13.3%。14、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中用己垸提取干燥莖皮所得木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的產(chǎn)率為大約16.7%。15、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所得cx-葡萄糖苷酶抑制活性化合物的純度為大約95%。16、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述木蝴蝶素A的體外a-葡萄糖苷酶抑制活性IC5Q為25.90微克/毫升。17、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述白楊素的體外a-葡萄糖苷酶抑制活性IC5。為57.59微克/毫升。18、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述黃岑素的體外ct-葡萄糖苷酶抑制活性ICs。為38.71微克/毫升。19、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述甲氧基白楊素的體外a-葡萄糖苷酶抑制活性IC5。為95.39.71微克/毫升。20、根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的體外a-葡萄糖苷酶抑制活性K^為97.31微克/毫升。21、一種藥物組合物，所述藥物組合物包含木蝴蝶的己烷和/或丙酮部分或者選自木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素、木蝴蝶苷甲酯或其混合物的a葡糖苷酶抑制活性化合物，并任選地包含藥學上可接受的載體、輔助劑和/或稀釋劑。22、a葡萄糖苷酶抑制化合物在受試者中的用途，所述用途包括將木蝴蝶本身的己烷和/或丙酮提取物或者自上述提取物中分離出來的選自木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素或木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯的活性化合物，任選地連同藥學上可接受的載體、輔助劑和/或稀釋劑一起給藥，用于治療餐后高血糖癥、高血糖癥、糖尿病、肥胖癥以及需要控制高血糖的病癥。全文摘要本發(fā)明提供了從印度藥用植物木蝴蝶中分離的α-葡萄糖苷酶抑制劑。具體而言，本發(fā)明提供了木蝴蝶的己烷和丙酮部分，其中所述己烷部分包含α-葡萄糖苷酶活性化合物木蝴蝶素A、白楊素和黃岑素，所述丙酮部分包含化合物木蝴蝶素A、白楊素、黃岑素、甲氧基白楊素和木蝴蝶素A-葡萄糖醛酸甲酯。本發(fā)明還涉及自上述木蝴蝶的己烷和丙酮部分中分離α-葡萄糖苷酶抑制活性化合物的方法。本發(fā)明還提供了有效的腸道α-葡萄糖苷酶抑制劑作為活性成分的用途，其可在藥物、食品、健康食品和專門保健食品中用作抗高血糖劑從而預防和治療餐后高血糖癥、糖尿病中的高血糖癥及相關(guān)病癥、肥胖癥以及需要控制高血糖和抑制α-葡萄糖苷酶活性的病癥。文檔編號A61K36/185GK101394858SQ200780007985公開日2009年3月25日申請日期2007年2月20日優(yōu)先權(quán)日2006年2月21日發(fā)明者A·K·蒂瓦里,A·Z·阿里,B·S·薩思特里,H·B·塔皮帕卡,J·M·拉奧,J·S·亞達夫,P·K·索亞德瓦,S·B·卡穿干達,V·S·普萊拉申請人:科學與工業(yè)技術(shù)研究委員會