專利名稱：透析患者用血液診斷方法和透析機(jī)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種使用從透析患者收集的血液進(jìn)行診斷和檢測的 方法，以及適用于該方法的透析機(jī)。
背景技術(shù)：
在使用透析機(jī)(例如，參見專利文獻(xiàn)l)的透析過程中，必須選 擇適合患者狀況的透析膜、必須確定患者的原發(fā)病、并且必須通過觀 察透析后的預(yù)后以及監(jiān)控諸如傳染性疾病和營養(yǎng)不良之類的并發(fā)癥 危險(xiǎn)來確定臨床進(jìn)展。由于透析患者在排泄及清除肌體廢物方面的功 能非常差，并且在血液透析后存在由透析導(dǎo)致的人工偏差，因此很難 通過使用與正常人相同規(guī)模的試驗(yàn)精確地弄清臨床結(jié)果。因此，為了 弄清透析患者的臨床進(jìn)展，除了監(jiān)控尿液體積、體重、肌肉質(zhì)量、血 液的生化試驗(yàn)和清除廢物的時(shí)間之外，可以使用(例如)下述的臨床
參數(shù)(1)到(3)作為診斷標(biāo)志。
(1) 清除率/小時(shí)(URRlhr)
在血液流速為大于或等于200 ml/分鐘的情況下，尿素氮的每小 時(shí)清除率優(yōu)選為30%或更高。當(dāng)清除率高于30%時(shí)，需要對透析治療 進(jìn)行調(diào)整(基于Seventh Japanese HDF Academy的研究結(jié)果)。
(2) 肌酸酐產(chǎn)生率(％CrGR)
對于透析患者而言，肌酸酐產(chǎn)生率的目標(biāo)值為100%或更高，對 于糖尿病透析患者而言，該目標(biāo)值為90%或更高。必需通過合適地?cái)z 入蛋白質(zhì)或進(jìn)行鍛煉來激活肌肉的新陳代謝并提高o/oCrGR。 .(3)標(biāo)準(zhǔn)透析劑量(Kt/V)
人們認(rèn)為必須有效地清除尿毒素以取得優(yōu)異的臨床表現(xiàn)。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn) 透析劑量(Kt/V)為0.8或更低時(shí)，流行率因尿毒素的存在而增加； 當(dāng)該劑量為0.9到1.5時(shí)，流行率連續(xù)降低。當(dāng)所述劑量大于1.5時(shí)，
積聚在細(xì)胞或組織中的尿毒素向血管中的移動變差，并且從全身清除 的尿毒素的量減少。因此，由于在透析中循環(huán)動態(tài)變得不穩(wěn)定，并由 此不能維持充足的透析劑量，從而使尿毒癥的病理學(xué)狀況惡化。日本未審查專利申請公開No. 9-10301 [專利文獻(xiàn)2]日本未審查專利申請公開No. 2005-37368
然而，為了獲得診斷標(biāo)志，需要以多個(gè)臨床數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)進(jìn)行大量 的復(fù)雜的計(jì)算。獲取臨床數(shù)據(jù)的操作或者引入以臨床數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)的臨 床標(biāo)志的操作是復(fù)雜的，因此從簡便的角度考慮，這就產(chǎn)生了問題。 在每個(gè)醫(yī)療中心，選擇診斷標(biāo)志的詳情都被作為是專有的技術(shù)。通常， 透析患者會由于原發(fā)病的差異而表現(xiàn)出不同的臨床進(jìn)展。因此，通常 難以選擇適合透析患者的透析膜或是設(shè)定適合透析患者的透析條件。 因此需要一種簡便且普通、并且在現(xiàn)場可以容易地使用的診斷標(biāo)志； 并且還需要使用該診斷標(biāo)志的方法。特別地是，需要在合適的時(shí)間更 換透析膜，因此選擇透析膜的更換時(shí)間和選擇透析膜是困難的。因此， 當(dāng)開發(fā)出一種用于獲得作為選擇透析膜的種類和更換時(shí)間的指標(biāo)的 診斷信息的方法時(shí)，這將極大地有助于進(jìn)行有效的透析治療。
然而，人們己經(jīng)證明指示患者營養(yǎng)狀況的諸如PEM (蛋白質(zhì)能 量營養(yǎng)不良)之類的因素對于控制血液透析治療的臨床效果非常重 要。但是，已經(jīng)報(bào)道諸如PEM之類的因素與常規(guī)的諸如標(biāo)準(zhǔn)透析劑 量(Kt/V)之類的診斷標(biāo)志具有負(fù)相關(guān)性。因此，除了常規(guī)的診斷標(biāo) 志，需要開發(fā)一種指示營養(yǎng)狀況的新指標(biāo)。已經(jīng)報(bào)道多種炎癥細(xì)胞因 子與患有腎衰竭晚期患者的尿毒癥的病理狀況的惡化有關(guān)。因此，當(dāng) 找到與炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生具有相關(guān)性并且有助于透析治療的診斷 標(biāo)志時(shí)，就可以優(yōu)化透析治療或評價(jià)臨床效果。
發(fā)明概述
本發(fā)明的目的是提供血液診斷和檢測的方法，其使用簡便且普 通、并有助于透析治療和臨床效果評價(jià)的診斷標(biāo)志。
根據(jù)本發(fā)明的一方面提供一種血液診斷方法，該方法包括以下步 驟(1)在透析前和/或透析后從透析患者收集血液樣品；(2)從所收集
的血液樣品中提取mRNA;以及(3)對在透析前和/或透析后的、所提 取的mRNA進(jìn)行基因表達(dá)譜處理。
在該血液診斷方法中，可以通過使用DNA微陣列或?qū)崟r(shí)PCR對 一種或多種預(yù)定基因的表達(dá)產(chǎn)物實(shí)施所述的步驟(3)。
在該血液診斷方法中， 一種或多種基因的表達(dá)產(chǎn)物可以包括以下 物質(zhì)中的至少一種(a)在原發(fā)病患者體內(nèi)的表達(dá)水平與正常人體內(nèi)的 表達(dá)水平明顯不同的物質(zhì)；(b)表達(dá)水平隨患者健康狀況的嚴(yán)重程度而 顯著變化的物質(zhì)；(c)在透析前和/或透析后表達(dá)水平隨透析過程中使 用的透析膜的類型而顯著變化的物質(zhì)；(d)預(yù)后表達(dá)水平顯著變化的物 質(zhì)。
在該血液診斷方法中，其中，使所述透析患者的血液流入透析器 中，通過使用從所述透析器中適當(dāng)分支出至該透析器外部的管子，來 實(shí)施所述步驟(l)中的血液樣品的收集。
在該血液診斷方法中，可以通過使用整體式盒實(shí)施所述的步驟(2) 和(3)，所述的整體式盒具有從血液中提取mRNA的裝置、具有從血 液中檢測mRNA的裝置、并且具有為了運(yùn)行所述裝置而通過流道彼 此連接的單獨(dú)的室。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面提供一種血液檢測方法，該方法包括以下 步驟(A)從在透析前和/或透析后從患者收集的血液樣品中提取 mRNA;以及(B)對在透析前和/或透析后的、所提取的mRNA進(jìn)行基 因表達(dá)譜處理。
在該血液檢測方法中，可以通過使用DNA微陣列或?qū)崟r(shí)PCR對 一種或多種預(yù)定基因的表達(dá)產(chǎn)物實(shí)施所述的步驟(B)。
在該血液檢測方法中，所述的一種或多種基因的表達(dá)產(chǎn)物可以包 括以下物質(zhì)中的至少一種(a)在原發(fā)病患者體內(nèi)的表達(dá)水平與正常人 的表達(dá)水平明顯不同的物質(zhì)；(b)表達(dá)水平隨患者健康狀況的嚴(yán)重程度 而顯著變化的物質(zhì)；(c)在透析前和/或透析后表達(dá)水平隨透析過程中 使用的透析膜的類型而顯著變化的物質(zhì)；(d)預(yù)后表達(dá)水平顯著變化的 物質(zhì)。
在該血液檢測方法中，可以通過使用整體式盒實(shí)施所述的步驟(A)和(B)，該整體式盒具有從血液中提取mRNA的裝置、具有從血液中 檢測mRNA的裝置、并且具有為了運(yùn)行所述裝置而通過流道彼此連 接的單獨(dú)的室。
本發(fā)明還提供一種透析機(jī)，其包括用于使血液從透析患者流出 的流入管、與該流入管連接的透析器、用于使血液從該透析器中流入 透析患者的流出管、以及通過閥從所述流入管分支出來的血液樣品收 集管。
在該透析機(jī)中，基因分析儀可以被連接到血液樣品收集管上。在 該透析機(jī)中，基因分析儀可以包含整體式盒，該整體式盒具有從血液 中提取mRNA的裝置、具有從血液中檢測mRNA的裝置、并且具有
為了運(yùn)行所述裝置而通過流道彼此連接的單獨(dú)的室。
在根據(jù)本發(fā)明的血液診斷和檢測方法中，由于對在透析前和/或
透析后所收集的血液樣品進(jìn)行基因表達(dá)譜處理，因此可以做出能夠容 易地弄清透析的臨床進(jìn)展或精確地選擇透析中使用的膜的種類的診 斷和檢測。
由于根據(jù)本發(fā)明的透析機(jī)被設(shè)置為這樣的方式從用于使對患者 收集的血液樣品流入透析器的管子來收集血液樣品，所以可以利用在 透析中對患者不造成負(fù)擔(dān)的因表達(dá)圖譜處理來做出診斷和檢測。
附圖簡要說明


圖1是示出透析機(jī)構(gòu)造的圖。
發(fā)明詳述
下面將說明根據(jù)本發(fā)明一方面的血液診斷方法。
本發(fā)明基于這樣的事實(shí)在透析患者透析前和/或透析后的血液
樣品中，特定mRNA組的圖譜與常規(guī)診斷標(biāo)志的數(shù)量變化和性質(zhì)變 化存在相關(guān)性。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)通過縮小mRNA組的范圍使其與常 規(guī)診斷標(biāo)志之間的相關(guān)性增強(qiáng)，從而可以獲得臨床狀況和基因診斷信 息之間有用的相關(guān)性數(shù)據(jù)。通過使用與患者的原發(fā)病或特定的臨床參 數(shù)具有高的相關(guān)性的mRNA組作為診斷標(biāo)志，可以提供一種能夠獲得影響透析的臨床進(jìn)展或所需的治療方法的信息的診斷和檢測方法。
在下面的過程中實(shí)施根據(jù)所述實(shí)施方案的血液診斷方法。步驟 (1):在透析前和/或透析后從透析患者收集血液樣品。隨后，步驟(2): 從所收集的血液樣品中提取mRNA。最后，步驟(3):對在透析前和/ 或透析后的、所提取的mRNA進(jìn)行基因表達(dá)譜處理。
在該血液診斷方法中，可以通過使用DNA微陣列或?qū)崟r(shí)PCR對 一種或多種預(yù)定基因的表達(dá)產(chǎn)物實(shí)施所述的步驟(3)。所述的一種或多 種基因的表達(dá)產(chǎn)物可以包括以下物質(zhì)中的至少一種(a)在原發(fā)病患者 體內(nèi)的表達(dá)水平與正常人體內(nèi)的表達(dá)水平明顯不同的物質(zhì)；(b)表達(dá)水 平隨患者健康狀況的嚴(yán)重程度而顯著變化的物質(zhì)；(c)在透析前和/或 透析后表達(dá)水平隨透析過程中使用的透析膜的類型而顯著變化的物 質(zhì)；(d)預(yù)后表達(dá)水平顯著變化的物質(zhì)。
這樣，在該血液診斷方法中，使用血液中的特定mRNA組作為 標(biāo)志(要診斷的基因表達(dá)產(chǎn)物)?？梢詮母鞣N觀點(diǎn)出發(fā)來選擇用作標(biāo) 志的基因(表達(dá)產(chǎn)物)組。例如，在慢性肝炎患者組的血液樣品中， 將受透析正調(diào)控的基因組和受透析負(fù)調(diào)控的基因組預(yù)先確定為"慢性 肝炎生物標(biāo)志"，并可將這些標(biāo)志用于本發(fā)明中?；谧鳛镈NA微 陣列或?qū)崟r(shí)PCR探針的基因組的序列，通過使用該探針將透析前和/ 或透析后從患者體內(nèi)收集的血液樣品制成圖譜，則該標(biāo)志可有效地用 于診斷。在這種情況下，可將不會因透析而發(fā)生性質(zhì)變化的一種或多 種基因序列的探針用作對照探針。
類似地，通過將患有腎疾病的糖尿病患者組的特定基因組或患有 腎病患者組的特定基因組預(yù)先確定為"腎性糖尿病生物標(biāo)志"或"腎 病生物標(biāo)志"，則這些標(biāo)志可用于根據(jù)本發(fā)明的診斷方法中。通過將 這些標(biāo)志物制成圖譜，可以估計(jì)出健康狀況或原發(fā)病的嚴(yán)重程度。
當(dāng)在根據(jù)本發(fā)明的診斷方法中預(yù)先選擇與現(xiàn)有臨床參數(shù)有較高 相關(guān)性的基因組并且對該基因組表達(dá)譜進(jìn)行制圖時(shí)，則使用基因組表 達(dá)譜處理而無需使用臨床參數(shù)就可以做出診斷。另外，通過對與肌酸 酐產(chǎn)生率(一種臨床參數(shù)，用作確定治療效果或患者營養(yǎng)狀況的指標(biāo)) 相關(guān)的基因組進(jìn)行基因表達(dá)譜處理，可以確定患者的營養(yǎng)狀況。類似
地，在根據(jù)本發(fā)明的診斷方法中，與其它用作常規(guī)臨床參數(shù)的指標(biāo)相 關(guān)的基因組也可以用作基因表達(dá)譜處理的目標(biāo)基因。
通過對與指示營養(yǎng)狀況(例如PEM(蛋白質(zhì)能量營養(yǎng)不良))的指 標(biāo)相關(guān)的基因組進(jìn)行基因表達(dá)譜處理，可以實(shí)施一種基于角度不同于 常規(guī)診斷標(biāo)志的新指標(biāo)的診斷方法。通過對與炎癥細(xì)胞因子相關(guān)的基 因組進(jìn)行基因表達(dá)譜處理，可以弄清腎衰竭晚期患者的尿毒癥的病理 狀況。通過對與諸如肺炎和老年支氣管炎之類的傳染性疾病相關(guān)的基 因組進(jìn)行基因表達(dá)譜處理，可以弄清這些疾病的發(fā)展趨勢。
通過對表達(dá)水平隨所用透析膜的種類的不同而顯著變化的一種 或多種基因進(jìn)行基因表達(dá)譜處理，可以將根據(jù)本發(fā)明的診斷方法用作 選擇透析膜的方法。
可以根據(jù)普通的統(tǒng)計(jì)學(xué)技術(shù)選擇在根據(jù)本發(fā)明的診斷方法中使 用的一種或多種基因的表達(dá)產(chǎn)物。通過將患者的圖譜數(shù)據(jù)(通過利用 所選擇的特定基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行基因表達(dá)譜處理而得到)反饋給其 它的臨床數(shù)據(jù)，可以選擇能夠用于進(jìn)行更精確的診斷的標(biāo)志。如果需 要的話，可以選擇能通過反復(fù)地將結(jié)果反饋給其它臨床數(shù)據(jù)的過程來 提供更精確結(jié)果的標(biāo)志。類似地，還可以增加對應(yīng)于新臨床指標(biāo)的標(biāo) 志或增加對應(yīng)于相同的臨床指標(biāo)的新的標(biāo)志。
通過利用基因診斷系統(tǒng)直接對血液樣品或經(jīng)過預(yù)處理的血液樣 品進(jìn)行基因分析來實(shí)施根據(jù)本發(fā)明的血液診斷方法。該方法具體為 在步驟(l)中，通過利用從透析器中適當(dāng)支出的管來進(jìn)行血液樣品的收 集，其中使透析患者的血液流入透析器，并流至該透析器的外部。在 步驟(2)和(3)中，使用整體式盒對所收集的血液樣品進(jìn)行處理和檢測，
該整體式盒具有從血液中提取mRNA的裝置、具有從血液中檢測 mRNA的裝置、并且具有為了運(yùn)行所述裝置而通過流道彼此連接的單 獨(dú)的室。
專利文獻(xiàn)2公開了可用于根據(jù)本發(fā)明的血液診斷方法的整體式盒的例子。
在根據(jù)本發(fā)明的血液診斷方法中，通過預(yù)先選擇與臨床數(shù)據(jù)相關(guān) 的mRNA標(biāo)志可獲得下列優(yōu)點(diǎn)。(l)可以選擇對應(yīng)于患者狀況的透析
膜。由于通過mRNA標(biāo)志可以快速地做出診斷，所以可以精確地選 擇合適的透析膜并使透析治療達(dá)到最優(yōu)。(2)容易發(fā)現(xiàn)慢性透析患者的 原發(fā)病。(3)可以獲得反映個(gè)體差異的診斷評價(jià)和透析治療。(4)可以 預(yù)防諸如感染性疾病之類的并發(fā)癥。通過使用作為并發(fā)癥指標(biāo)的 mRNA標(biāo)志可以獲得使用常規(guī)診斷標(biāo)志不能獲得的與并發(fā)癥有關(guān)的 評價(jià)、或合適的透析治療。(5)通過確定病因可以建立合適的治療計(jì)劃。 例如，使用對應(yīng)于臨床數(shù)據(jù)的mRNA標(biāo)志，可以確定慢性腎炎、源 自糖尿病的腎病等。(6)可以確定患者的營養(yǎng)狀況。如上所述，通過將 與指示營養(yǎng)狀況的指標(biāo)(例如PEM)有關(guān)的基因組用作mRNA標(biāo)志， 可以隨著營養(yǎng)狀況的改善而提高健康狀況。(7)由于通過對臨床數(shù)據(jù)和 mRNA圖譜的相關(guān)性進(jìn)行累積，發(fā)現(xiàn)了患者的原發(fā)病或健康狀況與經(jīng) 過對患者的透析而產(chǎn)生的治療效果之間的關(guān)系，所以可以合適地確定 透析的起始時(shí)間。因此，.可以使對慢性腎衰竭在預(yù)透析階段的治療持 續(xù)較長的時(shí)間。
在根據(jù)本發(fā)明的血液診斷方法中，由于將作為透析目標(biāo)的血液用 作樣品，所以，與使用其它臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行的診斷相比，本發(fā)明的方法 可以更直接有效地確定透析效果。由于透析效果快速地反映于血液樣 品中，所以可以迅速地做出診斷。
由于mRNA選自血液中的粒細(xì)胞(嗜中性粒細(xì)胞)、而作為目 標(biāo)物的mRNA的產(chǎn)生是在血液通過M析膜時(shí)因刺激而促進(jìn)的，所以 可以更有效地進(jìn)行基因處理。
在根據(jù)本發(fā)明的血液診斷方法中，可以通過合適地選擇mRNA 標(biāo)志來確定患者的炎癥狀況、營養(yǎng)狀況和肌肉分解狀況?？梢源_定炎 癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生狀況，并由此來確定紅細(xì)胞生成素的不應(yīng)性、胰島 素抵抗性以及脂肪組織細(xì)胞因子的異常分泌。
除了該血液診斷方法，本發(fā)明還提供了血液檢測方法。該血液檢 測方法包括(A)從在透析前和/或透析后從患者收集的血液樣品中提 取mRNA;以及(B)對在透析前和/或透析后的、所提取的mRNA進(jìn)行 基因表達(dá)譜處理。類似于根據(jù)本發(fā)明的血液診斷方法，通過使用DNA 微陣列或?qū)崟r(shí)PCR，對一種或多種預(yù)定基因的表達(dá)產(chǎn)物實(shí)施所述的步
驟(B)。所述的一種或多種基因的表達(dá)產(chǎn)物可以包括以下物質(zhì)中的至
少一種(a)在原發(fā)病患者體內(nèi)的表達(dá)水平與正常人體內(nèi)的表達(dá)水平明 顯不同的物質(zhì)；(b)表達(dá)水平隨患者健康狀況的嚴(yán)重程度而顯著變化的 物質(zhì)；(C)在透析前和/或透析后表達(dá)水平隨透析過程中使用的透析膜 的類型而顯著變化的物質(zhì)；(d)預(yù)后表達(dá)水平顯著變化的物質(zhì)。可以通 過使用整體式盒實(shí)施所述的步驟(A)和(B)，該整體式盒具有從血液中 提取mRNA的裝置、具有從血液中檢測mRNA的裝置、并且具有為 了運(yùn)行所述裝置而通過流道彼此連接的單獨(dú)的室。 圖1是示出根據(jù)本發(fā)明的透析機(jī)構(gòu)造的圖。
根據(jù)本發(fā)明的透析機(jī)包括流入管，使血液從透析患者流出；透 析器，與流入管連接；流出管，使血液從透析器流入透析患者；以及 血液樣品收集管，其通過閥由流入管分支出來。在該透析機(jī)中，基因 分析儀可以與血液樣品收集管連接。在該透析機(jī)中，基因分析儀可包 括整體式盒，該整體式盒具有從血液中提取mRNA的裝置、具有從 血液中檢測mRNA的裝置、并且具有為了運(yùn)行所述裝置而通過流道 彼此連接的單獨(dú)的室。
由于根據(jù)本發(fā)明的透析機(jī)具有上述構(gòu)造，因此可以直接從透析機(jī) 1中收集血液樣品?；颊叩难和ㄟ^透析機(jī)1的血液輸送器12和透析 器11流回患者體內(nèi)。如圖1所示，用于收集血液樣品的閥13被設(shè)置 于透析器11的前面，因此可以在透析開始或結(jié)束時(shí)通過開啟閥13來 收集用于診斷和檢測的血液樣品。在本發(fā)明中"在透析前和/或透析 后"不但是指在開始全部透析操作前和結(jié)束全部透析操作后收集血液 樣品，而且是指在透析操作過程中按時(shí)間間隔來幾次收集血液樣品。 即，可以在透析過程中收集血液樣品。通過在透析過程中收集血液樣 品，然后通過使用基因分析系統(tǒng)2來檢測所收集的血液樣品，則可以 在透析過程中監(jiān)控患者的狀況。
通過使用圖l所示的透析機(jī)l，可以使所收集的血液樣品達(dá)到最 少，從而減少患者負(fù)擔(dān)。不需花費(fèi)勞動收集血液樣品。透析機(jī)l所收 集的血液樣品可被自動地引入基因分析系統(tǒng)2中。在這種情況下，可
以減少所需的血液樣品的量。
基因分析系統(tǒng)2是由整體式盒(例如，參見專利文獻(xiàn)2)構(gòu)成的。
由于該整體式盒能夠自動地從血液中提取并檢測mRNA，因此可以減 少由操作者引起的偏差。由于必須的試劑可被設(shè)置在整體式盒中，所 以可以防止試劑的污染。
由于患者的血液樣品中可能含有病毒，對其進(jìn)行處理是很危險(xiǎn) 的。然而，當(dāng)使用整體式盒時(shí)，可以將加工后的樣品和廢物棄置在盒 部件中，因此可以安全地處理血液樣品。
如上所述，在根據(jù)本發(fā)明的血液診斷和檢測方法以及透析機(jī)中， 由于對所收集的血液樣品進(jìn)行的診斷是以mRNA標(biāo)志為基礎(chǔ)的，所 以，可以獲得全面、簡單且有用的診斷結(jié)果。
本發(fā)明不限于上述實(shí)施方案。本發(fā)明可以廣泛地用于在從透析患 者收集的血液的基礎(chǔ)上做出診斷的血液診斷方法中。
權(quán)利要求
1.一種血液診斷方法，該方法包括如下步驟(1)在透析前和/或透析后從透析患者收集血液樣品；(2)從該收集的血液樣品中提取mRNA；以及(3)對在所述透析前和/或所述透析后的、所提取的mRNA進(jìn)行基因表達(dá)譜處理。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血液診斷方法，其中，通過使用DNA 微陣列或?qū)崟r(shí)PCR對一種或多種預(yù)定基因的表達(dá)產(chǎn)物實(shí)施所述的步 驟(3)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的血液診斷方法，其中，所述的一種或 多種基因的表達(dá)產(chǎn)物包括選自以下物質(zhì)中的至少一種(a) 在原發(fā)病患者體內(nèi)的表達(dá)水平與正常人體內(nèi)的表達(dá)水平明顯 不同的物質(zhì)；(b) 表達(dá)水平隨患者健康狀況的嚴(yán)重程度而顯著變化的物質(zhì)；(c) 在所述透析前和/或所述透析后表達(dá)水平隨所述透析過程中 使用的透析膜的類型而顯著變化的物質(zhì)；和(d) 預(yù)后表達(dá)水平顯著變化的物質(zhì)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血液診斷方法，其中，使所述透析患 者的血液流入透析器中，通過使用從所述透析器中適當(dāng)分支出至該透 析器外部的管子，來實(shí)施所述步驟(l)中的血液樣品的收集。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血液診斷方法，其中，通過使用整體 式盒實(shí)施所述的步驟(2)和(3)，該整體式盒具有從血液中提取mRNA 的裝置、具有從血液中檢測mRNA的裝置、并且具有為了運(yùn)行所述 裝置而通過流道彼此連接的單獨(dú)的室。
6. —種血液檢測方法，該方法包括如下步驟(A) 從在透析前和/或透析后從患者收集的血液樣品中提取mRNA;以及(B) 對在所述透析前和/或所述透析后的、所提取的mRNA進(jìn)行 基因表達(dá)譜處理。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的血液檢測方法，其中，通過使用DNA 微陣列或?qū)崟r(shí)PCR對一種或多種預(yù)定基因的表達(dá)產(chǎn)物實(shí)施所述的步 驟(B)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的血液檢測方法，其中，所述的一種或 多種基因的表達(dá)產(chǎn)物包括選自以下物質(zhì)中的至少一種-(a) 在原發(fā)病患者體內(nèi)的表達(dá)水平與正常人體內(nèi)的表達(dá)水平明顯 不同的物質(zhì)；(b) 表達(dá)水平隨患者健康狀況的嚴(yán)重程度而顯著變化的物質(zhì)；(c) 在所述透析前和/或所述透析后表達(dá)水平隨所述透析過程中 使用的透析膜的類型而顯著變化的物質(zhì)；和(d) 預(yù)后表達(dá)水平顯著變化的物質(zhì)。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的血液檢測方法，其中，通過使用整體 式盒實(shí)施所述的步驟(A)和(B)，該整體式盒具有從血液中提取mRNA 的裝置、具有從血液中檢測mRNA的裝置、并且具有為了運(yùn)行所述 裝置而通過流道彼此連接的單獨(dú)的室。
10. —種透析機(jī)，該透析機(jī)包括 流入管，其用于使血液從透析患者流出； 透析器，其與所述的流入管連接；流出管，其用于使所述血液從所述透析器流入所述透析患者;以及血液樣品收集管，其通過閥由所述的流入管分支出來。
11. 根據(jù)權(quán)利要求IO所述的透析機(jī)，其中，基因分析儀與所述 的血液樣品收集管連接。
12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的透析機(jī)，其中，所述基因分析儀包含整體式盒，該整體式盒具有從血液中提取mRNA的裝置、具有從 血液中檢測mRNA的裝置、并且具有為了運(yùn)行所述裝置而通過流道 彼此連接的單獨(dú)的室。
全文摘要
本發(fā)明提供一種血液診斷方法，該方法提供一種普通的并且有助于透析治療和臨床效果評價(jià)的診斷標(biāo)志。該方法包括在透析前和/或透析后從透析患者收集血液樣品的步驟和以mRNA標(biāo)志為基礎(chǔ)對所收集的血液樣品進(jìn)行基因診斷的步驟。以臨床數(shù)據(jù)和mRNA圖譜之間的關(guān)系為基礎(chǔ)預(yù)先確定mRNA標(biāo)志。
文檔編號A61M1/14GK101113477SQ20071012847
公開日2008年1月30日 申請日期2007年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月26日
發(fā)明者一石英一郎, 伊東篤志, 澤井恒治, 石崎允, 福島和久, 青木秀年 申請人:橫河電機(jī)株式會社;國立大學(xué)法人東北大學(xué)