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利用空化混懸萃取分離設(shè)備高效提取假馬齒莧皂苷的方法

文檔序號:1130286閱讀:218來源:國知局

專利名稱::利用空化混懸萃取分離設(shè)備高效提取假馬齒莧皂苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域
:本發(fā)明屬醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域
,它涉及一種植物提取物及其高效提取工藝,具體是以假馬齒莧全草為原料提取假馬齒莧皂苷,可應(yīng)用于抗癌、抗抑郁和治療老年癡呆藥物的制備。
背景技術(shù)
:假馬齒莧(BacopaMonninera(L.)Wettst),又名"白花豬母菜",為雙子葉植物藥玄參科植物假馬齒莧的全草。為l年生匍匍草本,常生于水邊、濕地及沙灘,海拔550650m,主要分布在熱帶和亞熱帶地區(qū)。在國外,印度對其研究的記載較多,在國內(nèi)主要分布于臺灣、福建、廣東、云南及四川等省,中醫(yī)理論中其具有清熱解毒、消炎退腫之功效,用于治療赤目痢疾、目赤腫痛、丹毒、痔瘡中痛、皮膚紅腫等癥狀,在印度醫(yī)藥理論中認(rèn)為假馬齒莧具有安神、增進(jìn)記憶力和智力,促進(jìn)學(xué)習(xí)獲得,并有抗氧化的作用。到目前為止,從假馬齒莧中分離得到20多個化合物,其中以三萜皂苷化合物為主。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了該提取物的高效制備方法和用途。其得率可達(dá)到8%-腦。本發(fā)明的高效提取工藝流程見說明書附圖。附圖中的流程圖的流程說明如下稱取假馬齒莧的全草,經(jīng)過風(fēng)干,超微粉碎后,加入水于超聲波提取器中提取,將提取液濃縮至一定體積,再用活性炭進(jìn)行吸附脫色,接著利用空化混懸萃取分離裝置先用乙酸乙酯萃取,回收乙酸乙酯將水溶液部分用氯仿萃取,接著回收氯仿并將水溶液部分再用正丁醇萃取,回收正丁醇得假馬齒提取物,再以藥理活性檢測結(jié)果為指導(dǎo)進(jìn)行分離純化,得到活性假馬齒莧皂苷單體化合物。實(shí)驗(yàn)研究證明假馬齒莧皂苷對體外人腫瘤細(xì)胞K-562,SHG-44,A-549,HCT-8,PC-3M等細(xì)胞株的生長均有抑制作用;對S180荷瘤小鼠的肉瘤組織也有抑制作用;對抑郁病人和老年癡呆均有明顯的改善作用。假馬齒莧皂苷是有效的治療腫瘤和老年癡呆的藥物。本發(fā)明對假馬齒莧皂苷進(jìn)行了抗腫瘤的評價(jià)實(shí)驗(yàn)。(一)假馬齒莧皂苷對體外人腫瘤細(xì)胞的抑制作用。1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶w外人腫瘤細(xì)胞A-549(肺癌)、MCF-7(乳腺癌)、IA-9(卵巢癌)、CAKI-1(腎癌)、PC-3(前列腺癌)等細(xì)胞株生長的影響。2、方法試驗(yàn)方法為國際通用的SRB法根據(jù)細(xì)胞生長速率,將處于對數(shù)生長期的腫瘤細(xì)胞以90nl/孔接種于96孔培養(yǎng)板,貼壁生長24小時再加藥IOhI/孔。每個濃度設(shè)三復(fù)孔。并設(shè)相應(yīng)濃度的生理鹽水溶媒對照及無細(xì)胞調(diào)零孔。腫瘤細(xì)胞在37°C、5%<:02條件下培養(yǎng)72小時,然后傾去培養(yǎng)液,用10X冷TCA固定細(xì)胞,4t放置1小時后用蒸餾水洗滌5次,空氣干燥。最后加入150|11/孔的Tris溶液,酶標(biāo)儀520nm波長下測定OD值。3、結(jié)果如下表1所示。表1.假馬齒莧皂苷抗人類腫瘤的療效試驗(yàn)結(jié)果(EDso,pg/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>表1的結(jié)果表明,假馬齒莧皂苷對5種不同腫瘤細(xì)胞株均顯示明顯抑制作用。(二)假馬齒莧皂苷對老年癡呆的治療作用。1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?評價(jià)假馬齒莧皂苷對老年癡呆的治療作用D2、方法-取ICR小鼠,雄性,體重20士5g。隨機(jī)分為3組,陰性對照和陽性對照組每次均灌以等體積的生理鹽水,其余1個實(shí)驗(yàn)組先分別給藥7天,末次給藥后,除陰性對照組外,其余各組均用東莨菪堿灌胃10mg/kg,給藥后1小時進(jìn)行跳臺實(shí)驗(yàn)。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果假馬齒莧皂苷(10-50mg/kg)能顯著延長小鼠跳臺潛伏期并使錯誤次數(shù)明顯減少(表2)。_表2假馬齒莧皂苷對小鼠跳臺作用影響_訓(xùn)練5min內(nèi)錯24h后潛伏期3min內(nèi)錯誤次組別P誤次數(shù)(n)(Tl)/s數(shù)(n)陰性組6620.5陽性組17443.2<0.05假馬齒莧皂苷2121.0<0.04、結(jié)論假馬齒莧皂苷具有顯著的治療老年癡呆癥作用和促智活性。具體實(shí)施例實(shí)施例一將500g干燥假馬齒莧Bacopamonnieri丄的全草進(jìn)行超微粉碎,浸泡于5000mL水中,并用超聲波提取技術(shù)提取1次;合并提取液,減壓回流至2000mL左右,得假馬齒莧水提物,用活性碳進(jìn)行吸附脫色;利用空化混懸萃取設(shè)備先用乙酸乙酯萃取,至乙酸乙酯部分基本無色,回收乙酸乙酯;取水部分再用氯仿萃取,至氯仿基本無色,回收氯仿;又取水部分最后用正丁醇萃取,至正丁醇無色,合并正丁醇部分溶液進(jìn)行減壓回流,干燥,即得假馬齒莧皂苷418g,得率為8.56%,皂苷含量39.9%。實(shí)施例二將500g干燥假馬齒莧Bacopamonnieri丄的全草進(jìn)行超微粉碎,浸泡于5000mL水中,并用超聲波提取技術(shù)提取3次;合并提取液,減壓回流至2000mL左右,得假馬齒莧水提物,用活性碳進(jìn)行吸附脫色;利用空化混懸萃取設(shè)備先用乙酸乙酯萃取,至乙酸乙酯部分基本無色,回收乙酸乙酯;取水部分再用氯仿萃取,至氯仿基本無色,回收氯仿;又取水部分最后用正丁醇萃取,至正丁醇無色,合并正丁醇部分溶液進(jìn)行減壓回流,干燥,即得假馬齒莧皂苷45.8g,得率為9,16%,皂苷含量為41.4%。實(shí)施例三取假馬齒莧皂苷100g,用適量注射用水分散,加入輔料適量,混勻,制成顆粒,干燥。按實(shí)施例所得的顆粒劑,按所需劑量分裝于空膠殼中,即得膠囊劑。按實(shí)施例所得的顆粒劑,直接壓片,薄膜包衣,即得片劑。用于治療腫瘤和老年癡呆疾病。實(shí)施例四將假馬齒莧皂苷適量加注射用水分散,噴霧干燥或真空干燥,得假馬齒莧皂苷干粉。取聚乙二醇400,加假馬齒莧皂苷干粉,邊加邊攪拌至勻,采用壓制法,制成軟膠囊。用于治療腫瘤和老年癡呆疾病。實(shí)施例五取假馬齒莧皂苷400mg,加注射用水適量溶解。加甘露醇400mg,按照常規(guī)凍干工藝凍干,即得假馬齒莧皂苷凍干粉。用于治療腫瘤和老年癡呆疾病。權(quán)利要求1、一種從假馬齒莧中高效提取分離假馬齒莧皂苷的方法,其特征在于將干燥假馬齒莧Bacopamonnieri.L的全草進(jìn)行超微粉碎,浸泡于水中,并用超聲波提取技術(shù)提??;合并提取液,減壓回流至一定體積,得假馬齒莧水提物,用活性碳進(jìn)行吸附脫色;利用空化混懸萃取設(shè)備先用乙酸乙酯萃取,取水部分再用氯仿萃取,又取水部分最后用正丁醇萃取,得正丁醇部分進(jìn)行減壓回流,干燥,即得假馬齒莧皂苷。2、按權(quán)利要求所述假馬齒莧的全草,其特征在于假馬齒莧是印度阿育吠陀和中國傳統(tǒng)醫(yī)藥的植物藥,是玄參科一種普遍分布于熱帶、亞熱帶地區(qū)的匍匐、肉質(zhì)、多年生草本植物。3、按權(quán)利要求1所述用超聲波技術(shù)提取,其特征在于利用超聲波產(chǎn)生得強(qiáng)烈振動、高加速度、強(qiáng)烈空化效攪拌作用等,加速假馬齒莧全草的有效成分進(jìn)入水中,這樣就大大提高了提出率,縮短了提取時間,且避免了因長時間提取造成的提取液中含有較多雜質(zhì)。4、按權(quán)利要求1所述空化混懸萃取設(shè)備,其特征在于利用新型的一種結(jié)構(gòu)簡單、快速傳質(zhì)、快速分離、萃取率達(dá)95%以上、廢渣中溶劑殘留在5%以下的空化混懸萃取分離裝置。5、按權(quán)利要求l所述用乙酸乙酯和氯仿萃取,其特征在于去除非假馬齒莧皂苷的成分。6、按權(quán)利要求1所述乙酸乙酯和氯仿萃取部分液體,其特征在于需回收溶劑。7、按權(quán)利要求1所述用正丁醇萃取,其特征在于提取假馬齒莧皂苷。8、按權(quán)利要求1所述假馬齒莧皂苷,其特他在于對te據(jù)藥理藥理活性檢測結(jié)果為指導(dǎo),分離純化得到活性假馬齒莧單體化合物。9、按權(quán)利要求1所述的假馬齒莧皂苷在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。10、按權(quán)利要求1所述的假馬齒莧皂苷在制備抗抑郁的藥物中的應(yīng)用。11、按權(quán)利要求1所述的假馬齒莧皂苷在制備治療老年癡呆病的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種從玄參科植物假馬齒莧(BacopaMonninera)的全草中高效提取假馬齒莧皂苷的工藝。其工藝流程為將干燥假馬齒莧的全草進(jìn)行超微粉碎,浸泡于水中,并用超聲波提取技術(shù)提取;合并提取液,減壓回流至一定體積,得假馬齒莧水提物,用活性碳進(jìn)行吸附脫色;利用空化混懸萃取設(shè)備先用乙酸乙酯萃取,取水部分再用氯仿萃取,又取水部分最后用正丁醇萃取,得正丁醇部分進(jìn)行減壓回流,干燥,即得假馬齒莧皂苷。本發(fā)明中的假馬齒莧皂苷可應(yīng)用于抗癌、抗抑郁和治療老年癡呆藥物的制備。文檔編號A61K36/80GK101172137SQ20071006975公開日2008年5月7日申請日期2007年7月3日優(yōu)先權(quán)日2007年7月3日發(fā)明者軍巫申請人:軍巫
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