專利名稱：草烏甲素作為制備治療原發(fā)性紅斑肢痛癥藥物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于含有有效有機(jī)成分的藥品，特別是以草烏甲素作為治療疾病的 藥品。
背景技術(shù)：
原發(fā)性紅斑肢痛癥系以肢體遠(yuǎn)端陣發(fā)性血管擴(kuò)張，皮膚溫升高、膚色潮紅 和劇烈燒灼樣疼痛為主征的一種植物神經(jīng)系統(tǒng)疾病，本病病因未明，通常判斷 可能與寒冷導(dǎo)致肢端毛細(xì)血管舒縮功能障礙有關(guān)。由于肢端小動(dòng)脈擴(kuò)張，血液 流量顯著增加，局部充血，血管內(nèi)張力增高，壓迫或刺激動(dòng)脈及鄰近神經(jīng)末梢 而產(chǎn)生劇烈疼痛，該病癥在氣溫驟降受寒或長(zhǎng)途行軍等環(huán)境易被誘發(fā)。病癥初
發(fā)時(shí)可采取休息、抬高患肢和局部冷敷減輕疼痛和發(fā)作；較重病情的藥物治療 一般給予阿司匹林650mg每日14次以迅速和持久緩解疼痛，也可用血管收縮 劑，如麻黃素、或普萘洛爾、或二甲麥角新堿(methysergide)來解除疼痛。 細(xì)胞通訊方式揭示神經(jīng)系統(tǒng)傳導(dǎo)疼痛沖動(dòng)是由于動(dòng)作電位從胞體傳至軸突末 端，突觸前膜釋放興奮性遞質(zhì)，經(jīng)過突觸間隙擴(kuò)散并與突觸后膜受體結(jié)合，突 觸后膜瞬間提高對(duì)Na+、 K+，尤其對(duì)Na+的通透性，引起突觸后膜去極化而傳導(dǎo) 疼痛沖動(dòng)。因此，通過阻滯Na+通道，抑制Na+通道通透性，將有助于降^f氐疼痛 反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)表明，在等痛閾值下皮下注射給藥，嗎啡的劑量是草烏曱素的15. 3 -65.5倍，阿司匹林的劑量是草烏曱素的1208-7195倍，草烏曱素顯示出了強(qiáng) 效的鎮(zhèn)痛作用。但對(duì)激活狀態(tài)Na+電流，草烏曱素較為準(zhǔn)確的抑制機(jī)制和作用 尚無(wú)實(shí)驗(yàn)證明，也沒有利用草烏甲素減輕原發(fā)性紅斑肢痛癥相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)尚無(wú)治療原發(fā)性紅斑肢痛癥的專門療效藥物，本發(fā)明目的是依據(jù)草烏 甲素藥理作用機(jī)制，提供一種以草烏曱素作為治療原發(fā)性紅斑肢痛癥的藥物的 應(yīng)用。
本發(fā)明目的以下列方式實(shí)現(xiàn)
作為草烏甲素在治療原發(fā)性紅斑肢痛癥中的應(yīng)用，包括起填充、黏合、崩 解及潤(rùn)滑作用的賦形劑，將草烏甲素與賦形劑混合壓制成片劑。 所述的草烏曱素片劑含草烏甲素O. lmg 0.7 mg /片， 所述的草烏曱素片劑含草烏甲素進(jìn)一步為O.2mg~0.4 mg /片。 該片劑的口服用法及用量為一次一片， 一日2~3次。 本發(fā)明通過以下實(shí)驗(yàn)來論證應(yīng)用草烏曱素治療原發(fā)性紅斑肢痛癥的必然性。
(一)草烏曱素對(duì)野生型NaVl. 7細(xì)胞林鈉電流的影響 l.本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖怯^察不同濃度的草烏甲素10E (-"7) M、 10E (-6) M和10E(-5) M對(duì)野生型NaVl. 7細(xì)胞抹鈉電流的影響。 2.溶液配制
2.1細(xì)胞培養(yǎng)液含10%FBS的高糖DMEM培養(yǎng)基。
2. 2記錄鈉電流的細(xì)胞外液(咖ol/L): NaC1140、 KC13、 MgC121、 CaC121、 HEPESIO、以NaOH調(diào)節(jié)pH至7. 4。
2. 3記錄鈉電流的電極內(nèi)液(,ol/L): CsF140、 NaCllO、 EGTA1、 HEPESIO、 以CsOH調(diào)節(jié)pH至7. 3
3. 實(shí)驗(yàn)方式 3. 1細(xì)胞培養(yǎng)
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染野生型NaVl. 7通道的HEK-293細(xì)胞林，置于37X:、 5%C02的孵 箱內(nèi)，以含1(WFBS的高糖DMEM進(jìn)行培養(yǎng)，并加入終濃度為0. 4g/L的G418維 持抗性，于電生理實(shí)驗(yàn)前18-48小時(shí)接種至35mm培養(yǎng)皿內(nèi)。
3. 2全細(xì)胞膜片鉗記錄
將培養(yǎng)液置換為記錄鈉電流所用的細(xì)胞外液，于顯微鏡下選擇邊緣整齊、 表面清潔、胞內(nèi)無(wú)明顯顆粒的細(xì)胞，移動(dòng)電極并輕壓細(xì)胞表面，給予負(fù)壓死細(xì) 胞表面與電極尖端形成G極封接，之后瞬間給予較大負(fù)壓破膜，補(bǔ)償電容電流 和串聯(lián)電阻形成全細(xì)胞記錄方式。膜片鉗放大器通過AD/DA轉(zhuǎn)換與計(jì)算機(jī)連接， 通過Pulse軟件進(jìn)行刺激發(fā)放和信號(hào)采集，采樣頻率20Hz，記錄室溫21-23"C。
3. 3刺激程序設(shè)置
將細(xì)胞鉛直在-120mV，然后以步長(zhǎng)10 mV的階躍刺激由-80 mV去極化至+40 mV，時(shí)程40ms刺激間隔5s，以膜電位為橫坐標(biāo)對(duì)峰電流的電流密度作圖，得 到I-V曲線。
(二)本發(fā)明藥理作用機(jī)制 上述電壓門控Na+通道阻滯作用實(shí)驗(yàn)顯示，草烏甲素以濃度依賴增加野生 型NaVl. 7細(xì)胞林鈉電流，使激活曲線向超極化方向移動(dòng)，有利于激活野生型 NaV1.7細(xì)胞抹通道，對(duì)激活狀態(tài)Na+電流的抑制作用達(dá)90%,呈現(xiàn)狀態(tài)依賴性 Na+通道阻滯劑作用，阻斷Na+通道，從而抑制突觸末端神經(jīng)遞質(zhì)向突觸后細(xì)胞 傳導(dǎo)疼痛沖動(dòng)。


圖1是草烏曱素使野生型NaVl. 7細(xì)胞抹激活電流向超極化方向移動(dòng)(n-5 ) 的示意曲線。其中，
(A )是不同濃度草烏甲素對(duì)野生型NaVl. 7細(xì)胞林I-V曲線的影響。 (B)是不同濃度草烏曱素對(duì)野生型NaV1.7細(xì)胞激活曲線的影響，圖中鈉 電流反轉(zhuǎn)電位為-55 mV。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1.
草烏甲素在治療原發(fā)性紅斑肢痛癥中的應(yīng)用，以每片含O. lmg草烏曱素與 賦形劑混合壓制成草烏曱素片劑。 實(shí)施例2.草烏甲素在治療原發(fā)性紅斑肢痛癥中的應(yīng)用，以每片含0.2mg草烏甲素與 賦形劑混合壓制成草烏甲素片劑。 實(shí)施例3.
草烏曱素在治療原發(fā)性紅斑肢痛癥中的應(yīng)用，以每片含O. 3mg草烏甲素與 賦形劑混合壓制成草烏甲素片劑。 實(shí)施例4.
草烏曱素在治療原發(fā)性紅斑肢痛癥中的應(yīng)用，以每片含0.7mg草烏曱素與 賦形劑混合壓制成草烏甲素片劑。 實(shí)施例5.
草烏曱素在治療原發(fā)性紅斑肢痛癥中的應(yīng)用，以每片含0. 4mg草烏曱素與 賦形劑混合壓制成草烏甲素片劑。
上述草烏曱素片劑加入的賦形劑為起填充、黏合、崩解及潤(rùn)滑作用的、不 與藥物發(fā)生物理化學(xué)反應(yīng)、無(wú)生理作用、無(wú)毒、無(wú)不良反應(yīng)的通常的附加物料。
上述片劑的口服用法及角量為一次一片， 一日2 3次。
權(quán)利要求
1、草烏甲素作為制備治療原發(fā)性紅斑肢痛癥藥物的應(yīng)用，包括起填充、黏合、崩解及潤(rùn)滑作用的賦形劑，其特征在于將草烏甲素與賦形劑混合壓制成草烏甲素片劑。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的草烏甲素作為制備治療原發(fā)性紅斑肢痛癥藥物 的應(yīng)用，其特征在于草烏曱素片劑含草烏甲素0.1mg/片 0.7 mg /片。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的草烏曱素作為制備治療原發(fā)性紅斑肢痛癥 藥物的應(yīng)用，其特征在于草烏甲素片劑含草烏曱素0.2mg/片 0.4 mg /片。
全文摘要
草烏甲素作為制備治療原發(fā)性紅斑肢痛癥藥物的應(yīng)用，屬于含有有效有機(jī)成分的藥品，特別是以草烏甲素作為治療疾病的藥品。本發(fā)明包括起填充、黏合、崩解及潤(rùn)滑作用的賦形劑，將草烏甲素與賦形劑混合壓制成片劑。草烏甲素片劑含草烏甲素(0.1～0.7)mg/片或草烏甲素片劑含草烏甲素(0.2～0.4)mg/片。本發(fā)明以實(shí)驗(yàn)論證草烏甲素治療原發(fā)性紅斑肢痛癥的必然性，藥理機(jī)制顯示草烏甲素以濃度依賴增加野生型NaV1.7細(xì)胞株鈉電流，使激活曲線向超極化方向移動(dòng)，對(duì)激活狀態(tài)Na⁺電流的抑制作用可達(dá)90％。
文檔編號(hào)A61K31/439GK101468000SQ200710066489
公開日2009年7月1日 申請(qǐng)日期2007年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月26日
發(fā)明者彪 李 申請(qǐng)人:云南昊邦制藥有限公司